JAK/STAT信号通路在变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中的表达及意义

目的探讨JAK/STAT信号通路在大鼠变应性鼻炎(AR)鼻黏膜中的表达,探讨其在变应性鼻炎中的作用。方法 40只大鼠分为两组:对照组和变应性鼻炎组。变应性鼻炎组采用二异氰酸甲苯酯(TDI)制作大鼠实验性AR模型;对照组则给予TDI溶剂醋酸乙酯滴鼻。取两组大鼠下鼻甲组织,利用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测JAK1、JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达,利用Western blot检测p-JAK1、p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3蛋白表达。结果q-PCR结果显示,变应性鼻炎组JAK1、JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达均显著高于对照组(P0.05);Western blot结果显示,变应性鼻炎组p-JAK1、p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3蛋白表达均显著高于对照组(P0.05)。结论变应性鼻炎发生后JAK/STAT信号通路被激活,可能是变应性鼻炎治疗的靶点。     

丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄高血压大鼠JAK/STAT通路的影响

目的:观察丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄高血压大鼠心肌肥厚的作用,并研究其对左心室肌JAK/STAT通路的影响。方法:取32只9周龄SD大鼠,环扎其腹主动脉,制成高血压大鼠模型;术后4周将手术大鼠分为心肌肥厚组,丹参酮高、低剂量组和缬沙坦组。另取8只行假手术(假手术组)。测量大鼠的尾动脉收缩压(SBP)、室间隔厚度(IVS)及左室重量指数(LVMI),采用Western blot方法测定各组大鼠JAK1和STAT3的表达。结果:与假手术组相比,心肌肥厚组的SBP、IVS、LVMI以及JAK1、STAT3的表达均明显升高。丹参酮高、低剂量组上述指标(除SBP外)均较心肌肥厚组明显降低。结论:JAK、STAT的表达在心肌肥厚的信号通路中起着重要的作用。丹参酮ⅡA有可能是通过干预JAK/STAT通路而逆转左室肥厚。     

秦艽对佐剂性关节炎大鼠JAK2/STAT3信号通路的调控作用

目的:研究秦艽醇提物抑制佐剂性关节炎(adjuvantinduced arthritis,AA)大鼠及阻断Janus激酶2-信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的可能机制。方法:雄性,SD大鼠,48只,随机分为6组,每组8只。除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导AA大鼠模型。致炎第12天后,各组给予相应药物,每日1次,连续16d,处死,对大鼠体质量进行监测,并对大鼠进行关节评分;HE染色,对固定部位踝关节进行病理学观察;酶联免疫吸附实验(ELISA)法测SD大鼠血清中IL-6、IL-10和TNF-α的含量;Western blot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)的相对蛋白表达。结果:与模型组相比,秦艽醇提物(2.5、5、10g/kg)组不仅可减轻大鼠关节病理损伤程度,减少血管翳生成,减轻组织增生,还可明显抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达。结论:秦艽醇提物对AA大鼠具有较好的抑制作用,可能通过抑制JAK2及STAT3过度激活磷酸化,即抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白相对表达水平,进而阻断JAK2/STAT3信号转导通路有关。     

MiR-467b调控JAK/STAT信号通路在脂多糖诱导ATDC5细胞增殖及炎症反应中的作用

目的:探讨miR-467b调控JAK/STAT信号通路在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导ATDC5细胞增殖及炎症反应中的作用。方法:将ATDC5细胞分为4组:对照组、LPS组、NC mimics组、miR-467b mimics组。于转染培养48 h后收集细胞并进行后续实验:采用ELISA检测各组细胞TNF-α、IL-1β水平;采用qRT-PCR法检测各组细胞miR-467b的表达水平;采用MTT法检测各组细胞的增殖能力;采用蛋白质印迹和qRT-PCR法检测各组细胞JAK/STAT信号通路相关基因的蛋白质及mRNA表达水平。结果:与对照组相比,LPS组和NC mimics组ATDC5细胞TNF-α、IL-1β的表达水平均显著升高、miR-467b的表达水平显著降低(P<0.05);MTT实验结果表明:LPS组在24、48、72 h的吸光度值显著降低(P<0.05)。蛋白质印迹结果发现:与对照组相比,LPS组和NC mimics组ATDC5细胞STAT1、STAT3、JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达水平及STAT1、STAT3、JAK2 mRNA表达水平均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与NC mimics组相比,miR-467b mimics组TNF-α、IL-1β的表达水平均显著降低而miR-467b的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-467b后,细胞在24、48、72 h的吸光度值显著升高(P<0.05),而STAT1、STAT3、JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达水平及STAT1、STAT3、JAK2 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:LPS刺激ATDC5细胞后可通过激活JAK/STAT3信号通路引起细胞炎性损伤,过表达miR-467b后可抑制JAK/STAT3信号通路的活化,降低ATDC5细胞的炎症水平。     

慢性ITP患者外周血T淋巴细胞JAK2/STAT3 mRNA的表达及意义

目的:检测慢性特发性血小板减少性紫癜(chronic idiopathic thrombocytopenic purpura, CITP)患者外周血T细胞中JAK2/STAT3 mRNA信号转导通路的基因表达,探讨JAK2/STAT3 mRNA变化与CITP之间的相关性。方法:设立CITP患者组与健康对照组,用RT-PCR、琼脂糖电泳等方法检测CITP组及对照组外周血T细胞中JAK2/STAT3 mRNA基因的表达水平。结果:经PCR及RT-PCR实验证实,JAK2/STAT3 mRNA表达有清晰条带,熔解曲线峰值单一,CITP组JAK2mRNA表达水平明显高于对照组(P 0.0004);STAT3 m RNA表达水平也明显高于对照组(P 0.0001);这表明CITP患者的JAK2/STAT3 mRNA表达水平明显升高。结论:CITP组中JAK2/STAT3mRNA均有表达,且与对照组相比明显升高,其升高与患儿CITP发生有关。     

针灸对阿尔茨海默病大鼠的治疗作用及相关信号通路研究

目的 研究针灸对阿尔茨海默病大鼠的治疗作用及相关信号通路。方法 取40只SD大鼠,随机分为对照组(正常大鼠,不处理)、假手术组(大鼠双侧海马CA1区注射等量生理盐水)、模型组(建立阿尔茨海默病模型)、干预组(建立阿尔茨海默病模型+针灸),每组各10只。取各组大鼠脑组织,经苏木精-伊红染色行病理学检查;比较各组大鼠脑皮层区Janus激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)和炎性细胞因子白细胞介素1 (IL-1)、白细胞介素6(IL-6)阳性细胞数比率;采用免疫印迹法检测大鼠脑皮层区JAK2和STAT3蛋白表达情况。结果 病理学检查提示,模型组和干预组大鼠均出现不同程度的病理改变,且干预组的病理损伤程度明显轻于模型组。模型组、干预组大鼠脑皮层区JAK2、STAT3、IL-1和IL-6阳性细胞数比率较对照组、假手术组均明显升高(P <0. 01);干预组大鼠脑皮层区JAK2、STAT3、IL-1和IL-6阳性细胞数比率较模型组明显下降(P <0. 01)。免疫印迹法检测可知,相比对照组、假手术组,模型组、干预组大鼠脑皮层区JAK2和STAT3蛋白表达水平均明显升高(P <0. 01);相比模型组,干预组大鼠脑皮层区JAK2和STAT3蛋白表达水平均明显下降(P <0. 01)。结论 针灸治疗可有效减轻阿尔茨海默病大鼠脑损伤,其原因可能在于针灸治疗可下调JAK2和STAT3蛋白表达,阻滞JAK2/STAT3信号通路的异常活化,抑制炎性细胞因子的表达,从而可抑制慢性炎症反应的进展,减轻病情程度,起到良好的治疗作用。     

丹参酮ⅡA对压力超负荷大鼠心肌肥厚的抑制作用及机制研究

目的 观察丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinone ⅡA sulfonate,TSN) 对腹主动脉缩窄高血压大鼠肥厚心肌的作用以及对细胞内游离钙离子浓度、Janus激酶及其信号转导子和激活子(JAK/STAT)的影响.方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,随机分为心肌肥厚组(n=8)、丹参酮ⅡA组(n=8)和缬沙坦组(n=8);另取8只行假手术.用药8周后通过超声心动图测定左室后壁、室间隔的厚度;测量大鼠的尾动脉收缩压(SBP)和左室质量指数(LVMI);HE染色检测心肌细胞的直径(MDF);激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离Ca2+浓度的变化;Western blot方法测定各组大鼠JAK1和STAT3的表达.结果 ①TSN对血压没有影响,显著高于假手术组和缬沙坦组(P<0.01).②TSN组和缬沙坦组的左室后壁、室间隔厚度、LVMI、MFD虽然高于假手术组(P<0.05),却显著低于手术组(P<0.01).③TSN与缬沙坦均可显著降低肥厚心肌的[Ca2+]i,丹参酮对[Ca2+]i 的影响显著超过缬沙坦(P<0.05).④与假手术组相比,肥厚心肌的JAK1和STAT3蛋白表达显著升高(P﹤0.05);丹参酮ⅡA、缬沙坦均可显著降低肥厚心肌JAK1和STAT3的蛋白水平.结论 JAK/STAT的表达在心肌肥厚的信号通路中起着重要的作用;丹参酮ⅡA可能是通过降低心肌细胞[Ca2+]i浓度、阻滞JAK/STAT信号通路的转导,起到抑制心肌肥厚的作用.     

腹腔感染性脓毒症可溶性髓样细胞触发受体(sTREM-1)与Janus激酶-信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)通路的关系

目的 通过动物脓毒症模型探讨可溶性髓样细胞触发受体(sTREM-1)与Janus激酶-信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)通路的关系.方法 采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制作大鼠脓毒症模型,大鼠随机(随机数字法)分为正常对照组(n=6)、假手术组(n=24)、CLP组(n=48)、JAK 2抑制剂(AG 490)组(n=48)和STAT3抑制剂(雷帕霉素,RPM)组(n=48).留取外周血行流式细胞仪分析CD4+ CD25+ Treg细胞/CD4+T细胞比值.采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)测定肝组织sTREM-1 mRNA表达水平.结果 CLP后6h肝sTREM-1 mRNA表达即高于对照组和假手术组,且随时间变化逐渐升高.AG490组肝组织sTREM-1 mRNA的表达在术后6h、24 h(1.572±0.051,2.063±0.025)较同时间点CLP组(1.592±0.036,2.082±0.021)差异无统计学意义(P＜0.05),而在48 h和72 h AG490组肝组织sTREM-1 mRNA的表达(2.522±0.083,3.153±0.021)低于同时间点CLP组(2.592±0.055,3.204±0.013) (P＜0.05).术后6 h RPM组肝组织sTREM-1mRNA的表达(1.581±0.017)较CLP组差异无统计学意义(P＜0.05),而在术后24、48、72 h RPM组肝组织sTREM-1 mRNA的表达(1.486±0.019,1.263±0.011,1.115±0.022)显著低于同时间点CLP组肝组织sTREM-1 mRNA的表达(P＜0.05).结论 sTREM-1因子与JAK/STAT通路有关,阻断JAK/STAT通路能够抑制sTREM-1 mRNA的表达,减缓脓毒症炎症反应的进展.     

Janus激酶/信号转导和转录激活因子3对重症急性胰腺炎大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的体外作用研究

目的 探讨Janus激酶/信号转导和转录激活因子3(JAK/STAT3)信号转导通路在重症急性胰腺炎(SAP)肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用.方法 用牛磺胆酸钠建立SAP大鼠模型,取血清备用.将经原代培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞随机分组,对照组加入不含SAP大鼠血清的Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)培养液;SAP组加入含SAP大鼠血清的DMEM培养液;SAP+AG490组用JAK激酶抑制剂AG490预处理细胞,加入含SAP大鼠血清的DMEM培养液.用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测STAT3活化状态;逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测蛋白水平;流式细胞技术检测肺泡表面活性物质相关蛋白C(SP-C)表达和肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡.结果 与对照组比较,SAP组STAT3活性增强,STAT3 mRNA和蛋白表达均增强,SP-C蛋白表达下降(2 h SP-C荧光指数0.69±0.02比1.02±0.03,P＜0.01),肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡增加[(11.55±1.10)%比(5.30±0.36)%,P＜0.053;与SAP组比较,SAP+AG490组STAT3活性减弱,STAT3 mRNA和蛋白表达减弱,SP-C蛋白表达下降(2 h SP-C荧光指数0.48±0.10比0.69±0.02,P＜0.01),肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡增加[(13.92±0.82)%比(11.55±1.10)%,P＜0.053.结论 提示JAK/STAT3信号转导通路参与了SAP肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的病理生理过程.     

毒素清对肺炎痰热证大鼠肺组织Janus激酶/信号转导和转录激活因子信号通路的影响

目的 观察肺炎痰热证大鼠肺组织Janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)转导通路,探讨毒素清治疗肺炎痰热证的作用机制.方法 将Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组、肺炎组、肺炎痰热证组、阳性对照组、毒素清组,每组12只.制备细菌性肺炎痰热证大鼠模型,采用免疫组化法测定肺组织p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3、细胞信号转导抑制蛋白3(SOCS3)表达,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织SOCS3 mRNA表达.结果 与正常组比较,肺炎组、肺炎痰热证组肺组织p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3、SOCS3蛋白及SOCS3 mRNA表达均显著升高(均P<0.01),且肺炎痰热证组较肺炎组升高明显(均P<0.05).与肺炎痰热证组相比,毒素清组、阳性对照组肺组织p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3蛋白表达明显减弱(均P<0.01),SOCS3蛋白及mRNA表达明显增强(均P<0.01),其中,毒素清组肺组织p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3蛋白表达较阳性对照组减弱尤为明显(均P<0.05).结论 JAK/STAT信号转导通路参与了肺炎痰热证肺组织的病理损伤过程;毒素清治疗肺炎痰热证的作用机制可能与上调SOCS3,阻断JAK/STAT信号通路,继而减少炎症因子的释放有关.     

雷帕霉素抑制JAK/STAT通路对大鼠梗阻性黄疸肝肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨雷帕霉素抑制JAK/STAT信号通路在大鼠梗阻性黄疸中对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法采用胆总管结扎方法建立大鼠梗阻性黄疸模型,将54只SD大鼠随机分为假手术组(A组)18只,梗阻性黄疸+STAT抑制剂雷帕霉素处理组(B组)18只,梗阻性黄疸组(C组)18只,A、B、C三组分别于术后1、3、5d处死大鼠,每个时间段6只。监测各时间段大鼠肝功能酶学变化,Westernblot法检测受试样品TNF-α蛋白表达,RT-PCR测各组不同时间段TNF-αmRNA的表达。结果与假手术组比较,两梗阻性黄疸组肝功能酶学差异显著,TNF-α蛋白及基因表达升高明显,与雷帕霉素干预组比较,梗阻性黄疸组TNF-α蛋白及基因表达升高明显,有统计学差异(P<0.01)。结论雷帕霉素可能通过抑制JAK/STAT信号转导通路降低梗阻性黄疸大鼠TNF-α表达,减少对肝细胞的损伤,对肝脏起到一定的保护作用。     

白术内酯Ⅰ能诱导U266细胞凋亡和增强硼替佐米的作用

目的:探讨白术内酯Ⅰ对U266细胞增殖和凋亡的作用及其对硼替佐米抗多发性骨髓瘤的作用。方法:分别将不同浓度的白术内酯Ⅰ、硼替佐米以及硼替佐米+白术内酯Ⅰ作用于U266细胞,并应用CCK-8法检测细胞增殖活性,Annexin V-FITC/PI染色及流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,应用RT-PCR及Western blot分别检测目标基因Caspase-3、Caspase-9、BCL-2、BAX、JAK2、STAT3及IL-6的mRNA及相应蛋白的表达。结果:白术内酯Ⅰ能呈浓度依赖性抑制U266细胞的增殖(r=-0.98)和促进细胞凋亡(r=0.99),调控线粒体介导的凋亡途径;联合用药能显著增强对细胞增殖的抑制作用(P0.01);同时,单药组及联合用药组均能显著降低IL-6、JAK2、STAT3及BCL-2 mRNA及蛋白表达水平(P0.01)。结论:白术内酯Ⅰ能显著抑制U266细胞增殖,促进其凋亡,并能与硼替佐米产生协同作用,此作用与线粒体凋亡途径有关,可能与调节JAK2/STAT3通路上的IL-6、JAK2、STAT3等基因表达有关。     

氟伐他汀对高糖状态下肾小球系膜细胞JAK/STAT信号蛋白表达的影响

目的 观察氟伐他汀对体外培养的肾小球系膜细胞信号蛋白Janus酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导和转录活化因子1(STAT1)、STAT3表达的影响.方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和氟伐他汀干预.采用免疫沉淀和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测JAK2磷酸化表达;Westernblotting检测信号蛋白JAK2、STAT1、p-STAT1、STAT3和p-STAT3的表达;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中TGF-β1和纤维连接蛋白(FN)的含量.结果 与低糖组比较,高糖组肾小球系膜细胞p-JAK2(802±124比204±31)、p-STAT1(2 856.6±337.8比617.7±76.2)和P-STAT3(3 049.8±421.3比946.7±141.2)表达均明显增强;上清液中TGF-β1[(2.87±0.34)μg/L比(1.20±0.11)μg/L]和FN((6.34±0.61)mg/L比(3.24±0.26)mg/L]的含量均增高,TGF-β1 mRNA表达增加(P均＜0.01).与高糖组比较.高糖+氟伐他汀组p-JAK2(412±67)、p-STAT1(1 178.4±137.1)和p-STAT3(1 572.6±181.2)表达均明显下调,TGF-β1[(1.94±0.27)μg/L]和FN[(4.27±0.33)mg/L]含量减少,同时TGF-β1 mRNA表达降低(P均＜0.05).结论 高糖能激活肾小球系膜细胞JAK/STAT信号途径,氟伐他汀抑制肾小球系膜细胞TGF-β1和FN的分泌可能部分是通过影响JAK/STAT信号通路的激活而实现的.     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白JAK2和STAT3表达的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白Janus酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）与信号转导子和转录激活子3（STAT3）表达的影响。方法雄性Wistar大鼠60只，随机分为正常对照组、糖尿病组和氯沙坦治疗组。腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱发糖尿病大鼠模型，每日灌胃氯沙坦10mg／kg。采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测肾小球细胞JAK2、STAT3和磷酸化STAT3（P-STAT3）蛋白的表达。免疫沉淀和Western blot检测磷酸化JAK2（p-JAK2）情况，逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测肾小球细胞JAK2和STAT3 mRNA的表达。结果在2周和4周时，糖尿病组较对照组肾小球JAK2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白及其JAK2和STAT3mRNA表达明显增强（P均〈0．01）。氯沙坦治疗组较糖尿病组P-JAK2和P-STAT3表达降低（P〈0．05）。氯沙坦对JAK2和STAT3蛋白及其mRNA的表达无明显影响。结论JAK2和STAT3信号蛋白可能参与了糖尿病早期肾脏的发病过程，氯沙坦对肾脏保护作用可能部分是通过影响JAK／STAT信号途径的激活而实现的。     

饱和氢盐水对心肌缺血再灌注损伤大鼠冠状动脉内皮细胞功能的影响

目的探讨饱和氢盐水对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌内皮细胞功能的影响。方法选取健康清洁级雄性SD大鼠150只,体重400~540 g。采用随机数字表法将其分为5组(n=30):空白对照组(Ⅰ组)、假手术组(Ⅱ组)、缺血再灌注组(Ⅲ组)、饱和氢盐水治疗组(Ⅳ组)、生理盐水治疗组(Ⅴ组)。Ⅰ组不做任何处理;Ⅱ组大鼠仅穿线不结扎;Ⅲ组制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型;Ⅳ组于再灌注前5 min给予1 ml/100 g腹腔注射饱和氢生理盐水;Ⅴ组于再灌注前5 min给予1 ml/100 g腹腔注射等量生理盐水。于再灌注12 h、24 h后取左心室心肌组织HE染色观察心肌病理学,同时采用电镜观察冠状动脉内皮细胞。采用蛋白质印迹法检测内皮细胞蛋白激酶B(Akt)、内皮型NO合成的限速酶(e NOS)、微血管内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)。结果与Ⅰ组、Ⅱ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组大鼠缺血再灌注12 h、24 h时内皮细胞Akt、e NOS、ICAM-1和VCAM-1表达水平升高。与Ⅲ组、Ⅴ组比较,Ⅳ组大鼠缺血再灌注12 h、24 h时内皮细胞Akt、e NOS、ICAM-1和VCAM-1表达水平降低。结论饱和氢盐水可改善冠状动脉内皮细胞功能,从而减轻心肌再灌注损伤,其机制可能与抑制Akt/e NOS信号通路,降低ICAM-1、VCAM-1蛋白表达有关。     

电针刺激头部运动区对脑瘫大鼠脑损伤及JAK2/STAT3信号通路的影响

目的观察电针刺激头部运动区对脑瘫大鼠脑损伤及JAK2/STAT3信号通路的影响。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及电针刺激组, 每组10只大鼠。将模型组及电针刺激组大鼠制成脑瘫动物模型, 假手术组大鼠术中不结扎左颈总动脉。于造模后24 h及21 d时采用BBB运动功能评分评价各组大鼠运动功能情况, 并于造模后21 d时处死各组大鼠并提取脑组织。采用苏木素-伊红染色观察各组大鼠脑皮质病理学改变;采用荧光定量PCR法检测凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)mRNA表达水平;采用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)及氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量;采用Western blot法检测JAK2、STAT3、p-JAK2及p-STAT3表达水平。结果造模后21 d时模型组大鼠BBB运动功能评分、脑组织中Bcl-2 mRNA表达、SOD、T-AOC含量均显著低于假手术组水平(P...     

六味补气胶囊对COPD模型大鼠JAK/STAT通路及炎性反应的影响及相关机制研究

目的探讨六味补气胶囊对COPD模型大鼠JAK/STAT通路及炎性反应的影响及相关的分子机制。方法体外构建大鼠COPD模型,45只大鼠随机分为3组,对照组,模型组和实验组,每组15只。对照组只灌胃处理等量0.9%氯化钠溶液。模型组利用香烟暴露法制作大鼠COPD模型,灌胃处理等量0.9%氯化钠溶液。实验组在造模成功后采用六味补气胶囊对COPD模型大鼠进行灌胃治疗2周。利用Western blot法检测JAK2/p-JAK2和STAT3/pSTAT3的蛋白表达,利用ELISA法检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和干扰素γ(IFN-γ)水平,以及化学定量法检测基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-12水平。结果 Western blot结果显示,与对照组比较,模型组大鼠JAK2/p-JAK2和STAT3/p-STAT3的蛋白表达显著提高,与模型组比较,六味补气胶囊显著抑制COPD模型大鼠JAK2/p-JAK2和STAT3/p-STAT3的蛋白表达(P0.05);ELISA结果显示,与对照组比较,模型组大鼠TNF-α、IL-1β、IL-6以及IFN-γ水平显著提高,六味补气胶囊显著下调COPD模型大鼠TNF-α、IL-1β、IL-6以及IFN-γ水平(P0.05);化学定量法检测结果显示,与对照组比较,模型大鼠MMP-9、MMP-12水平显著提高,而六味补气胶囊显著下调COPD模型大鼠MMP-9、MMP-12水平(P0.05)。结论六味补气胶囊能显著抑制COPD大鼠炎症反应,其分子机制可能与抑制JAK/STAT通路相关。     

雷帕霉素软膏对银屑病小鼠模型的治疗作用及相关机制研究

目的探讨雷帕霉素(RAP)软膏对寻常型银屑病(PSO)小鼠皮肤的影响及相关机制。方法45只BALB/c小鼠分为3组:空白对照组、模型组和实验组,每组15只。模型组和实验组利用5%咪喹莫特乳膏建立银屑病小鼠动物模型,空白对照组不建模。实验组建模后连续给药0.1%雷帕霉素软膏涂抹14 d,其余两组给予生理盐水湿润皮肤,每日3次/d,连续涂抹14 d。三组小鼠于15 d检测血清细胞因子干扰素γ(IFN-γ),白介素4(IL-4)的表达;实时荧光定量PCR(q-PCR)检测酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、信号转导与转录因子1(STAT1)和信号转导与转录因子3(STAT3)mRNA表达;Western blotting检测磷酸化p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组血清细胞因子IFN-γ含量上调(P<0.05),用药后实验组血清中细胞因子IFN-γ水平明显低于模型组(P<0.05),IL-4水平三组比较差异无统计学意义(P>0.05);q-PCR显示,与空白对照组比较,模型组皮损区JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达显著升高(P<0.05),用药后实验组JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达显著低于模型组(P<0.05);Western blotting显示,与空白对照组比较,模型组皮损区皮损区p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达显著升高(P<0.05),实验组p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达显著低于模型组(P<0.05)。结论雷帕霉素可通过抑制JAK/STAT信号通路降低银屑病小鼠炎性因子表达,从而对银屑病小鼠起保护作用。