含人发角蛋白的真皮类似物促进真皮修复

目的探讨含人发角蛋白的真皮类似物植入体内后的真皮基质修复过程。方法将两种活性皮肤替代物植入大鼠皮下,于术后不同时间点取出植入物及其周围组织,作常规组织学、VG染色、醛复红弹性纤维染色及网状纤维染色观察。结果术后4d,成纤维细胞迁入,在人发角蛋白组可见细小的网状纤维,至术后10d新生血管形成,仍可见网状纤维分布于血管周围;术后2周,创缘周围形成胶原纤维;至3周,胶原纤维在移植块内形成,将移植块分割包绕。移植块内弹性纤维的出现最早为术后6周。但在对照组,3种纤维的形成慢、少,且常局限于创缘。结论组织学的结果提示人发角蛋白能促进真皮组织的再生。     

含人发角蛋白的真皮类似物植入大鼠皮下的形态学变化

目的：探讨由人发角蛋白(HHK)和胶原组成的真皮类似物植入体内后真皮重建过程中的形态学变化。方法：将含人发的活性皮肤替代物植入大鼠皮下，于术后不同时间取出植入物及其周围组织，作组织学和免疫组化观察。结果：术后4d，为急性炎症期，同时可见有约1／2的内皮细胞以及成纤维细胞等。术后第10d，植入物内可见大量的血管及其他迁入的细胞。第3w人发开始降解，出现胶原纤维。6w后，人发碎裂降解，胶原纤维粗大，集结成束，与真皮胶原无明显区别，同时移植块内也出现了弹性纤维。结论：组织学的结果显示人发可以作为真皮基质来修复皮肤缺损。     

真皮替代物

真皮替代物的研制与开发是皮肤组织工程中的关键,本重点综述了各类真皮替代物的研制,作用及优缺点。     

人发角蛋白人工腱的生物力学研究

目的：测定HHK人工腱及其各组分材料的主要生物力学指标。方法：分组将HHK人工腱两个末端分别固定于MTS858生物力学试验机上，进行断裂拉力和拉应力等生物力学指标的测定。结果：Z3．0、B3．0、F3．0各组平均断裂拉力分别为212、179、151N，拉应力分别为71、60、50MPa；ZBF1．0、ZBF、1．5、ZBF3．0、ZBF6．0、ZBF9．0、ZBF12．0各组平均断裂拉力分别为75、108、194、376、508、671N，拉应力分别为75、72、65、63、56、56MPa。结论：HHK人工腱足以供植入人工腱的肢体、指(趾)从植入人工腱到形成自体腱的过程中，进行功能活动所需要的拉应力。     

人发角蛋白丝束修复大鼠坐骨神经损伤的实验研究

目的：观察人发角蛋白(HHK)丝束桥接体诱导坐骨神经再生过程中形态字变化：方法：制备坐骨神经损伤SD大鼠动物模型，分别植入HHK或HHK 胶原屏障膜，术后2d、2、3、6、9、12周行组织学观察。结果：术后2d到2周，断端的施万细胞去分化，沿着HHK束表面纵向分裂增殖。术后3周HHK开始降解，施万细胞大量增生：HHK周围有很多巨噬细胞和多核巨细胞，并出现轴突和大量微血管：术后6周，HHK丝周围可见大量新生的神经纤维。术后9周，HHK降解显著，有明显的神经外膜和束膜。术后12周，HHK完全降解，其部位被新的神经纤维取代。HHK丝束 胶原膜屏障膜组与HHK丝束组没有明显区别。结论：HHK具有良好的桥接作用，坐骨神经沿着HHK再生时在其外周就能由微血管和结缔组织形成一屏障膜，无需外加屏障膜。     

胶原基真皮再生支架的微结构控制

综述了影响胶原基真皮再生支架微结构的各种因素及其控制方法。胶原基真皮支架的生物活性和修复创面的能力受到诸如除胶原外的其它主要材料 (第二组分 )、支架的孔径和孔隙率、支架厚度、生物活性因子以及交联度等多方面因素的综合影响。从材料学、生物学和医学的角度综合地应用物理、化学和生物学的手段探索各种影响因素的控制方法是组织工程皮肤研究的重点。     

胶原基人工真皮替代物的材料与结构设计

介绍了胶原基人工真皮替代物的结构模型、材料选择和微观结构控制。仿照人体天然的皮肤结构与功能，人工皮肤也应具有双层结构：上层以透气不透水的聚合物弹性体构成，发挥临时表皮的作用，下层由可降解的基于胶原的海绵体构成，作为自体可吸收的人工真皮层。除胶原外，多糖类化合物如氨基葡聚糖也是构成人工真皮替代物的重要物质之一，使人工真皮的成分更接近于天然皮肤，并调控胶原的降解速率与组织的再生同步。通过控制PH值、浓度和冻干温度等成膜条件，可调控所得胶原多孔膜的大小和形态结构。如此制备的基于胶原的人工真皮替代物可望成为皮肤移植的一种替代方法，用以治疗全厚皮损伤及皮肤溃疡。     

施万细胞复合人发角蛋白模拟微重力条件培养构建组织工程化神经

目的利用旋转式细胞培养系统模拟微重力条件体外构建人发角蛋白组织工程化神经。方法从乳鼠坐骨神经分离培养施万细胞，将传代施万细胞与人发角蛋白（HHK）在旋转式细胞培养系统内联合培养，分别在倒置显微镜和扫描电镜下观察施万细胞与HHK的相容性，评价体外构建效果。结果施万细胞分离培养成功，纯度达97％。联合培养后施万细胞在光镜下呈单层或多层贴附于HHK支架表面。扫描电镜下呈细长梭形．生长方向与HHK细丝长轴相一致．随着培养时间的延长其贴附程度加强，数量增加。结论在旋转式培养系统下施万细胞与HHK具有良好的粘附性和相容性，体外构建HHK组织工程化神经初步成功。     

人发角蛋白人工腱体内降解机制的形态学研究

目的：研究人工腱植人体内后的降解过程及细胞变化。方法：将人发角蛋白HHK人工腿植入兔离断跟腱中,于术后不同时期的取出植入物中段及吻合端取材,制作常规石蜡切片。结果：第一周,人工腱表面有一层粘膜状物,周围聚集大量的炎症细胞;第2周人腱中人发开始被纤维鞘包裹;第3,6周为人工腱降解活动高峰期,且降解步调不一致;第9周人发被完全降解,只残留少量的色素,结论：从形态学方面来看,人工腱植入兔体后经过系列变化,最终可被完全降解,吸收,而细胞表现的不仅仅是吞噬作用。     

真皮替代物

真皮替代物的研制与开发是皮肤组织工程中的关键 ,本文重点综述了各类真皮替代物的研制、作用及优缺点     

人工皮肤的研究进展

利用组织工程原理研究人工皮肤是近年来皮肤缺损修复临床研究中一个重要课题,为临床上从根本上解决皮肤缺损的修复提供了良好的前景。本文从人工皮片、真皮和复合皮肤等方面对该领域的最新研究现状进行综述,分析了人工皮肤目前存在的问题及未来发展方向。     

应用胶原海绵构建组织工程皮肤的实验研究

目的探讨以胶原海绵为支架材料构建组织工程皮肤的方法。方法体外分离、培养、鉴定角朊细胞和成纤维细胞,制备胶原海绵作为组织工程支架材料;在成功构建人工真皮的基础上,种植表皮细胞,构建人工复合皮肤,通过大体观察、HE染色与免疫组织化学进行组织学检测。结果制备的胶原海绵孔径平均100~150μm,孔隙率89%,组织相容性良好;以胶原海绵构建的皮肤替代物免疫组织化学染色显示Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白和层粘连蛋白阳性,HE染色可见均具有表皮和真皮双层结构,在形态结构上与正常皮肤相似。结论培养的人角朊细胞和成纤维细胞种植于胶原海绵支架上培养可构建出具有类似天然皮肤结构的组织工程皮肤。     

人发角蛋白凝胶对L-929细胞的增殖作用研究

利用人发角蛋白良好的可降解吸收和生物相容性,研究其作为软组织填充材料的可行性。实验以人发为原料,通过提取、纯化等方法获得角蛋白的水溶液,并制备成可注射的凝胶,研究采用SDS-PAGE对角蛋白的组成进行表征,通过对膜的吸水性实验表征凝胶的水合性能,并使用MTT法对凝胶材料的细胞增殖作用进行评价。SDS-PAGE结果显示提取的角蛋白分子量集中在30、50和65KD左右,角蛋白具有快速吸水性能且吸水率可高达850%,人发角蛋白对L-929小鼠成纤维细胞表现出明显的增殖作用,在24、48、72 h的平均增殖率分别达到119%、122%和123%。实验制备的人发角蛋白凝胶对L-929细胞具有明显的增殖作用,具有作为软组织填充材料的应用前景。     

Study on Different Modification Methods of Collagen for Tissue Engineering

Because of the excellent biocompatibility and its specific amino sequences, collagen is an ideal biomedical material for tissue engineering applications. But collagen is usually lack of mechanical strength to form a rigid 3-D matrix and lack of ability to resist collagenase. In order to be a tissue engineering scaffold, collagen must strengthen its structures by modifying with chemical crosslinkers. Chemical crosslinkers used for modif- ying collagen fibers include glutaraldehyde （GA）, epoxy compounds （PC） and carbodiim- ides （EDC）. The aim of this study is to choose the best chemical crosslinker from the three reagents. In terms of the resistance to collagenase degradation, chemical cross-link- ing with PC provided the best protection; in terms of the mechanical characterization, chemical cross-linking with GA provided the best;and in terms of the biocompatibility, chemical cross-linking with EDC provided the best. There is not a reagent which has all merits for collagen crosslinking, so we should select the crosslinking reagent as the demands of use ask.     

组织工程化皮肤的研制与应用

组织工程皮肤的研究发展迅速，目前已有许多组织工程化皮肤具有与正常皮肤相似的结构及屏障功能，应用于临床可达到理想愈合效果。根据人工表皮、无细胞活性的人工真皮替代物和有细胞活性的人工皮肤三大类，对组织工程皮肤的研制与应用进行介绍。     

Distribution of Collagen Fiber Orientation in the Human Lung

Collagen fiber, a major component of the extracellular matrix in the human lung, is crucial in maintaining the lung structure mechanically. It is necessary to study the collagen fiber orientation which the mechanical function is closely related to. In the present study the collagen fiber orientation in the lung was quantitatively measured by Osaki's microwave method. We succeeded in preparing sheet samples cut in a coronal direction from the lung for the measurements. It was found that the collagen fibers were, on average, orientated parallel to the longitudinal axis of the spine. The void spaces in the lung sample observed using an optical microscope was not circular but ellipsoidal. The direction of the long axes of ellipsoidal voids coincided with that of the collagen fiber orientation. The results suggested that collagen fiber orientation is closely related to the respiratory movement of the human lung. Anat Rec, 296:846–850, 2013. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.     

The Influence of Inflammation-Mediated Osteopenia (IMO) on the Structure of Rabbit Bone and Skin Collagen Fibrils

The influence of Inflammation Mediated Osteopenia (IMO) on rabbit skin and bone (trabecular and cortical) collagen fibrils was studied by electron microscopy. Severe abnormalities in collagen fibril structure were detected, at the ultrastructural level, in skin and bone specimens from IMO rabbits. In treated animals the arrangement of fibrils is anarchic. The overall collagen fibril architecture is disturbed compared to normal. IMO collagen fibrils' mean diameter values were significantly larger than those from controls, in all examined tissues. However, the banding patterns of fibrils were normal in all cases. Computer analysis shows no differences in charged amino acid composition between IMO and untreated samples. Our results show a correlation between the effects induced by osteopenia on skin and bone collagen.     

Ultrastructure of Abnormal Collagen in Human Tumors

Abnormal collagen fibrils were identified by transmission electron microscopy in 22 human tumors of differing histogenesis. They were found in a review of 1400 electron microscopy cases. Abnormal collagen fibrils, described by others as amianthoid fibers, composite collagen, collagen flowers and intrafibrillar collagen dysplasia, have been found only rarely in human tumors but commonly in certain connective tissue diseases such as pseudoxanthoma elasticum, Ehlers-Danlos syndromes, Marfan's syndrome, osteoarthritic cartilage, and emphysematous lung among others. Abnormalities in the cases described here included thickened fibrils, fibrillar degeneration of fibrils and irregular external contours. Proposed mechanisms for their formation have included degeneration possibly due to hypoxia or collagenase activity, abnormal collagen biosynthesis, and abnormal tissue levels of glycosaminoglycans. The finding of abnormal collagen fibrils in these 22 human tumors shows that their occurrence is more common than is indicated by previous published reports. Most of the tumors containing abnormal collagen fibrils were mesenchymal or soft tissue tumors. Four neuroendocrine neoplasms had abnormal collagen fibrils.