四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴作用的实验研究

目的研究调和肝脾之四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法实验设正常组、模型1组、模型2组、四逆散组。除正常组外其余各组用电刺激法制备慢性应激动物模型,并给予相应的处理。观察大鼠行为学指标的变化,测定血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量,同时检测大鼠下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA含量变化。结果四逆散能改善大鼠行为表现,降低大鼠血浆ACTH、下丘脑CRH、血浆CORT的含量及下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA的过度表达。结论四逆散可有效调整慢性应激大鼠HPA轴的异常。     

半夏厚朴汤对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的：观察半夏厚朴汤对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA）的影响。方法：复制慢性应激和孤养大鼠抑郁模型,采用放免法检测各组大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）和血清皮质醇（CORT）。结果：半夏厚朴汤能够降低下丘脑CRH、血浆ACTH及血清CORT的表达。结论：半夏厚朴汤具有抗抑郁作用,其机理与抑制HPA轴功能亢进有关。     

健脾益气中药对慢性应激大鼠HPA轴作用的实验研究

目的：观察健脾益气之中药复方四君子汤对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法：设正常组、模型1组、模型2组、四君子汤组,除正常组外其余各组大鼠用电刺激法制备慢性应激动物模型,观察行为学指标的变化．测定血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）含量,同时检测大鼠下丘脑CRHmRNA和垂体ACTHmRNA含量变化。结果：四君子汤能改善大鼠行为表现,降低大鼠血浆ACTH、下丘脑CRH、血浆CORT的含量．控制下丘脑CRHmRNA和垂体ACTHmRNA的过量表达。结论：健脾益气中药复方可有效调整慢性应激大鼠HPA轴的异常。     

五脏俞穴位埋线对衰老模型大鼠应激性下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的调节作用

目的:通过观察五脏俞穴位埋线对衰老模型大鼠应激下血清皮质醇(CORT)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量变化,探讨五脏俞穴位埋线对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的调节作用。方法:将60只SPF级雄性SD老龄大鼠随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)、模型+埋线组(C组)、模型+应激组(D组)、模型+应激+埋线组(E组)。应激从第5周开始,每天1次给予制动应激,持续4周。五脏俞穴位埋线从第1周开始,每周1次,共8次。运用放射免疫法分别检测5组大鼠ACTH、CRH、CORT的含量。结果:与A组比较,B、C、D、E组3项检测指标水平均升高(P0.05);与B组比较,C组CRH、CORT含量降低(P0.05),ACTH含量升高,但差异无统计学意义(P0.05),D组3项检测指标水平均升高(P0.05),E组3项检测指标水平均降低(P0.05);与C组比较,D组ACTH、CRH、CORT含量及E组CRH含量升高(P0.05),E组ACTH含量降低(P0.05),CORT含量也升高,但差异无统计学意义(P0.05);与D组比较,E组ACTH、CORT、CRH含量均降低(P0.05)。结论:衰老模型大鼠存在HPA轴功能障碍,慢性应激可加重HPA轴的功能紊乱,五脏俞穴位埋线可改善慢性应激和衰老导致的HPA轴功能障碍状态,降低应激损伤,延缓机体衰老。     

肝郁证与血浆内皮素(ET)、血清一氧化氮(NO)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)的相关性实验研究

目的:探讨肝郁证模型与血浆内皮素(ET)、血清一氧化氮(NO)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)的相关性.方法:采用"颈部带枷单笼喂养法"复制大鼠肝郁证模型.用放射免疫法检测模型2周组、4周组血浆BT含量、用比色法检测血清NO含量以及ALT活性.结果:实验显示应激大鼠呈现急性应激躁狂,2周和4周应激大鼠呈现慢性应激肝郁证时的抑郁状态;肝郁证模型大鼠血浆BT升高,血清NO含量降低(P＜0.01),而且肝脏组织有明显损伤,血清ALT活性增加(P＜0.01).结论:肝郁证状态时机体会出现血管舒缩功能的紊乱,并且出现肝脏细胞的损伤.     

右归丸对衰老大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能变化的影响

目的:观察自然衰老大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能变化,并通过右归丸干预,探索补肾方延缓衰老的机理。方法:以自然衰老SD雄性大鼠(24月龄)为肾虚衰老模型,大鼠随机分为老年对照组和右归丸组,每组35只,另设青年对照组(5月龄)35只,共3组。老年对照组大鼠常规喂养至24月龄。右归丸组大鼠自20月龄始,按相当于右归丸生药量7.5g/kg自由饮用稀释药液,每周停药2天,连续4个月;采用放射性配体结合分析法观察大鼠血中促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)含量;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)技术观察大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA及其多肽表达。结果:与青年组比较,老年组大鼠下丘脑CRHmRNA和CRH表达、血浆ACTH及血清CORT含量升高;与老年组比较,右归丸组大鼠下丘脑CRHmRNA和CRH表达、血浆ACTH及血清CORT含量显著下降(P0.05)。结论:自然衰老大鼠神经内分泌调控紊乱,HPA轴功能亢进;右归丸可调节HPA轴,使亢进的HPA轴功能得以改善,减轻对机体的危害而延缓衰老。     

逍遥丸对血虚肝郁证大鼠外周血象及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的研究含白芍中成药逍遥丸对血虚肝郁证大鼠外周血象和下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响。方法以辐照结合慢性束缚应激的方法制备大鼠血虚肝郁模型。健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、白芍组、逍遥丸组,对照组常规饲养,其余各组单笼饲养。造模第1天开始ig给药,共给药21 d。检测大鼠体质量、外周血象、糖水消耗量,并于给药结束后测定血浆中促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、下丘脑促肾上腺皮质激素释放素(CRH)的量。结果与对照组相比,模型组大鼠体质量、外周血象白细胞(WBC)量明显降低(P0.001),ACTH、CORT、CRH量均明显升高(P0.01、0.001),糖水消耗实验表明模型组大鼠快感缺失(P0.001),逍遥丸对上述各项指标具有相应的调节作用(P0.01、0.001)。结论逍遥丸对外周血象及HPA轴的调整作用可能是其发挥疏肝解郁、养血健脾功效的机制之一。     

淫羊藿女贞子配伍调节哮喘大鼠NO/ET及HPA轴作用的研究

目的:观察淫羊藿女贞子配伍对哮喘大鼠模型NO/ET及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的调节作用。方法:采用卵蛋白(OVA)致敏、激发复制大鼠慢性哮喘模型,以阿斯美胶囊为对照药,检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中内皮素(ET),NO,诱生型一氧化氮合酶(iNOS),原生型一氧化氮合酶(cNOS)的含量,血清皮质酮(CORT)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)及下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平,肺组织糖皮质激素受体(GCR)蛋白表达。结果:淫羊藿女贞子能抑制BALF中ET,NO浓度的升高(P0.05);能明显下调血及BALF iNOS水平(P0.01或P0.05),升高血及BAFL中cNOS水平(P0.01或P0.05);明显升高血清CORT含量(P0.01);上调肺组织GCR的蛋白表达(P0.05)。结论:淫羊藿女贞子防治哮喘的作用与其对ET,NO(NOS),HPA轴调节作用有关。     

子午流注针法对心理应激大鼠HPA轴中枢调控的影响

目的观察子午流注针法对心理应激大鼠HPA轴中枢调控中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、血清皮质醇(CORT)及免疫因子白细胞介素1 (IL-1)的影响,探讨子午流注针法治疗心理应激的机制。方法 52只Wistar大鼠随机分为子午流注开穴组、针刺对照组、造模组、正常组,每组13只。采用旁观电击实验建立心理应激模型。子午流注开穴组以养子时刻开穴法定时开穴治疗,针刺对照组针刺取百会穴。放射免疫法分别检测血清CORT和ACTH含量、下丘脑中CRH含量、垂体中ACTH含量、肾上腺中CORT含量,免疫组化法、RT-PCR法分别检测下丘脑、垂体中IL-1及其mRNA表达水平。结果与正常组比较,造模组大鼠血清CORT和ACTH水平、下丘脑中CRH含量、垂体中ACTH含量、肾上腺中CORT含量显著升高(P0.01),下丘脑、垂体中IL-1及其mRNA表达水平显著升高(P0.01);与造模组比较,子午流注开穴组大鼠血清CORT和ACTH水平、下丘脑中CRH含量、垂体中ACTH含量、肾上腺中CORT含量显著降低(P0.01),下丘脑、垂体中IL-1及其mRNA表达水平显著降低(P0.01);与针刺对照组比较,子午流注开穴组大鼠血清CORT和ACTH水平、下丘脑中CRH含量、垂体中ACTH含量、肾上腺中CORT含量明显降低(P0.05),下丘脑、垂体中IL-1及其mRNA表达水平明显降低(P0.05)。结论子午流注开穴针法可以调控心理应激大鼠CRH、ACTH、CORT的异常分泌,促进处于异常状态的HPA轴向正常状态恢复,其作用机制可能与下调IL-1 mRNA,减少诱发ACTH的分泌,传递信号参与大脑中枢调控有关,从而改善机体出现应激状态。     

柴胡疏肝散对慢性应激抑郁模型大鼠海马调节HPA轴功能的影响

目的:研究柴胡疏肝散对慢性应激模型大鼠海马调节HPA轴功能的影响。方法:采用慢性不可预见性刺激制造慢性应激大鼠模型,分别用Western bolt法和Elisa法检测各组大鼠海马MR和GR及下丘脑CRH蛋白的表达,检测血浆ACTH和血清CORT含量。结果:治疗组大鼠海马GR蛋白表达明显增高,下丘脑CRH蛋白表达及血浆ACTH和血清CORT的含量明显降低。结论:柴胡疏肝散能够抑制慢性应激所致的大鼠HPA轴功能的亢进,其机制可能与调节大鼠海马GR蛋白表达、进而发挥对HPA轴功能的抑制作用有关。     

高血压病不同中医肝证患者氧化应激功能变化情况的临床观察

目的:研究不同的中医肝证者机体氧化应激情况的变化。方法:选取2013年4月至2015年4月,随机选取纳入商洛市公共卫生服务高血压管理项目的高血压患者100例,对所有患者实施检测,其中肝气郁结组52例,肝气上亢组48例。再选择50例正常体检者作为对照组。对各组SOD、CAT、GSH-PX以及MDA水平和各组ET、NO以及ET/NO水平实施检测。结果:高血压患者的收缩压和舒张压均显著大于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。高血压患者中肝气郁结以及肝气上亢患者的SOD、CAT和GSH-PX水平均显著低于对照组;MDA水平均显著大于对照组。高血压患者中肝气郁结和肝气上亢患者的NO以及ET/NO水平均显著低于对照组;ET水平均显著大于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论:高血压肝证者机体氧化应激作用下降,且不同肝证者具有的炎性反应情况不同。     

益气、行气活血法在冠心病心血瘀阻证中的作用机理探讨

目的：初步探讨行气活血法和益气活血法在冠心病心血瘀阻证的作用机理。方法：从冠心病患者中随机选择气滞心血瘀阻证30例和气虚心血瘀阻证30例，并随机分配到行气活血法组和益气活血法组中治疗，检测治疗前后的一氧化氮（NO）、内皮素（ET）、血栓素B2（TXB2）、6－酮－前列腺素（6－Keto-PGF1α）的变化。结果：气虚心血瘀阻证患者的血管内皮细胞的损伤程度比气滞心血瘀阻证患者严重，ET与NO间的平衡遭到更严重的破坏，平衡明显倾向于ET；气虚心血瘀阻证患者TXB2、6－Keto-PGE1α间的平衡；2种治法对证治疗时，效果最佳。结论：辨证论治能发挥治疗的最大效应。益气活血法、行气活血法治疗冠心病血瘀阻证的作用机理可能与其修复受损的内皮细胞，调节NO与ET、TXB2与6－Keto-PGF1α间的平衡有关。     

电针抗大鼠急性胃黏膜损伤机理的实验研究

目的　探讨电针对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法　用无水乙醇灌胃建立大鼠急性胃黏膜损伤模型 ,观察指标包括胃黏膜血流量 (GMBF)、血清一氧化氮 (NO)、血浆内皮素 (ET)、胃黏膜损伤指数 (L I)含量的变化及其 NO与 ET含量变化的关系。结果　大鼠无水乙醇灌胃后 ,GMBF减少 ,NO含量降低 (P<0 .0 1) ,血浆 ET含量和 L I增高 (P<0 .0 1) ;各电针组 GMBF、血清 NO含量均升高 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ,血浆 ET含量和 L I均有所下降 (P<0 .0 5或P<0 .0 1) ;电针不同穴位对上述改变的影响效果不同 ,其中尤以“足三里” “中脘” “内关”组疗效最显著。结论　电针具有抗大鼠胃黏膜损伤的作用 ,其作用机制可能是通过调节血中 NO/ ET含量 ,改善胃黏膜血流 ,从而起到抗胃黏膜损伤的作用。     

行气活血法治疗2型糖尿病气滞血瘀证的临床研究

目的:观察行气活血法对2型糖尿病气滞血瘀证患者血小板活化因子及血浆内皮素、一氧化氮的影响.方法:104例患者,随机分为治疗组53例,对照组51例;治疗组服用加味桃红四物汤,对照组服用桃红四物汤;观察两组临床疗效、血黏度、CD62p、CD63、PAC-1和ET、NO的变化.结果:两组治疗前后组内比较,血黏度、CD62p、CD63、PAC-1和ET、NO的差异,治疗组有非常显著性意义(P＜0.01),对照组有显著性意义(P＜0.05);组间比较,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:行气活血法能降低2型糖尿病患者的血黏度,抑制血小板活化,调节内皮素和一氧化氮的分泌失衡,作用较活血化瘀法显著.     

冠脉灵方对气滞血瘀型不稳定型心绞痛患者内皮功能的影响

目的:探讨冠脉灵方对气滞血瘀型不稳定型心绞痛患者的临床疗效及对血管内皮功能的影响。方法:60例不稳定型心绞痛患者,按随机数字分为对照组(常规西药治疗)和治疗组(常规西药治疗基础上加用冠脉灵方),治疗周期为4周。主要观察两组治疗前后心绞痛发作、中医证候的变化以及内皮功能指标一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列环素(6-keto-PGF1)水平的变化。结果:对照组与治疗组心绞痛缓解总有效率分别为70.00%和93.33%,中医症状疗效总有效率分别为70.00%和96.66%,治疗组与对照组比较有显著性差异(P<0.05);治疗后,两组患者血浆ET-1、TXB2均降低,6-keto-PGF1和NO均升高(P<0.05),且治疗组与对照组血浆ET-1、NO、TXB2和6-keto-PGF1水平有显著性差异(P<0.05)。结论:冠脉灵方能改善气滞血瘀型不稳定型心绞痛的临床症状和血管内皮功能,是安全,有效的辅助治疗药物。     

Effect of Yinian Jiangya Yin on Primary Hypertension in Early Stage—A Clinical Observations on 40 Patients

Objective: To observe the effect of Yinian Jiangya Yin (Decoction for lowering blood pressure to prolong life) on patients with early hypertension and its mechanism on the function of vascular endotheliocytes. Methods: The 79 patients with early primary hypertension belonging to the TCM syndrome of stagnation of phlegm and blood stasis in meridians and hyperactivity of the liver-yang were randomly divided into a treatment group of 40 patients treated with Yinian Jiangya Yin and a control group of 39 patients treated with Tianma Gouteng Yin (Decoction of Gastrodia and Uncaria). The changes in score of TCM syndrome and in blood pressure before and after treatment were observed in the two groups. The contents of nitrogen monoxide (NO) and endothelin (ET) in serum after treatment were determined. Results: There was a statistical difference (P0.05) in score of TCM syndrome, effect of lowering blood pressure, and the contents of ET and NO in serum after treatment between the two groups. Conclusion: The effect of Yinian Jiangya Yin on improving TCM syndrome of patients with primary hypertension in early stage and on lowering blood pressure may be related to its regulating the imbalanced condition between ET and NO for restoring the function of endothelium-dependent vasodilation.     

“肝郁证”大鼠模型的建立及代谢组学的初步研究

目的:建立并验证肝郁证大鼠模型,在此基础上运用代谢组学的方法研究肝郁证代谢组学特征及生物标志物,探讨代谢组学用于证候研究的可行性。方法:12只Wistar大鼠随机分为模型组与对照组(每组6只)。模型组采用慢性束缚的方法造成肝郁证大鼠模型,通过行为学观察、糖水偏好实验、血浆皮质酮、胃黏膜、肾上腺病理观察评价模型。运用1HNMR技术对两组大鼠血清进行代谢组学分析。结果:模型组大鼠行为异常,主要表现为躲避、活动减少、大便松散、皮色失去光泽,造模第2周开始生长较对照组缓慢(P<0.05);糖水偏好实验显示造模过程中模型组对糖水的偏好摄入少于对照组(P<0.05);造模结束后模型组大鼠血浆皮质酮水平高于对照组(P<0.01);造模后模型组胃黏膜、肾上腺未见明显病理改变,但模型组肾上腺体重指数高于对照组(P<0.05)。代谢组学分析表明,与对照组相比,模型组血浆中葡萄糖(Glucose)和肌酸(Creatine)的含量明显偏高,而3-羟基丁酸(3-HB)、谷氨酰胺(Gln)、磷脂酰胆碱(PtdCho)、磷酸胆碱(PCho)和不饱和脂肪酸(UFA)的含量明显偏低。结论:从病因学、行为学和病理表现上慢性束缚的方法成功构建了肝...     

内皮素、一氧化氮等内皮细胞活性因子与动脉硬化闭塞症血瘀证关系的研究

目的：观察动脉硬化闭塞症（ＡＳＯ）血瘀证患者血浆内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）、细胞粘附分子等内皮细胞活性因子水平及其变化规律，借以从血管内皮细胞角度，从蛋白、分子水平探讨ＡＳＯ血瘀证的实质。方法：选择９８例本病患者，按轻、中、重三组和气滞血瘀、气虚血瘀和湿热血瘀三种证型；利用密度梯度法检测外周循环血内皮细胞计数（ＣＥＣ），利用放射免疫测定法和亚硝酸盐比色法检测ＥＴ、ＮＯ等血浆活性因子，利用酶联免疫法测定血浆细胞间粘附分子，同时检测血液流变学指标。结果：本病患者均存在高ＣＥＣ、高ＥＴ和低ＮＯ血症，存在血粘度增加等血液流变学变化。结论：血管内皮细胞损伤及由此引起的血液流变学变化是ＡＳＯ血瘀证的发生机制之一；检测ＥＴ、ＮＯ等血浆活性因子有助于判断病情轻重，协助辨证分型，有助于探讨ＡＳＯ血瘀证的本质