黄芪多糖对过氧化氢诱导人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)氧化损伤的保护作用。方法培养的人RPE细胞系ARPE-19分为正常对照组、过氧化氢损伤组和不同浓度(1000 mg·L-1、500mg·L-1)APS干预组,正常对照组不作任何处理,过氧化氢损伤组加入200μmol·L-1过氧化氢,APS干预组加入不同浓度(1000 mg·L-1、500 mg·L-1)APS后加入200μmol·L-1过氧化氢。用倒置荧光显微镜观察各组细胞形态变化;MTT检测各组细胞活性;DAPI染色观察各组细胞核形态学变化;实时细胞电子分析系统(real-time cell electronic sensing system,RT-CES)实时记录细胞生长状态;应用caspase-3活性检测试剂盒测定各组细胞中caspase-3的活性。结果过氧化氢损伤组细胞皱缩,悬浮细胞增多,APS干预后细胞状态改善。MTT检测结果显示:1000 mg·L-1、500 mg·L-1APS孵育24 h后细胞存活率分别为(99.86±3.64)%和(101.03±3.52)%,与正常对照组(100%)相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05),过氧化氢损伤组细胞存活率为(56.49±2.30)%,与正常对照组相比显著降低(P<0.01),1000 mg·L-1、500 mg·L-1APS干预后,细胞存活率升高到(88.14±2.97)%和(80.75±3.13)%,与过氧化氢损伤组相比差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。DAPI染色显示正常细胞核均匀淡染,过氧化氢损伤组出现强荧光点和致密的细胞核,APS处理后凋亡程度减轻。RT-CES显示,APS处理可以减少过氧化氢造成的细胞损伤。Caspase-3检测发现过氧化氢造成细胞caspase-3水平升高,APS处理后caspase-3水平下降。结论 APS可以抑制过氧化氢诱导的人RPE细胞系ARPE-19的凋亡,这为APS的临床应用提供了一定的实验基础。     

P-糖蛋白对H2O2诱导的视网膜色素上皮细胞氧化损伤的抑制作用

目的探讨P-糖蛋白对H₂O₂诱导的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化损伤的抑制作用。方法取人RPE细胞株D407细胞,放入体积分数5%CO₂培养箱中用含体积分数10%胎牛血清和双抗的DMEM培养基于37℃传代培养。先将细胞按H₂O₂浓度梯度处理,使用免疫印迹实验和P-糖蛋白荧光性底物罗丹明123蓄积实验确定H₂O₂对P-糖蛋白表达的最佳诱导浓度。预先使用1μmol·L^-1P-糖蛋白抑制剂Tariquidar处理细胞,通过测量细胞内罗丹明123蓄积量检测P-糖蛋白功能活性。将细胞分成3组:对照组、H₂O₂模型组(400μmol·L^-1)、H₂O₂+P-糖蛋白抑制剂组(H₂O₂+Tariquidar),通过检测细胞...     

杞黄颗粒对H2O2诱导的人视网膜色素上皮细胞炎症损伤的保护作用

目的　探讨杞黄颗粒（QHG）对H₂O₂诱导的人视网膜色素上皮（RPE）细胞系ARPE-19炎症损伤的保护作用。方法　常规培养ARPE-19细胞,随机分为对照组、H₂O₂损伤组(200 μmol?L^-1 H₂O₂处理细胞）、QHG低剂量组（1 g?L^-1 QHG作用24 h后再加入H₂O₂处理细胞）和QHG高剂量组（2 g?L^-1QHG作用24 h后再加入H₂O₂处理细胞）。使用相差显微镜观察各组ARPE-19细胞形态;流式细胞仪检测各组ARPE-19细胞凋亡率,Real-time PCR检测各组ARPE-19细胞β淀粉样蛋白（Aβ)mRNA表达,ELISA检测各组ARPE-19细胞Aβ以及攻膜复合物（MAC）的蛋白表达水平。结果　相差显微镜下可见,QHG低剂量组、QHG高剂量组ARPE-19细胞形态改变均较H₂O₂损伤组轻。对照组、H₂O₂损伤组、QHG低剂量组、QHG高剂量组ARPE-19细胞凋亡率分别为（6.85±0.14）%、（43.60±1.80）%、（23.23±1.43）%、（17.90±0.78）%,H₂O₂损伤组细胞凋亡率较对照组明显增加,QHG低剂量组及QHG高剂量组细胞凋亡率均较H₂O₂损伤组明显降低,且QHG高剂量组较QHG低剂量组降低更明显,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与对照组相比,H₂O₂损伤组ARPE-19细胞Aβ mRNA及Aβ、MAC蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义（均为P<0.01）。与H₂O₂损伤组相比,QHG低剂量组及QHG高剂量组均可明显降低ARPE-19细胞Aβ mRNA 相对表达量及Aβ、MAC蛋白的表达水平,差异均有统计学意义（均为P<0.01）。结论　QHG能有效抑制H₂O₂诱导的人RPE细胞凋亡,减少细胞Aβ及MAC表达,从而起到保护人RPE细胞的作用。     

复方血栓通胶囊对叔丁基过氧化氢诱导人视网膜色素上皮细胞氧化损伤保护作用

目的 探讨复方血栓通胶囊对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞(hRPE)氧化损伤的保护作用.方法 原代培养hRPE细胞后取第3～5代进行实验.应用MTT法筛选复方血栓通的最佳药物浓度;再分别用MTT及Annexin V/PI双染法检测复方血栓通及其各单方药物对细胞氧化损伤的保护作用.hRPE细胞分为正常对照组、t-BHP模型组和t-BHP+复方血栓通(0.25mg/ml)组,倒置相差显微镜和Hoechst33258染色观察各组细胞的形态和细胞核;MitoSOX染色检测活细胞线粒体中ROS的产生;JC-1染色检测线粒体膜电位的变化;ELISA法检测细胞分泌的VEGF浓度.结果 500μmol-BHP干预6h后,模型组细胞存活率下降到(49.9±6.3)%,而不同浓度的复方血栓通组细胞存活率均较模型组升高,且以0.25mg/ml的保护作用最佳;细胞存活率、凋亡及坏死率的结果显示复方血栓通较各单方药物的保护作用更为明显;模型组多数细胞肿胀、变圆、漂浮和核固缩,复方血栓通组损伤的细胞明显减少,线粒体内ROS的产生、线粒体膜电位的下降、分泌的VEGF均较模型组明显减少.结论 复方血栓通胶囊对t-BHP诱导hRPE细胞的氧化损伤具有保护作用,且其保护作用较各单方药物更为明显,其作用机制为清除ROS,阻止线粒体膜电位的下降,抑制VEGF的分泌,从而抑制细胞凋亡和坏死,提高细胞存活率.     

氧化损伤对体外培养人视网膜色素上皮细胞PEDF的影响

目的研究氧化损伤对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞表达色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)的影响。方法体外培养人RPE细胞,加入浓度为600μmol.L-1H2O2分别作用不同时间(2h、8h、24h),采用免疫细胞化学法检测PEDF蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测PEDF mRNA。结果免疫细胞化学染色对照组即有PEDF的阳性表达,而氧化损伤2h、8h、24h PEDF蛋白阳性表达量逐渐减少,染色由棕黄色变为黄色。各时间段两组结果比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测PEDF mRNA量与PEDF蛋白表达变化一致。结论氧化损伤能促使人RPE细胞PEDF表达下调,并在一定范围内与作用时间有关。     

褪黑素对体外培养的人视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的观察褪黑素对体外培养的人视网膜色素上皮细胞生长、增殖的影响,寻找药物以防治增殖性玻璃体视网膜病变。方法分别将不同浓度的褪黑素(0,125ng·L-1,250ng·L-1,500ng·L-1)加入体外培养的视网膜色素上皮细胞培养液,72h后用四甲基唑盐(MTT)比色法在自动酶标测定仪测540nm处的吸光值A,并计算出不同浓度条件下的细胞增殖抑制率。结果褪黑素在不同浓度下抑制视网膜色素上皮细胞增殖,并存在剂量-效应关系,实验组125ng·L-1和500ng·L-1组与对照组比较有显著性差异(P<0.001),但实验组250ng·L-1组与对照组之间的差异无显著性。结论褪黑素能抑制体外培养的人视网膜色素上皮细胞增殖,可作为防治增生性玻璃体视网膜疾病的侯选药物作进一步研究。     

EPO对氧化损伤的人视网膜色素上皮细胞bcl-2表达的影响

目的研究实验性氧化损伤的人视网膜色素上皮（RPE）细胞中凋亡相关基因（bcl-2）表达的变化及促红细胞生成素（EPO）对bcl-2基因表达的影响。方法制备RPE细胞氧化损伤模型,加入40U/ml的重组人促红细胞生成素（rhEPO）共同孵育,采用免疫细胞化学法检测bcl-2蛋白的表达,RT-PCR测定bcl-2mRNA的表达量。结果bcl-2在正常RPE细胞有弱表达,在氧化损伤2、8、24h其表达水平依次降低,氧化损伤组在各时间点与正常组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。EPO组bcl-2表达变化规律与氧化损伤组一致,但较氧化损伤组明显增加（P〈0.05）。bcl-2mRNA表达量与bcl-2蛋白表达的变化趋势一致。结论bcl-2参与视网膜氧化损伤的机制,EPO促进bcl-2在氧化损伤的RPE细胞中的表达。     

虾青素对人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的：：探讨虾青素(astaxanthin,AST)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H2 O2)诱导人视网膜色素上皮细胞( retinal pigment epithelial cells,RPE)氧化损伤的保护作用。方法：人RPE细胞系传代培养,MTT检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,透射电镜观察超微结构变化。结果：MTT结果显示用10-8 mol/L和10-4 mol/L AST处理后, RPE 细胞活性分别提高到53.66％±3.25％和70.43％±2.38％,与氧化损伤组(38.76％±3.74％)比较,差异具有统计学意义(P<0.05);流式细胞计数结果显示,预先给予10-8 mol/L和10-4 mol/L的AST作用后, RPE细胞凋亡率分别下降到30.23％±1.91％和12.58％±2.12％,与氧化损伤组(42.50％±1.94％)比较,差异具有统计学意义( P<0.05)。电镜观察结果显示,伴随AST作用浓度的增加,细胞形态亦逐渐得到改善。结论：AST可以抑制H2 O2诱导的人RPE细胞的凋亡,从而为寻求有效的防治视网膜损伤的药物提供可靠的实验依据。     

牛磺酸对氧化损伤人视网膜色素上皮细胞 caspase-3 表达的影响

目的探讨牛磺酸在氧化损伤的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡中的作用机制。方法体外培养的RPE细胞加入600μmol.L-1H2O2,制备氧化损伤模型,加入牛磺酸共同孵育,采用免疫组织化学法检测caspase-3的表达,ELISA检测上清液中caspase-3的浓度。结果Caspase-3在正常的RPE细胞中未见明显表达,在氧化损伤组其表达位于胞核,为特异性黄色着色,且随时间增加而表达增强。牛磺酸保护组caspase-3表达规律与氧化损伤组相似,但较相应氧化损伤组明显减少,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论Caspase-3参与视网膜氧化损伤凋亡的发生,牛磺酸对视网膜氧化损伤可能有保护作用。     

雌激素对人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的 探讨雌激素对过氧化氢(H2O2)氧化损伤人视网膜色素上皮(RPE)细胞的保护作用及其机制. 方法 制作人RPE细胞氧化损伤模型,分为对照组、H2O2损伤组和预处理组,后者于损伤前24 h加入17β-E2,根据17β-E2的浓度分为10-6、10-5、10-4 μmol/L亚组.采用分光光度计测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率及细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的浓度,细胞免疫组织化学法检测bcl-2的表达情况. 结果 H2O2损伤组与对照组相比,LDH释放率、MDA浓度明显升高,而bcl-2的表达减少,差异有统计学意义(P＜0.05);各预处理组与H2O2损伤组比较,LDH释放率、MDA浓度均有降低,而bcl-2的表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05).随17β-E2浓度的增加LDH释放率、MDA浓度减少,bcl-2的表达增加. 结论 雌激素对H2O2诱导的人RPE细胞的氧化损伤有保护作用.     

南珠水解液对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨南珠水解液对过氧化氢(H₂O₂)诱导的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化应激损伤的保护作用。方法培养HLEC细胞株HLEB3,在培养液中加入不同浓度南珠水解液,培养24 h和48 h分别检测细胞增殖水平,并据此选择后续实验中南珠水解液浓度。培养HLE-B3细胞,分成3组:正常对照组;氧化损伤组,加入H₂O₂至终浓度为300μmol·L^-1;南珠水解液处理组,加入H₂O₂至终浓度为300μmol·L^-1,加入南珠水解液至终浓度为200 mg·L^-1。3组细胞使用流式细胞术检测细胞凋亡率,利用电镜观察细胞形态差异;利用生化检测试剂盒检测3组细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物岐化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果 3组细胞增殖法检测结果显示,南珠水解液处理HLE-B3细胞24 h后,对其活性无抑制作用;50 mg·L^-1、100 mg·L     

miR-29a抑制H2O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤

目的　探究miR-29a在H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤中的作用和机制。方法　使用不同浓度（0 μmol·L^-1、100 μmol·L^-1、200 μmol·L^-1、300 μmol·L^-1、400 μmol·L^-1）的H₂O₂处理人晶状体上皮细胞HLE-B3,以确定后续实验中H₂O₂使用的浓度。将HLE-B3细胞随机分成4组:对照组、H₂O₂组、H₂O₂+模拟物对照组和H₂O₂+miR-29a模拟物组,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）含量,Real-time PCR检测miR-29a和Bcl2修饰因子（Bcl2 modifying factor,BMF）、Bcl2拮抗/杀伤因子1（Bcl2-antagonist/killer 1,BAK1） mRNA表达,Western blotting检测BMF和BAK1蛋白表达。结果　HLE-B3细胞活力随着H₂O₂浓度的增加而降低,呈现剂量依赖性,后续实验H₂O₂浓度选择200 μmol·L^-1。与对照组相比,H₂O₂组中miR-29a的表达（0.56±0.12）下调,细胞活力［（59.67±10.09）%］和SOD含量［（52.97±6.64）U·mL^-1］降低,细胞凋亡率［（40.30±4.76）%］和ROS水平［（299.52±43.95)%］增加,BMF和BAK1 mRNA和蛋白表达均上调,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与H₂O₂组相比,H₂O₂+miR-29a模拟物组中miR-29a的表达（4.49±0.55）上调,细胞活力［（92.83±8.09）%］和SOD含量［（84.03±6.31）U·mL^-1］增加,细胞凋亡率［（18.74±2.48）%］和ROS水平［（143.13±21.32）%］降低,BMF和BAK1 mRNA和蛋白表达均下调,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;与H₂O₂组相比,H₂O₂+模拟物对照组上述指标变化均不大,差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　上调miR-29a可促进H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞的细胞增殖、抑制细胞凋亡、减少氧化损伤,这些作用可能与BMF和BAK1的表达下调相关。     

Metallothionein protects retinal pigment epithelial cells against apoptosis and oxidative stress

The retina expresses metallothionein (MT) which has been reported to protect cells against oxidative stress and apoptosis. The types of MT expressed by human retinal cells were identified by laser capture microdissection and RT--PCR and it was found that MT-2a is expressed by retinal pigment epithelial (RPE) cells, photoreceptor cells, inner nuclear layer cells and ganglion cells while MT-1a is expressed by RPE cells and MT-3 by cells of the neural retina. MT is induced in cultured human RPE cells under stress conditions such as the presence of glucocorticoids, interleukin-1/TNF alpha, oxygen and TGF beta 1. Cultured human D407 RPE cells were transfected with plasmids that allowed the expression of MT to be controlled via the tet operator protein by the level of tetracycline in the medium. These experiments showed that elevation of MT levels by transfection of RPE cells protects them against toxic levels of cadmium, heme- and iron-induced oxidation and UV light-induced apoptosis.     

Melatonin protects human retinal pigment epithelial (RPE) cells against oxidative stress

Oxidative stress is involved in the pathogenesis of age-related macular degeneration (AMD). Administration of conventional antioxidants has been shown to slow the progression of AMD and vision loss. Melatonin, an endogenous neurohormone produced by the pineal gland and retina, has been reported to be a potent antioxidant and free radical scavenger. In this study we tested whether melatonin can protect retinal pigment epithelial (RPE) cells against hydrogen peroxide (H(2)O(2))-induced cell death. Since mitochondrial DNA (mtDNA) is preferentially susceptible to oxidative damage, we tested whether melatonin can reduce H(2)O(2)-induced mtDNA lesions. A human RPE cell line (ARPE-19) was cultured and exposed to H(2)O(2) (100 and 200 microm) for 1 hr to induce cell death. Prior to H(2)O(2) treatment, cells were treated with various concentrations (0.1-200 microm) of melatonin for 2, 24 or 72 hr. Control cells received either melatonin or ethanol alone. Cell viability, as determined by MTT assay, showed no significant (P>0.05) protection against H(2)O(2) toxicity in cells receiving 2- and 24-hr pretreatment of melatonin at either concentration. However, when melatonin was administered diurnally for 3 consecutive days, this prolonged treatment markedly reduced H(2)O(2)-induced cell death (P>0.05) MtDNA damage, as assessed with quantitative PCR, was significantly decreased (P<0.05) in RPE cells pretreated with melatonin as compared to those without melatonin treatment. These results suggest that melatonin may play a role in protecting RPE cells from oxidative stress.     

DNA氧化损伤修复基因ERCC6对过氧化氢诱导的氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨DNA氧化损伤修复基因ERCC6对过氧化氢（H₂O₂）诱导的氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法　采用不同浓度H₂O₂处理SRA01/04细胞,构建氧化损伤模型。取氧化损伤的SRA01/04细胞分为H₂O₂组、H₂O₂+空白质粒转染组和H₂O₂+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组进行转染处理。采用实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测转染后氧化损伤的SRA01/04细胞中ERCC6 mRNA和科凯恩综合征互补B蛋白（CSB）的表达变化。采用免疫印迹实验和EdU染色实验分别检测转染后各组SRA01/04细胞凋亡相关蛋白表达变化和细胞增殖能力。结果　当H₂O₂处理浓度为200 μmol·L^-1时, SRA01/04细胞ERCC6 mRNA和CSB蛋白的相对表达量最低,后续转染实验H₂O₂处理浓度均采用200 μmol·L^-1。与H₂O₂组和H₂O₂+空白质粒转染组相比,H₂O₂+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞ERCC6 mRNA和蛋白表达水平均显著增高（均为P<0.05）。进一步实验发现,与另外两组相比,H₂O₂+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞中的促凋亡蛋白Bax表达均明显降低,而抑制凋亡的蛋白Bcl-2表达则均明显增加（均为P<0.05）。EdU染色实验检测结果显示,与H₂O₂+空白质粒转染组相比,H₂O₂+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞内绿色荧光亮度增高,阳性细胞数量增加,表明SRA01/04细胞的增殖能力增强。结论　ERCC6基因可能通过减弱DNA的核苷酸切除修复作用抑制氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖、促进其凋亡从而导致老年性白内障的发生。     

雷公藤甲素对人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的抑制作用

目的　探讨雷公藤甲素对人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞氧化损伤的抑制作用及其机制。方法　RPE细胞传代培养,分为对照组、氧化损伤组（100 μmol·L^-1 H₂O₂）和雷公藤甲素（100 μmol·L^-1、200 μmol·L^-1）干预组。应用MTT比色法检测细胞增殖率,流式细胞技术测定细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量,Hoechst33258染色观察细胞凋亡,Western-blot检测RPE细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）蛋白的表达水平。结果　雷公藤甲素能明显抑制H₂O₂诱导的RPE细胞活性的下降,用不同浓度雷公藤甲素处理后,RPE细胞存活率分别提高到（56.00±2.76）%和（70.33±3.85）%,与氧化损伤组［（32.67±3.08）%］相比差异均有统计学意义（均为P<0.05）。雷公藤甲素能减少细胞内ROS生成,抑制细胞凋亡,不同浓度雷公藤甲素处理后,RPE细胞凋亡率分别下降到（50.33±4.61）%和（46.67±4.73）%,与氧化损伤组（67.00%±3.42%）相比差异均有统计学意义（均为P<0.05）。雷公藤甲素组SOD蛋白表达显著高于氧化损伤组,MDA蛋白表达显著低于氧化损伤组（P<0.05）。结论　雷公藤甲素对RPE细胞氧化损伤具有抑制作用,其作用机制与上调SOD的表达及下调MDA的表达有关;雷公藤甲素有望成为治疗视网膜病变的有效药物。     

木犀草素对碘酸钠诱导的视网膜色素上皮细胞及视网膜损伤的保护作用

目的　探讨木犀草素对碘酸钠诱导的视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial，RPE）细胞及视网膜损伤的保护作用。方法　体外实验选择人RPE细胞（ARPE-19），先将细胞分为对照组、碘酸钠模型组（1 g·L^-1碘酸钠）、木犀草素浓度梯度治疗组（10 μmol·L^-1、25 μmol·L^-1、50 μmol·L^-1、100 μmol·L^-1），MTT法分别检测各组细胞活力。随后将细胞分为对照组，碘酸钠模型组（1 g·L^-1碘酸钠），木犀草素治疗组（50 μmol·L^-1木犀草素），Hoechst33342染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况，Western blotting检测高迁移率族蛋白B1(high mobility group box l，HMGB1)、核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)、cleaved caspase-3相对表达量的变化。体内实验:将30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、碘酸钠模型组和木犀草素治疗组，木犀草素治疗组给予木犀草素预处理1周后，碘酸钠模型组与木犀草素治疗组鼠尾静脉给予碘酸钠造模，木犀草素治疗组继续如前给药4周，光学相干断层扫描 (optical coherence tomography，OCT)测量视网膜厚度，HE染色观察形态学变化并统计玻璃膜疣数量。结果　体外实验:MTT显示，碘酸钠模型组吸光度(A)值低于对照组（P<0.05），木犀草素浓度梯度治疗组A值均高于碘酸钠模型组（P<0.05）。Hoechst33342染色显示，碘酸钠模型组细胞凋亡率高于对照组（P<0.05），木犀草素治疗组细胞凋亡率低于碘酸钠模型组（P<0.05）。流式细胞计数显示，碘酸钠模型组细胞凋亡率高于对照组（P<0.05），木犀草素治疗组细胞凋亡率低于碘酸钠模型组（P<0.05）。Western blotting检测显示，碘酸钠模型组HMGB1、NF-κB、cleaved caspase-3相对表达量均高于对照组（均为P<0.05），木犀草素治疗组HMGB1、NF-κB、cleaved caspase-3相对表达量均低于碘酸钠模型组（均为P<0.05）。体内实验:OCT显示，对照组各层结构排列均一整齐，与碘酸钠模型组相比，木犀草素治疗组RPE层高反射点减少，光感受器和外核层排列紊乱程度减轻，视网膜相对厚度增加（P<0.05）。HE染色显示，对照组各层细胞排列整齐，密度均匀；与碘酸钠模型组相比，木犀草素治疗组外核层褶皱程度减轻，RPE层连续性增加，棕黑色颗粒（玻璃膜疣）沉积数量减少（P<0.05）。结论　木犀草素通过降低HMGB1表达减轻NF-κB介导的炎症抑制碘酸钠诱导的RPE细胞凋亡并保护视网膜免受损伤。     

干性ARMD中视网膜色素上皮细胞的作用及损伤机制

年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,ARMD)是导致老年人中心视力不可逆丧失的主要原因。ARMD的典型特征是视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)和脉络膜毛细血管发生退行性改变及黄斑区出现玻璃膜疣。临床上ARMD分为两种亚型：非渗出型(干性或萎缩型)和渗出型(湿性或新生血管型)。该病的发生是年龄、环境、遗传、吸烟、氧化应激和心血管功能障碍等多种因素相互作用的结果。鉴于RPE细胞在ARMD发病中的重要作用,现以RPE细胞为重点,总结了蓝光、吸烟、氧化应激、脂褐素积累、慢性炎症和蛋白质稳态对干性ARMD发病的作用和可能机制,为认识和预防干性ARMD的发生提供新的帮助。