体外鼠脑星形胶质细胞损伤后c-fos蛋白、GFAP及其mRNA的动态表达

研究ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＧＦＡＰ—ｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ在鼠脑星形胶质细胞（ａｓｔｒｏｃｙｅ，ＡＳ）损伤后反应性星形胶质化时的动态变化。用ＡＳ原代培养技术建立体外ＡＳ机械损伤模型．并结合应用免疫组织化学和原位杂交方法．结果：（１） ｃ－ｆｏｓ蛋白于损伤后 ４５ ｍｉｎ即有阳性表达，伤后 ２ ｈ消失； （２损伤边缘的 ＡＳ于损伤后 ６ ｈ开始表达 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ， １ｄ达高峰，３ ｄ则在损伤边缘少数 ＡＳ中可检出 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ；（３）损伤后 １ｄ，ＧＦＡＰ表达明显增强，胞体肥大，粗大突起伸向损伤区形成反应性星形胶质化。结论：（ｌ） ＡＳ受损后原癌基因 ｃ－ｆｏｓ首先被激活，ｃ－ｆｏｓ蛋白呈－过性的表达，参与调节ＡＳ的激活；（２）ＡＳ损伤后，ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ的转录增加，ＧＦＡＰ表达增强是由于在转录水平上ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ表达增强的结果；（３）反应性星形胶质化是ＡＳ的自身特性，以ＡＳ肥大为主，ＡＳ受损后，原癌基因ｃ－ｆｏｓ的蛋白参与调节ＡＳ激活的确切机制尚待阐明。     

大鼠脑损伤后波形蛋白和胶质纤维酸性蛋白的表达及意义

以胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌ ｆｉｂｒｉｌｌａｒｙ ａｃｉｄｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）和波形蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ，Ｖｉｍ ）为标记，观察针刺损伤大基底节后反应性星形胶质化（ｒｅａｃｔｉｖｅａｓｔｒｏｇｌｉｏｓｉｓ）的发展过程。针刺蟮谒奶欤郑椋肀泶锎锏礁叻澹院笤诮系退缴铣中谑笛槿獭＃郑椋硌粜韵赴饕植荚谏丝谥鼙撸诘谒奶煲还猿鱿钟谏丝谕喔浇拇竽云こ帧＃牵疲粒蟹从π员泶镌     

体外鼠脑星形胶质细胞损伤后c—fos蛋白,GFAP及其mRNA的动态…

研究ｃ－ｆｏｓ蛋白，ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ在鼠脑星形胶质细胞损伤后反应性星形胶质化时的动态变化。用 ＡＳ原代培养技术建立体外ＡＳ机械损伤模型，并结合应用免疫组织化学和原位杂交方法。结果（１）ｃ－ｆｏｓ蛋白于损伤后４５ｍｉｎ即有阳性表达，伤后２ｈ消失Ｄ（２）损伤缘的ＡＳ于损伤后６ｈ开始表达ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ，１ｄ达主同峰，３ｄ则在损伤边缘少数ＡＳ中可检出ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ；（３）损伤后１ｄ，Ｇ     

大脑皮质机械性损伤诱导Nestin表达和神经前体细胞增殖

目的：探讨皮质损伤后 Ｎｅｓｔｉｎ 的表达和神经前体细胞的增殖情况。方法：在立体定位仪上横切成年大鼠的大脑皮质和胼胝体,于术后１４ ｄ 和３０ ｄ 分别杀死动物。用 Ｎｅｓｔｉｎ 、 Ｇ Ｆ Ａ Ｐ免疫组化和 Ｎｉｓｓｌ 染色方法,观察损伤后神经前体细胞和反应性星形胶质细胞的反应模式。结果：损伤后,伤口周围的皮质、扣带和胼胝体出现大量的 Ｎｅｓｔｉｎ 阳性细胞,伤侧侧脑室室管膜下区（ Ｓ Ｖ Ｚ） 的神经前体细胞也分裂增殖。 Ｎｅｓｔｉｎ 在皮质的表达呈现一个以切口为中心的梯度反应模式并持续到术后３０ ｄ 。在分布上,神经前体细胞与反应性星形胶质细胞有部分重叠。结论：机械性大脑皮质损伤可诱导切口周围和侧脑室 Ｓ Ｖ Ｚ神经前体细胞增殖,后者可能对脑损伤后的修复起重要作用。     

雄激素对脑损伤后星形胶质细胞反应的影响

目的：研究雄激素对脑穿刺损伤后星形胶质细胞（Ａｓｔ）反应性胶质化的影响。方法：通过免疫组化、免疫荧光染色及流式细胞仪计数等方法,观察切除睾丸及补充睾丸酮后脑穿刺损伤鼠伤灶周围ＧＦＡＰ－ＩＲ阳性细胞的形态、数量与比例变化。结果：切除睾丸鼠脑损伤后,伤灶周围反应性胶质比较单纯损伤鼠明显,表现为胞体肥大,突起增粗、延长,ＧＦＡＰ免疫组化染色显著增强。睾丸酮治疗后,Ａｓｔ反应程度虽有减弱,但未能恢复到正常     

大脑皮质机械性损伤诱导Nestin表达和神经前体细胞增殖

目的：探讨皮质损伤后Ｎｅｓｔｉｎ的表达和神经前体细胞的增殖情况。方法：在立体定位仪上横切成年大鼠的大脑皮质和胼胝体,于术后１４ｄ和３０ｄ分别杀死动物。用Ｎｅｓｔｉｎ,ＧＦＡＰ免疫组化和Ｎｉｓｓｌ染色方法,观察损伤后神经前体细胞和反应性星形胶质细胞的反应模式。结果：损伤后,伤口周围的皮质,扣带和胼胝体出现大量的Ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞,伤侧侧脑室室管膜下区（ＳＶＺ）的神经前体细胞也分裂增殖。Ｎｅｓｔｉｎ     

5—甲基硫代腺苷对培养鼠脑星形胶质细胞反应性胶质化的抑制

观察５－甲基硫代腺苷（５－ＭＴＡ），作为碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）受体的酪氨酸激酶抑制剂，对反应性星形胶质化的影响。原代培养大鼠星形胶质细胞（ＡＳ）行机械刮伤后，应用免疫组织化学及原位杂交法检测增生细胞核怕（ＰＣＮＡ），胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）及其ｍＲＮＡ表达。结果：与对照组相比，损伤后１－２ｄ，实验组ＡＳ胞体瘦小，突起短少，增生减弱（ＰＣＮＡ阳性细胞数减少，Ｐ〈０．０１），ＧＦＡＰ－     

惊厥对癫痫易感大鼠星形胶质细胞基因表达的影响

惊厥对癫痫易感大鼠星形胶质细胞基因表达的影响张月华单魏松梁英武张国荣吴希如神经系统损伤可引起星形胶质细胞反应性增生，胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）合成增加是代表星形胶质细胞增生的一个重要特点［１］...     

大鼠脑损伤后星形胶质细胞结蛋白和肌球蛋白表达的研究

对大鼠脑基底节穿刺损伤后星形胶质细胞结蛋白和肌球蛋白的表达进行了动态观察。结果显示结蛋白的表达显著增强，７ｄ时达高峰并 维持这一高水平至损伤后３０ｄ，损伤后早期（２－４ｄ）其反应限于伤口周围，随后波主整个同侧半球，便强度随与伤口距离增加而逐渐减弱。肌球蛋白的阳性细胞主要见于伤口周围，部分出现在皮质分子层。结果表明结蛋白表达增强与反应性胶质化密切相关，而肌球蛋白的表达可能与增生星形胶质细胞的迁移、收     

大鼠脑损伤后星形胶质细胞结蛋白和肌球蛋白表达的研究

对大鼠脑基底节穿刺损伤后星形胶质细胞结蛋白和肌球蛋白的表达进行了动态观察。结果显示结蛋白的表达显著增强，７ｄ时达高峰并维持这一高水平至损伤后３０ｄ，损伤后早期（２～４ｄ）其反应限于伤口周围，随后波及整个同侧半球，但强度随与伤口距离增加而逐渐减弱。肌球蛋白的阳性细胞主要见于伤口周围，部分出现在皮质分子层。结果表明结蛋白表达增强与反应性胶质化密切相关，而肌球蛋白的表达可能与增生星形胶质细胞的迁移、收缩有关。文中还对脑损伤后星形胶质细胞骨架蛋白表达改变的意义进行了讨论。     

波形蛋白在大鼠大脑穿刺损伤后的表达研究

目的 观察波形蛋白（Vimentin,Vim)在脑穿刺损伤后的动态变化。探讨Vim在脑胶质瘢痕形成中的作用。方法 应用大鼠脑顶叶刺伤模型。动物分为4组：对照组,脑穿刺损伤3d及1、4周组,行Vim免疫组织化学染色、Vim阳性细胞的流式细胞计数和RT-PCR半定量。结果 3d时Vim免疫反应阳性细胞从伤道周围到伤道较远距离,表现为不同程度的增生和肥大,较正常的星形胶质细胞数量明显增多,且胞体增大,突起增多,延长、染色加深,1周时Vim上述变化进一步加强,4周即见伤道周围形成胶质瘢痕,大量突起相互交织成网状;刺伤后的Vim的阳性细胞数和mRNA增加。结论 脑损伤后Vim在核酸,蛋白和细胞水平均增加,Vim可能在胶质产痕的形成中起重要作用。     

大鼠全脑缺血再灌注损伤及相关分子表达的时间过程

目的：研究大鼠全脑缺血再灌注损伤的时间过程及相关分子的表达变化。方法：在四血管阻断法（4VO）诱导全脑缺血模型上观察脑组织病理改变；同时应用免疫印迹方法检测脑组织NMDA受体亚单位蛋白及VCAM－1水平。结果：全脑缺血再灌注后3－14d海马CA1区产生迟发性神经元死亡。皮层NR1和NR2A亚单位表达分别于再灌注后1和3d显著增加，NR2B亚单位在1－3d也显示较高水平；海马NR1亚单位表达在1d明显下降，以后呈进行性升高，于14d达高峰；NR2A和NR2B表达有相似的趋向并于7d明显增加。海马和皮层VCAM－1分别于再灌注后3和7d表达明显上调。结论：脑缺血再灌注过程中海马神经元数量减少，皮层和海马的NMDA受体亚单位蛋白（NR1、NR2A和NR2B）及粘附分子VCAM－1有不同变化；干预两者的表达可能减轻脑缺血再灌注损伤。     

芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤创面愈合及其相关因子表达的影响

目的:研究芦荟对大鼠浅度烫伤创面愈合及表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:建立大鼠浅度烫伤模型,制备芦荟凝胶。实验动物分两组:自然愈合组(对照组);芦荟凝胶组(试验组)。通过免疫组化染色及图像分析,测定伤后2、6、10、18、24d的创面愈合率及创面组织中EGF、bFGF的表达。结果:1创面愈合率:芦荟凝胶组在10、18、24d各时相点的创面愈合率较自然愈合组高,差异有显著性(P<0.05)。尤以24d时相点更明显(P<0.01)。2EGF的表达:芦荟凝胶组总体的EGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后10、18d时EGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。3bFGF的表达:芦荟凝胶组总体的bFGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后18、24d时bFGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤的愈合有促进作用,其机制可能与促进EGF、bFGF的表达有关。     

在创伤愈合中VEGF和Ang-1表达的生物动力学变化研究

目的研究大鼠皮肤损伤愈合过程中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和促血管生成素-1（Ang-1）表达的动态变化，阐明其在组织修复血管再生中的作用。方法在大鼠背侧切开皮肤全层建立大鼠创伤模型，不同时问后活体取材，应用HE染色观察组织病理形态学变化；应用免疫组化SP法检测VEGF和Ang-1的蛋白表达。结果伤口组织病理学检查可见，毛细血管在伤后第3d即见增多，伤后第7d达高峰，随后逐渐减少。血管内皮细胞胞浆VEGF蛋白表达在伤后第1d呈阳性。伤后第3d呈强阳性，伤后第5d呈阳性，而于伤后第7d阳性程度逐渐减弱。伤后第1～14d VEGF蛋白表达与对照组比较，有非常显著性差异（P〈0．01）。血管内皮细胞胞浆Ang-1蛋白表达在伤后第1d部分呈阳性表达，部分呈弱阳性表达，在伤后第3d呈阳性表达。伤后第5、7d呈强阳性、阳性表达。随后阳性程度逐渐减弱。伤后第3～21d Ang-1蛋白表达与对照组比较，有非常显著的统计学差异（P〈0．01）。结论VEGF和Ang—1在血管内皮细胞中的表达强度与组织损伤愈合程度密切相关，在创伤愈合过程中互相协调、促进并调节血管肉芽组织的生长和成熟。     

EXPRESSION OF TISSUE－TYPE PLASMINOGENACTIVATOR IN SMOOTH MUSCLE CELLS OF INJUREDILIAC ARTERIES IN RABBITS

ＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦＴＩＳＳＵＥ－ＴＹＰＥＰＬＡＳＭＩＮＯＧＥＮＡＣＴＩＶＡＴＯＲＩＮＳＭＯＯＴＨＭＵＳＣＬＥＣＥＬＬＳＯＦＩＮＪＵＲＥＤＩＬＩＡＣ　ＡＲＴＥＲＩＥＳＩＮＲＡＢＢＩＴＳＭａＸｉａｏｌｉ；（马晓莉），ＨｕａｎｇＷｅｎｙｉｎｇ；（黄文...     

纳米银敷料联合表皮生长因子凝胶制剂对深Ⅱ度烧伤创面溶痂及愈合的影响

目的 分析纳米银敷料联合表皮生长因子凝胶制剂在深Ⅱ度烧伤创面治疗中的应用效果。 方法 按随机数字表法将156例深Ⅱ度烧伤病人分为观察组与对照组,各78例。观察组病人清创后给予纳米银敷料联合表皮生长因子凝胶制剂治疗,对照组病人清创后给予表皮生长因子凝胶制剂治疗。换药时观察创面情况。比较2组病人治疗前、治疗后1周创面视觉模拟评分（VAS）、治疗1周、2周、3周、4周创面溶痂率、细菌培养阳性率及完全溶痂时间、创面愈合时间,治疗前、治疗2周通过免疫组织化学法测定基质金属蛋白酶（MMP）-1、MMP-2表达,并记录治疗前后相关不良反应发生情况。 结果 观察组治疗4 d创面痂皮变软,6 d大部分痂壳脱落,8 d创面痂皮基本溶解;对照组治疗4 d创面干痂形成,6 d创面干燥,部分坏死组织呈黄黑色,但尚未脱落,8 d干痂逐渐软化,10 d干痂逐渐脱落,基底肉芽组织生长。治疗后2组VAS评分明显低于治疗前（P < 0.01）,且观察组明显低于对照组（P < 0.01）。观察组治疗1周、2周创面溶痂率均明显高于对照组（P < 0.01）。观察组完全溶痂时间、创面愈合时间均明显短于对照组（P < 0.01）。观察组创面细菌阳性率为11.54%,低于对照组的24.36%（P < 0.05）。与治疗前比较,治疗2周2组病人MMP-1、MMP-2表达水平均明显下降,且观察组均明显低于对照组（P < 0.01）。 结论 纳米银敷料联合表皮生长因子凝胶制剂治疗深Ⅱ度烧伤创面溶痂率高,创面愈合时间较短,其机制可能与抑制创面MMP-1、MMP-2表达相关。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进创伤愈合的研究

目的：研究重组人酸性成纤维细胞生长因子（rh-aFGF)对兔创伤的促愈合作用。方法：采用兔背部刀割伤模型，将rh-aFGF溶液隔日一次滴注于创面，用创面照像、透明膜描记称量法记录伤后第4、8、12、16天创面面积，用注水法测量伤腔容积，伤后第8、16天取创面组织，观察创面的病理学变化，包括肉芽组织生长与再上皮化情况。结果：rh-aFGF可明显加速兔皮肤创伤的愈合，使创面面积明显缩小（P＜0．05），使伤腔容积明显减少（P＜0．05）。组织学检查：rh-aFGF组创面伤后8天成纤维细胞生长活跃、数量多，其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组；伤后16天，创面收缩与再上皮化明显，新生上皮向创面中心爬行较快。结论：rh-aFGF对兔背部刀伤创面有明显的促修复作用。     

发育中Wistar大鼠大脑皮层甲基化结合蛋白-2基因表达变化

目的:研究甲基化结合蛋白-2(methyl-CpG-binding protein 2,mecp2)基因在发育中正常Wistar大鼠大脑皮层表达水平的变化.方法:应用实时定量PCR(real-time PCR),Northern印迹杂交对mecp2基因在正常Wistar大鼠发育的不同阶段:胚胎第15天(E15)、第17天(E17)、第19天(E19)、出生当日(P0),生后第7天(P7)、生后第14天(P14)、生后第28天(P28),成年期大鼠mRNA的表达水平进行定性、定量分析;应用Western印迹杂交对MeCP2的表达水平进行半定量分析.结果:mecp2基因是在正常Wistar大鼠大脑皮层中表达的mRNA,约为10kb.从胚胎至成年期的发育过程中,mecp2基因mRNA的表达虽有波动,但差异无显著性.mecp2基因在正常Wistar大鼠大脑皮层中仅表达一种MeCP2,相对分子质量为75 000.在不同发育阶段其表达水平表现为,胚胎E15表达水平最低,自胚胎E19始至成年期MeCP2表达水平较E15明显增高.生后第7日至成年期,各时间点间表达水平的变化差异没有显著性.结论:随着正常Wistar大鼠大脑皮层神经元的发育成熟,MeCP2的表达水平逐渐增高,说明MeCP2对神经元的成熟有重要作用,并可能与维持神经元的成熟状态有关.     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对烫伤大鼠创面愈合及新生血管化的影响

目的:研究重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rhGM-CSF)对烫伤创面组织愈合及新生血管化的影响。方法:72只SD大鼠于背部制备直径3 cm的深Ⅱ度烫伤创面。根据创面不同处理方式将大鼠随机分为实验组(创面局部应用rhGM-CSF凝胶剂)和对照组(创面局部应用不含rhGM-CSF的凝胶基质),每组36只。分别于创面形成后当日和第1、3、7、10、14、21天观察创面并计算创面愈合率;免疫组织化学染色观察创面组织中新生血管内皮细胞表面标志物CD31表达,计算微血管密度。结果:自创面形成后第7天起,实验组创面愈合率明显高于对照组(P0.01),实验组创面组织中CD31表达及微血管密度也均明显高于对照组(P0.01)。结论:外用rhGM-CSF具有促进烫伤创面愈合作用,其机制可能与上调创面组织中CD31表达、使新生血管再生加速有关。