珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应及机制研究

目的观察珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应并初探其分子机制。方法体外细胞培养采用人肝癌细胞株SMMC-7721,分为对照(BL)组、珠子参(PJ)组、二甲基亚砜(DMSO)组及5-FU组,采用电镜观察作用后肝癌细胞超微结构改变;流式细胞仪检测肝癌细胞周期和凋亡率;RT-PCR法检测癌基因c-myc、c-fos和抑癌基因p53、p21表达的变化。结果与对照组比较,电镜下珠子参组SMMC-7721细胞染色质浓缩,分解成大小不一有膜包绕团块,内含有新月形DNA物质及细胞器,形成凋亡小体;周期分析可见G0/G1期细胞阻滞,阻止了细胞向S期的转换,并引起细胞凋亡,凋亡率达38.34%;RT-PCR半定量分析珠子参能降低癌基因c-myc表达(P<0.05),增高抑癌基因p53和p21表达(P<0.05)。结论珠子参能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,部分作用机制可能与阻滞细胞停留在G0/G1,降低癌基因c-myc和c-fos表达,增高抑癌基因p53和p21表达有关。     

正丁酸钠诱导人肝癌细胞表型分化的观察

 目的 探讨SB对人肝癌细胞的诱导分化作用。方法 以0-2mmolL的SB作用于培养的人肝癌细胞GHC-3,作用30 天后恢复正常培养,观察癌细胞表型的变化。结果 人肝癌细胞生长抑制;SB作用30 天细胞形态由多角型转变为棱形,ConA凝集现象消失,琼脂集落形成率下降;染色体主流范围变窄,二倍体及亚二倍体比例升高;3H-TdR 掺入率、细胞DNA含量下降与对照比较有显着差异（ P< 0-01） ;并观察到,上述细胞再经不含SB 的正常培液继续培养三代后该细胞表型未发生明显改变。结论 人肝癌细胞在低剂量丁酸钠持续作用下,某些恶性表型可发生部分逆转,且这些改变在恢复正常培养后可保持相对稳定。     

树突状细胞体外诱导分化扩增方法的研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)是一种重要的免疫辅佐细胞,是体内最广泛的专职抗原递呈细胞(profession-alantigen presenting cells),具有强大的激活静息T细胞,激发初次免疫应答的独特功效,在肿瘤免疫治疗中,具有潜在的应用价值.     

顺铂诱导人肝癌细胞凋亡机理研究

顺铂是多种化疗方案的核心药物,在对人卵巢癌细胞和大鼠肝癌细胞的研究中,发现其具有诱导凋亡的作用。本实验从细胞形态、ＤＮＡ裂解片段、细胞周期、ＤＮＡ断裂点末端标记,凋亡相关基因观察顺铂诱导人肝癌细胞凋亡的作用机理。1　材料与方法1.1　细胞培养及药物人肝癌细胞ＳＭＭＣ-7721,引自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库。在含10%小牛血清的ＲＰＭＩ-1640培养基(Ｇｉｂｃｏ产品),37℃,5%ＣＯ2条件下培养。顺氯氨铂(ｃｉｓｐｌａｔｉｎ,ＤＤＰ齐鲁制药厂出品,批号:960601),用含10%正常大鼠血清的ＲＰＭＩ-1640培养液配制,ＤＤＰ终…     

槲皮素诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的研究

目的:观察槲皮素(quercetin)体外对肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制和诱导凋亡作用,并探讨线粒体在诱导凋亡机制中的作用。方法:以10、30、60和100μmol/L槲皮素作用于体外培养的SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;Annexi-V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况;吖啶橙(acridine or-ange,AO)染色法观察细胞凋亡时形态变化;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)变化。结果:槲皮素体外能抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长(P<0.01),诱导细胞发生凋亡,并呈现量效和时效关系。10、30、60和100μmol/L槲皮素作用72h引起的细胞抑制率(F=343.71,P<0.01)和凋亡率(F=234.17,P<0.01)明显高于对照组。槲皮素作用48h后,AO染色图片可见细胞膜呈泡状膨出和凋亡小体等。凋亡过程中线粒体膜电位下降。结论:槲皮素体外能抑制肝癌SMMC-7721细胞生长,诱导细胞凋亡发生,线粒体膜电位下降在细胞凋亡过程中可能起到重要作用。     

人急性早幼粒细胞性白血病细胞诱导分化生成树突状细胞的体外研究

树突状细胞(dendritic cells,DC)在激发机体抗白血病T细胞免疫应答中具有重要作用,有报道DC可以由单核细胞及粒细胞分化生成,本研究应用细胞因子在体外诱导了急性早幼粒细胞性白血病(APL)细胞向DC的分化.从M3型APL患者外周血分离白血病细胞,加入GM-CSF(100ng/ml)或GM-CSF(100ng/ml) rhIL-4(500U/ml)体外培养14天,并于培养结束前3天加人TN-α(100ng/ml).结果表明,GM-CSF可以促进白血病细胞体外增殖,并从幼稚状态逐渐分化成熟,表达高水平的CD45分子,其中部分为CD14~ 的单核细胞,部分为CDla~ 的DC(M3DC);培养后期加入TNF-α,可以促进DC生成,约占35%;以GM-CSF IL-4培养也诱导了幼稚细胞的成熟,2周后DC约占10%,但较少单核细胞生成,培养至3周时DC约占60%;而在培养后第11天加入TNF-α则可以加速DC生成,3天后生成的白血病型DC达90%.电镜观察到M3DC具有与单核细胞来源的DC相似的超微结构,但具有的突出特征是部分细胞存在少量胞浆颗粒;M3DC高表达HLA-DR、B7-2、CD40、CD54分子,体外可以强烈刺激同种T细胞增殖.此类由白血病细胞诱导生成的DC可被用于体内外诱导生成肿瘤特异性CTL,在APL的免疫治疗中具有一定的应用价值.     

树突状细胞诱导的抗肿瘤免疫预防肝癌转移

目的 探讨树突状细胞（ＤＣ）体外诱导的抗肿瘤免疫在肝癌患者体内的抗转移作用。方法 直癌患者外周血ＤＣ及Ｔ淋巴细胞,ＨｅｐＧ２细胞抗原激活ＤＣ,粒／巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素－４联合刺激ＤＣ,ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）,ＤＣ及其诱导的ＣＴＬ回输肝癌患者,检测肝癌患者外周血ＡＦＰ为ｍＲＮＡ。结果 ＡＦＰ ｍＲＮＡ阳性组经ＤＣ及其诱导的ＣＴＫ,治疗２月后,治疗组９例Ａ     

树突状细胞体外诱导肝癌免疫抑制裸鼠人肝癌细胞系Hep …

为研究树突状细胞（ＤＣ）体外诱发抗肿瘤免疫能否预防裸鼠发生及抑制裸鼠移植生长，联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白介素４（ＩＬ－４）直接从肝癌患者外周血中培养出ＤＣ；以源于人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２的肿瘤抗原粗提物刺激ＤＣ，ＤＣ激活同源的Ｔ淋巴细胞；以被激活的Ｔ淋巴细胞预防性接种于裸鼠皮下，观察进一步接种的人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２移植瘤发生；观察被激活的Ｔ淋巴细胞抑制已接种于裸鼠的人肝癌     

菱角提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡

[目的]探讨菱角提取物对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。[方法]采用MTT法检测菱角提取物对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;丫啶橙染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。[结果]菱角提取物能抑制SMMC-7721细胞的增殖,且呈明显的剂量依赖性。荧光显微镜下细胞呈典型的凋亡形态学改变。[结论]菱角提取物可抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡。     

中国鲎鲎素诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化的观察

背景与目的：海洋生物活生物质抗肿瘤活性研究是海洋生物活性物质开发与抗癌药物研究的一个重要领域。诱导肿瘤细胞分化则是肿瘤药物治疗的新策略。本文拟研究海洋生物活性物质鲎素对人肝癌SMMC-7721细胞分化的影响,以为鲎素抗肿瘤作用及其机理的深入研究提供实验依据。方法：从中国鲎血细胞酸抽提液提取鲎素,应用光镜和透射电镜观察3.0μg/ml鲎素处理前后人肝癌SMMC-7721细胞形态和超微结构的变化,应用细胞化学或免疫细胞化学方法观察鲎素处理前后细胞碱性磷酸酶活性与甲胎蛋白和增殖细胞核抗原表达的变化。结果：经3.0μg/ml鲎素处理的SMMC-7721细胞形态和超微结构发生恢复性变化,碱性磷酸酶活性减弱,甲胎蛋白和增殖细胞抗原表达降低。结论：鲎素能有效改变肝癌细胞恶性形态和超微结构特征,改变肝癌细胞相关酶活性和抗原表达,对肝癌细胞具有一定的诱导分化作用。     

生物化学治疗及细胞诱导分化的临床应用

生物化学治疗及细胞诱导分化的临床应用储大同教授李峻岭，赵龙妹，王金万中国医学科学院，协和医科大学肿瘤医院（１０００２１）随着生物技术不断向一定广度和纵深发展，肿瘤生物治疗的探索也出现多样化的趋势。体细胞如ＬＡＫ、ＴＡＫ、ＴＩＬ细胞等的免疫治疗；干细胞...     

二甲基亚砜(DMSO)对人肝癌HepG2 细胞的诱导分化作用的实验研究

目的:探讨二甲基亚砜(DMSO)对人肝癌HepG2细胞的诱导分化作用。方法:体外培养人肝癌HepG2细胞,用DMSO干预细胞,MTT法检测药物对细胞增殖活力的影响;倒置相差显微镜和瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;放射免疫法检测细胞甲胎蛋白（AFP）和清蛋白(ALB)的分泌量;酶促反应试剂盒检测细胞中γ-谷胺酰转肽酶（γ-GT）、碱性磷酸酶（ALP）的活性。结果:用DMSO处理HepG2细胞72h后,能显著抑制细胞的增殖（P＜0.05）;细胞的形态向成熟细胞分化;细胞AFP的分泌量和γ-GT酶的活性明显降低,ALP活性和ALB含量则显著升高（P＜0.05）。结论:DMSO具有诱导人肝癌HepG2向正常细胞分化的作用并抑制细胞增殖。     

树突状细胞体外诱导抗肿瘤免疫通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制裸鼠 …

研究突状细胞体外诱导的细胞免疫制裸鼠移植瘤生长作用及其机理。方法联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子及白介素－４直接从肝癌患者外周血中培养出ＤＣ,以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的肿瘤抗原粗提物刺激ＤＣ,ＤＣ激活同源的Ｔ淋巴细胞,     

肉桂酸对人肺腺癌细胞诱导分化的实验研究

目的：研究肉桂酸对人肺腺癌细胞的诱导分化作用。方法：在细胞培养中,用不同浓度的肉桂酸处理人肺腺癌Ａ５４９细胞,进行细胞群体增殖动力学检测,流式细胞计量术（ＦＣＭ）测定来观察诱导分化作用效果。结果：肉桂酸能明显抑制Ａ５４９细胞增殖和促进细胞分化（Ｐ〈０．０５）;细胞在软琼脂中的集落形成率明显下降（Ｐ〈０．０５）;ＦＣＭ显示细胞周期移行被阻滞于Ｇ１／Ｇ０期。结论：肉桂酸具有使人肺腺癌细胞逆转的作用,是     

流式细胞术分析苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡

目的 为探讨苦参碱抑制HepG2增殖的机制。方法 以不同浓度苦参碱作用于HepG2细胞不同时间用PI及AnnexinV-FTTC-PI双标记两法检测凋亡细胞,结果 0.8,1.5,2.0g/L苦参碱处理细胞72h,细胞均出现了凋亡峰,凋亡细胞分别为10.57,16.37,10.85%细胞早期凋亡检测;2.0,1.5,3.0g/L苦参碱分别作6h、12h、12h,凋亡细胞分别达7.7,8.6,15.7%;当3.0g/L苦参碱作用12h,坯 煞费苦心细胞达21.9%。结论 一定浓度苦参碱可诱导HepG2细胞凋亡,凋亡与坏死相伴存在并呈剂量和时间依赖性。     

树突状细胞诱导抗裸鼠人肝癌移植瘤免疫

[目的]讨究树突状细胞（DC）体外诱导的抗肝癌细胞免疫能否预防裸鼠人肝癌移植癌发生及抑制课鼠人肝癌移植瘤生长。[方法]联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子（GM－CSF）及白介素－4（IL－4）直接从肝癌患者外周血中培养DC：以人肝癌细胞系HepG2肿瘤细胞的肿瘤抗原粗提物刺激DC；DC激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞（CYL）；以DC激活的CIL预防性接种于探鼠皮下观察其后接种的人肝癌细胞系HepG2移植瘤发生率；并观察该CTL对已接种裸鼠的人肝癌细胞系HepG2移植瘤生长的影响。[结果]DC诱导的工体外对HepG2肿瘤细胞具有高效而特异杀伤作用，在裸鼠体内不能预防探鼠人肝癌细胞系HepG2移植瘤发生，而且能抑制该移植瘤生长。[结论]经肝癌肿瘤相关抗原激活的肝癌患者外用血DC体外诱导的抗肿瘤细胞免疫在体内外均具有良好的抗肿瘤作用。提示DC作为一新概念上的抗肿瘤疫苗有可能在人肝癌的预防及治疗中发挥重要作用。     

人粘液表皮样癌MEC-1细胞诱导分化实验研究

恶性肿瘤是一种分化异常疾病，其细胞属于未分化成熟的细胞，具有再分化潜能。许多恶性肿瘤细胞在一些分化诱导剂的作用下，可以向良性或正常细胞分化，粘液表皮样癌是比较多见的恶性唾液腺肿瘤，发病率居恶性唾液腺肿瘤首位，其对传统化疗不敏感，放射治疗效果不稳定，低分化型者手术局部复发病率高，     

阿霉素诱导人肝癌细胞凋亡模型的建立

目的建立肝癌细胞凋亡模型,为进一步研究细胞凋亡分子机理打下基础。方法用抗癌药阿霉素诱导培养的人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞发生凋亡,用四唑盐比色试验（ＭＴＴ法）检测。结果研究发现,０．５μｇ／ｍｌ放线菌素Ｄ可明显抑制２０μｍｏｌ／Ｌ阿霉素对肝癌细胞凋亡的诱导作用。用２０μｍｏｌ／Ｌ阿霉素作用肝癌细胞３小时,换培养液继续培养１２小时后,肝癌细胞ＤＮＡ结构断裂,电泳呈梯状带型。肝癌细胞形态学改变出现膜小泡和凋亡小体形成等凋亡细胞特征。用流式细胞仪测定,出现典型的凋亡峰,凋亡细胞占７２．１％。用２０μｍｏｌ／Ｌ阿霉素诱导肝癌细胞凋亡后,细胞周期Ｇ１期、Ｓ期和Ｇ２期分别为７５．９％,２４．１％和０％,肝癌细胞活细胞率为３５．５％。结论用抗癌药阿霉素成功地诱导人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞发生凋亡,该细胞凋亡模型的建立,将有助于进一步探讨肝癌细胞凋亡的分子机制。     

肝癌患者的细胞遗传学研究

对30例诊断为原发性肝癌(简称肝癌,下同)患者的细胞遗传学研究结果提示,染色体数。目畸变主要表现为四倍体和核内复制增多,分别为1.30％和3.07％;染色体结构畸变的各种类型均出现,畸变率为2.60％,其中尤以染色单体断裂和三射体、四射体的检出最为显著;G带核型分析未见异常;SCE(姐妹染色单体互换)率为10.12±2.44/细胞、0.22±0.05/染色体;MN(微核)率为2.80‰。以上各项异常检出率均高于对照组(P<0.01),有非常显著意义。