中药坚骨液对卵巢切除后大鼠骨质疏松的影响

中药坚骨液对卵巢切除后大鼠骨质疏松的影响冯坤，高子范，张灵菊，刘月桂Ｅｆｆｅｃｔｏｆ＇＇ＪｉａｎｇｕＹｅ＇，ｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ￥ＦｅｎｇＫｕｎ；ＧａｏＺｉｆａｎ；ＺｈａｎｇＬｉｎｇｊｎａｎｄＹａｅｇｕｉ（Ｌｕｏｙａｎ...     

雌激素对卵巢切除大鼠内源性白细胞介素-6变化的影响

目的：探讨卵巢切除后大鼠内源性白细胞介素－６（ＩＬ－６）的变化及雌激素替补治疗对此的影响。方法：通过酶联免疫吸收法检测骨髓上清的ＩＬ－６含量,通过斑点杂交和免疫组织化学方法检测骨组织ＩＬ－６的表达和分布。结果：卵巢切除导致骨髓上清ＩＬ－６含量细胞均有较强的ＩＬ－６免疫活性。结论：雌激素缺乏使骨髓内源性ＩＬ－６增加可能是由于骨细胞系ＩＬ－６ｍＲＮＡ表害升高决定的,雌激素抗骨吸收作用部分是通过降低ＩＬ     

外源性雌激素对卵巢切除小鼠骨折愈合影响的组织学观察

目的　探讨外源性雌激素对骨折愈合的影响。方法　在卵巢切除后 3个月已经出现明显骨丢失的balb/c小鼠用折骨器造成右股骨中段闭合性骨折 ,应用不同剂量的雌激素治疗 ,然后分批处理取出骨痂标本进行组织学检查。结果　发现卵巢切除后未用雌激素治疗小鼠骨痂形成较小 ,而应用高剂量雌激素治疗小鼠骨痂发育明显推迟。结论　实验表明 ,补充超生理剂量雌激素对卵巢切除小鼠骨折愈合 (早期 )不利。     

雌激素预防性给药对去卵巢大鼠骨和脏器的影响

目的采用双侧卵巢切除术建立绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)大鼠模型,探讨雌激素预防性给药对绝经后大鼠骨和脏器的影响。方法将SD大鼠分为假手术(sham-operated,Sham)组、去卵巢(ovariectomized,OVX)组、雌二醇组(β-estradiol-treated OVX,OVX/E2)组。术后第10 d开始皮下注射给药并称量大鼠体重,术后61 d处死大鼠,取脏器和骨,称量脏器重量,计算脏器指数。制备组织切片,进行HE染色。结果组织形态学观察表明,OVX组大鼠的股骨和胫骨均出现骨小梁断裂、间距变大、结构紊乱等骨质疏松症状,而OVX/E2组并未出现明显的发病症状。相较于Sham组,OVX组大鼠子宫内膜固有层中的子宫腺数目增多,腺腔增大,子宫黏膜上皮明显增厚,而OVX/E2组的大鼠子宫形态结构并未发生明显病变。大鼠体重和脏器指数分析表明,摘除卵巢不仅会引起大鼠术后早期的体重增加,还会导致大鼠肝、肺、肾和脾的脏器指数增加,而雌激素预防性给药能一定程度上缓解去卵巢手术引发的脏器指数的异常变化。结论适时进行一定剂量的雌激素给药能够较好地预防绝经后骨质疏松症的发生,为绝经后骨质疏松症的预防和治疗提供参考。     

卵巢切除大鼠垂体ACTH细胞免疫细胞化学研究

目的探讨促肾上腺皮质激素在绝经后骨质疏松症发病机制中的作用。方法４０只ＳＤ雌性大鼠分为去势组和对照组，分别于术后第６周末和第１２周末处死，行血、尿生化检查，取大鼠垂体行ＡＣＴＨ免疫细胞化学染色。光镜下观察垂体ＡＣＴＨ阳性细胞形态、分布并计数，通过计算机图像分析仪测定其灰度及阳性染色面积。结果去势组大鼠血钙、碱性磷酸酶、尿钙、尿羟脯氨酸均高于对照组（Ｐ＜０．０５），去势组大鼠垂体ＡＣＴＨ细胞数明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＡＣＴＨ细胞染色增强，灰度高于对照组（Ｐ＜０．０５），而阳性染色面积明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论雌性大鼠去势后ＡＣＴＨ分泌明显增强，提示ＡＣＴＨ在绝经后骨质疏松症发病机制中起一定作用。     

中药增骨丸对去卵巢大鼠骨髓IGF-1和IL-1β的影响

目的：探讨去卵巢后大鼠骨髓上清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)的变化及中药增骨丸对其影响。方法：将48只8个月龄Wistar性大鼠随机分为正常对照组、模型组、乙烯雌酚组及3种不同浓度的增骨丸组。每组8只。正常组仅摘除一段肠系膜，其余5组均做双侧卵巢切除术。术后1周开始给药，连续用药90d后取右侧股骨，剔净软组织，截取1．5cm，用1ml PBS液将骨髓冲入DEPC处理过的试管中备用。分别测定骨髓中IGF-1和IL-1β的含量。结果：卵巢切除后大鼠骨髓上清中IGF-1的含量明显降低，而IL-1β的含量明显增高。经过雌激素及中药治疗能明显增高卵巢切除所致的IGF-1的降低，抑制IL-1β的增高，且其作用与剂量有关系。结论：增骨丸通过增加IGF-1的表达和降低IL-1β的表达而发挥防治骨质疏松症的作用。     

雌激素类药物对去卵巢大鼠认知功能的影响

目的 :观察去卵巢 ( OVX)成年雌鼠的认知功能、脑内神经生化学改变及补充雌激素的影响。方法 :通过跳台法测试动物被动及主动回避反应 ,神经生化学手段测定相关酶及受体活性。结果 :OVX组大鼠的学习记忆能力明显下降 ;大脑皮层和海马部位的胆碱乙酰化转移酶 ( Ch AT)活性显著低下 ;大脑皮层胆碱能 M受体和 N-甲基 -D-天门冬氨酸 ( NMDA)受体结合活性明显降低而单胺氧化酶 B( MAO-B)活性增加。经补充苯甲酸雌二醇 ( EB)或植物雌激素 NH1 9966周后 ,其学习记忆明显改善 ,上述生化指标均接近正常。结论 :推测雌激素和 NH1 996可通过影响中枢胆碱能 ,谷氨酸能和单胺能神经系统的功能参与学习记忆的调节过程     

葛根素对卵巢切除大鼠血清E2、腰椎BMD及骨髓细胞IL-6 mRNA表达的影响

目的 观察葛根素对卵巢切除(去势)大鼠血清E2、腰椎BMD及白细胞介素6(IL-6)mRNA表达水平的影响,探讨葛根素对绝经后骨质疏松的治疗机理.方法 40只健康3月龄雌性SD大鼠,随机分成假手术组、去卵巢(OVX)组、尼尔雌醇组和葛根素组,每组10只.假手术组进行假手术,其余各组通过切除双侧卵巢,术后分别给予尼尔雌醇(0.1 mg/kg体重)和葛根素(0.5 g/kg体重)治疗.3个月后测量腰椎骨密度(BMD),然后处死各组动物,从骨髓细胞中提取总RNA,采用相对半定量逆转录-聚合酶链反应技术检测IL-6 mRNA表达.结果 去势组大鼠血清E2、腰椎BMD值与对照组、尼尔雌醇组和葛根素组比较显著降低(P＜0.05).骨髓细胞白细胞介素6(IL-6)基因表达与对照组、尼尔雌醇组和葛根素组比较显著升高.结论 去势大鼠血清E2和腰椎BMD值显著降低,同时IL-6基因mRNA表达水平显著增高.葛根素可降低IL-6 mRNA表达,提高血清E2和腰椎BMD值.     

雌激素对去卵巢大鼠松质骨中骨保护素mRNA表达的影响

目的 :通过去卵巢大鼠予雌激素后 ,腰椎内OPGmRNA的表达进一步探讨雌激素防治骨质疏松的分子机制。方法 :雌性 3月龄SD大鼠 3 6只 ,随机均分为卵巢切除 +雌激素 (倍美力 )预防组 (EP) ,骨质疏松组 (卵巢切除OVX)及正常对照组 (SHAM ) 3组。术后 12周处死大鼠 ,取第 3腰椎椎体 ,异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,嵌套式反转录聚合酶链反应 (NRT PCR)扩增待检测各组OPGmRNA的表达。同时取第 4腰椎椎体 ,行骨组织形态计量学检测。结果 12例腰椎骨组织中 ,EP组 10例OPGmRNA呈阳性表达 (阳性率 83 .3 % ) ,OVX组 2例呈阳性表达 (阳性率 16.7% ) ,而SHAM组 12例均呈阳性表达。统计学处理 :EP组与OVX组有高度显著性差异 (P <0 .0 1) ,EP组与SHAM组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。骨组织形态计量学检测 ,OVX组骨体积、骨小梁数目均比SHAM组显著减少 ,而骨小梁间隔显著增大。与OVX组比较 ,EP组骨体积、骨小梁厚度增加 ,骨小梁间隔稍有减小 ,无统计学意义。EP对骨小梁数目无明显影响。结论 :雌激素通过增强松质骨中OPGmRNA的表达 ,抑制破骨细胞性骨吸收 ,从而对去卵巢大鼠的骨质疏松有明显的预防作用。     

卵巢切除对SD大鼠骨折骨痂形态的影响

目的研究卵巢切除对SD大鼠骨折骨痂形态的影响。方法雌性SD大鼠56只,随机分为两组,每组28只。实验组大鼠3月龄时切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症模型,另一组行假手术对照。4周后建立双侧股骨骨折模型。分别在骨折前、骨折后6周、16周采用QCT及自动图像分析仪检测两组大鼠骨折区域骨痂情况,指标包括骨痂面积、骨痂组成成分、骨含量、骨密度、骨矿化面积、骨矿化率及骨生成率等。结果卵巢切除导致在不同时期大鼠股骨骨密度均降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。骨折后6周实验组骨生成率、骨痂面积较对照组大,而骨矿化面积、骨矿化率与对照组无显著差异。实验组骨痂成分以编织骨为主,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。骨折后16周实验组骨痂面积及骨痂成分与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);而破骨细胞表面及数量较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,实验组股骨髓腔面积增大,骨皮质面积减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢切除导致的高骨转换可能会加快骨痂改建速度,从而促进骨折愈合。     

雌激素对大鼠骨性关节炎影响的实验研究

目的　了解雌激素水平改变对雌性大鼠骨性关节炎的影响。　方法　 SD大鼠 4 0只 ,采用膝关节制动制作骨性关节炎及同时切除卵巢的方法制作绝经期大鼠模型。实验分为 4组 , 组为正常对照组 ; 组为单纯关节固定组 ; 组为关节固定加卵巢切除组 ; 组在 组基础上同时给予 0 .80 mg/ (kg· d)己烯雌酚 ,连续 4周。 1个月后进行骨性关节炎病理学观察、评分和血清骨钙素检测。　结果　 组 (5 .72± 0 .6 4 )μg/ L血清骨钙素明显高于 组 (3.5 0±0 .39)μg/ L及 组 (3.95± 0 .4 4 )μg/ L。骨性关节炎、关节软骨和滑膜组织病理学评分 组 (10 .83± 4 .35、4 .2 1± 2 .0 3) , 组 (15 .32± 3.4 2、7.6 2± 3.4 2 ) , 组 (12 .6 5± 2 .73、5 .4 6± 1.2 3)。　结论　雌性大鼠切除卵巢可加重骨性关节炎的病理改变 ,而应用己烯雌酚替代后可延缓骨性关节炎的病理过程。雌激素可能在延缓骨性关节炎的发病过程中发挥重要作用。     

荣骨颗粒对卵巢切除后骨质疏松大鼠骨形态计量的影响

目的 探索补肾中药荣骨颗粒对去势大鼠骨质疏松症的防治作用。方法 摘除大鼠双侧卵巢造成骨质疏松症模型，分别灌服大、中、小剂量的荣骨颗粒，并与己烯雌酚和骨疏康组作对照，3个月后，进行骨形态计量测定和分析。结果 大中剂量的荣骨颗粒能使切除卵巢大鼠骨小梁体积百分比显著增高，骨小梁吸收表面百分比、骨小梁形成表面百分比、活性生成表面百分比、骨小梁矿化率、类骨质平均宽度及骨皮质矿化率均明显降低。结论 大、中剂量的荣骨颗粒对卵巢切除后的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用；小剂量荣骨颗粒无明显作用，而大剂量则优于中剂量组的治疗作用。     

雌激素对去势SD雌性大鼠骨折愈合早期骨痂形成影响的实验研究

目的：初步探讨雌激素在雌性ＳＤ大鼠骨折愈合早期的作用及其机制。方法：将ＳＤ大鼠分为Ａ、Ｂ、Ｃ３组,后２组摘除卵巢,２１ｄ后定支点折骨造成动物左胫腓骨闭合骨折,Ｃ组应用雌激素,分别于骨折后１、２、３、５周采取骨痂标本行ＡＫＰ测定,Ｘ线及组织学检查。结果：骨痂形成早期Ｂ组软骨骨痂较另两组稍多,但各组骨痂成熟程度无明显差异,骨痂形成后期Ｂ组骨痂结构疏松,而Ｃ组小梁致密,有编织、板层化趋势。结论：雌激素在ＳＤ大鼠骨痂形成早期轻度抑制软骨骨痂形成,骨痂形成后期有利于小梁骨形成、堆积及向编织骨的转化。     

普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度及血清IL-6的影响

目的 探讨普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度及对血清IL-6水平的影响。方法 50只健康雌性未交配6个月龄SD大鼠随机分为5组,每组10只:①假手术组(sham);②去卵巢(PVX)后雌激素治疗组(O E);③OVX后普萘洛尔治疗组(O p);①OVX后雌激素 普萘洛尔治疗组(O E P);⑤OVX后安慰剂组(OVX);OVX后1周开始经灌胃给予普萘洛尔8 mg·kg-1·d-1、皮下注射17β-雌二醇20μg·kg-1·d-1,共12周。动物处死时留取第3,4,5腰椎、血清标本,进行骨密度分析及血清IL-6水平测定。结果 O P、O E P、O E组的骨密度较手术组(OVX)明显增高(P<0.05),血清IL-6较OVX组明显下降(P<0.01)。结论 普萘洛尔能有效地预防OVX大鼠的骨丢失,同时降低血清IL-6水平。     

氟化物及氟化物加钙对卵巢切除大鼠血清中LPO变化的影响

目的 确定氟化物及钙对卵巢切除大鼠血清脂质过氧化物的影响。方法 64只雄性Wistar大鼠,随机分为卵巢切除组,卵巢切除后单纯喂给氟组及卵巢切除后喂给氟加钙组。喂养6个月后,处死动物,测定血中的脂质过氧化物含量。结果 卵巢切除组血中OPO含量明显高于对照组（P＜0．05）。卵巢切除同时喂给不同剂量的氟及氟加钙组,大鼠血清OPO明显低于单纯卵巢切除组（P＜0．01）。卵巢切除同时投给不同剂量的氟与卵巢切除同时投给不同剂量的氟加钙组比较大鼠血清LPO改变不明显（P＞0．05）。结论 卵巢切除骨质疏松大鼠血中LPO明显增高,加入不同剂量的氟及钙后改善了去势大鼠的脂质过氧化程度。     

他莫西芬对去卵巢骨质疏松大鼠影响的实验研究

目的 探讨选择性雌激素受体调节剂他莫西芬对去卵巢造成的骨质疏松大鼠性激素及骨密度的影响。方法 通过切除大鼠卵巢造成骨质疏松模型,观察他莫西芬对骨质疏松大鼠血清雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、泌乳素（PRL）、乳酮（PROG）、皮质醇（COR）、睾酮（T）及骨密度 （BMD）的影响,并与尼尔雌醇（nilestrial）做阳性对照。结果 他莫西芬治疗的去卵巢骨质疏松大鼠血清E2水平高于病理对照组（P＜0．05）,LH水平低于病理对照组（P＜0．05）,左侧后腿股骨胫骨及平均骨密度均高于模型组（P＜0．01,P＜0．1,P＜0．05）。结论 他莫西芬能提高去卵巢骨质疏松大鼠骨密度,其作用机制可能与其拟雌激素样作用有关。     

加味补肾壮筋汤颗粒剂对去卵巢骨质疏松大鼠血清NO、SOD及MDA的影响

目的探讨去卵巢骨质疏松大鼠血清中NO、SOD、MDA的变化及中药加味补肾壮筋汤颗粒剂对其的影响。方法选用6月龄清洁级Wistar雌性大鼠45只,随机分为正常对照组、模型组和中药组,每组15只。模型组和中药组行双侧卵巢切除术,术后正常对照组及模型组分别给予生理盐水67ml·kg-1·d-1,中药组给予加味补肾壮筋汤颗粒混悬液67ml·kg-1·d-1,分别于造模前及造模后3个月进行血清NO、SOD、MDA含量的测定。结果造模后3个月模型组血清中NO和SOD含量明显低于正常对照组,MDA含量明显高于正常对照组,且差异有统计学意义(P<005);而使用加味补肾壮筋汤颗粒剂3个月后血清中NO和SOD的含量明显升高,MDA含量明显降低,且差异与模型组比较有统计学意义(P<005)。结论血清中NO、SOD、MDA可能参与了绝经后骨质疏松症的病理进程,而加味补肾壮筋汤颗粒剂可以调节血清中NO、SOD、MDA含量,这可能是其防治骨质疏松症的机制之一。     

大豆异黄酮减缓去卵巢大鼠骨量丢失的实验研究

目的研究大豆异黄酮对雌激素缺失状态下大鼠骨量丢失及骨转换的影响。方法 12月龄雌性SD大鼠40只随机分为4组,除假手术组大鼠行卵巢切除假手术外,其余均切除卵巢建立雌激素缺失模型。分组设计为:实验组[大豆异黄酮类40 mg／(kg．d)]及元素钙250 mg／(kg·d), 假手术组[蒸馏水)、实验对照组[元素钙250 mg／(kg·d)]及雌激素组[雌二醇30μg／100(g· 3d)及元素钙250mg／(kg·d)],除雌二醇皮下注射给予外,其余灌胃给予。28 d实验期满后处死大鼠,取股骨测定骨密度、股骨钙含量、股骨形态计量学相关指标,并测定血清碱性磷酸酶 (AKP)活性及血清骨钙素(OC)水平。结果实验组股骨骨密度、股骨钙含量稍高于假手术组和实验对照组,但未呈显著性差异(P>0．05);实验组骨小梁面积与假手术组无显著差异(P> 0．05);各组动物AKP活性无显著差异(P>0．05):实验组和雌激素组OC水平显著高于假手术组 (P<0．01)。结论大豆异黄酮具有弱雌激素样作用,可能通过促进成骨形成而减少雌激素缺失状态下的骨丢失,维持骨健康,预防绝经后骨质疏松。