不同刺激剂赫氏培养基对鼠疫菌生长影响的观察

目的观察不同刺激剂对鼠疫菌生长的作用,筛选出理想的刺激剂。方法在原有刺激剂的基础上,新增生长液（破伤风培养基用Ⅰ号溶液）,分别加入到赫氏基础培养基上,通过活菌数实验观察4种刺激剂对鼠疫菌生长的影响。结果经实验观察,破伤风培养基用Ⅰ号溶液和10%脱纤维兔溶血无统计学差异（q=0.95,P〉0.05）,破伤风培养基用Ⅰ号溶液和2.5%亚硫酸钠存在差异性（q=4.47,P〈0.05）,破伤风培养基用Ⅰ号溶液和0.2%硫酸亚铁的差异有统计学意义（q=5.41,P〈0.05）。结论破伤风培养基用Ⅰ号溶液和10%脱纤维兔溶血,对鼠疫菌刺激剂作用优于2.5%亚硫酸钠和0.2%硫酸亚铁。     

3种不同干粉培养基对鼠疫菌生长的影响

<正>干粉培养基的优点在于使用方便,节省时间,易运输,易保存。干粉培养基的推广应用,对微生物的研究和发展是有益的,也是培养基专业发展的必然趋势。本研究选择了鼠疫菌细菌培养常用的3种干粉培养基,采用活菌计数方法,筛选最适宜鼠疫菌生长的干粉培养基。1材料与方法1.1材料氯化钠,天津市化学试剂批发公司;磷酸氢二钠,天津市凯通化学试剂有限公司;琼脂粉,北京欣经科生物技术有限公司;蛋白胨(英国进口);赫     

13种培养基对鼠疫菌药敏试验影响观察

药敏试验对培养基的要求比较严格 ,Kiring-Bauer方法选用 Mulllleer- Hinton培养基 [1] (以下简称MH培养基 ) ,该培养基在药敏试验中广为应用 ,被列为专用培养基。鼠疫菌虽在普通培养基上生长良好 ,但常用的培养基为赫金格尔琼脂、肉浸液琼脂 ,为了明确普通培养基可否用于鼠疫菌的药敏试验 ,我们对不同的普通培养基与 MH培养基进行了比较 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1.1　培养基 :本次试验选用四类培养基 ,其中赫金格尔类包括赫金格尔琼脂、赫金格尔溶血、赫金格尔龙胆紫溶血、赫金格尔亚硫酸钠、赫金格尔干燥 99- 1、赫金格尔干…     

两种鼠疫菌培养基现场应用效果评价

在前文中 [1 ] ,我们报道了六种鼠疫菌培养基筛选试验的研究结果。以胰酶消化液兔溶血培基为对照基 ,市售营养琼脂培基和胰蛋白月示为主要成分自制的五种培基 ,鼠疫菌在这些培基上生长均良好 ,并具鼠疫菌特点的典型菌落。其中营养琼脂培基和胰蛋白月示两种培基操作简便、经济 ,便于基层使用和质控 [1 ]。为验证所筛选出的这两种培基在鼠疫现疫区分离鼠疫菌的效果 ,于 2 0 0 0年 9月在临沧县凤翔镇及蚂蚁堆乡有动物鼠疫流行并波及到人间的现场作了以上两种培养基和对照培养基应用效果的比较 ,结果如下。1　材料和方法1 .1　试剂 :K2 HPO4,1…     

几种鼠疫菌培养基的筛选试验

比较了鼠疫菌在胰酶消化液琼脂培养基、市售普通营养琼脂培养基和以胰蛋白Ｓｉ为主要万分自制的５种培养基上的生长情况。结果显示,鼠疫菌在上述７种培养基上均生长良好,可培养出具有鼠疫菌特点的典型菌落,其中营养琼脂培养基和胰蛋白Ｓｉ（２、３号）培养基操作简便、经济,便于基层使用和实验条件的质量控制。     

鼠疫细菌检验赫氏干燥培养基的研制应用和质量测析

鼠疫细菌检验工作是鼠疫防治的重要一环,疫区现场培养基的制作速度和质量直接影响着细菌检验的结果。为服务于鼠疫防治,方便基层工作,特研制了适宜基层鼠疫细菌检验用的赫氏干燥培养基,在几年的使用中取得了良好的效果。现将这种培养基的研制和应用情况报告如下。     

检测鼠疫菌培养基的质量控制

鼠疫是人兽共患的烈性传染病。鼠疫疫源地证实,鼠疫疫情的判定是以分离到鼠疫菌为依据^[1],而鼠疫菌分离的主要环节是培养基和基础液赫金格尔消化液的质量控制。本文对其制备、贮存、性能测试、影响因素、注意事项等方面应采取的质量控制进行讨论。     

选择培养基分离鼠疫菌的实验研究

开展鼠疫监测以来一直使用营养琼脂培养基、赫氏培养基和龙胆紫血液培养基分离培养鼠疫菌,这些培养基的缺点是选择性差,所有营养条件要求不高的细菌均可生长,鼠疫菌菌落特征不典型,常常与一些杂菌菌落难以辨认。为此,我们选择国际上认可的耶氏菌选择培养基(Yersinia selective     

一种分离鼠疫菌的指示性选择培养基的实验报告

从腐败的啮齿动物(特别是自毙鼠)、土壤、粪便、蚤体内以及动物肠内容物等中欲检出鼠疫菌,往往检出率较低,如果用一种新的指示性培养基就能较好地解决这个问题,笔者就此做了试验,结果如下。1 材料与方法1.1 试剂 进口蛋白胨、酵母侵膏粉、甘露醇、去氧胆酸钠、新生霉素、K_2HPO_4,亚硫酸钠。1.2 被试菌株 鼠疫EV菌、鼠伤寒、假结核菌、大肠杆菌V_(517)     

不同pH刚果红培基的鼠疫菌Pgm试验报告

鼠疫菌的色素沉着试验(Pgm),可以检定其吸收外源性色素的能力,它是鼠疫菌毒力决定体之一;Pgm±突变率可作为鼠疫菌分型的指标之一;对鼠疫菌在蚤体内形成菌栓有着重要作用。因此Pgm试验在确定鼠疫菌生物学性状,在自然界保存和感染宿主的能力方面都有重要作用。     

一种选择敏感培养基对腐败材料检测鼠疫耶尔森氏菌检测的应用效果北大核心CSCD

目的研制并筛选适合从腐败材料分离鼠疫菌的选择敏感培养基,对其性能进行评价。方法以自制赫氏消化液为基础,加入刺激鼠疫菌和抑制杂菌生长的生化试剂配制成2种选择敏感培养基,以常见致病菌株、耶尔森氏菌属中与鼠疫菌近源的假结核耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌评估2种培养基的敏感性和特异性;应用以上培养基分离野外腐败动物材料的鼠疫菌,评价几种选择培养基的应用效果。结果1号培养基(4%十二烷基硫酸钠选择培养基)对鼠疫菌检测的特异性高、敏感性强,培养24 h鼠疫菌发育为典型成熟菌落,应用该培养基从腐败动物材料中分离鼠疫菌阳性检出率与龙胆紫选择培养基一致。结论4%十二烷基硫酸钠选择培养基分离鼠疫菌效果优于龙胆紫选择培养基,可用于野外腐败动物材料的鼠疫菌快速检验。     

贵州省鼠疫耶尔森菌生物学特征研究

目的研究贵州省鼠疫耶尔森菌的生物学特征,探讨疫源地性质。方法对37株鼠疫菌进行生化试验、营养需求试验、毒力基因检测、随机扩增多态性DNA分析和脉冲场电泳分析。结果37株鼠疫菌均不发酵鼠李糖和甘油,发酵麦芽糖和阿拉伯糖,脱氮阳性。选择20株代表菌株检测均为苯丙氨酸依赖(Phe )、谷氨酸半依赖(Glu±);用Pla、Cafl、inv、hms4对引物分别进行PCR扩增,均得到456、249、1000和700bp的目标基因条带;随机引物(RAPD)分析均获得505、790、1140和1680bp的条带;脉冲场电泳图谱显示338、242.5、168和77kbp的条带。结论贵州省鼠疫菌株的生物学特征与云南省滇闽居民生态型鼠疫菌相同。     

鼠疫菌6MD质粒在假结核菌中的表达及其对假结核菌毒力的影响

使用电穿孔转化技术,将鼠疫耶尔森氏菌所携带的6MD 质粒转移到假结核耶尔森氏菌中,获得了杂交菌株。该杂交菌株能够表达鼠疫菌素Ⅰ及凝固酶,但其毒力却仍与作为受体的假结核菌株类似,而没有向鼠疫菌的毒力水平接近。本文对这种现象的可能原因进行了分析。     

胶体金免疫层析法诊断鼠疫的特异性试验

目的研究胶体金免疫层析法用于鼠疫快速诊断的特异性。方法采用胶体金免疫层析测试条和鼠疫反向间接血凝试验(RIHA)平行检测。结果检测鼠疫菌F1抗原具有很强的特异性,不与包括小肠结肠炎和假结核耶尔森等其他细菌发生交叉免疫反应。结论该方法简便、快速、敏感,适合现场鼠疫监测。     

多重PCR快速鉴定鼠疫耶尔森氏菌

目的　建立鼠疫耶尔森氏菌多重PCR鉴定系统 ,用于鼠疫耶尔森氏菌的快速鉴定。方法　针对分别存在于pFra、pRst质粒上毒力基因caf1和pla ,以及一段 2 76bp染色体序列 3a分别设计引物。采用多重PCR技术 ,同时检测caf1、pla、3a三个靶序列。结果　应用该多重PCR反应体系 ,对我国鼠疫耶尔森氏菌 17个生态型及新发现的青海田鼠鼠疫疫源地菌株的多重PCR扩增结果表明 ,实验菌株中除 2株分别缺失pFra、pPst质粒而扩增出 2条产物带外 ,其余 5 2株均扩增出预期的 3条产物带 ,相关菌株均阴性 ,其检测灵敏度为 1× 10 -4ngDNA。 结论　该方法用于鼠疫耶尔森氏菌的鉴定简便、快捷 ,具有很高的特异性和敏感性 ,为鼠疫耶尔森氏菌的快速鉴定提供了有力手段     

广西鼠疫菌生物学性状的研究

目的 研究广西鼠疫菌生化特性，确定该地区鼠疫疫源地的性质。方法 包括糖醇酵解试验、毒力因子检测、脱氮反应、营养需求等，采用Kado温和法提取质粒。结果 广西鼠疫菌对麦芽糖、阿胶糖酵解，而对鼠李糖、甘油不酵解。毒力因子(pgm)6株阳性，5株弱阳性、4株阴性。31株鼠疫菌经质粒图谱分析，其中2株菌缺失65MD，1株菌携带111MD大质粒，其余均含有4,6、45和65MD质粒。结论 按中国鼠疫菌生态分型标准，被试菌株属滇西闽居民区型。     

对1株疑似鼠疫耶尔森氏菌的系统鉴定

目的对1株可疑菌株进行系列验证实验,以确定其是否为鼠疫耶尔森氏菌（以下简称鼠疫菌）。方 法用鼠疫细菌学常规方法和分子生物学手段确定其生物学表型特征、特异性基因及基因组特征。结果该菌 株具备鼠疫菌的典型形态特征;能被鼠疫噬菌体完全裂解;主要生化特性为阿胶糖（＋）、鼠李糖（－） 、麦芽糖（＋）、蜜二糖（－）、甘油（＋）、脱氮（+）,与典型鼠疫菌一致。毒力因子检查结果为均 为阴性;对实验动物小白鼠完全无致死能力。全基因组芯片杂交实验和PCR扩增表明55023菌株没有鼠疫菌 的三个质粒;也不具鼠疫标识基因;pgm位点代表性基因YPO1954扩增阳性,YPO1908扩增阴性,表明其pgm 位点不完整;差异片段（DFR）分型结果表明该菌株缺失了14个DFR,不符合鼠疫菌的特征;多位点序列分 型（MLST）分析结果表明该菌株与鼠疫存在16个碱基的差异,而与血清III型假结核耶尔森氏菌仅相差两 个碱基。结论尽管55023菌株具备鼠疫菌的一些表型特征,但基因组特征表明其不是鼠疫菌,而可能是血 清III型的假结核耶尔森氏菌;噬菌体裂解结果等表型不能作为鼠疫菌鉴定的最终标准。     

鼠疫菌fra基因探针的研究

利用ＰＣＲ的方法，由鼠疫菌的ＤＮＡ中扩增获得了单一的，长２４９ｂｐ的基因片段。这一反应的特异性良好，可以作为鼠疫菌的一种鉴定标志。将这一片段地高辛标记制成探针，与国外已经试用过的，来自９．５ｋｂ质粒的９００ｂｐ探针相比较，表明该探针的特异性优良，可用于鼠疫的监测与对鼠疫菌分子生物学的进一步研究。     

鼠疫菌质粒上标识基因的筛选

目的 筛选鼠疫菌质粒上保守、稳定、特异的DNA标识序列.方法 选择32条源于鼠疫菌质粒上DNA序列,采用常规PCR技术,对云南家、野鼠两型共40株鼠疫菌、47株非鼠疫菌、鼠疫菌疫苗株EV76(阳性对照),进行了特异性验证试验和稳定性鉴定试验.结果 筛选出4对相对保守、稳定、特异的DNA标识序列:YPMT1.05c,YPMT1.03c,YPMT1.42及YPMT1.04c.结论 所筛选的4对鼠疫菌DNA标识序列,可用于鼠疫快速诊断.