离体兔眼试验在检测农药眼刺激性方面的初步研究

目的 探讨离体兔眼(IRE)试验作为兔眼刺激性试验(Draize test)检测农药眼刺激性的替代方法的适用性.方法 选取29种市售农药进行离体兔眼试验,并同步按照GB15670-1995<农药登记毒理学试验方法>进行兔眼刺激性试验,对试验结果进行相关性和一致性分析.结果 IRE试验检测农药眼刺激性分级结果与Draiz...     

鸡胚尿囊膜苔盼蓝染色试验替代兔眼刺激试验的研究

目的评价鸡胚尿囊膜苔盼蓝染色试验（CAM—TBS）替代动物眼刺激试验（Draizetest）的可行性。方法在本实验室建立CAM—TBS试验方法，对已知刺激性分级的26种化学物质和未知刺激性分级的20种化妆品产品进行刺激性测评，化妆品检验样品同步进行Draize试验，然后将2种试验的分级结果进行比较，以分析判断2种方法分级结果的相关性和一致性。结果对所选的26种化学物质及其因不同受试浓度而形成的36个刺激性分级，CAM—TBS与Draize试验有32个分级结果一致，两者间等级相关性为Gamma=0．990（P〈0．01），分级一致性为Kappa=0．833（P〈0．01）：而对于20种化妆品产品，CAM—TBS刺激性分级结果有18个与Draize试验结果一致，两者间等级相关性为Gamma=0．957（P〈0．05），分级一致性为Kappa=0．688（P〈0．01）。结论CAM—TBS对受试物眼刺激性的分级与Draize试验具有较好的一致性，具有替代Draize试验的应用价值。     

红细胞溶血实验替代兔眼刺激性实验检测农药眼刺激性初步研究

目的 探讨红细胞溶血实验(Red blood cell test,PBC)检测农药眼刺激性的适用分级标准和作为兔眼刺激性实验(Draize test)替代方法的适用性.方法 选取29种市售农药进行RBC实验,并同步进行Draize实验.根据2种分级标准,将RBC实验结果与Draize实验进行相关性和一致性分析.结果 按化妆品原料分级标准,区分无/轻刺激性和中度及以上眼刺激性农药的结果为:McNemar-Bowker W=9.35(P=0.22);Kappa=0.55(P=0.002);Spearman R=0.58(P=0.001);按化妆品产品分级标准,区分无/微刺激性和轻度及以上眼刺激性农药的结果为:McNemar-Bowker W=10.40(P-0.02);Kappa=0.54(P=0.001);Spearman R=0.61(P＜0.001).结论 RBC实验可参照化妆品原料分级标准检测农药眼刺激性;尚不能完全替代Draizc实验,但可作为筛检农药眼刺激性的替代方法纳入到农药眼刺激性检测策略中.     

荧光素漏出试验替代整体兔眼刺激试验的初步研究

目的：探讨荧光素漏出试验（FLT）替代整体动物眼刺激试验（Draize eye irritation test，Draize test）的可能性。方法：用FLT对26种阳性参考物和20种化妆品产品进行检测并分级，化妆品产品同步进行Draizetest，比较分析两种方法受试物刺激性分级结果的等级和分级一致性。结果：对于所检测26种阳性参考物和20种化妆品的刺激性分级，FLT与Draize test之间具有较高的一致性（kappa值分别为0．827和0．571，P均〈0．001）。结论：FLT是一种有效的Draizetest体外替代方法，具有良好的应用价值。     

化妆品原料眼刺激性替代方法分层筛选模型的建立

目的建立化妆品原料眼刺激性的体外替代方法分层筛选模型。方法应用鸡胚绒毛膜尿囊膜试验(HET-CAM)、鸡胚绒毛膜尿囊膜-台盼蓝染色试验(CAM-TBS)、中性红摄取试验(NRU)、红细胞溶血试验(RBCH)、荧光素漏出试验(FLT)及离体兔眼试验(IRET)6种体外替代方法对30种化妆品原料的眼刺激性进行检测,将检测结果与Draize试验结果进行比对(指标为灵敏度、特异度和ROC曲线下面积),根据6种替代方法分别在区分有无刺激性、有无腐蚀性两个级别的效能设计、建立分层筛选模型,并对模型进行评价。结果 6种方法区分有无刺激性的效能为NRUHET-CAMIRETCAM-TBSRBCH,区分有无腐蚀性的效能为IRETFLTRBCHNRUHET-CAMCAM-TBS。本研究建立并评价的4种模型中,以NRU(第一层)和FLT(第二层)组成的分层筛选模型具有最好的检测效能[Mc Nemar-Bowker检验,W=3.0(P=0.392),Gamma=0.85(P0.001),Kappa=0.76(P0.001),分级一致率为83.3%]。结论鉴于由NRU和FLT组成的分层筛选模型与Draize试验分级结果比较具有很高的相关性和分级一致性,检测效能明显优于单一替代方法,因此更适合检测化妆品原料的眼刺激性。     

溶血试验作为眼刺激试验替代方法的研究

目的：使用溶血试验作为体内眼刺激试验（Draize test)的一种替代方法。方法：用该方法对14种化学物的眼刺激性进行检测，得到指标HC50值，与Draize test两种评分标准，即最大平均值（MAS）和24h作用值的结果进行相关性比较。结果：LogHC50与MAS和24h作用值的相关系数分别是0．955和0．944，MAS与结膜评分相关显著。结论：溶血试验可用于替代Draize眼刺激试验。     

溶血试验用于评价隐形眼镜护理液眼刺激性的可行性研究

目的：探索溶血试验替代体内眼刺激性试验（Draize试验）用于评价隐形眼镜护理液眼刺激性的可行性。方法：采用Draize试验及溶血试验（hemolysis test）对10种不同品牌的隐形眼镜护理液进行评价,分析溶血试验结果的LogHC50（LogHC50为50%红细胞溶血的受试物的浓度）与Draize试验结果的相关性。评价其特异性（%）和准确性（%）。结论：溶血试验结果与Draize体内试验结果特异性为100%,准确性为100%。     

鸡胚尿囊绒膜试验检测化妆品的刺激性

目的研究鸡胚尿囊绒膜-苔盼蓝吸收(CAM-TB)试验作为体内眼刺激试验(Draize test)的替代方法检测化妆品产品时眼刺激性的可行性.方法用该方法对17种化妆品的刺激性进行检测,与Draize test的结果进行比较,作相关性分析.结果 CAM-TB与Draize test的相关系数为0.937?5.结论 CAM-TB试验可作为Draize test眼刺激试验的一种替代方法,用于评价化妆品对眼刺激性.     

红细胞溶血试验作为眼刺激性替代方法的初步研究

目的探讨红细胞溶血试验在化妆品原料和产品眼刺激性检测中的适用性。方法选择已知动物实验眼刺激性分级的23种化学品原料和12个洗发、护发类化妆品产品作为受试物,确定受试物引起绵羊红细胞50%发生溶血时的受试物浓度(LC50值)和血红蛋白变性指数(DI,%),计算L/D值(LC50/DI),以L/D值作为评价标准,进行眼刺激性分级。将红细胞溶血试验刺激性分级结果与动物实验结果进行分级一致性比较,初步分析体外试验的适用性。结果红细胞溶血试验对23种化妆品原料的分级结果与动物实验的分级一致性系数为0.582,而当化妆品原料不包括酸、碱及难溶于水的物质时,一致性系数为0.803。红细胞溶血试验对化妆品的分级结果与动物实验结果具有等级相关性(γ=1.000,P0.001)及分级一致性(κ=0.733,P0.001)。结论与Draize试验比较,红细胞溶血试验具有较好的预测能力,除了酸类、碱类以及难溶性受试物,作为严重眼刺激性化妆品原料和产品评价的筛选方法具有良好的应用价值。     

荧光素漏出试验检测化妆品眼刺激性的初步验证

目的初步验证荧光素漏出试验(FLT)替代家兔眼刺激试验用于化妆品行政许可检验的可行性。方法用荧光素漏出试验对20份化妆品进行检测,以受试物处理后4h所引起荧光素漏出20%时受试物浓度(FL20H4)作为刺激分级标准,与《化妆品卫生规范》(2007年版)中家兔眼刺激试验分级标准进行相关性比较。结果 FLT能有效筛选出重度刺激物,FLT分级与规范要求做30s冲洗产品的家兔眼刺激试验分级有较好的一致性,两者间校正Spearman等级相关系数rs为0.694(P<0.05),Pearsonχ2值为16.343(P<0.01);对规范要求做4s冲洗的染发剂类产品,FLT法中仅20mg/mL FL20H4值与兔眼刺激试验结果有一定的相关性。结论荧光素漏出试验有望成为我国现行化妆品行政许可检验体外替代方法之一。     

农药常用有机溶剂的眼刺激性实验研究

目的 探讨农药常用有机溶剂对兔眼刺激性.方法 分别取受试物0.1 ml滴眼,于给药后1、24、48、72 h和4、7、14、21 d观察兔眼部刺激症状,据GB 15670-1995<农药登记毒理学试验方法>对眼损伤进行评分及分级.结果 有机溶剂对兔眼有刺激性,二甲苯、醋酸丁酯为无刺激性,苯、甲苯为轻度刺激性,乙醇、乙酸乙酯为轻度至中度刺激性,甲醇、异丙醇、正丁醇、丙酮为中度刺激性.结论 多数农药常用有机溶剂对兔眼有不同程度刺激性.     

化妆品及原料眼刺激性STE法评价

目的探讨兔角膜上皮细胞体外短时暴露试验方法(STE)用于化妆品原料及化妆品产品动物眼刺激试验替代的可行性及其适用范围。方法选择经济合作与发展组织(OECD)数据库中能涵盖无刺激性到重度眼刺激性的18种代表性化学物质以及20种市售化妆品产品,同时进行STE试验和兔眼刺激试验,通过Kappa分析比较2种试验方法结果的一致性。结果对于化妆品原料,经Kappa一致性检验,k=0.826,2种试验结果几乎完全一致(0.81～1.00)。对于化妆品产品,经Kappa一致性检验,k=0.370,2种方法分级结果一致性一般(0.21～0.40)。对于清洁类产品,经Kappa一致性检验,k=–0.333,2种方法分级结果一致性极低(0.20),对于护肤类产品,k=0.796,2种方法的分级结果有高度的一致性(0.61～0.80)。结论 STE试验适合于预测化妆品原料眼刺激性的分级标识。对于化妆品产品来说,面膜、眼霜和护发素等护肤类产品,预测效果好;清洁类产品和染发剂,假阳性率高,不太适用。     

眼刺激试验方法标准化的探讨——一种新眼液的兔眼刺激试验

采用Draize法结合摄相及组织学检查,对治疗用0.4%新眼液进行兔眼刺激试验。以改进的急性眼刺激试验方法对不同浓度的滴眼溶液作眼刺激毒性评价。对各种影响因素进行了研讨。本结果为眼刺激试验方法标准化提供了科学依据。提出筛选不同浓度眼用药物配方和检查错误配方的新方法。     

化学杀虫剂的眼刺激性试验研究

目的研究分析有机磷等杀虫剂的急性眼刺激性。方法分别取受试物0．1ml滴眼,于给药后1、24、48、72h和4、7、14、21d观察兔眼部刺激症状,依据GB15670—1995（农药登记毒理学试验方法》对眼损伤进行评分及分级。结果232个不同类型杀虫剂,除沙蚕毒素类为无刺激性外,70％以上杀虫剂样品对兔眼有不同程度刺激性;其中53％样品为中度以上刺激性,26％样品引起的眼刺激性症状观察至21d仍未恢复。结论多数化学杀虫剂对兔眼有不同程度刺激性,杀虫剂为乳油时刺激性最重,为水剂、可湿性粉剂、悬浮剂时刺激性轻。     

应用细胞方法建立表面活性剂眼刺激性分层筛选模型

目的建立表面活性剂眼刺激性测试的体外细胞方法分层筛选模型。方法应用中性红摄取试验(NRU)、红细胞溶血试验(RBCH)及荧光素漏出试验(FLT)3种体外细胞方法对20种表面活性剂的眼刺激性进行检测,将检测结果代入4种分层筛选模型(FLT+NRU、FLT+RBCH、RBCH+NRU、NRU+RBCH),所得到的分级结果与Draize试验结果进行比较(指标为Gamma系数、Mc Nemar-Bowker系数、Kappa系数和分级一致率),以此来评价4种分层筛选模型对表面活性剂的检测效能。结果本研究建立的4种分层筛选模型(FLT+NRU、FLT+RBCH、RBCH+NRU、NRU+RBCH)与Draize试验分级结果进行比较,分级一致率分别为90.0%、80.0%、80.0%、65.0%,Kappa值分别为0.84、0.68、0.69、0.47(均P0.01),Gamma值分别为1.00、1.00、0.93、0.88(均P0.01)。结论以FLT(第1层)和NRU(第2层)组成的分层筛选模型较其他3种模型具有较好的检测效能,更适合应用于对表面活性剂的眼刺激性检测。     

鸡胚绒毛尿囊膜血管试验在化妆品安全性评价中的应用研究

目的 将鸡胚绒毛尿囊膜血管试验（CAMVA）与家兔眼刺激试验进行比较,探讨在化妆品安全性评价中的应用。方法 将11种化妆品原料和8种化妆产品分别进行鸡胚绒毛尿囊膜血管试验和家兔眼刺激试验,结果进行分析比较。结果 CAMVA试验分级标准和动物试验评级标准具有较高的等级相关性和一致性。结论 CAMVA是一种较好的体外眼刺激替代方法,但需和其他体外试验组合评价更加可靠。     

鸡胚绒毛膜尿囊膜试验应用于抗菌洗液类产品毒性初筛研究

目的通过观察抗茵洗液类产品对鸡胚绒毛膜尿囊膜（CAM）的毒性作用,探讨鸡胚绒毛膜尿囊膜试验方法（HET—CAM）用于该类产品初筛的可行性。方法采用HET—CAM和家兔阴道黏膜试验方法（动物试验）,分别对18种抗茵洗液类产品进行检测,分析2种方法试验结果的相关性和一致性。结果分别采用2种方法对18种抗茵洗液类产品进行检测,结果显示HET—CAM分级结果中有13个结果与动物试验结果一致,灵敏度为100．00％（6／6）,特异度为58．33％（7／12）,阳性预测值为54．55％（6／11）,阴性预测值为100．00％（7／7）,分级相关性为Gamma=1．000（P〈0．01）,一致性为Kappa=0．483（P〈0．05）,ROC曲线下面积A=0．896,Std=0．076,P=0．008。结论HET．CAM对受试物的刺激性分级与家兔阴道黏膜试验具有较好的相关性和一致性,适合用于抗茵洗液类产品的初筛。     

眼刺激试验的替代方法及应用策略研究进展

兔的眼刺激性试验(draize test)是毒理学安全性评价的常规测试方法之一,由于其存在评分系统主观、实验室间变异性、动物外推至人的种属差异等缺点,加之近年来随着“3Rs”原则的广泛兴起,许多国家开展了有关兔眼刺激性试验的替代性研究与评价。但是目前尚没有任何一种方法可以作为替代动物眼刺激性试验的充分试验依据,为了减少试验中使用动物的数量,通过若干个离体试验的同步联合或逐步检测方法的应用有望增强替代方法检测的有效性。     

化妆品的皮肤和眼刺激性试验结果比较分析

目的:了解具有刺激性化妆品的类型分布特点,比较皮肤和眼刺激性试验的敏感性,并分析这两项试验结果的相关性。方法:应用动物试验对140份化妆品样品的皮肤和眼刺激性进行检验,比较和分析试验结果。结果:在140份样品中,对皮肤具有轻刺激性和中刺激性的样品分别占10.7%和5.7%;对眼有轻刺激性、刺激性和腐蚀性的样品分别占11.4%、4.3%和2.9%。对皮肤和眼刺激性最强的化妆品类型是洗发类,其次是沐浴类,再次是护发类、面膜类和洗面类,护肤类刺激性最弱。眼刺激性试验比皮肤刺激性试验敏感性高(Z=-6.67,P0.01),两种试验结果之间存在较弱的正相关性(r=0.414)。结论:洗发类是对皮肤和眼具有较强刺激性的化妆品类型,一般眼刺激性试验比皮肤刺激性试验敏感性高,两项试验的结果之间存在较弱的正相关性。     

农药眼刺激强度影响因素初步探讨

目的 探讨农药眼刺激强度的影响因素.方法 选择阿维菌素、氟氯氰菊酯和啶虫脒等10种农药活性成分,乳油、微乳剂和水乳剂等12种剂型,共61个农药制剂样品进行眼刺激试验,将其眼刺激强度和损伤类型分类,比较农药活性成分、浓度和剂型对眼刺激强度与损伤类型的影响,比较不同剂型间角膜损伤率的差异.结果 阿维菌素乳油、吡虫啉悬浮剂和代森锰锌可湿性粉剂的浓度与眼刺激强度间未见明确的相关性.4种不同剂型的高效氯氰菊酯制剂的眼刺激强弱顺序大致为乳油＞水乳剂、微乳剂＞悬浮剂.乳油样品的角膜损伤率为60.0％(6/10),非乳油样品的角膜损伤率约为7.3 ％(3/41),差异有统计学意义(x2=1 1.942,P＜0.05).结论 本研究纳入的样品中,剂型对眼刺激强度的影响最大,其中尤以乳油制剂的眼刺激性最强.