绝经后妇女护骨素基因G1181C多态性与骨密度变化相关

目的　寻找护骨素基因(OPG)外显子中的单核苷酸多态性 (SNP),并分析其与绝经后妇女骨密度的关系。方法　在 205名绝经后妇女中,采用PCR和直接测序法确定OPG基因的SNP及基因型。应用双能X线骨密度仪测定腰椎和股骨颈骨密度 (BMD)。同时检测血清骨钙素 (BGP)、尿Ⅰ型胶原交联N端肽(NTx),以及血清护骨素(OPG)和核因子κB受体活化子配体 (RANKL)。结果　在OPG基因第一外显子中发现一个G1181C的SNP,该SNP的基因型频率分布依次为GG型占 0. 566、GC型 0. 346、CC型0. 088。去除年龄和体重的影响后,CC型的腰椎BMD明显高于GC和GG型 (P<0. 05),多元回归分析提示OPG基因型与绝经后妇女腰椎、股骨颈BMD相关 (P<0. 01)。Logistic回归分析显示OPG基因是绝经后妇女发生骨量减少和骨质疏松的独立危险因子,GG型发生骨量减少和骨质疏松的危险是CC型的 2. 83倍(P<0. 05)。结论　OPG基因的G1181C多态性与绝经后妇女BMD存在一定的关联,CC型对绝经后妇女腰椎BMD具有保护作用。     

体脂比率与OPG基因启动子G209-A和T245-G多态性联合作用与骨质疏松症发生的关系

目的探讨护骨素(OPG)基因启动子区G209-A和T245-G多态性及其脂肪保护作用、联合作用对绝经后正常妇女和绝经后骨质疏松症妇女骨密度(BMD)的影响。方法随机抽取25个样本经SSCP-PCR法寻找异常迁移条带,再采用测序方法确定扩增区域中的单核苷酸点突变位点,最后采用PCR-限制性片段长度法(RFLP)对所有样本进行分析;双能X线吸收法测定BMD。结果73例绝经后骨质疏松症妇女和61例绝经后正常妇女OPG启动子扩增区中找到两个单核苷酸点突变多态性位点,G209-A和T245-G。分析显示这两个多态性位点基因型频率在两组实验对象中的分布均符合Hardy-Weinberg定律。G209-A和T245-G多态性位点单一基因型和复合基因型的分布在两组实验对象之间没有显著性差异(P>0.05)。对各单一基因型及其复合基因型的BMD分析显示:绝经后骨质疏松症妇女的腰椎和髋部BMD明显低于绝经后正常妇女,同时,绝经后骨质疏松症妇女的全身体脂比率也明显低于正常妇女。结论G209-A和T245-G多态性对绝经后骨质疏松症和绝经后正常妇女的骨量影响没有协同作用;单一的和复合的G209-A、T245-G多态性各基因型不能作为预测中国汉族妇女是否发生骨质疏松症的遗传标志,但可能是骨质疏松症发生的易感基因,并且合理的含脂饮食有利于骨保护。     

低体重与护骨素基因启动子T149-C和A163-G多态性与骨质疏松的关系

目的 探讨护骨素(OPG)基因启动子区T149-C和A163-G多态性及低体重联合作用对绝经后健康女性和绝经后骨质疏患者骨密度(BMD)的影响.方法 以134例广州地区居住10年以上无亲缘关系的绝经汉族女性为研究对象.骨质疏松症73例,绝经后健康女性61例作对照组.随机抽取25个样本经SSCP-PCR法寻找异常迁移条带,再采用测序方法确定扩增区域中的单核苷酸突变位点,最后采用PCR限制性片段长度法(RFLP)对所有样本进行分析;双能X线吸收法测定BMD.结果 在73例绝经后骨质疏松症女性和61例绝经后健康女性OPG启动子扩增区中,找到两个单核苷酸点突变多态性位点,T149-C和A163-G.分析显示这两个多态性位点基因型频率在两组中的分布均符合Hardy-Weinberg定律.T149-C和A163-G多态性单一基因型和复合基因型的频率分布在两组实验对象间差异无统计学意义(P＞0.05).对单一基因型及其复合基因型的BMD分析显示绝经后骨质疏松症女性的腰椎和髋部BMD明显低于绝经后健康女性.绝经后骨质疏松症患者的体质指数(BMI)也明显低于绝经后健康女性[分别为(22.5±3.0)kg/m2和(24.4±3.6)kg/m2,P＜0.01].结论 T149-C和A163-G多态性对绝经后骨质疏松患者和绝经后健康女性的骨量影响没有协同作用;单一的和复合的T149-C和A163-G多态性各基因型不能作为预测中国汉族女性发生骨质疏松的遗传标志,但可能是骨质疏松发生的易感基因.     

护骨素基因多态性与老年男性骨质疏松症的关系

目的探讨护骨素（OPG）基因启动子区T950C单核苷酸多态性与老年男性骨质疏松症发生的关系。方法选择98例老年男性骨质疏松症患者和101例正常老年男性,利用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析技术检测OPG T950C多态位点的基因型,分析比较两组之间OPG T950C位点基因型频率的差异。结果OPGT950C基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡,OPG T950C位点CC基因型频率在老年男性骨质疏松症患者和正常老年男性之间具有统计学差异（P〈0.01）。结论OPG基因启动子区T950C位点多态性与老年男性骨质疏松症的发生有关,OPG C950C基因型可能是老年男性发生骨质疏松的遗传易感性指标。     

北京地区汉族妇女维生素D受体基因和降钙素受体基因多态性与骨密度的关系

目的　探讨维生素D受体基因起始密码子 (VDRSC)和降钙素受体 (CTR)基因多态性与 30～ 39岁健康妇女峰值骨量和绝经后妇女骨密度 (BMD)及骨折的关系。方法　应用PCR RFLP方法测定 89名 30～ 39岁健康妇女和 12 7名绝经后妇女VDRSC及CTR基因型 ;用双能X线吸收法测定BMD。结果　本研究人群VDRSC和CTR基因型频率分布均符合Hardy Weinberg定律。 6 6例骨质疏松伴 (或 )骨折组与 6 1名正常绝经后妇女组VDRSC和CTR基因型频率分布差异无显著性 ;VDRSC多态性与 30～ 39岁妇女峰值骨量和绝经后妇女BMD值均无关联 ;30～ 39岁妇女组CTRTC基因型在L2 4和大转子区BMD值高于CC基因型的对应部位 (P <0 .0 5 ) ,CTR基因型与绝经后妇女BMD值无关联 ;协同分析VDRSC和CTR基因型与BMD的关系显示 ,30～ 39岁妇女组TCFF基因型在L2 4和大转子区有较高的峰值骨量 (P <0 .0 5 ) ,但是VDRSC多态性与CTR基因型对妇女峰值骨量的影响无协同作用。结论　VDRSC多态性对 30～ 39岁妇女峰值骨量及绝经后妇女BMD无潜在影响 ;CTR基因型与 30～ 39岁妇女峰值骨量的达到和维持有关 ,而且独立于VDRSC基因型 ;VDRSC和CTR基因型不能作为预测中国汉族妇女发生骨质疏松危险性的遗传学标志。     

广西壮、汉族绝经后妇女维生素D 受体基因型与骨密度、骨代谢的关系

目的探讨维生素D受体基因(VDR)型在壮、汉族绝经后妇女中的分布及其与骨密度、骨代谢的关系.方法在广西居住20年以上的绝经后汉族妇女116名,壮族妇女82名.记录年龄、绝经年龄,测量身高、体重.采用双能X线吸收法测定骨密度(BMD);用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR -RFLP)法测定受试者的VDR基因型;测定血清骨钙素(osteocalcin,OC)、尿脱氧吡啶啉(deoxypyridinoline,DPD)和尿肌酐(creatinine,Cr).结果壮、汉族妇女年龄、绝经年限、体重、体重指数、BMD、VDR基因型频率分布无显著性差异(P>0.05);BB、Bb、bb基因型检出率分别为6.57%、66.16%和27.27%;BB基因型组第2腰椎(L2)BMD比bb基因型组低10.03%,第4腰椎(L4)BMD分别较bb、Bb基因型组低9.63%和12.44%(P<0.05);BB基因型组骨质疏松发生率最高(46.15%),Bb基因型组次之(19.85%),bb基因型组最低(14.81%)(P<0.05);BB基因型组OC最低,与Bb、bb 基因型组比较也有显著性差异(P<0.05);三组间尿DPD排泄率(DPD/Cr)差异无统计学意义.结论 VDR基因型可作为预测广西壮、汉族绝经后妇女骨质疏松危险性的遗传学标志.     

北京地区汉族妇女PPARγ基因C161→T多态性与骨密度关系的研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖体激动受体γ（PPARγ）基因第6外显子C161→T的单核苷酸多态性（SNP）与青年妇女骨峰值及绝经后低骨量妇女骨密度的关系。方法筛选2004年1月至2005年1月北京安贞医院和北京协和医院收集的219例健康青年妇女和102例绝经后低骨量妇女，用双能X线吸收测定法检测研究对象腰椎和髋部的骨密度，用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）分析法检测研究对象的PPARγ基因第6外显子C161→T的基因型。结果研究人群中PPARγ基因第6外显子C161→T的基因型及基因频率的分布符合Hardy—Weinberg定律；校正年龄、体重、身高和体重指数对骨密度的影响后，219名青年妇女和102名绝经后妇女中PPARγ各基因型组间在L2-4、股骨近端部位的BMD值差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论PPARγ基因C161→T的SNP可能不是汉族妇女骨质疏松症遗传影响因素，其基因型的检测可能对筛查汉族妇女骨质疏松症高危人群的意义不大。     

北京地区汉族妇女PPARγ基因C161→T多态性与骨密度关系的研究

目的探讨过氧化物酶体增殖体激动受体γ(PPARγ)基因第6外显子C161→T的单核苷酸多态性(SNP)与青年妇女骨峰值及绝经后低骨量妇女骨密度的关系。方法筛选2004年1月至2005年1月北京安贞医院和北京协和医院收集的219例健康青年妇女和102例绝经后低骨量妇女,用双能X线吸收测定法检测研究对象腰椎和髋部的骨密度,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法检测研究对象的PPARγ基因第6外显子C161→T的基因型。结果研究人群中PPARγ基因第6外显子C161→T的基因型及基因频率的分布符合Hardy-Weinberg定律;校正年龄、体重、身高和体重指数对骨密度的影响后,219名青年妇女和102名绝经后妇女中PPARγ各基因型组间在L2-4、股骨近端部位的BMD值差异均无统计学意义(P>0·05)。结论PPARγ基因C161→T的SNP可能不是汉族妇女骨质疏松症遗传影响因素,其基因型的检测可能对筛查汉族妇女骨质疏松症高危人群的意义不大。     

绝经后股骨颈骨折发生与骨代谢的相关性分析

目的:探讨绝经后股骨颈骨折发生与骨代谢的相关性。方法:选择绝经后妇女180例,根据骨质疏松与骨折情况分为对照组82例,骨质疏松症88例,骨质疏松伴骨折10例,所有入选者都进行股骨颈密度的测量,并且进行血清骨保护蛋白(OPG)和k B受体活化子配体(RANKL)检测。结果:骨质疏松伴骨折组的股骨颈骨密度、T分数、Z分数都明显低于其他2组,而骨质疏松症组也明显低于对照组(P0.05)。骨质疏松伴骨折组、骨质疏松组与对照组的血清OPG与RANKL值对比差异均有统计学意义(P0.05)。二分类Logistic回归分析对骨折有显著影响的变量包括OPG和RANKL(P0.05)。结论:绝经后股骨颈骨折发生率比较高,血清骨代谢指标OPG与RANKL检测在临床上可选择性用于预测绝经后妇女的股骨颈骨折。     

脂联素基因多态性与老年妇女骨质疏松症相关性研究

目的研究脂联素基因SNP＋45多态性与上海地区绝经后妇女骨质疏松症的相关性,比较脂联素基因SNP＋45多态性与骨转换生化标志物的关系。方法以聚合酶链反应-限制性内切酶长度多态性（PCR—RELF）技术,对75例骨质疏松症患者和71例正常对照者脂联素基因SNP＋45位点进行基因分型,应用酶联免疫测定法或电化学发光免疫法测定75例骨质疏松症患者血清和尿液中8项骨代谢指标。结果脂联素基因SNP＋45多态性位点的基因型和等位基因频率在骨质疏松症患者和正常对照组比较差异无统计学意义,脂联索基因SNP＋45多态性位点的基因型与骨转换标志物比较差异也均无统计学意义。结论脂联素基因SNP＋45多态性与上海地区绝经后妇女骨质疏松症无相关性,与骨转换率也无相关性。     

Sequence variations in the osteoprotegerin gene promoter in patients with postmenopausal osteoporosis

Osteoprotegerin (OPG) is a recently discovered member of the TNF receptor superfamily that acts as an important paracrine regulator of bone remodeling. OPG knockout mice develop severe osteoporosis, whereas administration of OPG can prevent ovariectomy-induced bone loss. These findings implicate a role for OPG in the development of osteoporosis. In the present study, we screened the OPG gene promoter for sequence variations and examined their association with bone mineral density (BMD) in 103 osteoporotic postmenopausal women. Single-strand conformation polymorphism analysis followed by DNA sequencing revealed a presence of four nucleotide substitutions: 209 G-->A, 245 T-->G, 889 C-->T, and 950 T-->C. The frequencies of genotypes were as follows: GG (89.3%), GA (10.7%) for 209 G-->A polymorphism; TT (89.3%), TG (10.7%) for 245 T-->G polymorphism; and TT (25.2%), TC (53.4%), CC (21.4%) for 950 T-->C polymorphism. Substitution 889 C-->T was found in only two patients. Statistically significant association of genotypes with BMD at the lumbar spine (P = 0.005) was observed for 209 G-->A and 245 T-->G polymorphisms. Haplotype GATG was associated with lower BMD as compared with GGTT haplotype. Our results suggest that 209 G-->A and 245 T-->G polymorphisms in the OPG gene promoter may contribute to the genetic regulation of BMD.     

汉族和蒙古族维生素D受体基因多态性分布的研究

目的 分析中国汉族与蒙古族维生素D受体（VDR）基因多态性分布.方法 应用PCR-RFLP技术,分别对我国179名汉族和112名蒙古族健康绝经后妇女的VDR基因型进行分型,并计算其基因频率分布.结果 汉族和蒙古族绝经后妇女bb基因型频率分别为90.5%和50%,BB基因型频率分别为0%和4.46%,汉族与蒙古族之间VDR基因型频率分布差异非常显著（P＜0.001）.结论 我国汉族与蒙古族之间VDR基因型多态性具有种族差异性,这种种族差异性与骨质疏松的相关性有待于进一步研究.     

雌激素受体和骨钙素基因多态性位点联合PXh单倍型对绝经后妇女骨密度的影响

目的 探讨雌激素受体(ER)基因(Xba Ⅰ、Pvu Ⅱ)、骨钙素基因(Hind Ⅲ)多态性位点联合型与绝经后妇女骨密度的相关性.方法 采用双能X线(DXA)骨密度仪检测307例绝经后妇女腰椎和左侧股骨上端骨密度,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测ER基因Xba Ⅰ、PvuⅡ和Hind Ⅲ多态性.结果 (1)XX型大转子骨密度C(O.600±0.104)g/cm2]低于xx型[(0.653±0.119)g/cm2],P<0.05;Xx型、有X等位基因组的股骨颈[分别为(0.695±0.087)g/cm2和(0.697±0.088)g/cm2]、大转子[(0.592±0.106)g/cm2和(0.594±0.105)g/cm2]、Ward's三角[分别为(0.500±0.115)g/cm2和(0.505±0.123)g/cm2]骨密度低于xx型[分别为(0.737±0.108)g/cm2、(0.653±0.119)g/cm2、(0.554±0.130)g/cm2]、无X等位基因组[分别为(0.737±0.108)g/cm2、(0.653士0.119)g/cm2、(0.554±0.130)g/cm2],均P<0.05.(2)PP型、有P等位基因组Ward's三角骨密度分别低于pp型、无P等位基因组(P<0.05).(3)hh型、有h等位基因组的股骨颈、大转子、Ward's三角骨密度低于HH型,无h等位基因组骨密度低于HH型(均P<0.05).(4)含有PX、PXh单倍型组股骨颈、大转子、Ward's三角骨密度分别低于元PX、无PXh单倍型组(均P<0.05).结论 ER基因Xba Ⅰ、骨钙素基因Hind Ⅲ多态性与绝经后妇女骨密度相关,X、h等位基因对骨密度有不利影响,PXh单倍型可作为福州地区绝经后妇女骨质疏松的遗传标记物.     

北京地区汉族女性Cbfa1基因多态性与骨密度相关性研究

目的了解北京地区汉族女性核心结合因子α1（core binding factor α1,Cbfa1）基因多态性的分布,并分析其与骨密度的相关性。方法利用异源双链分析技术和直接测序方法,检测北京地区204名无亲缘关系的女性受试者的Cbfa1基因型。受试者中,30—39岁年轻妇女91名（35±3岁）,自然停经1年以上的绝经后妇女113名（63±8岁）。研究对象的骨密度（BMD）采用双能X线骨密度仪（DXA）进行测量。测量部位包括腰椎1-4、股骨颈、Wards三角区及大转子部位。结果（1）北京地区汉族女性Cbfa1基因型分布频率依次为G／G占85．3％,G／A占8．3％,A／A占1．0％,G／11Ala占3．9％,A／11Ala占1．0％,11Ala／11Ala占0．4％。Cbfal等位基因频率为G占94．4％,A占5．6％。（2）校正了年龄、身高、体重和BMI的协方差分析显示,北京地区汉族妇女股骨颈部位和Wards三角区G／A基因型的BMD较G／G基因型高（分别为0．896±0．168比0．823±0．148和0．759±0．236比0．714±0．200g／cm^2;P=0．002,0．036）。独立样本T检验结果显示,股骨颈部位含A等位基因组BMD高于不含A等位基因组（0．901±0．153比0．821±0．148g／cm^2,P=0．023）。资料分为青年妇女组和绝经后妇女组进一步分析,结果提示青年妇女组股骨颈部位和Wards三角区G／A基因型的BMD较G／G基因型高（1．017±0．167比0．924±0．103,0．967±0．172比0．861±0．131g／cm^2;P=0．031,0．046）;而在绝经后妇女组,仅股骨颈部位存在A等位基因的保护作用（0．802±0．097比0．730±0．119g／cm^2,P=0．044）。结论（1）北京地区汉族女性Cbfal基因型,以G等位基因频率为主。（2）北京地区汉族妇女股骨颈部位和Wards三角区骨密度G／A基因型者较G／G基因型者高,A等位基因对BMD具有保护作用,它有利于青年妇女峰值骨量的获得。     

Age-related changes in cortical bone content of insulin-like growth factor binding protein (IGFBP)-3, IGFBP-5, osteoprotegerin,and calcium in postmenopausal osteoporosis: a cross-sectional study

Serum GH and IGF-I levels decline with increasing age, whereas osteoprotegerin (OPG) increases. IGFs as well as OPG are present in bone matrix and mediate the effects of many upstream hormones (e.g. estrogen). To evaluate whether changes in these proteins may to some extent explain the decrease in bone mass in postmenopausal or senile osteoporosis, we measured bone contents of IGF-I, IGF-II, IGF binding protein (IGFBP)-3, IGFBP-5, and OPG in combined extracts obtained after EDTA and guanidine hydrochloride extraction in 60 postmenopausal women aged 47-74 (mean, 63) yr with a previous distal forearm fracture and a hip or spine Z-score less than 0. We found age-related increases in IGFBP-3 (r = 0.35; P < 0.01), IGFBP-5 (r = 0.59; P < 0.001), and OPG (r = 0.36; P < 0.01) in cortical bone, significantly inversely correlated with femoral neck and lumbar spine BMD. A correlation between age and OPG was also detected in trabecular bone (r = 0.27; P < 0.05). A pronounced age-related decrease in cortical calcium contents (r = -0.60; P < 0.001), positively correlated with femoral neck and lumbar spine BMD, was also found. No age-related changes were detected for IGF-I or IGF-II. The present study demonstrates age-related changes in cortical bone contents of IGFBPs, calcium, and OPG, possibly related to the pathophysiology of postmenopausal osteoporosis. As for OPG, our findings probably represent compensatory responses to increased osteoclastic resorption.     

Polymorphisms in the P450 c17 (17-hydroxylase/17,20-Lyase) and P450 c19 (aromatase) genes: association with serum sex steroid concentrations and bone mineral density in postmenopausal women

The CYP 17 and CYP 19 genes encode 17alpha-hydroxylase/17,20-lyase and aromatase, respectively, both involved in sex hormone synthesis. We investigated the association between 2 common polymorphisms in 1) the promoter region (T-->C substitution) of CYP 17, and 2) exon 3 (G-->A) of CYP 19, bone mineral density (BMD) and serum androgen/estradiol, in a case-control study of 252 postmenopausal women aged 64.5 +/- 9.2 yr (mean +/- SD). There was no significant difference in serum estradiol concentrations between cases (n = 136) and controls (n = 116). The CYP 19 genotype was significantly associated with serum estradiol (P = 0.002). Women with the AA genotype had higher serum estradiol concentrations compared with those with the GG genotype (P = 0.03). In older women, those with the CYP 19 GA and GG genotypes had an increased prevalence of osteoporosis (P = 0.04) and fractures (P = 0.003). We found no significant association between CYP 17 genotype and serum androgens and estradiol concentrations. However, a significant association was seen between BMD values at the femoral neck with CYP 17 genotype in cases (P = 0.04) and in the whole study population (P = 0.012). Subjects with the CC genotype had significantly lower BMD (mean +/- SD: TT, 0.7 +/- 0.16; CC, 0.6 +/- 0.08 g/cm(2); P = 0.006). In conclusion, both CYP 17 and CYP 19 are candidate genes for osteoporosis in postmenopausal women.     

Association of the F352V variant of the Klotho gene with bone mineral density

Klotho gene codes for a protein with glucuronidase activity and is thought to influence bone and vascular homeostasis. We studied the relationship of a common T/G polymorphism, resulting in a phenylalanine (F) to valine (V) substitution at aminoacid position 352, with bone mineral density (BMD) and osteoporotic fractures. The study group comprised 914 Spanish women, including 438 control subjects, 190 patients with osteoporosis, 198 with hip fractures, and 88 patients with severe osteoarthritis. BMD was measured by DEXA in 540 women from the control and osteoporosis groups. Allele frequencies were 86% and 14%, for the F and V alleles, respectively. In comparison with the most common FF genotype, postmenopausal women with FV/VV genotypes had higher hip BMD (femoral neck: 0.673 ± 0.011 vs. 0.644 ± 0.006 g/cm²; P = 0.02; total hip: 0.807 ± 0.014 vs. 0.774 ± 0.008 g/cm²; P = 0.03). Klotho alleles explained about 1.5% of BMD variance, but were not associated to the risk of osteoporotic spine or hip fractures. The Klotho genotype was not associated to BMD in premenopausal women. In conclusion, the F352V Klotho polymorphism is associated with BMD in postmenopausal women, suggesting that Klotho gene variants influence skeletal aging.