肿瘤浸润淋巴细胞对不同分子亚型乳腺癌预后效应的研究进展

肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocytes,TILs）是肿瘤微环境的重要组分，对结肠癌、肺癌等多种肿瘤预后有明确的指示效应。在乳腺癌中，相关研究的结论并不一致。考虑到乳腺癌是一组由多种不同分子亚型组成的异质性疾病，TILs对不同分子亚型乳腺癌的预后指示作用也不同。本综述阐述常用TILs指标对不同分子亚型乳腺癌预后指示效应的相关研究进展。     

CD8+淋巴细胞浸润对可手术乳腺癌预后的影响

目的 探讨CD8+淋巴细胞浸润与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法 回顾性分析2000年1月至2008年12月中山大学肿瘤防治中心收治的681例可手术切除的乳腺癌患者的临床资料,用组织芯片免疫组化法检测乳腺癌原发灶中CD8+淋巴细胞浸润情况,分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果42.0%（286/681）的乳腺癌间质存在CD8+淋巴细胞高浸润。CD8+淋巴细胞浸润与乳腺癌患者的年龄、月经情况、肿瘤大小、淋巴结转移、病理分期、脉管癌栓、组织学分级、激素受体表达、HER-2表达有关（P＜0.05）。全组患者的5年无病生存率和5年生存率分别为79.2%和87.6%;其中CD8+淋巴细胞高浸润者与低浸润者的5年无病生存率分别为83.2% 和68.8%,5年生存率分别为89.5%和82.2%,差异均有统计学意义（P＜0.05）。Cox多因素分析显示,CD8+淋巴细胞浸润是影响患者无病生存和总生存的独立预后因素。结论 CD8+淋巴细胞浸润可作为预测可手术乳腺癌预后的一个指标。     

食管癌患者血清蛋白指纹图谱的检测及食管癌诊断模型的建立

目的: 探讨负性协同刺激分子B7H1、B7H3在乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理参数、预后及CD3+T淋巴细胞浸润程度的相关性。方法：选取2003年3月至2004年1月在苏州大学附属第三医院乳腺外科接受手术治疗的女性乳腺癌患者49例（均经病理诊断确认为浸润性导管癌）的乳腺癌组织标本,免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中协同刺激分子B7H1、B7H3的表达以及CD3+T淋巴细胞浸润程度。结果：（1）乳腺癌组织中B7H1阳性表达率为53.06%（26/49）,其表达水平与肿瘤大小呈正相关（P<0.05）、与Her2/neu表达水平呈正相关（P<0.05）、与CD3+T淋巴细胞浸润程度呈负相关（P<0.05）;（2）乳腺癌组织中B7H3阳性表达率为59.18%（29/49）,其表达水平与病理分期呈正相关（P<0.05）、与患者预后呈负相关（P<0.05）;（3）乳腺癌组织中B7H1和B7H3的表达水平呈正相关（r=0.3316,P<0.05）。结论：负性协同刺激分子B7H1和B7H3在乳腺癌中的表达水平与临床病理因素及预后密切相关,对该两分子的检测在乳腺癌诊断和预后判断中具有潜在的临床应用价值。     

肿瘤相关巨噬细胞及CD8+/CD68+细胞比值是影响肺腺癌患者预后的独 立危险因素

目的：探讨CD68+ 肿瘤相关巨噬细胞（TAM）、CD8+ T 细胞、Foxp3+ Treg 细胞等在肺腺癌（LUAD）组织中浸润分布及 其与患者预后的关系。方法：收集2004 年9 月至2009 年4 月间在苏州大学附属第三医院手术切除的93 例LUAD 组织及78 例癌 旁组织,采用组织芯片（TMA）及多重免疫荧光（mIF）技术检测其中的免疫细胞浸润与分布,Wilcoxon 秩和检验比较癌与癌旁组 织、癌巢与间质中浸润水平的差异,χ2 检验分析其浸润水平及CD8+/CD68+细胞比值与临床病理特征的关系,Kaplan-Meier 法和 COX 模型分析影响患者OS 的潜在危险因素。结果：与癌旁组织比较,癌组织中CD68+ TAM、CD8+ T 细胞、Foxp3+ Treg 细胞浸润 水平均显著增加（均P<0.01）,间质CD68+ TAM、CD8+ T 细胞的浸润水平均显著高于癌巢（均P<0.01）。总CD68+ TAM、癌巢及间质 CD68+ TAM 浸润水平与淋巴结转移呈正向关联（均P<0.05）,癌巢CD68+ TAM 浸润水平与T 分期呈正向关联（P<0.05）,间质 CD68+ TAM 浸润水平与病理分级呈正向关联（P<0.05）;癌组织中CD8+/CD68+细胞比值与病理分级、淋巴结转移均呈负向关联（均 P<0.05）。Kaplan-Meier 生存分析显示,LUAD 组织中总CD68+ TAM、癌巢及间质CD68+ TAM 高浸润患者OS 均短于低浸润患者（P<0.05 或P<0.01）、癌组织中CD8+/CD68+细胞比值高患者OS 显著长于低比值患者（P<0.05）。多因素COX 模型分析示,LUAD 患者年龄、TNM 分期及癌组织中CD8+/CD68+ 细胞比值是影响患者预后的独立风险因素（P<0.05或P<0.01）。结论:高度浸润的 CD68+TAM与LUAD的进展、侵袭、转移和不良预后显著关联,而高CD8+/CD68+ 细胞比值是影响LUAD 患者OS 的独立保护因素。     

CSPG4在胃肠间质瘤中的表达及其与临床参数及肿瘤免疫细胞的关系

目的:通过检测硫酸软骨素蛋白聚糖4(chondroitin sulfate proteoglycan 4，CSPG4)在胃肠间质瘤（gastrointestinal stromal tumor，GIST）中的表达情况,探讨其与临床病理参数和免疫细胞的相关性。方法:运用免疫组化EnVision二步法检测162例GIST中CSPG4蛋白的表达情况，分析其与年龄、性别、发生部位及NIH危险度分级的相关性，并探讨GIST中CSPG4蛋白的表达与肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes，TILs）CD4+、CD8+、CD20+、CD56+及CD68+细胞计数的关系。结果:CSPG4蛋白在GIST中的表达与发生部位及NIH危险度分级相关(P＜0.05)，与年龄及性别差异无统计学意义(P＞0.05)。CSPG4蛋白在GIST中的表达与CD8+、CD56+及CD68+细胞计数相关(P＜0.05)，而与CD4+及CD20+细胞计数差异无统计学意义(P＞0.05)。结论:CSPG4蛋白表达水平在一定程度上可预测GIST的生物学行为，CSPG4蛋白可能通过调节肿瘤免疫微环境参与GIST的发生和发展。     

CD4+CD25+调节性T细胞与CD4+T、CD8+T细胞在结直肠癌组织中的分布

 目的 分析CD4+CD25+ FOXP3+调节性T细胞（Treg）与CD4+T、CD8+T在结直肠癌（colorectal carcinoma, CRC）组织中的分布及其与临床病理特征之间的关系。方法 收集42例CRC新鲜手术标本,应用冰冻切片、免疫组织化学SP法检测肿瘤组织和癌旁组织中FOXP3+、CD4+T和CD8+T阳性细胞数。结果 CRC患者肿瘤组织中FOXP3表达水平显著升高,与癌旁组织相比差异有统计学意义（P<0.01）;中低分化组Treg细胞数明显高于高分化组（P<0.01）;淋巴结转移组Treg细胞数明显高于无淋巴结转移组（P<0.05）;癌巢内CD4+、CD8+T细胞数及CD4+/CD8+值显著低于间质（P<0.01）;Ⅲ+Ⅳ期、淋巴结转移组癌巢内CD4+/CD8+比值显著低于Ⅰ+Ⅱ期及无淋巴结转移组（P<0.05）;CRC中Treg数量与癌巢内CD4+/CD8+比值显著负相关（r=-0.605, P<0.01）。结论 CRC的发生发展可能与其癌组织局部微环境中Treg数量变化相关,肿瘤局部Treg数量的增多与T淋巴细胞亚群比例失调可能成为肿瘤免疫逃逸的机制之一。     

CD4+/CD8+比值在乳腺癌患者临床病理分析及预后评估中的意义

目的:初步探讨外周血中CD4+/CD8+的比值与乳腺癌患者临床病理及与总生存时间的关系,分析其临床意义。方法:回顾性分析2010年5月1日至2015年12月31日辽宁省肿瘤医院134例行乳腺癌根治术乳腺癌患者临床病理资料;采用Kaplan-Meier 生存分析法绘制生存曲线,比较两组不同患者的5年生存率,分析患者临床病理因素与总生存时间的关系。结果:低CD4+/CD8+组和高CD4+/CD8+组两组非三阴性乳腺癌患者在肿瘤分期方面,差异具有统计学意义（P＜0.05）;三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌两组患者生存率方面相比较,5年生存率差异均不具有统计学意义（P＞0.05）。结论:乳腺癌中CD4+/CD8+比值可作为乳腺癌预后不良的危险因素,为乳腺癌的治疗寻找新的治疗靶点。     

负性协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨负性协同刺激分子B7-H1、B7-H3在乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理参数、预后及CD3+T淋巴细胞浸润程度的相关性.方法:选取2003年3月至2004年1月在苏州大学附属第三医院乳腺外科接受手术治疗的女性乳腺癌患者49例(均经病理诊断确认为浸润性导管癌)的乳腺癌组织标本,免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中协同刺激分子B7-H1、B7-H3的表达以及CD3+T淋巴细胞浸润程度.结果:(1)乳腺癌组织中B7-H1阳性表达率为53.06%(26/49),其表达水平与肿瘤大小呈正相关(P<0.05)、与Her2/neu表达水平呈正相关(P<0.05)、与CD3+T淋巴细胞浸润程度呈负相关(P<0.05);(2)乳腺癌组织中B7-H3阳性表达率为59.18%(29/49),其表达水平与病理分期呈正相关(P<0.05)、与患者预后呈负相关(P<0.05);(3)乳腺癌组织中B7-H1和B7-H3的表达水平呈正相关(r=0.3316,P<0.05).结论:负性协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌中的表达水平与临床病理因素及预后密切相关,对该两分子的检测在乳腺癌诊断和预后判断中具有潜在的临床应用价值.     

CD8+T淋巴细胞浸润与三阴性乳腺癌新辅助化疗疗效的关系

目的 探讨三阴性乳腺癌组织CD8+T淋巴细胞浸润（CD8+Tils）的特点与患者预后的关系。方法 回顾性分析术前行新辅助化疗的126例三阴性乳腺癌患者的临床病理资料，采用免疫组织化学法分析CD8+Tils与临床病理特征的关系；Kaplan-Meier法绘制生存曲线，Cox风险比例回归模型分析患者无病生存时间（DFS）的预后影响因素。结果 高密度CD8+Tils浸润与年龄<60岁、病理高分级、临床高分期显著相关（P<0.05）。CD8+Tils高密度浸润患者术后pCR率较低密度组高（66.7% vs. 19.8%, P=0.000）。高密度组中位DFS显著长于CD8+Tils低密度组（49 vs. 25月, P<0.05）。多因素分析显示病理高分级、肿瘤直径>2 cm 、淋巴结转移、脉管侵犯、CD8+Tils低密度浸润均为预后不良影响因素（P<0.05），CD8+Tils为独立预后因素。结论 CD8+Tils有可能是三阴性乳腺癌患者独立预后指标，高密度浸润患者术后pCR率高、DFS长、远期疗效更优。     

EGR1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:探究早期生长反应基因1（early growth response 1,EGR1）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:下载并提取TCGA数据库中EGR1的表达数据;购买乳腺癌组织芯片（HBreD090CS01）,并采用免疫组织化学法检测EGR1在乳腺癌中的表达;利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析EGR1在乳腺癌中的预后价值;利用TIMER数据库分析乳腺癌中EGR1表达与免疫细胞浸润的关系。结果:相较于癌旁组织,EGR1 mRNA在乳腺癌中的表达显著下调（P＜0.001）;EGR1蛋白在45例乳腺癌组织中有18例呈低表达,27例呈高表达,在45例癌旁组织中有9例呈低表达,36例呈高表达,差异具有统计学意义（P=0.038）;EGR1表达与乳腺癌分化程度相关（P=0.003）,与患者年龄、肿瘤大小、N分期、临床分期等无关（P＞0.05）;EGR1低表达的乳腺癌患者,其无复发生存率显著低于EGR1高表达的患者（P＜0.001）,但EGR1表达与乳腺癌患者的总生存率无明显相关性（P＞0.05）;乳腺癌组织中EGR1表达与B细胞浸润水平呈负相关（P＜0.001）,与CD8+T细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞浸润水平呈正相关（P＜0.001）。结论:EGR1在乳腺癌组织中的表达较癌旁组织低,且与肿瘤分化程度、预后及免疫浸润有关,有望成为乳腺癌预后评估的分子标志物及治疗的潜在靶点。     

乌司他丁对食管癌手术患者CD14+肺泡巨噬细胞及免疫功能的影响

目的:探讨术前静脉输注乌司他丁对食管癌手术患者单肺通气时CD14+肺泡巨噬细胞、局部及全身炎性反应和免疫功能的影响。方法:前瞻性选取南京医科大学附属肿瘤医院2019年10月至2020年8月行胸腔镜下食管癌根治手术患者80例,数字随机表法分为两组:对照组和乌司他丁组各40例。乌司他丁组患者麻醉诱导前静脉输注20 KU乌司他丁,对照组给予生理盐水。检测两组患者术前和术后2 h外周静脉中血白介素-2（IL-2）和免疫细胞,并检测术中单肺通气1 h后非通气侧肺支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中CD14+巨噬细胞、IL-2、免疫细胞。结果:两组患者一般情况比较无差异。术后2 h乌司他丁组患者外周血中IL-2、CD14+单核细胞增高幅度小于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）,NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及活化的T细胞亚群增高幅度高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。两组患者术前外周血IL-2、CD14+单核细胞及主要免疫细胞亚群差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,乌司他丁组患者单肺通气1 h后非通气侧肺BALF中IL-2和CD14+巨噬细胞增高幅度明显小于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）,而CD4+T细胞、CD8+T细胞高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）,活化的T细胞也高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论:麻醉前给予乌司他丁能减少食管癌术中单肺通气时全身及肺部的炎性反应,保护患者的免疫功能,具有临床应用价值。     

胃癌中FTO表达与TGF-β表达、肿瘤免疫表型的关系及临床意义

目的:分析胃癌组织中FTO表达与TGF-β表达及肿瘤免疫表型的关系及临床意义。方法:采用TIMER数据库分析胃癌组织中FTO和TGF-β mRNA的表达情况。采用GEPIA数据库评估FTO及TGF-β mRNA在胃癌中表达的相关性。利用TIMER数据库分析FTO对胃癌免疫细胞浸润水平的影响。采用免疫组织法检测胃FTO、TGF-β、CD8+T细胞的表达,分析FTO与TGF-β、肿瘤免疫表型的相关性,及其与临床病理特征的关系。结果:胃癌组织中FTO、TGF-β阳性率皆高于癌旁组织(P＜0.05);分析三种免疫表型在胃癌中的表达情况,发现在胃癌组织中以免疫豁免型为主(P＜0.05);在胃癌中,FTO表达水平与TGF-β表达水平、免疫细胞浸润及免疫豁免型呈显著正相关(P＜0.05);FTO表达与淋巴结转移、TNM分期及分化程度密切相关(P＜0.05)。结论:FTO在胃癌中高表达,可影响TGF-β表达水平、免疫细胞浸润水平及肿瘤免疫表型。     

OTUD3和PTEN在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的:检测乳腺癌组织中OTUD3与PTEN表达,分析其与临床病理特征及预后的关系。方法:选取2014年1月至2014年12月于我院行手术治疗的79例乳腺癌患者癌组织及其对应癌旁正常组织标本。采用免疫组化染色法、Western blot 检测、RT-PCR法分别检测癌组织及癌旁正常组织中OTUD3与PTEN表达,并分析两者表达相关性;探究OTUD3、PTEN与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果:乳腺癌组织中PTEN阳性主要定位于细胞核,OTUD3阳性主要定位于细胞质。乳腺癌组织中OTUD3和PTEN阳性率、蛋白表达量及mRNA水平显著低于癌旁正常组织（P均<0.05）。乳腺癌组织中OTUD3、PTEN表达呈正相关（r=0.580,P=0.000）。PTEN与肿瘤直径、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移、分子分型及ER/PR/HER-2/p53状态显著相关（P＜0.05）;OTUD3与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移及p53显著相关（P＜0.05）。OTUD3及PTEN阴性表达组患者生存率显著低于阳性表达组（Log-rank检验P＜0.05）,两者不同表达是影响乳腺癌预后生存的独立危险因素之一（P＜0.05）。结论:乳腺癌组织中OTUD3、PTEN低表达,两者表达呈正相关,与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移及p53等临床病理特征及预后显著相关,有望成为临床预后预测的有效因子。     

β-TubulinⅢ、MGMT在女性乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨β-TubulinⅢ、MGMT在女性乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义。方法:收集我院女性乳腺浸润性导管癌组织标本191例,采用免疫组织化学法检测β-TubulinⅢ、MGMT在乳腺癌组织中的表达情况。乳腺癌分子分型采用免疫组化及FISH 检测确定。结果:女性乳腺浸润性导管癌组织中β-TubulinⅢ的阳性表达率为72.3%（138/191）,与乳腺癌组织学分级、脉管侵犯及分子分型相关,其差异具有统计学意义（P＜0.05）。MGMT的阳性表达率为74.3%（142/191）,与乳腺癌组织学分级和分子分型相关,其差异具有统计学意义（P＜0.05）。β-TubulinⅢ、MGMT共同阳性表达与乳腺癌组织学分级及分子分型具有相关性（P＜0.05）。Spearman 相关分析显示β-TubulinⅢ和MGMT两者在女性乳腺浸润性导管癌组织中表达呈正相关（r=0.252）。结论:β-TubulinⅢ和MGMT与乳腺癌的发生具有一定的相关性。     

Immunoexpression of Tumor Infiltrating Lymphocytes(TILS) CD4 + and CD8 + in Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) in Correlations with Clinicopathological Characteristics and Prognosis

Objective: This study aimed to analyze CD4 +and CD8 + TILs in oral squamous cell carcinoma (OSCC) and to correlate it with histologic grade of malignancy and clinicopathologic data. Methods: The sample was composed of 43 archived specimens. Clinical features and histological grade of malignancy were obtained. The infiltrating intensity of CD4 +, CD8 positive cells were assessed by immunohistochemistry. One-way ANOVA was used to study the association between CD4 +, CD8 + and the grade of OSCC. The cut-off values of the proposed diagnostic indices were received from calculating the coordinates of the receiver operating characteristic (ROC) curve. For clinicopathologic data Independent-Samples T test, Pearson Correlation Coefficient, Correlation Coefficient were used clinicopathologic characteristics. Results: CD4 +and CD8 + were observed in all specimens. CD4 + were more frequent in poorly differentiated specimens (74.14) (P= 0.021<0.05). CD8 + were more frequent in well- differentiated  specimens (51.18). None of these correlations were significant (P=0.454>0.05). CD4 +/ CD8 ratio was higher in low-grade specimens (180.28) (P=0.017<0.05). No differences between CD4 +, CD8 +and CD4 +/ CD8 ratio between poorly- differentiated   and moderately- differentiated   groups ROC P value (0.370, 0.248, 0.126) respectively. there is a difference between CD4 +, CD4 +/ CD8ratio between poorly- differentiated   and well- differentiated   groups ROC P value (0.022, 0.341, 0.012) Sensitivity (0.857, 0.882), specificity (0.706, 0.857) respectively. and no differences between CD8 + poorly- differentiated and well- differentiated groups ROC P value (0.341). there is a difference between CD4 + between moderately - differentiated   and well- differentiated groups ROC P value (0.038) Sensitivity (0.368), specificity (0,765). No significant correlation was obtained with clinicopathologic findings of OSCC. Conclusion: CD4 + and CD4 +/ CD8 + ratio are independent prognostic factor in OSCC.     

Genetically driven CD39 expression shapes human tumor-infiltrating CD8+ T-cell functions

In our study, we investigated the role of CD39 on tumor-infiltrating CD8⁺ T lymphocytes (CD8⁺ TILs) in colorectal, head and neck and pancreatic cancers. Partially confirming recent observations correlating the CD39 expression with T-cell exhaustion, we demonstrated a divergent functional activity in CD39⁺CD8⁺ TILs. On the one hand, CD39⁺CD8⁺ TILs (as compared to their CD39⁻ counterparts) produced significantly lower IFN-γ and IL-2 amounts, expressed higher PD-1, and inversely correlated with perforin and granzyme B expression. On the other, they displayed a significantly higher proliferative capacity ex vivo that was inversely correlated with the PD-1 expression. Therefore, CD39⁺CD8⁺ TILs, including those co-expressing the CD103 (a marker of T resident memory [TRM] cells), were defined as partially dysfunctional T cells that correlate with tumor patients with initial progression stages. Interestingly, our results identified for the first time a single nucleotide polymorphism (SNP rs10748643 A>G), as a genetic factor associated with CD39 expression in CD8⁺ TILs. Finally, we demonstrated that compounds inhibiting CD39-related ATPases improved CD39⁺CD8⁺ T-cell effector function ex vivo, and that CD39⁺CD8⁺ TILs displayed effective suppression function in vitro. Overall these data suggest that the SNP analysis may represent a suitable predictor of CD39⁺CD8⁺ T-cell expression in cancer patients, and propose the modulation of CD39 as a new strategy to restore partially exhausted CD8⁺ TILs.     

乌苯美司联合奥沙利铂和替吉奥治疗晚期胃癌的疗效及对患者免疫功能的影响

目的:研究乌苯美司联合奥沙利铂和替吉奥在晚期胃癌治疗中的临床疗效和对患者免疫功能的影响。方法:选取2016年01月01日至2018年01月01日蚌埠医学院第一附属医院收治的80例晚期胃腺癌患者,随机分为观察组和对照组,每组40例。两组患者均给予奥沙利铂和替吉奥化疗,观察组患者加用乌苯美司口服。观察两组患者临床疗效、免疫功能以及观察组的疗效与CD13表达的相关性。结果:治疗后观察组患者外周血中CD3+、CD4+T细胞的数量和NK细胞活性增高,CD4+/CD8+比值显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;治疗后治疗组和对照组疾病控制率（DCR）分别为77.50%和70.00%,差异有统计学意义（P＜0.05）;中位无进展生存期（PFS）分别为6.6月和5.7月,差异有统计学意义（P＜0.05）;总生存期（OS）分别为11.9月和11.6月,差异无统计学意义(P＞0.05);进一步研究分析观察组患者OS与CD13的高表达呈正相关（P＜0.05）。结论:乌苯美司联合化疗能提高晚期胃腺癌患者的机体免疫功能和患者的无进展生存时间。