枸杞子的抗衰老功效及增强DNA修复能力的作用

目的:检测枸杞子对遗传物质DNA受损后修复的作用,探讨枸杞子在抗衰老中的药理作用。方法:2000-03北京医科大学遗传系检测了不同浓度的枸杞培养液培养受γ射线照射的人淋巴细胞所得微核率的差异,同时在非程序DNA合成法(UDS)基础上,检测受紫外线损伤后外周血淋巴细胞诱导3H-TdR掺入细胞的量。结果:人外周血淋巴细胞微核率及微核细胞率结果:显示γ射线具有很强的诱发微核产生的作用(P<0.001);同一放射剂量下,培养液中加枸杞提取液组与不加枸杞提取液组相比,微核率及微核细胞率均极显著降低P<0.001),1g/L枸杞浓度组比0.5g/L浓度组这种抑制微(核的作用更为显著(P<0.001)。口服枸杞子后能提高正常人DNA修复能力。结论:枸杞对辐射所致DNA损伤具有良好的修复作用,为延缓细胞衰老的分子生物学研究提供理论基础。     

羊睾丸提取液对小鼠受损睾丸支持细胞的修复作用

目的：探讨羊睾丸提取液对重金属致损睾丸支持细胞的修复与保护作用，以期为干预男性生育功能障碍提供新思路。方法：选用健康昆明种雄性小白鼠30只，随机将其分为对照组、模型组、给药组。每组小鼠10只。采用醋酸铅制备睾丸受损模型，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸-黄递酶(NADPH-d)组织化学方法结合显微图像分析，观察各组小鼠睾丸支持细胞一氧化氮合酶(nitric oxide synthase。NOS)活性。结果：模型组睾丸支持细胞肿胀变性，模型组NOS活性(A值：0．146&;#177;0．023)明显低于对照组(0．298&;#177;0．031)；给药组支持细胞形态接近对照组。给药组NOS活性(0．236&;#177;0．020)明显高于模型组(P&;lt;0．01)。对照组体质量明显高于模型组(P&;lt;0．01)；给药组体质量明显高于模型组(P&;lt;0．05)；对照组与给药组无明显差异(P&;gt;0．05)。对照组睾丸质量明显高于模型组(P&;lt;0．05)；给药组睾丸质量明显高于模型组(P&;lt;0．05)。结论：羊睾丸提取液对铅等重金属所致的睾丸损伤有一定的修复和保护作用。     

抗呆Ⅰ号对体外模拟脑缺血再灌注损伤星形胶质细胞的影响

目的：观察体外培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞在模拟脑缺血再灌注损伤中的活性、存活率和无血清条件培养液蛋白含量的变化以及中药抗呆Ⅰ号的影响。方法：先对分离纯化培养的星形胶质细胞进行体外模拟脑缺血再灌注损伤模型的建立，然后采用MTT法对星形胶质细胞的活性和存活率进行测定以及用Bradform法对星形胶质细胞条件培养液中蛋白质含量进行测定。结果：体外培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞在体外模拟脑缺血再灌注损伤中的活性、存活率、无血清条件培养液蛋白含量的变化具有一定的规律性，可分细胞损伤期、功能代偿期、功能低下期和功能恢复期。抗呆Ⅰ号可使受损的星形胶质细胞的活性明显增强(与模型组相比多数时间点比较(t=2．074，P&;lt;0．05)。存活率显著提高(与模型组相比多数时间点P&;lt;0．05，t&;gt;2．219)，使其条件培养液中的蛋白含量迅速增高(与模型组相比多数时间点，t&;gt;5．087，P&;lt;0．001)。结论：抗呆Ⅰ号可能通过保护星形胶质细胞免受损伤或使其分泌功能增强，从而间接地发挥星形胶质细胞对神经元的保护和修复作用。     

SHG-44胶质瘤细胞表达β-1，4-半乳糖基转移酶V后对鬼臼乙叉甙敏感性影响

目的：研究鬼臼乙叉甙(Etoposide，VP16)对表达β-1，4-半乳糖基转移酶V(beta-1，4-galactosyltransferase V，β-1，4-GaITV)的SHG-44胶质瘤细胞死亡和凋亡的影响，为进一步探讨β-1，4-GaIT V与化疗药物敏感性的关系奠定基础。方法：通过流式细胞仪(FCM)和Hoeehst 33258染色法，分析不同浓度的VP16处理转染了正义(GalT V-HA／SHG-44)、反义β-1，4-GalT V(GalT V-AS／SHG-44)和空载体(Mock)的SHG-44细胞后细胞的凋亡和死亡情况。结果：①低浓度的VP16(20μmoL／L)处理24h后，GalT V-HA／SHG-44组的死亡细胞加上凋亡细胞的比例明显低于Mock组(t=4．5506，P&;lt;0．01)和GalT V-AS／SHG-44组(t=5．0865,P&;lt;0．001)。GalT V-AS／SHG-44组的死亡细胞加上凋亡细胞比例明显高于Mock组(t=3．2873，P&;lt;0．01)。高浓度的VP16(120μmoL／L)处理48h和72h后，GalT V-HA／SHG-44组死细胞所占比例明显低于Mock组(t=3．3664，P&;lt;0．05；t=5．4953，P&;lt;0．01)和GalT V-AS／SHG-44组(t=3．1732，P&;lt;0．01：t=4．6035，P&;lt;0．001)。②MTT分析显示，VP16处理48，72h后，GalT V-HA／SHG-44组活细胞数明显高于Mock组(t=5．0783,P&;lt;0．05；t=3．8923,P&;lt;0．01)和GalT V-AS／SHG44组(t=4．5667，P&;lt;0．01；t=4．7849，P&;lt;0．001)。③VP16(20μmoL／L)处理24h后，用Hoechst 33258染色。镜下观察到死亡或者凋亡细胞中的细胞核仁及断裂的核片段呈新月形。或核固缩并深染。GalT V-AS／SH组平均死亡和凋亡阳性率为41％，大大高于经同样处理的转染空载体和转染正义β-1，4-GaIT V的SHG44细胞。结论：β-1，4-GalT V能够影响抗肿瘤药VP16的杀伤作用，过表达β-1，4-GalT V可以拮抗VP16的作用，为解释胶质瘤的化疗耐药性提供了新的依据。     

大鼠脑缺血后树突状细胞参与脑损伤过程的作用及其免疫活性

目的：证明大鼠脑缺血后树突状细胞(dendritic cell，DC)是否参与脑损伤过程和所具有的免疫活性。方法：用线栓方法封闭大鼠右侧大脑中动脉制作动物模型。用免疫组化染色方法检测脑缺血1h到第6天时，缺血脑组织中DC(OX62^+)的存在，以及胶质细胞／巨噬细胞(OX42^+)转化成DC(OX62^+)的情况。同时检测活化后的DC样细胞表达MHC—Ⅱ类分子的水平。结合免疫组化和寡核苷酸探针杂交方法，检测DC样细胞的功能。结果：缺血脑半球和假手术的脑半球相比较，在1h DC的数量明显增加(t=7．143，P&;lt;0．001)。在脑缺血组中，缺血脑半球与非缺血脑半球相比较，DC的数量也增多(t=10．295，P&;lt;0．001)。脑缺血第6天，缺血组与假手术组进行比较，DC表达MHC—Ⅱ类分子(OX62^+OX6^+)显著升高(t=2．975，P&;lt;0．05)。缺血脑半球与非缺血脑半球相比较，在12，24和48h，DC表达白介素-6(interleukin-6，IL-6)mRNA，P值均&;lt;0．05，而DC表达白介素-10(interleukin-10，IL-10)mRNA在12h时，t=11．258，P&;lt;0．01，24h时，t=12．124，P&;lt;0．001。脑缺血1h到第6天，缺血脑半球与非缺血脑半球相比较，DC表达肿瘤坏死因子—α(tumor necrotic factor—α，TNF—α)mRNA有两个—α，TNF—α)mRNA有两个2．696．P&;lt;0．05)和12h(t=4．793，P&;lt;0．01)，第二个高峰期是在48h(t=3．072，P&;lt;0．05)和第6天(t=2．715，P&;lt;0．05)。脑缺血后，DC表达干扰素-γ(interferon—γ，IFN—γ)mRNA是随着脑缺血时间延长，IFN—γ表达量增加，24h时，t=2．677，P&;lt;0．05，48h时，t=2．896，P&;lt;0．05，第6天，t=6．145，P&;lt;0．001。结论：脑缺血后，脑缺血组织中DC数量的增加，提示DC参与了脑缺血过程。DC不仅在脑损伤过程中处于活化状态，而且通过DC表达的细胞因子产生免疫效应。     

类风湿关节炎患者Th1／Th2细胞因子分泌模式与疾病活动程度的关系

目的：用全血在单个细胞水平上研究类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者Th1／Th2细胞因子分泌模式及其与疾病活动程度的关系。方法：用三色流式细胞术检测20例活动期RA患者的外周血单个核细胞及10例正常人的PBMC细胞内细胞因子干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)和白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)的表达情况。结果：RA患者外周血IFN-γ^+细胞百分率及IFN-γ^+／IL-4^+细胞比值比健康人明显增高[分别为(45．8&;#177;10．1)％和(15．2&;#177;8．5)％，t=9．07，P&;lt;0．01和(10．6&;#177;3．8)％和(5．5&;#177;3．1)％，t=5．67，P&;lt;0．01]，IFN-γ^+／IL-4^+比值与患者Stoke指数呈正相关(r=0．8610，P&;lt;0．01)。结论：RA患者外周血中细胞因子分泌模式朝，Th1偏移，IFN-γ^+／IL-4^+比值与疾病活动性相关，Th1／Th2平衡在RA发病机制及疾病进程中起重要作用。     

来氟米特对类风湿关节炎患者外周血Th1／Th2平衡和关节功能的影响

目的：探讨来氟米特对类风湿关节炎(rheumatoid arthrtitis，RA)患者外周血T淋巴细胞亚群和关节功能的影响及其可能的作用机制。方法：收集25例RA患者(RA组)和10例接受来氟米特治疗前及治疗3个月后的RA患者(治疗组)的外周血，对CD4^+，CD8^+细胞分泌白细胞介紊-4(IL-4)和1干扰紊的情况进行检测。选择9例健康志愿者作为对照组。采用细胞内细胞因子染色、三色流式细胞分析法检测单个细胞分泌细胞因子的情况。结果：RA患者和健康对照组的外周血CD4^+／CD8^+T淋巴细胞中，分泌(干扰紊的细胞群均比分泌IL-4的细胞群多(t=3．534。P&;lt;0．01)，同健康对照组[(7．61&;#177;3．27)％]比较，RA组患者外周血中Thl型细胞[(4．57&;#177;2．70)％]明显减少(t=-2．233，P&;lt;0．05)。接受来氟米特治疗后产生1干扰紊的Th1型、Te1型细胞和产IL-4的Th2型细胞明显减少(分别t=3．709，3．419，3．211，均P&;lt;0．01)，而Te2型细胞则无明显增加或减少(t=1．022，P&;lt;0．05)，各项关节功能指标包括关节肿胀指数、血沉、C-反应蛋白等均显著下降(t=3．466，3．325，3．207，均P&;lt;0．01)。结论：氟米特可能通过抑制Th1型和Te1型的分化、减少Th1／Te1型细胞因子如γ干扰紊的分泌而发挥抗炎和改善关节功能的作用。     

三七总皂甙对大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的：以原代培养的大鼠海马神经细胞缺氧／缺糖再给氧为模型，观察三七总皂甙对神经细胞凋亡的抑制作用。方法：流式细胞术检测凋亡细胞百分率，激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内Ca^2+浓度，荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率，同时，测定细胞LDH的释放。结果：神经细胞缺氧／缺糖5h后再给氧3h时，细胞凋亡百分率明显增高，为19．06％(P&;lt;0．01)，细胞坏死百分率为6．83％(P&;lt;0．01)，细胞内Ca^2+浓度为169．32nmol／L Ca^2+浓度(P&;lt;0．01)，LDH的释放率为27．63％(P&;lt;0．01)；神经细胞缺氧／缺糖5h后再给氧24h时．细胞凋亡百分率为49．85％(P&;lt;0．01)，细胞坏死百分率为11．49％(P&;lt;0．01)，细胞内Ca^2+浓度为298．11nmol／L(P&;lt;0．01)，LDH的释放率为60．35％(P&;lt;0．01)。三七总皂甙(25，50mg／L)能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率，降低细胞内Ca^2+浓度，减少LDH的释放，三七总皂甙的作用随剂量增加而作用增加。结论：三七总皂甙对缺血再灌注损伤后海马神经元的凋亡过程具有抑制作用，这种作用可能与其能降低细胞内Ca^2+浓度有关。     

不同剂量γ射线照射对体外培养胶质瘤细胞系的影响及对神经功能的保护作用

目的：比较不同剂量γ射线对胶质瘤细胞系C6和SHG-44的影响，建立γ射线诱导胶质瘤细胞系C6和SHG-44凋亡研究的生物模型，探索γ射线照射对胶质瘤细胞周期的影响。方法：采用对数生长期的C6和SHG-44胶质瘤细胞经4，8，16，32和64Gy的γ射线照射后培养48h，用流式细胞仪进行细胞凋亡检测并分析细胞周期的改变。结果：不同剂量γ射线照射均可诱导C6和SHG-44胶质瘤细胞凋亡。C6细胞对照组、4，8，16，32和64Gy组照射后48h的凋亡百分数分别为(3．1&;#177;0.5)，(16．7&;#177;0.6)，(27．9&;#177;0.8)，(27．3&;#177;0.4)，(33．8&;#177;0.7)和(36．7&;#177;0.7)，照射组凋亡率均高于对照组(t=30．16～67．65，P&;lt;0.01)。SHG-44细胞对照组，4，8，16，32和64Gy组照射后48h的凋亡率均高于对照组(t=35．51～103．79，P&;lt;0.01)，但两组细胞的坏死比例均无明显增加(P&;gt;0.05)。SHG-44细胞对电离辐射更加敏感。两种细胞G0／G1期的细胞比例与γ射线照射剂量呈正相关；S期的细胞比例与照射剂量呈负相关。结论：以γ射线照射C6和SHG-44胶质瘤细胞可建立理想的射线诱导的细胞凋亡模型，γ射线照射可引起两种胶质瘤细胞系G1期阻滞和S期延迟。     

新生戒毒胶囊对海洛因成瘾小白鼠戒断作用的实验研究

目的：观察新生戒毒胶囊对海洛因成瘾小白鼠戒断作用。方法：将100只小白鼠随机分为5组，测量跳跃次数、跳跃反应数及体质量变化并比较各组差异有无显著性意义。结果：新生戒毒胶囊各剂量组与福康片对照组的跳跃次数和跳跃百分率显著低于生理盐水组(P&;lt;0．001)，新生戒毒胶囊大剂量组跳跃次数和跳跃百分率(2．7&;#177;2．1，10％)显著低于福康片组(5．8&;#177;2.9，30％，P&;lt;0．001和P&;lt;0．05)。新生戒毒胶囊大、小剂量组之间跳跃次数和跳跃百分率其值分别为2．7&;#177;2．1，10％；6．5&;#177;3．8，35％)差异有显著性意义(P&;lt;0．001)。新生戒毒胶囊各剂量组与福康片对照组的体质量改变。显著低于生理盐水组(P&;lt;0．01～0．05)，新生戒毒胶囊大剂量组[(-0，09&;#177;0．17])显著低于福康片对照组[(-0．30&;#177;0.28)g]，(P&;lt;0．0001)。结论：新生戒毒胶囊对海洛因成瘾小白鼠急性戒断时跳跃次数、跳跃百分率和体质量改变的对抗作用有一定的量效关系。     

非遗传性阿尔茨海默病大鼠模型建立的实验研究

目的：应用喹啉酸损毁Meynert基底核建立非遗传性阿尔茨海默病大鼠模型.方法：应用喹啉酸(每侧150nmol，2μL)损毁老年大鼠双侧Meynert基底核，一次性训练被动回避跳台实验和水迷宫空间分辨能力测试，研究大鼠学习记忆的改变，并观察1，2，3，4四氢吖啶(THA)对Meynert基底核损毁大鼠学习记忆的改善作用.结果：与假损伤组相比，喹啉酸损伤Meynert基底核后13d，大鼠在跳台中出现的错误反应次数明显增多，学习中为(1．25&;#177;0.71)次比(3．75&;#177;1．28)次(q=6．83，P&;lt;0．01)，重测验中为(0．50&;#177;0．53)次比(2．00&;#177;0．76)次(q=7．42，P&;lt;0．001)。损伤后16d，大鼠学会迷宫所需的训练次数显著增加(q=22．16，P&;lt;0．001)。与喹啉酸组对比，腹腔注射THA 10mg／(kg&;#183;d)13d后，Meynert基底核损伤后大鼠在跳台中出现的错误反应次数明显减少(P&;lt;0．01)，腹腔注射THA 16d后学会迷宫所需的训练次数也显著减少(q=20．38，P&;lt;0．01)。结论：喹啉酸损毁老年大鼠双侧Meynert基底核，能够建立非遗传性阿尔茨海默病大鼠模型。     

转铁蛋白-多聚乙烯亚胺介导IL-12基因对小鼠抗骨肉瘤免疫的增强作用

目的：研究以转铁蛋白一多聚乙烯亚胺(transferririn-polyethylenimine．Tf-PEI)为靶向性载体，体内转染小鼠白细胞介素12(murine interleukin-12，mIL-12)基因治疗小鼠骨肉瘤模型的疗效。方法：分别以PEI和Tf-PEI为载体，将mIL-12基因导人体外培养的小鼠骨肉瘤细胞，并观察游离转铁蛋白对Tf-PEI转染效率的影响。建立小鼠骨肉瘤动物模型，在荷瘤部位将Tf-PEI包裹mIL-12基因直接注入肿瘤中，检测此基因在肿瘤细胞中的蛋白表达情况和小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)、细胞毒T淋巴细胞(CTL)的活性。结果：Tf-PEI组mIL-12蛋白表达效率显著高于PEI组(f=38．15，P&;lt;0．001)。游离转铁蛋白可显著抑制Tf-PEI组的转染效率(1=44．36，P&;lt;0．001)。在注射有mIL-12基因的肿瘤组织中，小鼠IL-12蛋白水平明显升高，为(72&;#177;5)ng／L(F=3．449，P&;lt;0．001)，小鼠脾细胞：NK，CTL活性增强(t=5．04，t=6．13，P&;lt;0．001)。结论：Tf-PEI是一种高效率的肿瘤靶向性基因转染载体，它可以成功的将mIL-12基因导入小鼠骨肉瘤模型，mIL-12基因治疗可提高机体的抗肿瘤免疫应答。     

构建体外联合培养条件下抗原诱导淋巴细胞反应的抑制模型

目的：观察在体外混合培养条件下，抗原能否诱导外周淋巴细胞反应抑制．建立体外淋巴细胞反应抑制模型。方法：实验于2003-10／2004—04在解放军第四军医大学西京医院心脏外科研究所实验室进行。取健康自愿者新鲜血液用于分离外周淋巴细胞。在体外条件下，以同种异体外周淋巴细胞分作供体和受体进行混合培养，采用四甲基偶氮唑盐比色法、电镜、姬姆萨一瑞氏染色、流式细胞仪检测对照组[D组：首次混合培养淋巴细胞(PMLC)，即受体淋巴细胞(R)+用丝裂霉素处理过的供体淋巴细胞(DBm)混合培养72h所得]，A组(PMLC+DBm)、B组(PMLC+白细胞介素2中和单抗)、C组(PMLC+DBm+白细胞介素2中和单抗)等4组淋巴细胞的活性变化、活性变化的原因及其数量的变化。结果：①4组混合培养淋巴细胞在电镜、显微镜下变化：均可见细胞质染色浓集、核固缩裂解，凋亡小体形成。②四甲基偶氮唑盐比色法检测4组细胞活性即刺激指数：B组和C组比A、D组明显减弱(3．152&;#177;0．322，1．802&;#177;0．115，4．293&;#177;0．269．3．709&;#177;0．278，P&;lt;0．05)：C组细胞活性比B组也明显减弱(P&;lt;0．05)。③流式细胞仪检测淋巴细胞凋亡率：单向混合淋巴细胞培养后的T淋巴细胞的凋亡率Br组和Cr组高于Dr对照组和Ar组[(11．25&;#177;0．78)％，(31．65&;#177;1．33)％。(5．95&;#177;0．24)％，(2．15&;#177;0．04)％，P&;lt;0．01]；Cr组细胞凋亡率明显高于Bf组(P&;lt;0．01)。结论：在体外混合培养条件下，实现抗原诱导外周淋巴细胞凋亡，从而构建体外淋巴细胞反应抑制模型是可行的。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肿瘤细胞凋亡和细胞周期的影响

目的：研究扶正抑瘤颗粒对小鼠移植性肿瘤S180的抑制作用及对细胞凋亡和细胞周期的影响。方法：用小鼠体内肿瘤试验观察扶正抑瘤颗粒对S180肉瘤的肿瘤抑制率，通过流式细胞术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法测定细胞凋亡率、凋亡指数，分析细胞周期。结果：扶正抑瘤颗粒显著抑制S180生长，最高肿瘤抑制率为56．04％(P&;lt;0．01)，显著提高S180肉瘤的细胞凋亡率，最高凋亡率为18．37％(P&;lt;0．001)，细胞周期分析表明扶正抑瘤颗粒将肿瘤细胞阻滞于Go／G1期而降低S期比率。TUNEL检测证实扶正抑瘤颗粒明显提高S180肉瘤的细胞凋亡指数(P&;lt;0．001)。结论：扶正抑瘤颗粒具有明显的体内抗肿瘤活性，其抗肿瘤作用与调控肿瘤细胞周期和诱导细胞凋亡有关。     

核酸对铅染毒大鼠DNA损伤的干预效应

目的：探讨抗氧化物质核酸对铅染毒大鼠淋巴细胞和肝细胞DNA损伤的干预效应。方法：实验于2003-03／05在哈尔滨医科大学公共卫生学院完成。选用32只纯种雄性健康3月龄Wistar大鼠，清洁级，32只大鼠随机分为4组，空白组、模型组、低剂量和高剂量核酸组各8只。空白组正常饮水．其余3组饮醋酸铅水溶液8g／L。空白组、模型组灌胃蒸馏水，低剂量和高剂量核酸组分别灌胃核酸200，700mg／kg，末次灌胃后24h，尾部取抗凝血，分离淋巴细胞，制成细胞悬液，24h内待测。5周后断头处死各组动物，取出肝脏，制成肝细胞悬液，24h内待测。采用单细胞凝胶电泳技术(彗星细胞实验)对淋巴细胞和肝细胞DNA损伤进行观察，细胞中DNA损伤单链断裂时会出现拖尾的彗星细胞。每片随机观察30个细胞，计数彗星细胞百分率，用目镜测微尺测量彗星细胞尾长。结果：32只大鼠全部进人结果分析，无脱失。①淋巴细胞中彗星细胞百分率和尾长比较：模型组与核酸低、高剂量组大鼠淋巴细胞中彗星细胞百分率和尾长均显著高于空白组[(50．25&;#177;6．21)％，(41．25&;#177;6．96)％．(35-38&;#177;5．93)％，(6．88&;#177;1．13)％；(23．25&;#177;4．23)μm，(16．50&;#177;4．24)μm，(13．63&;#177;2．62)μm，(6．751&;#177;0．17)μm，(q=11．28～42．94，P&;lt;0．01)]。核酸低、高剂量组彗星细胞百分率及彗星细胞尾长均明显低于模型组(q=8．91～15．77，P&;lt;0．01)。②肝细胞中彗星细胞百分率和尾长比较：模型组与核酸低、高剂量组大鼠肝细胞彗星细胞百分率和尾长均明显高于空白组(56．25&;#177;6．71)％，(42．25&;#177;6．09)％，(39．25&;#177;7．17)％，(8．25&;#177;1．28)％：(27．63&;#177;4．98)μm，(19．25&;#177;3．54)μm，(18．50&;#177;5．48)μm，(7．88&;#177;0．99)μm．(q=14．07～45．24，P&;lt;0．01)。核酸低、高剂量组彗星细胞百分率和尾长也显著低于模型组(q=11．10～16．02，P&;lt;0．01)。结论：慢性铅染毒可导致大鼠淋巴细胞和肝细胞DNA损伤，饮食核酸能显著提高对淋巴细胞和肝细胞DNA损伤的修复作用。     

慢性苯染毒小鼠DNA损伤及体内抗氧化酶的变化

背景：苯是重要的工业溶剂，长期接触可导致苯可导致DNA损伤，染色体畸变，DNA加合物的形成，基因突变等。目的：了解苯对体内DNA的损伤作用、机制以及抗氧化酶体系的变化情况。设计：随机对照的实验研究。单位：哈尔滨医科大学附属第一医院检验科，哈尔滨医科大学公共卫生学院。材料：实验在哈尔滨医科大学公共卫生学院动物室完成。选用健康雄性昆明种小鼠24只。体质量18—22g，由哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心提供。干预：分为正常对照组、低剂量苯损伤组和高剂量苯损伤组。除对照组外，其余各组小鼠进行静式吸入苯蒸气染毒，4h／d，2个月后处死，分离骨髓细胞及外周血淋巴细胞，取肝、脾、脑组织并制备匀浆。主要观察指标：用单细胞凝胶电泳技术对骨髓细胞及外周血淋巴细胞DNA损伤进行检测；同时检测肝、脾、脑组织中超氧化物歧化酶(supemxide dismulase，SOD)、谷胱肝肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)的活性及丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量。结果：染毒组小鼠骨髓细胞及外周血淋巴细胞彗星百分率分别为骨髓细胞(83．56&;#177;10．28)％，(92．54&;#177;15．93)％，外周血淋巴细胞(41．27&;#177;6．03)％，(65．79&;#177;11．62)％，显著高于对照组(4．13&;#177;0．52)％。(2．21&;#177;0．31)％(P&;lt;0．01)，并呈剂量-反应关系。高、低浓度组小鼠肝匀浆SOD活力分别为(11573．31&;#177;1938．72)．(12574．68&;#177;1938．72)nkat／g，GSH—Px活力分别为(309．40&;#177;82．85)，(375．41&;#177;55．18)nkat／g，均显著低于对照组【分别为(16668．67&;#177;3137．96)，(588．62&;#177;110．52)nkat／g】(P&;lt;0．05)，但不同剂量组间差异无显著性意义；高、低浓度组小鼠脾匀浆GSH-Px活性分别为(421．75&;#177;124．02)、(523．10&;#177;45．18)nkat／g，均显著低于对照组(618．42&;#177;57．01)nkat／g(P&;lt;0．05)，且不同剂量组间差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；高、低浓度组小鼠脑匀浆GSH-Px活性分别为(87．35&;#177;19．84)，(95．02&;#177;14．00nkat／g，均显著低于对照组(118．36&;#177;7．67)nkat／g(P&;lt;0．05)，但不同剂量组间无显著性差异；高浓度组小鼠脑匀浆MDA含量为(3．99&;#177;1．15)μmol／g，显著高于对照组(2．58&;#177;0．53)p．mol／g(P&;lt;0．05)。结论：慢性苯染毒可致小鼠骨髓细胞及外周血淋巴细胞DNA损伤，体内抗氧化酶活性降低。     

骨关节炎Ⅰ号方对抗过氧化氢致软骨细胞DNA的损伤作用

目的：选用过氧化氢作为实验软骨细胞DNA的损伤因子，探讨骨关节炎Ⅰ号方预防过氧化氢对软骨细胞DNA的损伤作用。方法：实验于2004—01／12在福建省中医学院动物中心完成。骨关节炎Ⅰ号方由仙灵脾、巴戟天、川芎、三七、祖师麻组成。取三四周龄兔关节软骨，经胶原酶Ⅱ消化，建立软骨细胞体外培养体系。随机分成4组，①骨关节炎Ⅰ号方组加入100g／L骨关节炎Ⅰ号方药液，②中药加过氧化氢组加入100g／L骨关节炎I号方与lmmol／L过氧化氢组混合液，③过氧化氢对照组加入1mmol／L过氧化氢液，④正常对照组加入磷酸盐缓冲液。均加入软骨细胞培养体系中培养2h，用单细胞凝胶电泳法检测培养体系中软骨细胞的DNA损伤的程度以彗星细胞出现率和慧星尾长的变化做评估指标。结果：①彗尾样细胞出现率：过氧化氢组彗尾样细胞出现率显著高于中药加过氧化氢组(41％，24％，P&;lt;0．05)、显著高于中药组(41％，8％．P&;lt;0．01）、显著高于正常对照组(41％，9％，P&;lt;0．01)；中药组与正常对照组彗尾样细胞出现率相似(8％，9％)。②彗星尾长：正常对照组、中药组DNA荧光图像呈圆形；过氧化氢对照组软骨细胞出现慧星状DNA荧光图像；中药加过氧化氢组软骨细胞也出现“拖尾”现象，但较过氧化氢对照组短(20．2950&;#177;12．8414，39．3983&;#177;12．5368．P&;lt;0．05)。结论：过氧化氢组彗星样细胞出现率，彗星尾长都显著高于正常对照组，说明过氧化氢对软骨细胞DNA具有损伤作用。加入骨关节炎Ⅰ号方进行干预后，彗星样软骨细胞百分率、彗星尾长都明显下降，说明骨关节炎Ⅰ号方具有预防过氧化氢对软骨细胞DNA的损伤作用。     

补阳还五汤对中风后遗症“气虚血瘀”大鼠脑组织三磷酸腺苷及二磷酸腺苷和单胺类神经递质的影响

目的：在中风后遗症“气虚血瘀”大鼠模型的基础上，观察补阳还五汤对其脑组织三磷酸腺苷(ATP)，二磷酸腺苷(ADP)及单胺类神经递质的影响，探讨其对中风后遗症脑损伤的治疗保护作用。方法：复制了中风后遗症“气虚血瘀”大鼠模型，并设空白对照组(正常组)、病理对照组(模型组)和低、中、高剂量组，补阳还五汤用传统方法煎制，大鼠灌胃15d后取脑组织，采用高效液相色谱法测定大鼠模型脑组织中ATP，ADP及去甲肾上腺素(NE)，多巴胺和5—羟色胺的含量。结果：ATP含量模型组(95．7300&;#177;43．8137)μg／L显著低于正常组(439.4700&;#177;103．4430)μg／L(F=26．642，P&;lt;0．001），各给药组显著高于模型组（P&;lt;0．001～0．01)；ADP含量模型组(126．7722&;#177;24．1103)μg／L显著低于正常组(557.1229&;#177;87．5038)μg／L(P&;lt;0．001)，各给药组显著高于模型组（P&;lt;0.001)；NE含量模型组显著低于正常组(P&;lt;0．001)，各给药组显著高于模型组（P&;lt;0．05～0．01)；多巴胺含量模型组显著低于正常组(557．1229&;#177;87．5038)μg／L(P&;lt;0．001)，各给药组显著高于模型组（P&;lt;0．05～0．01)；5—羟色胺含量模型组显著低于正常组(P&;lt;0．001)，中剂量组显著高于模型组(P&;lt;0．05)。结论：中风后遗症“气虚血瘀”大鼠由于能量代谢障碍而出现脑组织ATP，ADP含量降低，并伴有大脑分泌NE，多巴胺和5—羟色胺增加及脑组织NE，多巴胺和5—羟色胺含量减少。补阳还五汤可对抗这种改变，有效改善能量代谢障碍，提高脑组织中单胺类神经递质含量，反应了该方补气活血药理作用的内涵。     

脑卒中后抑郁及抗抑郁治疗对患者神经功能恢复影响的Meta分析

目的：了解脑卒中后抑郁(post-strokede pression，PSD)及抗抑郁治疗对脑卒中患者神经功能恢复的影响，以进一步认识PSD与脑卒中患者神经功能的关系。方法：应用Meta分析对20项研究中PSD及抗抑郁治疗对脑卒中患者神经功能康复影响的对照研究进行再分析，评价其综合显著性差异和效应大小。结果：①脑卒中患者中抑郁组与非抑郁组的CSS评分比较：综合检验Z=8．0628，自由度16，P&;lt;0．001；效应大小：d平均=0．7031。②抑郁组抗抑郁治疗前后抑郁症状的改善情况比较：综合检验Z=51．8899，自由度26，P&;lt;0．001；效应大小：d平均=3．6761。③抑郁组抗抑郁治疗前后神经功能的改善情况比较：Z=30．3631，自由度30，P&;lt;0．001；效应大小：d平均=1．868。④抑郁治疗组与对照组抑郁症状改善程度的组间比较：Z=24．7187，自由度26，P&;lt;0．001：效应大小：d平均=2．3253。⑤抑郁治疗组与对照组神经功能改善程度的组间比较：Z=11．5910，自由度30，P&;lt;0．001；效应大小：d平均=0．80。结论：PSD与脑卒中患者神经功能的缺损程度相关；抗抑郁治疗不仅能改善患者的抑郁症状，而且有利于患者神经功能的康复。     

汉防己甲素对兔眼人工晶状体植入术后房水细胞学的影响

目的：自内障摘除人工晶状体植入术后眼内发生炎症反应，导致人工晶状体前膜的形成影响患者的术后视力。观察汉防己甲素对兔眼晶状体摘除人工晶状体植入术后房水细胞学的变化特征和规律。方法：36只日本大耳白兔按随机数字分为空白对照组、地塞米松组和汉防己甲素组。术后第1，3，7，14天抽取前房水计数房水细胞总数。结果：汉防己甲素组、地塞米松组术后细胞总数(第1天：F=86．11，P&;lt;0．01；第3天：F=153．61，P&;lt;0．01；第7天：F=74．77，P&;lt;0．01：第14天：F=34．5，P&;lt;0．01)、嗜中性粒细胞(第1天：F=126．95，P&;lt;0．01；第3天：F=68．09，P&;lt;0．01；第7天：F=105．81，P&;lt;0．01；第14天：F=0．32，P&;lt;0．05)、巨噬细胞(第1天：F=34．14，P&;lt;0．01；第3天：F=208．52，P&;lt;0．01；第7天：F=206．59，P&;lt;0．01；第14天：F=34．50，P&;lt;0．01)、淋巴细胞计数(第1天：F=67．17，P&;lt;0．01；第3天：F=158．16，P&;lt;0．01；第7天：F=163．88，P&;lt;0．01；第14天：F=426．68，P&;lt;0．01)明显低于对照组；汉防己甲素组与地塞米松组相比差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：汉防己甲素组能够抑制晶状体摘除人工晶状体植入术后的炎症反应，预防人工晶状体植入术后前膜的形成。