温度敏感型瞬时受体电位通道与皮肤神经源炎症和瘙痒

温度敏感型瞬时受体电位通道(TRP channels)包括TRPV1,TRPV2,TRPV3,TRPV4,TRPM8 和TRPA1,在皮肤上表达于皮肤感觉神经,角质形成细胞及肥大细胞.温度敏感型TRP通道可被各种物理和化学刺激致敏或激活,激活的温度敏感型TRP通道不但介导温度感知和调节,而且还参与痛痒觉发生以及皮肤神经源炎症发生,因此,温度敏感型TRP通道已成为治疗炎症性皮肤病和瘙痒的重要分子靶标.此外,利用以温度敏感型TRP通道为中心建立的知觉基本句法和分子底物,能辨别和重新确定感觉分类,并且有助于对瘙痒或瘙痒性皮肤病发病机制进行分析和处理.     

温度敏感型瞬时受体电位通道与皮肤神经源炎症和瘙痒

温度敏感型瞬时受体电位通道（TRPchannels）包括TRPV1,TRPV2,TRPV3,TRPV4,TRPM8和TRPA1,在皮肤上表达于皮肤感觉神经,角质形成细胞及肥大细胞。温度敏感型TRP通道可被各种物理和化学刺激致敏或激活,激活的温度敏感型TRP通道不但介导温度感知和调节,而且还参与痛痒觉发生以及皮肤神经源炎症发生,因此,温度敏感型TRP通道已成为治疗炎症性皮肤病和瘙痒的重要分子靶标。此外,利用以温度敏感型TRP通道为中心建立的知觉基本句法和分子底物,能辨别和重新确定感觉分类,并且有助于对瘙痒或瘙痒性皮肤病发病机制进行分析和处理。     

TRP通道对心肌缺血再灌注损伤保护作用研究进展

瞬时受体电位（transient receptor potential,TRP）通道是一类位于细胞膜上的阳离子通道。TRP通道被分为7个亚家族（TRPC、TRPA、TRPM、TRPV、TRPN、TRPP和TRPML）,在心肌组织中广泛表达。近年来,随着基因敲除和转基因模型动物的应用,发现TRP通道超家族成员中TRPM、TRPC和TRPV与心肌缺血再灌注损伤密切相关。TRP通道的激活或抑制参与了心肌缺血再灌注损伤的调控,减少了心肌的梗死面积,发挥保护作用。因此,本文首先对TRPM、TRPC、TRPV结构特征及其在心血管系统分布情况做了概述,再分别对TRPM、TRPC、TRPV调控心肌缺血再灌注的机制做了总结,为心肌缺血再灌注损伤的治疗提供一定的理论依据。     

新型钙离子通道TRPV5和TRPV6与成骨细胞信号传递的关系

TRPV5和TRPV6是瞬时性受体电位通道（TRP）超家族中的成员，是上皮样钙离子专用通道。目前研究已经证明，TRPV5和TRPV6在肠道和肾脏等组织中均有表达，并对跨细胞钙离子(Ca²⁺)转运起着关键性调控作用。TRPV5和TRPV6在骨组织中表达的相关报道较 少，TRPV5和TRPV6与成骨细胞内信号传递关系方面的研究更少。本文作者对TRPV5和TRPV6与成骨细胞内信号传递的关系进行综述。     

瞬时受体电位通道蛋白A1和V1在正常小鼠耳蜗中的定位表达

目的 研究瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和V1(TRPV1)在正常小鼠耳蜗中的定位与表达.方法 选择12只健康成年BALB/c小鼠,应用免疫荧光染色方法和蛋白质印迹技术检测TRPA1和TRPV1在耳蜗中的定位与表达,同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试小鼠的听力.结果 TRPA1和TRPV1在小鼠耳蜗螺旋器的内、外毛细胞、螺旋神经节细胞和血管纹边缘细胞等都有表达,且主要定位于细胞膜;蛋白质印迹检测结果亦显示小鼠耳蜗中有TRPA1和TRPV1的表达.结论 TRPA1和TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗的多种细胞中均有表达,这为深入研究二者在内耳听觉生理和病理生理中的作用奠定基础.     

TRPV1/TRPA1对小鼠子宫内膜异位症炎症及疼痛的作用

目的 探讨瞬时受体电位锚定蛋白1(transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1)和瞬时受体电位香草酸1(transient receptor potential cation channel subfamily Ⅴ member 1,TRPV1)异聚体在子宫内膜异位症(简称内异症)小鼠子宫内膜组织中的表达及其与内异症缩宫素介导的疼痛的相关性,同时研究TRPA1和TRPV1对炎症因子的影响。方法 建立小鼠内异症模型,予以TRPA1激动剂肉桂醛和TRPA1拮抗剂HC-030031给药干预。疼痛行为学实验检测内异症小鼠扭体次数;ELISA检测血液及腹腔灌洗液炎症因子含量;实时荧光定量PCR及Western blot检测TRPV1/TRPA1基因和蛋白表达;免疫荧光检测TRPV1/TRPA1共定位。结果 在内异症模型小鼠中,TRPV1/TRPA1基因和蛋白表达上调,TRPA1激动剂肉桂醛上调TRPV1表达,TRPA1抑制剂HC030031抑制TRPA1的表达。肉桂醛对缓解小鼠内异症疼痛的作用较小,HC030031对疼痛的缓解作用显著。内异症小鼠血清及腹腔灌洗液IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和前列腺素(prostaglandin E2,PGE2)的含量显著升高,肉桂醛进一步促进这种作用,而HC030031显著抑制内异症小鼠血清及腹腔灌洗液炎症因子的含量。结论 TRPV1、TRPA1为内异症中感知炎症并进行传导的通道;TRPV1/TRPA1异聚体可能有利于响应炎症微环境,进行信号传导,增强疼痛感。     

瞬时感受器电位通道 vanilloid 4 在机械牵张人脑微血管内皮细胞中对内皮型一氧化氮合酶的作用

目的：筛选人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)中瞬时感受器电位 (transient receptor potential,TRP)通道亚型,检测该通道亚型在机械牵张刺激中对内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达的影响及探讨相关机制。方法：荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)、Western印迹及细胞免疫 荧光筛选HBMEC上TRP通道亚型。根据筛选的TRP通道亚型将细胞分组,应用多功能小型生物撞击机给予机械牵张 刺激;流式细胞仪检测细胞牵张前后胞内Ca2+荧光强度变化;Western印迹检测eNOS蛋白表达情况。结果：qRT-PCR 结果表明：TRPV4及TRPC1的mRNA相对表达量较多;细胞免疫荧光及Western印迹显示TRPV4通道蛋白表达;流式细 胞仪检测结果显示,特异性TRPV4通道抑制组较单纯牵张组Ca2+相对浓度低(P<0.001),较未牵张组(P=0.072)、非特异 性TRP通道抑制组(P=0.308)无明显差异。Western印迹检测结果显示：TRPV4通道抑制组和内皮型一氧化氮合酶抑制 组eNOS蛋白表达水平较单纯牵张组明显降低(P<0.05),较未牵张组无明显差异(P>0.05)。结论：TRPV4在HBMEC上有 表达,机械牵张将其激活后,可以引起eNOS蛋白表达增多,其机制可能与胞外Ca2+的内流有关。     

穴位敷贴对哮喘小鼠相关转录因子的调控作用

[目的]观察新型透皮吸收中药贴剂穴位敷贴对哮喘小鼠相关转录因子的调控作用.[方法]采用随机对照分组法将60只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组和贴药组,除正常组外,其他两组均采用卵蛋白致敏与激发法造模,其中贴药组以新型透皮吸收中药贴剂敷贴小鼠肺俞、大椎、风门穴,疗程结束后分别应用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)...     

瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）在胰腺炎中的作用

瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)是一个非选择性的阳离子通道,在疾病的发展过程中能被多种途径激活。近来研究表明胰腺初级感觉神经元中TRPV1受体的活化可促进胰腺炎症。此外,阻滞瞬时受体电位（TRP）通道能显著改善胰腺炎模型的疼痛反应。     

吴茱萸药材粉末及其主要有效成分的离体透皮吸收考察

目的:考察吴茱萸粉末及有效成分的体外透皮渗透特性。方法:采用透皮吸收仪,以离体大鼠皮肤为渗透屏障,通过体外透皮吸收实验,以高效液相色谱法检测接收液及皮肤中相关成分的质量浓度,计算累积透过量、皮肤滞留量、透皮速率、建立透皮曲线。结果:吴茱萸碱可以透过离体皮肤,吴茱萸次碱滞留在皮肤中,吴茱萸次碱滞留量比吴茱萸碱多,柠檬苦素未能透过离体皮肤。结论:吴茱萸碱具备较好的体外透皮释放性能,吴茱萸次碱具备良好的"药库"特性,柠檬苦素未能透皮释放,可为吴茱萸透皮吸收制剂的研究提供参考依据。     

薄荷醇影响TRP通道的研究进展

近年来,国内外学者在薄荷醇影响钙离子通道的研究中发现,其与瞬时感受器电位(TRP)通道有着密切的关系,其中包括TRPV1、TRPV3、TRPM8和TRPA1.本文对近年来薄荷醇参与细胞内Ca2+调节的TRP通道的相关研究进行综述.     

TRP通道参与温度感觉的分子机制

机体通过温度感受器来感知内外环境温度的变化,近年来已明确瞬时感受器电位（transientreceptorpotential,TRP）通道在温度感觉中起重要作用,其中包括介导热感觉的TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV4和介导冷感觉的TRPM8与TRPA1,本文就TRP通道参与温度感受作用的几个TRP通道的分子机制进行综述。     

基于不同皮肤模型的复方南星止痛膏透皮吸收行为研究

目的 制备复合磷脂脂质体人工皮肤膜(Composite phospholipid liposome-based artificial skin membrane, CPLASM)以评价复方南星止痛膏(Compound Nanxing Zhitong Plaster, CNZP)的透皮吸收行为。方法 建立同时测定CNZP中5种活性成分(桂皮醛、丹皮酚、丁香酚、水杨酸甲酯和欧前胡素)的HPLC分析方法。制备CPLASM并与市售人工皮肤膜Strat-M^TM、真实皮肤(猪耳皮和大鼠皮)一起用于考察CNZP体外透皮吸收行为,通过透皮吸收参数分析,比较不同人工皮肤膜与真实皮肤之间的相似度。结果 HPLC法能同时测定CNZP中5种活性成分的含量。在活性成分中,桂皮醛和丁香酚的透皮吸收能力最强。CPLASM、Strat-M^TM与猪耳皮测定的5种活性成分表观渗透系数相关系数分别为0.965 8和0.943 3,与大鼠皮测定的5种活性成分表观渗透系数相关系数分别为0.949 3和0.946 0。结论 应用CPLASM能够有效表征CNZP中活性成分体外透皮吸收行为...     

克班宁贴剂在大鼠体内的药动学与药效学评价

目的 比较克班宁经皮和灌胃2种给药途径在大鼠体内的药动学差异性,评价克班宁贴剂经皮给药抗大鼠心律失常的效果,以及克班宁对钙离子通道的作用机制。方法 采用HPLC法测定大鼠血浆中克班宁的浓度;采用氯化钡(BaCl₂)致大鼠心律失常的模型观察克班宁经皮给药的抗心律失常效果,采用Whole Cell记录检测克班宁对钙通道电流的影响。结果 克班宁贴剂经皮给药(400 mg·kg^-1)的主要药动学参数为：AUC_0-∞=(204.500±170.496)mg·h·L^-1;T_max=(10.333±0.745)h;C_max=(1.968±0.147)mg·L^-1(n=6)。克班宁溶液灌胃给药(40 mg·kg^-1)的主要药动学参数为：AUC_0-∞=(26.980±6.672)mg·h·L^-1;T_max=(0.086±0.024)h;C_max...     

天麻素全载药可溶性微针的制备及体外经皮渗透性研究

目的 制备天麻素全载药可溶性微针,并考察其理化性质及体外透皮性能。方法 采用两步离心法制备天麻素全载药可溶性微针,HPLC法测定其载药量,并进行形态学、机械性能、皮肤穿刺性能和恢复性能考察;采用Franz扩散池考察其体外透皮性能。结果 所制微针阵列完整,柔韧性好,每片载药量达(5.45±0.14)mg,机械性能良好,能成功刺穿大鼠皮肤,微针处理后皮肤在2 h内即可恢复到原来的状态。离体皮肤渗透结果显示,12 h后全载药微针中天麻素的累积渗透量可达87%,而天麻素溶液中天麻素的累积渗透量为12%,说明可溶性微针对天麻素具有良好的透皮递送促进作用。结论 制备的天麻素全载药可溶性微针机械强度及柔韧性好,实现了水溶性药物的透皮递送。     

硫酸软骨素载药胶束靶向肿瘤细胞内高尔基体治疗肿瘤转移的初步研究

  目的  本研究旨在初步探究共载吡柔比星（pirarubicin, THP）与长春瑞宾（vinorelbine, VRL）的硫酸软骨素胶束（chondroitin sulfate-modified micelles, CSmicelles）的肿瘤细胞内高尔基体的靶向性及其体外抗肿瘤转移效果。  方法  采用流式细胞术考察小鼠乳腺癌细胞株4T1摄取CSmicelles情况及摄取机制;通过共定位实验对CSmicelles的高尔基体靶向性进行初步研究;采用GM130免疫荧光实验考察共载THP与VRL的CSmicelles（THP+VTL-CSmicelles）对高尔基体结构的影响;最后通过细胞划痕实验和Transwell迁移/侵袭实验对THP+VTL-CSmicelles的体外抗肿瘤转移效果进行初步评价。  结果  CSmicelles能显著增加药物的入胞能力,其细胞摄取途径为网格蛋白和小窝蛋白介导的内吞,为能量依赖性的主动转运,并具有良好的肿瘤细胞内高尔基体靶向性。THP+VTL-CSmicelles能破坏高尔基体结构,显著抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭。  结论  THP+VTL-CSmicelles具有肿瘤细胞高尔基体靶向性,可发挥靶向效应,抑制肿瘤细胞转移。     

当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性大鼠背根神经节TRPs通道的影响

目的 探讨当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性大鼠背根神经节TRPs通道的影响。方法 使用奥沙利铂腹腔注射造成慢性神经毒性大鼠模型,60只大鼠分空白组、模型组、及当归四逆汤高、中、低剂量组。通过大鼠疼痛行为学、机械疼痛阈值测定检测当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性的缓解作用,并进一步通过RT-PCR、Western blot观察大鼠背根神经节TRPs（TRPV1、TRPA1、TRPM8）mRNA及蛋白表达水平变化。结果 大鼠行为学测定显示,与空白组比较,模型组、当归四逆汤低、中剂量组机械疼痛阈值下降（P<0.05）,而高剂量组未出现明显的下降（P＞0.05）。与空白组比较,其余各组大鼠背根神经节TRPA1、TRPM8、TRPV1蛋白表达量显著增加（P<0.01）。与模型组比较,当归四逆汤低剂量组可降低TRPM8蛋白表达（P<0.05）,中剂量组可降低TRPA1（P<0.01）、TRPM8（P<0.01）、TRPV1（P<0.05）蛋白表达,高剂量组明显降低三者蛋白表达量（P<0.01）。与空白组比较,其余各组大鼠背根神经节TRPV1、TRPA1、TRPM8 mRNA表达显著增加（P<0.01）,与模型组比较,当归四逆汤各组均可显著下调三者表达（P<0.01）。结论 当归四逆汤可以预防奥沙利铂慢性神经毒性,减缓大鼠机械疼痛阈值下降程度,其机制可能与下调TRPs通道蛋白表达有关。      

原发性痛经患者耳穴贴压方案的构建

目的 构建原发性痛经耳穴贴压方案,为原发性痛经患者的护理提供参考。方法 基于循证研究的理念和方法,将临床随机对照试验、指南及教科书作为证据来源,初步拟定方案。召开专家小组会议,确定函询问卷。2021年7—9月,通过现场发放及电子邮件的方式向13名专家发放问卷。经过两轮专家函询,构建了原发性痛经患者耳穴贴压方案。结果 两轮函询的专家积极系数分别为86.67%、100.00%;权威系数分别为0.85、0.81。第1轮函询中,耳穴组方部分肯德尔协调系数为0.386,操作方法部分为0.555（均P<0.001）;第2轮函询中,耳穴组方部分肯德尔协调系数为0.398,操作方法部分为0.709（均P<0.001）。最终构建的方案包括耳穴组方、操作方法2个部分,分为主穴、配穴、按压次数、按压频率、干预时间、干预疗程、选取何侧耳穴、耳穴贴更换频率8个维度。其中主穴包括内生殖器、内分泌、神门、交感、盆腔、卵巢6个穴位。在配穴方面,寒凝血瘀证配肾,气滞血瘀证配肝,肝肾亏损证配肝、肾,气血亏虚证配脾、肺、肝,湿热瘀阻证配耳尖、脾、三焦。结论 本研究构建的方案完善了主穴,增加了辨证配穴,规范了操作...     

促渗剂对八桂止痛乳膏体外经皮吸收的影响

目的 研究八桂止痛乳膏的最佳制备方法,确定最佳基质配方,考察不同浓度促渗剂氮酮对八桂止痛乳膏体外透皮吸收的影响。方法 制备含不同浓度促渗剂的八桂止痛乳膏。采用Franz扩散池法,离体小鼠皮肤为经皮吸收材料,高效液相色谱法作为此研究测定方法,比较桂皮醛在不同浓度促渗剂下的累积渗透量（Q）、经皮吸收速率（J）,以此为指标,筛选出最佳促渗剂浓度。结果 不同浓度的氮酮均不同程度地促进桂皮醛体外渗透,其促渗顺序为：5%氮酮组> 3%氮酮组> 7%氮酮组> 1%氮酮组> 10%氮酮组。经多重比较,差异均有统计学意义（P <0.05）。结论 在含1%、3%、5%、7%和10%氮酮的八桂止痛乳膏中,选择5%的氮酮作为八桂止痛乳膏的促渗剂最佳。