葡聚糖硫酸钠致溃疡性结肠炎小鼠模型的建立

目的 建立小鼠溃疡性结肠炎模型。方法 给小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液7d后，改为蒸馏水自由饮用10d，如此进行4个循环，每天观察症状。在第1个循环和第4个循环后剖杀小鼠，取出整段结肠行实体显微镜观察及切片组织学研究。结果 所观察的症状，实体显微镜像，组织学病理改变均与人类溃疡性结肠炎类似。结论 此模型制作方法简便，重复性良好，可应用于多种实验研究。     

姜黄素联合5-氨基水杨酸介导Notch信号通路治疗溃疡性结肠炎大鼠的分子机制研究

目的:探讨Notch信号通路在溃疡性结肠炎(UC)大鼠发病中的可能作用及姜黄素通过该信号通路治疗UC大鼠的分子机制。方法:按照将2 mL/kg三硝基苯磺酸注入结肠的方法制备大鼠UC模型。实验设对照组、UC模型组、5-氨基水杨酸(5-ASA)组、姜黄素组、姜黄素+5-氨基水杨酸(5-ASA)组,每组各6只。后3组每天灌胃1次,连续10 d。同时每日观察大鼠一般情况,并且记录其每天的疾病活动指数评分,在连续10 d给予不同处理方式后,取大鼠结肠组织进行结肠黏膜损伤指数评分、HE染色分析,观察统计大鼠结肠黏膜损伤情况,用免疫组织化学法、Western blotting法检测大鼠结肠黏膜内Notch1、jaggled1、Hes1蛋白表达,RT-PCR检测大鼠结肠黏膜内Notch1、jaggled1、Hes1 mRNA表达。结果:HE染色结果表明模型组与对照组相比,出现了显著性病理损伤,5-ASA和姜黄素治疗组病理损伤有所减缓(P<0.01);姜黄素+5-ASA联合治疗组病理损伤减缓效果最佳(P<0.01)。免疫组织化学结果、Western blotting结果及RT-PCR结果显示...     

药物治疗溃疡性结肠炎的信号通路研究进展

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）是一种受多因素共同影响的疾病,易反复发作,是世界公认的难治病之一,目前药物治疗效果不佳,所以越来越引起人们重视。该文主要综述UC 及治疗药物作用的相关信号通路,为以后新药或新机制研究提供更多参考依据,并对实验所用动物模型的造模方法进行分类评价,以期为研究者选择合适的模型提供参考。     

Notch信号通路与溃疡性结肠炎的相关研究进展

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis ,UC ）是以结肠上皮黏膜的持续性损伤为主要病理改变的临床难治性疾病［1‐2］。大量证据表明肠道上皮细胞的增殖和分化在结肠上皮黏膜的维护和修复方面发挥着重要的作用,当肠道上皮细胞系统的增殖和分化失常时会诱发多种肠道疾病（如溃疡性结肠炎、克罗恩病,甚至结肠癌等）［3‐5］。肠道上皮细胞的增殖和分化主要受Notch、Wnt和BM P等细胞内信号通路的调节［6‐8］,其中 Notch信号通路是黏膜层再生过程中的决定性因素,是调节肠道上皮细胞增殖和分化以及参与肠道上皮细胞的维护,保持肠道上皮细胞抗菌活性的关键通路［3,9］。此外,Notch信号通路在淋巴前体细胞向T淋巴细胞的分化以及 T 淋巴细胞向 T h1或 T h2效应淋巴细胞的分化过程中起重要作用［10‐11］,而 Th1和 Th2效应淋巴细胞在溃疡性结肠炎发病中起重要作用,其分化控制调节的炎性细胞因子白细胞介素（IL ）‐2、肿瘤坏死因子‐γ（IFN‐γ）、IL‐4、IL‐10表达失衡可能是溃疡性结肠炎发病的主要机制之一。     

绿原酸调控巨噬细胞极化治疗溃疡性结肠炎的机制研究

[目的] 探讨绿原酸(chlorogenic acid，CGA)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium，DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)的治疗作用及分子机制。[方法] C57BL/6小鼠50只，用3%DSS腹腔注射7 d，建立UC动物模型并随机分为5组，除UC模型组外，其余4组分别给予柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine，SZ)100 mg/kg·d和CGA 30、60、120 mg/kg·d灌胃10 d，另以C57BL/6小鼠10只设为正常对照组。检测小鼠疾病活动指数(disease activity index，DAI)；以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色观察结肠组织病理变化；酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测结肠组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、IL-10、IL-1β水平；定量实时聚合酶链式反应(quantitative real time-polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测结肠组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)、精氨酸酶-1(arginase-1，Arg-1)的mRNA表达；免疫印迹检测结肠组织小鼠无翅型乳腺肿瘤病毒整合位点家族成员5a(wingless type 5a，Wnt5a)、C1型尼曼-匹克蛋白(Nieman-Pick type C1，NPC1)的蛋白表达；流式细胞术检测结肠组织M1型及M2型巨噬细胞比例。[结果] 与正常对照组比较，UC模型组DAI评分显著增高，结肠组织出现明显炎症病理改变，M1型巨噬细胞比例，TNF-α、IL-6、IL-1β水平，iNOS mRNA表达，Wnt5a及NPC1蛋白表达均显著增高，M2型巨噬细胞比例、IL-10水平及Arg-1 mRNA表达均显著降低(P<0.01)。与UC模型组比较，CGA可显著降低小鼠DAI评分，减轻结肠组织炎症病理改变，降低结肠组织M1型巨噬细胞比例，TNF-α、IL-6、IL-1β水平，iNOS mRNA表达，以及Wnt5a和NPC1蛋白表达，增加M2型巨噬细胞比例、IL-10水平及Arg-1 mRNA表达(P<0.05，P<0.01)。[结论] CGA可通过减少巨噬细胞向M1型极化，从而减轻由DSS诱导的炎症反应以治疗UC，其机制与抑制Wnt5a/NPC1信号通路活化有关。     

磷脂酰肌醇3激酶信号传导通路在溃疡性结肠炎发病中的作用

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt信号传导通路在溃疡性结肠炎(UC)和小鼠葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎发病中的作用。方法1收集40例UC患者肠黏膜活检组织,20例结肠癌旁正常组织标本,采用体外组织培养法观察PI3K/Akt信号传导通路抑制剂Wortmannin对UC患者肠黏膜活检组织TNF-α表达的影响。236只BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组、DSS模型组、DMSO载体组和Wortmannin干预组,以5%DSS溶液构建DSS小鼠结肠炎模型,观察各组小鼠的疾病活动指数(DAI)和Wortmannin对小鼠肠黏膜组织TNF-α表达的影响。结果1与未用Wortmannin处理的UC组比较,Wortmannin处理后UC患者肠黏膜组织分泌TNF-α的水平明显降低(P<0.05)。2Wortmannin干预组小鼠的DAI评分和肠黏膜TNF-α的水平明显低于DSS模型组和DMSO载体组,高于正常对照组(P<0.05),而DSS模型组和DMSO载体组小鼠的DAI评分和TNF-α水平差异无统计学意义。结论PI3K/Akt信号传导通路参与了促炎性细胞因子TNF-α的调控与释放,Wortmannin能阻断PI3K/Akt信号传导通路。     

沉默信号调节蛋白6在溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中的表达及意义

探讨沉默信号调节蛋白(SIRT)6在溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中的表达及意义.方法将22只14日龄清洁级无病原体C57BL6/J野生型(WT)小鼠分为WT对照组(n=6)和WT-葡聚糖硫酸钠(WT-DSS)组(n=16),将13只肠道上皮细胞敲除SIRT6基因(SIRT6IKO)小鼠分为SIRT6IKO对照组(n...     

Hedgehog信号通路在骨关节炎致病机制及治疗靶点的研究进展

骨关节炎(Osteoarthritis, OA)是全球最常见的退行性关节疾病,其发病机制尚不完全清楚。近年来发现的OA相关生物标志物多达10多种,其中非胶原蛋白类相关标志物的代表刺猬(hedgehog, HH)被证明与OA患者软骨代谢高度相关,可能在OA的发生发展过程中发挥重要作用。然而HH与OA发生发展时软骨代谢的作用机制尚不明确,现就HH与OA软骨代谢的相关关系作一综述,以期为骨及关节软骨相关疾病的治疗提供参考。     

盐酸青藤碱晶形纯度的研究

目的：对灰白色、淡黄色及纯白色盐酸青藤碱三种晶形的纯度进行分析。方法：采用电子显微镜扫描、红外光谱、高效液相等方法对盐酸青藤碱晶形的纯度进行分析并比较差异。结果：灰白色晶形的溶解度为9．1g/100ml，淡黄色晶形的溶解度为9．0g/100ml，纯白色晶形的溶解度为16．8g/100ml，纯白色晶形溶解度明显高于灰白色和淡黄色晶形；电子显微镜扫描结果，纯白色盐酸青藤碱晶形表面光洁、透明；灰白色、淡黄色盐酸青藤碱晶形表面吸附有杂质斑点，且淡黄色比灰白色多；在HPLC图中，纯白色盐酸青藤碱晶形峰与对照品完全一致，灰白色晶形有2个小杂质峰，淡黄色3个小杂质峰；红外光谱图中，纯白色晶形与对照品峰形一致，灰白色晶形与淡黄色晶形在2400-2300cm^-1有一VcmN吸收峰，且淡黄色晶形的吸收峰较灰白色晶形峰强。结论：盐酸青藤碱晶形纯度与生产工艺有关，在生产中应控制好原料质量。运用以上方法进行纯度分析，快速、简便、专属性强。为盐酸青藤碱质量控制提供参考。     

Hedgehog通路在缺氧诱导脑胶质瘤转移中的作用及分子机制研究

目的 探讨Hedgehog 通路在缺氧诱导脑胶质瘤转移中的作用及分子机制。方法 选择2018 年1 月～2019 年8 月浙江省立同德医院脑胶质瘤患者5 例,取其脑胶质瘤细胞,随机分为对照组、抑制剂处理组、乏氧组和乏氧加抑制剂处理组。各组细胞均完成48 h 培养,采用Westernblot 检测各组细胞Smoothened（SMO）、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1（GLI1）和上皮间质转化（EMT）E-cadherin 基因表达,采用BrdU-ELISA 法检测细胞增殖,采用Transwell 法检测细胞侵袭作用。结果 Westernblot 检测结果显示,乏氧加抑制剂处理组SMO、GLI1 及EMT 相关蛋白表达水平低于乏氧组、抑制剂处理组与对照组（P＜0.05）;乏氧组SMO、GLI1 及EMT 相关蛋白表达水平高于抑制剂处理组与对照组（P＜0.05）。BrdU-ELISA 法结果显示,乏氧加抑制剂处理组不同时间点细胞增殖率低于乏氧组,高于抑制剂处理组与对照组（P＜0.05）。Transwell 法检测结果显示,乏氧加抑制剂处理组细胞侵袭率低于乏氧组,但明显高于抑制剂处理组与对照组（P＜0.05）;乏氧组细胞侵袭率高于抑制剂处理组与对照组（P＜0.05）。结论Hedgehog 通路可能通过SMO、GLI1 调控EMT,参与疾病的发生、发展,在缺氧诱导脑胶质瘤转移中发挥重要的作用,能为脑胶质瘤转移治疗提供新的靶点。     

益生菌对小鼠急性溃疡性结肠炎模型疗效观察及机制研究

目的探讨TNF-α在UC小鼠发病中的作用以及益生菌治疗UC的可能作用机制。方法采用DSS诱导的小鼠急性UC模型,将60只BALB/c小鼠分为6组:空白对照组、DSS模型组、NS组、SASP组、乳酸杆菌和双歧杆菌组,每组10只,造模第8天处死小鼠,结肠组织常规石蜡切片,HE染色,观察小鼠一般情况,计算小鼠组织学损伤评分和组织学病理改变,应用免疫组化技术检测小鼠结直肠黏膜TNF-α的表达。结果乳酸杆菌组、双歧杆菌组及SASP组小鼠一般情况好,组织学损伤评分低,且明显降低小鼠结直肠黏膜TNF-α的表达。结论乳酸杆菌和双歧杆菌可能通过抑制结直肠黏膜TNF-α的表达而减轻小鼠结肠黏膜的损伤,达到治疗UC的目的,其疗效与SASP相当。     

康复新液治疗溃疡性结肠炎小鼠的效果

目的：建立溃疡性结肠炎（UC）动物模型并评价康复新液（KFX）对UC的修复效果。方法：建立硫酸葡聚糖（DSS）诱导的UC小鼠模型,分为0.9%氯化钠溶液组（Saline组）、地塞米松灌肠液组（DXM组）和KFX组;评价UC小鼠治疗后症状缓解、脾肿胀、结肠长度、结肠组织髓过氧化物酶（MPO）水平,对比评价康复新液的治疗效果。对治疗后结肠组织进行HE染色、免疫组织化学染色、免疫荧光染色,比较3组小鼠结肠形态的修复效果。结果：与Saline组比,DXM组和KFX组UC小鼠腹泻和便血症状、脾肿胀明显缓解,结肠肿胀明显减轻,结肠长度增长,结肠组织MPO水平明显降低（P ＜0.05）。HE染色表明,与DXM组比,KFX组治疗后小鼠结肠黏膜上皮、隐窝、肌层黏膜和黏膜下层更为完整、各层分界分明,未见明显的肿胀与炎症细胞浸润,表明受损结肠形态有效修复。免疫组织化学染色表明,与DXM组比,KFX组炎症因子分泌明显减少（P ＜0.05）,表明结肠组织有效修复。免疫荧光染色表明,与DXM组比,KFX组的紧密连接蛋白分泌明显有所增加（P ＜0.05）,表明受损结肠组织黏膜屏障得到有效修复。结论：KFX能有效缓解UC症状并修复受损的结肠形态。     

木香烃内酯对溃疡性结肠炎小鼠肠道免疫炎症的影响及其机制

目的:观察木香烃内酯对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道菌群及Th1/Th2失衡的影响.方法:将50只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组,木香烃内酯低剂量、高剂量组,每组10只.采用DSS法建立UC模型,SASP组及木香烃内酯低、高剂量组连续灌胃相应药物7 d,观察小鼠一般状况、疾病活动度指...     

乙状结肠镜直视下给药治疗溃疡性直肠乙状结肠炎疗效观察

目的 :研究乙状结肠镜下直接给药治疗溃疡性结肠炎 (UC)的疗效和安全性。方法 :用随机对照方法对 12 4例溃疡性直肠乙状结肠炎患者分为治疗组 6 4例与对照组 6 0例 ,治疗组给予乙状结肠直视下给药 ,对照组给予局部灌肠治疗 ,疗程 4周。观察临床症状、结肠镜下组织学炎症及疾病活动指数 (DAI)和改善情况。结果 :两种治疗方法症状改善率分别为 87 5 0 %和6 8 33% (P <0 0 5 ) ;结肠镜下炎症改善率分别为 82 81%和 6 5 0 0 % (P <0 0 5 ) ;组织学改善率分别为 85 75 %和 6 1 6 7% (P <0 0 5 ) ;两组的DAI均有明显下降 ,无严重副作用。结论 :乙状结肠镜直视下给药为一有效、简便、安全的治疗溃疡性直肠乙状结肠炎的方法。     

miR-19a对溃疡性结肠炎的作用机制

目的探讨miR-19a对溃疡性结肠炎的作用机制。方法通过生物信息学分析预测miR-19a可能的靶基因,通过免疫组化及Western blotting技术检测靶基因在溃疡性结肠炎小鼠中表达的变化,并进一步通过绿色荧光蛋白报告载体实验对靶基因进行鉴定。结果生物信息学分析预测miR-19a可能的靶基因是TNF-α,免疫组化及Western blotting显示溃疡性结肠炎小鼠肠道组织TNF-α表达增加,miR-19a可抑制TNF-α-3’UTR-WT报告基因活性,而变异型TNF-α-3’UTR-mut报告基因活性不能被抑制。结论 miR-19a的靶基因为TNF-α,其结合位点为TNF-α3’UTR,miR-19a可能在肠道通过直接调控TNF-α而发挥作用。     

葡聚糖硫酸钠致溃疡性结肠炎小鼠模型的建立

目的　建立小鼠溃疡性结肠炎模型。方法　给小鼠自由饮用5％葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液7d后,改为蒸馏水自由饮用10d,如此进行4个循环,每天观察症状。在第1个循环和第4个循环后剖杀小鼠,取出整段结肠行实体显微镜观察及切片组织学研究。结果　所观察的症状、实体显微镜像、组织学病理改变均与人类溃疡性结肠炎类似。结论　此模型制作方法简便,重复性良好,可应用于多种实验研究。     

盐酸舍曲林片治疗溃疡性结肠炎合并抑郁症的疗效观察

目的 了解盐酸舍曲林片治疗溃疡性结肠炎合并抑郁症的疗效,为该疾病提供有效的药物干预措施。 方法 74例溃疡性结肠炎并抑郁症患者被随机分为观察组42例和对照组32例,除支持治疗和心理干预之外,观察组被给予舍曲林联合美沙拉嗪,对照组被给予美沙拉嗪。评价2组的溃疡性结肠炎活动指数(UCAI)、抑郁自评量表(SDS)、汉密顿抑郁量表(HAMD)评分。 结果 2组治疗后的UCAI、SDS、HAMD量表评分与治疗前相比均下降,差异有统计学意义(t=8.074、8.679、13.269、6.906、3.321、7.604,P均＜0.05);2组治疗后的UCAI差异无统计学意义(t=0.972,P＞0.05);治疗后观察组的SDS、HAMD量表评分均低于对照组(t=3.958、2.945,P均＜0.05)。治疗后,观察组的溃疡性结肠炎的总有效率为71.43%(30/42),对照组总有效率为65.63%(21/32),差异无统计学意义(χ2=0.286,P＞0.05)。治疗后,观察组的抑郁症的总有效率为78.57%(33/42),高于对照组的53.13%(17/32)(χ2=5.367,P＜0.05)。治疗过程中,观察组的药物不良反应发生率为19.05%(8/42);对照组的不良反应发生率为21.88%(7/32);差异无统计学意义(χ2=0.090,P＞0.05)。 结论 舍曲林可在美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎的同时,发挥良好的治疗抑郁症的作用,并未增加药物不良反应发生率。      

IL-18通过下调KLF4阻碍杯状细胞发育加剧小鼠溃疡性结肠炎

目的:观察白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulphate,DSS)溶液诱导的小鼠结肠炎中肠黏膜屏障功能的作用及机制。方法:将成年雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、DSS组(每天给予DSS喂养,连续7 d)、DSS+IL-18组(给予DSS喂养连续7 d,同时给予腹腔注射1μg IL-18),每天测量小鼠体质量变化,7 d后HE染色检测肠黏膜损伤情况、肠道杯状细胞数量、q PCR及Western blot检测IL-18和Kruppel样转录因子-4(Kruppel-like factors-4,KLF4)的变化。结果:与正常对照组相比,DSS组小鼠体质量明显减轻(P=0.000),肠黏膜损伤,绒毛高度降低,结构紊乱,空泡状杯状细胞数量减少(对照组:43.600±7.092,DSS组:16.000±6.205,P=0.000),IL-18蛋白表达增加(对照组:0.444±0.073;DSS组:0.649±0.062,P=0.006),同时参与杯状细胞分化成熟的KLF4表达减少(对照组:0.934±0.053;D...