鸡胚绒毛膜尿囊膜试验应用于抗菌洗液类产品毒性初筛研究

目的通过观察抗茵洗液类产品对鸡胚绒毛膜尿囊膜（CAM）的毒性作用,探讨鸡胚绒毛膜尿囊膜试验方法（HET—CAM）用于该类产品初筛的可行性。方法采用HET—CAM和家兔阴道黏膜试验方法（动物试验）,分别对18种抗茵洗液类产品进行检测,分析2种方法试验结果的相关性和一致性。结果分别采用2种方法对18种抗茵洗液类产品进行检测,结果显示HET—CAM分级结果中有13个结果与动物试验结果一致,灵敏度为100．00％（6／6）,特异度为58．33％（7／12）,阳性预测值为54．55％（6／11）,阴性预测值为100．00％（7／7）,分级相关性为Gamma=1．000（P〈0．01）,一致性为Kappa=0．483（P〈0．05）,ROC曲线下面积A=0．896,Std=0．076,P=0．008。结论HET．CAM对受试物的刺激性分级与家兔阴道黏膜试验具有较好的相关性和一致性,适合用于抗茵洗液类产品的初筛。     

离体兔眼试验在检测农药眼刺激性方面的初步研究

目的探讨离体兔眼（IRE）试验作为兔眼刺激性试验（Draize test）检测农药眼刺激性的替代方法的适用性。方法选取29种市售农药进行离体兔眼试验,并同步按照GB15670—1995《农药登记毒理学试验方法》进行兔眼刺激性试验,对试验结果进行相关性和一致性分析。结果 IRE试验检测农药眼刺激性分级结果与Draize试验分级结果的差别无统计学意义（McNemar-BowkerW=3.33,P〉0.05）;Gamma=0.98（P〈0.01）,Kappa=0.68（P〈0.01）,显示2种试验方法之间的一致性较好;相关系数为0.86（P〈0.01）,显示两者之间的相关性较好。结论 IRE试验检测农药眼刺激性的分级结果与Draize试验分级结果的相关性和一致性较好I,RE试验可作为筛选无/轻刺激性农药的替代方法,是一种比较有潜力的眼刺激替代试验方法。     

荧光素漏出试验替代整体兔眼刺激试验的初步研究

目的：探讨荧光素漏出试验（FLT）替代整体动物眼刺激试验（Draize eye irritation test，Draize test）的可能性。方法：用FLT对26种阳性参考物和20种化妆品产品进行检测并分级，化妆品产品同步进行Draizetest，比较分析两种方法受试物刺激性分级结果的等级和分级一致性。结果：对于所检测26种阳性参考物和20种化妆品的刺激性分级，FLT与Draize test之间具有较高的一致性（kappa值分别为0．827和0．571，P均〈0．001）。结论：FLT是一种有效的Draizetest体外替代方法，具有良好的应用价值。     

红细胞溶血试验作为眼刺激性替代方法的初步研究

目的探讨红细胞溶血试验在化妆品原料和产品眼刺激性检测中的适用性。方法选择已知动物实验眼刺激性分级的23种化学品原料和12个洗发、护发类化妆品产品作为受试物,确定受试物引起绵羊红细胞50%发生溶血时的受试物浓度(LC50值)和血红蛋白变性指数(DI,%),计算L/D值(LC50/DI),以L/D值作为评价标准,进行眼刺激性分级。将红细胞溶血试验刺激性分级结果与动物实验结果进行分级一致性比较,初步分析体外试验的适用性。结果红细胞溶血试验对23种化妆品原料的分级结果与动物实验的分级一致性系数为0.582,而当化妆品原料不包括酸、碱及难溶于水的物质时,一致性系数为0.803。红细胞溶血试验对化妆品的分级结果与动物实验结果具有等级相关性(γ=1.000,P0.001)及分级一致性(κ=0.733,P0.001)。结论与Draize试验比较,红细胞溶血试验具有较好的预测能力,除了酸类、碱类以及难溶性受试物,作为严重眼刺激性化妆品原料和产品评价的筛选方法具有良好的应用价值。     

红细胞溶血实验替代兔眼刺激性实验检测农药眼刺激性初步研究

目的 探讨红细胞溶血实验(Red blood cell test,PBC)检测农药眼刺激性的适用分级标准和作为兔眼刺激性实验(Draize test)替代方法的适用性.方法 选取29种市售农药进行RBC实验,并同步进行Draize实验.根据2种分级标准,将RBC实验结果与Draize实验进行相关性和一致性分析.结果 按化妆品原料分级标准,区分无/轻刺激性和中度及以上眼刺激性农药的结果为:McNemar-Bowker W=9.35(P=0.22);Kappa=0.55(P=0.002);Spearman R=0.58(P=0.001);按化妆品产品分级标准,区分无/微刺激性和轻度及以上眼刺激性农药的结果为:McNemar-Bowker W=10.40(P-0.02);Kappa=0.54(P=0.001);Spearman R=0.61(P＜0.001).结论 RBC实验可参照化妆品原料分级标准检测农药眼刺激性;尚不能完全替代Draizc实验,但可作为筛检农药眼刺激性的替代方法纳入到农药眼刺激性检测策略中.     

化妆品原料眼刺激性替代方法分层筛选模型的建立

目的建立化妆品原料眼刺激性的体外替代方法分层筛选模型。方法应用鸡胚绒毛膜尿囊膜试验(HET-CAM)、鸡胚绒毛膜尿囊膜-台盼蓝染色试验(CAM-TBS)、中性红摄取试验(NRU)、红细胞溶血试验(RBCH)、荧光素漏出试验(FLT)及离体兔眼试验(IRET)6种体外替代方法对30种化妆品原料的眼刺激性进行检测,将检测结果与Draize试验结果进行比对(指标为灵敏度、特异度和ROC曲线下面积),根据6种替代方法分别在区分有无刺激性、有无腐蚀性两个级别的效能设计、建立分层筛选模型,并对模型进行评价。结果 6种方法区分有无刺激性的效能为NRUHET-CAMIRETCAM-TBSRBCH,区分有无腐蚀性的效能为IRETFLTRBCHNRUHET-CAMCAM-TBS。本研究建立并评价的4种模型中,以NRU(第一层)和FLT(第二层)组成的分层筛选模型具有最好的检测效能[Mc Nemar-Bowker检验,W=3.0(P=0.392),Gamma=0.85(P0.001),Kappa=0.76(P0.001),分级一致率为83.3%]。结论鉴于由NRU和FLT组成的分层筛选模型与Draize试验分级结果比较具有很高的相关性和分级一致性,检测效能明显优于单一替代方法,因此更适合检测化妆品原料的眼刺激性。     

溶血试验作为眼刺激试验替代方法的研究

目的：使用溶血试验作为体内眼刺激试验（Draize test)的一种替代方法。方法：用该方法对14种化学物的眼刺激性进行检测，得到指标HC50值，与Draize test两种评分标准，即最大平均值（MAS）和24h作用值的结果进行相关性比较。结果：LogHC50与MAS和24h作用值的相关系数分别是0．955和0．944，MAS与结膜评分相关显著。结论：溶血试验可用于替代Draize眼刺激试验。     

化妆品及原料眼刺激性STE法评价

目的探讨兔角膜上皮细胞体外短时暴露试验方法(STE)用于化妆品原料及化妆品产品动物眼刺激试验替代的可行性及其适用范围。方法选择经济合作与发展组织(OECD)数据库中能涵盖无刺激性到重度眼刺激性的18种代表性化学物质以及20种市售化妆品产品,同时进行STE试验和兔眼刺激试验,通过Kappa分析比较2种试验方法结果的一致性。结果对于化妆品原料,经Kappa一致性检验,k=0.826,2种试验结果几乎完全一致(0.81～1.00)。对于化妆品产品,经Kappa一致性检验,k=0.370,2种方法分级结果一致性一般(0.21～0.40)。对于清洁类产品,经Kappa一致性检验,k=–0.333,2种方法分级结果一致性极低(0.20),对于护肤类产品,k=0.796,2种方法的分级结果有高度的一致性(0.61～0.80)。结论 STE试验适合于预测化妆品原料眼刺激性的分级标识。对于化妆品产品来说,面膜、眼霜和护发素等护肤类产品,预测效果好;清洁类产品和染发剂,假阳性率高,不太适用。     

3T3中性红摄取试验评价皮肤刺激性的初步研究

目的:建立BALB/c-3T3中性红摄取细胞毒性试验并初步探讨其在化妆品原料皮肤刺激毒性评价中的适用性。方法:运用22种已知皮肤刺激性的化妆品原料进行BALB/c-3T3中性红摄取细胞毒性试验,根据判断标准划分皮肤刺激性等级,并与体内试验结果进行比较,分析3T3-中性红摄取细胞毒性实验的预测能力和重现性。结果:3T3-NRU细胞毒性试验与动物实验结果比较呈现较好的等级相关性及分级一致性;三次重复试验分析结果显示体外试验结果间的差别无统计学意义(χ2=0.245,P=0.984),Spearman等级相关系数rs=0.914,P<0.001;说明3T3-NRU细胞毒性试验具有良好的可重复性和稳定性。结论:与Draize试验比较,3T3-NRU试验对参照化学物质具有较好的预测能力和重复性,作为皮肤刺激性化妆品原料评价的筛选方法可进行进一步研究。     

溶血试验用于评价隐形眼镜护理液眼刺激性的可行性研究

目的：探索溶血试验替代体内眼刺激性试验（Draize试验）用于评价隐形眼镜护理液眼刺激性的可行性。方法：采用Draize试验及溶血试验（hemolysis test）对10种不同品牌的隐形眼镜护理液进行评价,分析溶血试验结果的LogHC50（LogHC50为50%红细胞溶血的受试物的浓度）与Draize试验结果的相关性。评价其特异性（%）和准确性（%）。结论：溶血试验结果与Draize体内试验结果特异性为100%,准确性为100%。     

鸡胚尿囊绒膜试验检测化妆品的刺激性

目的研究鸡胚尿囊绒膜-苔盼蓝吸收(CAM-TB)试验作为体内眼刺激试验(Draize test)的替代方法检测化妆品产品时眼刺激性的可行性.方法用该方法对17种化妆品的刺激性进行检测,与Draize test的结果进行比较,作相关性分析.结果 CAM-TB与Draize test的相关系数为0.937?5.结论 CAM-TB试验可作为Draize test眼刺激试验的一种替代方法,用于评价化妆品对眼刺激性.     

溴脱氧尿嘧啶核苷掺入法作为皮肤致敏试验替代方法研究

目的 探讨应用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)示踪和酶联免疫吸附测定(ELISA)的局部淋巴结试验(LLNA:Br-dU-ELISA法)替代LLNA(放射法)作为皮肤变态反应试验替代方法的可行性.方法 雌性BALB/c小鼠随机分组,每组4只.选择27种受试物进行测试,每种受试物视情况设3～4个剂量组和1个溶剂时照组.将受试物连续3d涂抹于小鼠双耳背,第5天腹腔注射BrdU标记液,第6天摘取小鼠耳部淋巴结,制备淋巴细胞悬液,采用ELISA技术测定BrdU掺入细胞的水平.选择3种受试物进行3次重复性试验以了解结果的重现性;将27种受试物的LLNA:BrdU-ELISA法与文献报告的LLNA(放射法)结果比较,分析方法的致敏性判别能力及分级结果的一致性和相关性.结果 LLNA:Br-dU-ELISA法结果重现性较好(F=2.890,P＞0.05);与LLNA(放射法)相比,该方法对27种化学物的致敏性判别能力较好(灵敏度= 95.00%,特异度=85.71%,符合率=92.59%),致敏性分级结果有较好的一致性和相关性(Kappa=0.575,Gamma=0.959).结论 LLNA:BrdU-ELISA法可作为皮肤变态反应试验的替代方法应用于化学物皮肤致敏性评价.     

离体兔眼试验在检测农药眼刺激性方面的初步研究

目的 探讨离体兔眼(IRE)试验作为兔眼刺激性试验(Draize test)检测农药眼刺激性的替代方法的适用性.方法 选取29种市售农药进行离体兔眼试验,并同步按照GB15670-1995<农药登记毒理学试验方法>进行兔眼刺激性试验,对试验结果进行相关性和一致性分析.结果 IRE试验检测农药眼刺激性分级结果与Draiz...     

麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验试剂的比较和评价

目的对目前中国市场上已有的两种麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）试剂（德国Virion／Serion试剂和德国IBL试剂）进行比较和评价,筛选适用于2006年全国人群麻疹血清流行病学调查的试剂。方法以蚀斑减少中和试验（Plague Reduction Neutralization Test,PRNT）的检测结果为“金标准”,分别用两种ELISA试剂检测52份麻疹IgG抗体组合血清,然后对试剂的定性和定量能力进行全面分析和评价。结果两种ELISA试剂均能正确的将13份PRNT结果为阴性的血清判定为阴性,特异度均为100％。两种试剂中,Virion／Serion试剂的敏感度为94．9％,与PRNT结果的相关性Kappa值为0．902,相关系数为0．878（P〈0．01）;IBL试剂敏感性为58．8％,与PRNT结果的相关性Kappa值为0．441,相关性系数为0．850（P〈0．01）。结论Virion／Serion试剂的特异性、敏感性较好,有单孔IgG抗体定量能力,价格适中,适于在自动化工作平台工作站中开展大规模血清样本的检测。     

应用细胞方法建立表面活性剂眼刺激性分层筛选模型

目的建立表面活性剂眼刺激性测试的体外细胞方法分层筛选模型。方法应用中性红摄取试验(NRU)、红细胞溶血试验(RBCH)及荧光素漏出试验(FLT)3种体外细胞方法对20种表面活性剂的眼刺激性进行检测,将检测结果代入4种分层筛选模型(FLT+NRU、FLT+RBCH、RBCH+NRU、NRU+RBCH),所得到的分级结果与Draize试验结果进行比较(指标为Gamma系数、Mc Nemar-Bowker系数、Kappa系数和分级一致率),以此来评价4种分层筛选模型对表面活性剂的检测效能。结果本研究建立的4种分层筛选模型(FLT+NRU、FLT+RBCH、RBCH+NRU、NRU+RBCH)与Draize试验分级结果进行比较,分级一致率分别为90.0%、80.0%、80.0%、65.0%,Kappa值分别为0.84、0.68、0.69、0.47(均P0.01),Gamma值分别为1.00、1.00、0.93、0.88(均P0.01)。结论以FLT(第1层)和NRU(第2层)组成的分层筛选模型较其他3种模型具有较好的检测效能,更适合应用于对表面活性剂的眼刺激性检测。     

6分钟步行试验评定心衰患者心功能

目的探讨6分钟步行试验（6MWT）对老年慢性心力衰竭（CHF）患者心功能的评价及其临床应用价值。方法54例CHF患者随机分为常规治疗组（n=29）和卡维地洛组（n=25），治疗前后进行步行试验及心功能分级的评定，监测白细胞介素6（IL-6）、去甲肾上腺素（NE）、心指数（CI）和左室射血分数（LVEF）。结果心功能Ⅳ级患者较Ⅲ级患者、Ⅳ级患者较Ⅱ级患者步行距离均明显下降（P〈0．01），而Ⅲ级与Ⅱ级患者之间步行距离的差异无显著性意义（P〉0．05）；卡维地洛组6分钟步行距离治疗前后差异有显著性意义（P〈0．01），而治疗组差异无显著性意义（P〉0．05），并且步行距离与IL-6、NE呈显著负相关（P〈0．05），与LVEF和CI呈正相关（P〈0．05）。结论6MWT操作简单、易行、安全，结果可靠，可作为心衰患者心功能评估的方法，尤其适用于老年患者。     

慢性乙型肝炎患者HBV前S1抗原与HBV-M和HBV-DNA的相关性分析

目的了解慢性乙型肝炎患者HBV前S1抗原（preS1-Ag）与HBVM、HBV—DNA之间的相关性，探讨preS1-Ag检测的临床意义。方法用ELISA法对568份慢性乙型肝炎患者血清进行HBV标志物及preS1-Ag检测，同时采用荧光定量PCR法检测HBV—DNA。结果在HBsAg阴性血清中，preS1-Ag检测结果均为阴性；在HBsAg阳性血清中，HBeAg阳性时preS1-Ag的阳性率为84．6％，HBeAg阴性时preS1-Ag的阳性率为43．4％，两者之间差异具有显著性（Y。=95．3，P〈0．01）；HBV—DNA与preS1-Ag一致性比较Kappa=0．697，一致性较好；HBV-DNA与libeAg一致性比较KaPPa=0．345，一致性较差。结论preS1-Ag与HBeAg和HBVDNA结果有较好的相关性，同时preS1-Ag与HBVDNA结果的一致性优于HBeAg，preS1-Ag检测可作为判断HBV感染与复制的一项血清学标志物。     

2型糖尿病胰岛素释放试验与糖耐量试验结果对比

目的通过对胰岛素释放试验与糖耐量试验对比分析，了解2型糖尿病（DM）病人糖代谢和胰岛功能情况，探讨对2型DM早期诊断的临床意义。方法对来内蒙古医学院附属人民医院就诊的50例DM患者及20例正常对照者行馒头餐，采用磁性分离酶联免疫（MAIA）法测定血清胰岛素，同步测定糖耐量（氧化酶法），依据糖耐量测定结果分3组：糖耐量正常对照组（NGT），糖耐量减低组（IGT），2型DM组（DM）；分别将各点胰岛素和血糖的结果进行比较。结果2型DM组的空腹血糖、胰岛素明显高于NGT组，血糖、胰岛素在餐后一二小时出现峰值，餐后3h仍不能恢复至空腹水平，NGT组的血糖和胰岛素在餐后0．5—1．0h出现峰值，2组在0、0．5、1、2、3h各点的血糖和胰岛素差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；IGT组的空腹血糖和胰岛素与NGT组差异无统计学意义（P〉0．05），但是2组在餐后1、2、3h的血糖和胰岛素差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论采用MAIA法测定胰岛素释放试验和氧化酶法测定糖耐量，可以及时了解2型DM病人糖代谢和胰岛功能情况，对早期诊断和治疗有重要的临床意义。     

鸡胚绒毛尿囊膜血管试验在化妆品安全性评价中的应用研究

目的 将鸡胚绒毛尿囊膜血管试验（CAMVA）与家兔眼刺激试验进行比较,探讨在化妆品安全性评价中的应用。方法 将11种化妆品原料和8种化妆产品分别进行鸡胚绒毛尿囊膜血管试验和家兔眼刺激试验,结果进行分析比较。结果 CAMVA试验分级标准和动物试验评级标准具有较高的等级相关性和一致性。结论 CAMVA是一种较好的体外眼刺激替代方法,但需和其他体外试验组合评价更加可靠。     

儿童慢性乙型肝炎病毒携带者T细胞亚群的研究

目的研究儿童慢性乙型肝炎病毒（HBV）携带者（ASC）的T细胞亚群状态。方法设对照组（n=32）及ASC组（n=104），ASC组中又分别根据HBV—DNA及HBeAg的定性分为HBV—DNA阳性组（n=62）及阴性组（n=42）和HBeAg阳性组（n=56）及阴性组（n=48）。血清HBV标志物和HBV-DNA分别经酶联免疫吸附试验（EUSA）和基因扩增技术聚合酶链反应（PCR）法检测，T细胞亚群采用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸（APAAP）免疫组化染色法检测。结果ASC组CD3、CD4、CD4/CD8明显低于对照组（P〈0．05或〈0．01），CD8明显高于对照组（P〈0．01）；其中HBV—DNA阳性组CD．、CDJCD8明显低于HBV—DNA阴性组（P〈0．05或〈0．01），CD8明显高于HBV—DNA阴性组（P〈0．01）；HBeAg阳性组的CD4、CD4/CD8较HBeAg阴性组明显降低（P〈0．05或〈0．01）；CD8明显升高（P〈0．01）。结论儿童ASC存在T细胞亚群功能紊乱，尤其以HBV—DNA阳性及HBeAg阳性者为著。