Radiolabeling of Anti-human Prostatic Specific Membrane Antigen Antibody with 99Tcm and its Biodistribution in Nude Mice Bearing Human Prostate Cancer

目的 研究99Tcm-抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体(J591)对前列腺癌细胞体外结合性能、在荷人前列腺癌裸鼠体内生物分布.方法 用改进的Schwarz方法进行99Tcm标记,经Sephadex G-50柱分离纯化;用纸层析法和三氯醋酸法测定标记率与放化纯;用流式细胞术测定抗体与肿瘤细胞在体外的结合性能;PSMA阳性的C4-2前列腺癌裸鼠为实验组,PSMA阴性的PC3前列腺癌裸鼠为对照组,裸鼠静脉注射7.5 MBq(25μg/只)99Tcm-J591,分别于2、6、12及24h测定体内放射性分布,计算每克组织百分注射剂量率(％ ID/g)及T/NT比值.结果 表明99Tcm - J591标记率为(78.9±6.2)％,放化纯＞90％.J591与99Tcm - J591在体外能结合PSMA阳性的C4-2细胞,与PSMA阴性的PC3细胞不结合,显示出J591具有良好的特异性.生物分布实验显示:实验组裸鼠肿瘤部位出现99Tcm浓聚,对照组则没有.肿瘤组织百分注射剂量率(％ ID/g)在12h达高峰,为(15.91±5.16)％ID/g,与对照组(3.22±1.33)％ID/g相比差异有统计学意义(P＜0.05),其余组织和器官的百分注射剂量率在两组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 J591具有良好的免疫活性和对前列腺癌的靶向定位性能,可望用于前列腺癌的导向诊断及导向治疗.     

99mTc(V)-DMSA骨显像诊断细菌性骨关节炎动物模型实验研究

目的利用骨关节炎症动物模型观察99mTc(V)-DMSA的生物分布和在骨关节炎症区域的代谢特点.方法在制作骨关节炎症动物模型的基础上,经在体显像及其感兴趣区技术计算器官和炎症关节的放射性活度的变化,同时也利用动物模型离体的测量器官或组织的百分注射量,分析99mTc(V)-DMSA在各器官和骨关节炎症区域的代谢特点.结果骨关节炎症区域对99mTc(V)-DMSA有较高的摄取,骨关节炎症的患/健比值高峰出现在注射示踪剂后的2小时～6小时之间:百分注射量靶/非靶比值分别为2.353±0.465和3.196±0.461(%ID/g);在体显像患/健比值分别为2.593±0.343和2.882±0.525(%).99mTc(V)-DMSA主要经泌尿系统排出,其在肠道系统有聚集并不影响四肢骨病灶的观察.结论 99mTc(V)-DMSA有较低和较稳定的蛋白结合率,是急性骨关节炎症良好的显像剂,其最佳显像时间为在注射99mTc(V)-DMSA后的2～3小时之间.     

99mTc-反义寡聚核苷酸DNA肿瘤显像的实验研究

拟探讨放射性标记反义寡聚核苷酸(Antisense oligonucleotide,ASON)DNA在荷瘤裸鼠体内显像的可行性。采用两种不同肿瘤细胞系KB-G2和KB-31,并肿瘤内注射的方法;设立ASON的对照正义寡聚核苷酸(Sense oligonucleotide,SON);用聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定所用经MAG3偶联的寡聚核苷酸的杂交活性;完成99mTc-MAG3-ASON和99mTc-MAG3-SON DNA肿瘤内注射后在荷瘤裸鼠体内的显像及其生物分布研究。经MAG3偶联的寡聚核苷酸与天然寡聚核苷酸具有相同的杂交活性。在荷KB-G2瘤裸鼠肿瘤内,99mTc-MAG3-ASON DNA的分布明显高于其对照99mTc-MAG3-SON DNA的分布(14.7vs8.5%ID/g)。但在荷KB-31瘤裸鼠肿瘤内,两者的分布无显著性差异(8.6vs4.3%ID/g)。全身显像显示99mTc-MAG3-ASON DNA较其对照正义DNA寡聚核苷酸在荷KB-G2瘤裸鼠肿瘤内的靶向分布增高,但在荷KB-31瘤裸鼠肿瘤内的靶向分布则未见显著性差异。结果表明:99mTc-MAG3-ASON DNA较其对照正义DNA寡聚核苷酸在荷瘤裸鼠肿瘤内的分布有显著性统计学差异,本研究证实了活体动物体内肿瘤反义显像的可行性。     

IGF-IA~（99）Tc~m标记及其在正常裸鼠体内放射性分布

目的：建立99Tcm标记胰岛素样生长因子I类似物（IGF-IA）的方法,观察其在正常裸鼠体内的生物学分布。方法：SnCl2.2H2O浓度0.75g～4g/L,IGF-IA的用量（20～100）μg,Tween80的用量从（0～10）μl,淋洗液的体积从（20～200）μl,在0.25h～6h不同时间点测定标记率及其在体外的稳定性。将标记物经正常裸鼠尾静脉注射,于5min、30min、1h、2h、4h取血液及主要脏器测量其放射性计数率值。结果：99Tcm标记IGF-IA的最佳标记方法为：浓盐酸溶解SnCl2.2H2O后用葡萄糖酸钠溶液配成3g/L,吸取100μl后加入40μlIGF-IA（2g/L）;300μlNa3PO4和2μl0.1%Tween80混匀后加入50μl99TcmO4-新鲜淋洗液;在IGF-IA体系中加入淋洗液体系,混匀,室温下反应0.5h;加入500μlNaH2PO4将pH值调节到7左右,99Tcm-IGF-IA最高标记率为（94.43±0.75）%,室温下放置6h标记率为（85.57±2.81）%。99Tcm-IGF-IA在正常裸鼠体内主要分布于肾脏和肝脏。结论：预锡化法进行99Tcm标记IGF-IA方法简捷且具有较高标记率和良好稳定性。99Tcm-IGF-IA在正常裸鼠体内主要被肾脏和肝脏摄取,血液清除快。     

microPET-CT显像监测叶酸受体靶向放射性药物药代动力学的实验研究

目的制备叶酸受体靶向的~(68)Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸-赖氨酸-叶酸(~(68)Ga-DOTA-lysFA),用小动物正电子发射计算机体层摄影术(microPET)-CT动态显像考察其间质给药后体内药代动力学。方法合成~(68)Ga-DOTA-lys-FA,考察其理化特性。用人卵巢癌细胞(SKOV3)和人肺癌细胞(A549)测定受体结合实验。荷人卵巢癌细胞裸鼠模型33只,雌性,体质量18~20 g,鼠龄8~10周;瘤体直径0.6~0.8 cm;荷人肺癌细胞裸鼠模型4只,雌性,体质量18~20 g,鼠龄8~10周。通过尾静脉注射~(68)Ga-DOTA-lys-FA后不同时间点处死荷瘤鼠,解剖分离重要脏器称质量和用γ计数仪进行放射性测定,分析其体内生物学分布。抽签法随机分为~(68)Ga-DOTA-lys-FA尾静脉注射组(Ⅳ组)、肿瘤间质注射组(IT组),荷人肺癌细胞模型(A549)作为阴性对照组(ITC组),在给药后不同时间点行microPET-CT显像,勾画肿瘤及脏器感兴趣区并计算其放射性摄取(%ID和%ID/cm~3),对比分析~(68)Ga-DOTA-lys-FA给药后不同时间体内生物学分布。结果 ~(68)Ga-DOTA-lys-FA标记率为(97.80±2.11)%。3 h内体外稳定性好,尾静脉注射后microPET-CT获得的60 min肿瘤/肺部放射性摄取比值为5.36±1.03,明显高于生物学分布结果 (4.13±1.25,t=4.97,P=0.001)。基于microPET-CT定量,IT组60 min、180 min肿瘤放射摄取量分别为(125.60±18.40)%ID/cm~3、(91.80±14.50)%ID/cm~3,明显高于ITC组[(42.30±11.46)%ID/cm~3、(12.82±3.86)%ID/cm~3](P0.001、0.001),也明显高于IV组。结论 ~(68)Ga-DOTAlys-FA microPET-CT动态显像可更有效评价其体内生物学分布,瘤内注射可明显增加其瘤内生物半减期,为治疗性核素标记叶酸靶向治疗提供数据支持。     

新型~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7靶向肿瘤血管Anxa1分子探针的制备及SPECT显像

目的制备针对肿瘤血管表面受体Annexin A1(Anxa1)分子探针~(99m)Tc-二乙三胺五乙酸(DTPA)-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-精氨酸-天冬氨酸-天冬酰胺(GGGRDN)-异亮氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-亮氨酸-色氨酸-谷氨酰胺-精氨酸(IFLLWQR,IF7),进行体外肿瘤细胞(人脑星形胶质细胞瘤U87细胞)实验;探讨~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7在荷瘤小鼠体内的生物学分布规律,并利用单光子发射计算机体层摄像术(SPECT)进行显像研究。方法将100μg DTPA-GGGRDN-IF7溶于10μL二甲基亚砜(DMSO)中,充入氮气保护。加入10μL 1 mg/mL氯化亚锡(SnCl2)溶液(pH 4.0),再加入约111 MBq(3 mCi)Na~(99m)TcO_4,37℃水浴反应30 min,经C_(18)柱淋洗后制备~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7。取样注入分析型高效液相色谱(HPLC)仪分析~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7的放射化学纯度及体外血清稳定性。将U87细胞与~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7共同孵育后,测定放射性计数并计算摄取率。取30只4～5周龄18～20 g荷瘤裸鼠,建立U87荷瘤裸鼠模型,进行~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7的体内分布实验及SPECT显像。结果 ~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7标记产率大于95%,放射化学纯度大于95%。在大鼠血清中37℃保温2 h后性状稳定,放射化学纯度大于92.3%。U87细胞在体外对~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7摄取在60 min时达峰值(6.85%±0.97%),过量的GGGRDN-IF7可以明显降低细胞的摄取。体内分布实验结果显示,药物均在血浆清除较快,肝肾摄取高,主要从肝肾排泄。SPECT显像结果表明,肿瘤部位呈明显放射性浓聚态,注射2 h后肿瘤对~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7摄取值为(3.56±0.44)%ID/g。结论 ~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7合成简便,放射化学纯度高,易于推广;U87细胞对~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7具有较强亲和力;SPECT显像表明肿瘤明显浓聚~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7,体内生物分布理想,靶向性强,有望用于肿瘤显像。     

^99mTc（V）-DMSA骨显像诊断细菌性骨关节炎动物模型实验研究

目的　利用骨关节炎症动物模型观察99mTc(V) -DMSA的生物分布和在骨关节炎症区域的代谢特点 .方法　在制作骨关节炎症动物模型的基础上 ,经在体显像及其感兴趣区技术计算器官和炎症关节的放射性活度的变化 ,同时也利用动物模型离体的测量器官或组织的百分注射量 ,分析99mTc(V) -DMSA在各器官和骨关节炎症区域的代谢特点 .结果　骨关节炎症区域对99mTc(V) -DMSA有较高的摄取 ,骨关节炎症的患 /健比值高峰出现在注射示踪剂后的 2小时～ 6小时之间 :百分注射量靶 /非靶比值分别为 2 .35 3± 0 .4 6 5和 3.196± 0 .4 6 1( %ID/g) ;在体显像患 /健比值分别为 2 .5 93± 0 .343和 2 .882± 0 .5 2 5 ( % ) .99mTc(V) -DMSA主要经泌尿系统排出 ,其在肠道系统有聚集并不影响四肢骨病灶的观察 .结论　99mTc(V) -DMSA有较低和较稳定的蛋白结合率 ,是急性骨关节炎症良好的显像剂 ,其最佳显像时间为在注射99mTc(V) -DMSA后的 2～ 3小时之间     

软骨链蛋白双核素标记实验研究

目的探讨双核素标记软骨链蛋白(CLP)的制备方法.方法采用99TcmO4-、Na125I放射源和CH-T、Iodogen 、SnC12和2-ME四种方法制备99Tcm-CLP、125I-CLP 和125I-CLP-99Tcm放射性药物.结果四种方法获得的125I、99Tcm-CLP、125I-CLP-99Tcm标记率均可达到90%以上,体外结合活性KD分别为8.14、9.01、1.12 、1.07(×108mol/L);125I-CLP-99Tcm为106～107 mol/L;将125I-CLP 和99Tcm-CLP配体混合获得的125I-CLP-99Tcm KD为5.63×108mol/L.结论用Iodogen和SnCl2方法制备125I-CLP 和99Tcm-CLP探针,体外按1∶1混合获得的125I-CLP-99Tcm双标记物可有效减轻氧化剂的损伤作用.     

软骨链蛋白双核素标记实验研究

目的　探讨双核素标记软骨链蛋白 (CLP)的制备方法 .方法　采用99TcmO4-、Na12 5I放射源和CH -T、Iodogen、SnC12 和 2 -ME四种方法制备99Tcm-CLP、12 5I -CLP和12 5I-CLP - 99Tcm 放射性药物 .结果　四种方法获得的12 5I、99Tcm-CLP、12 5I -CLP - 99Tcm 标记率均可达到 90 %以上 ,体外结合活性KD分别为 8.14、9.0 1、1.12、1.0 7(×10 8mol/L) ;12 5I-CLP - 99Tcm 为 10 6～ 10 7mol/L ;将12 5I-CLP和99Tcm-CLP配体混合获得的12 5I-CLP - 99Tcm KD为 5 .6 3× 10 8mol/L .结论　用Iodogen和SnCl2方法制备12 5I-CLP和99Tcm-CLP探针 ,体外按 1∶1混合获得的12 5I-CLP - 99Tcm双标记物可有效减轻氧化剂的损伤作用     

~（99m）Tc标记DTPA-生物素和hIgG在正常小鼠体内分布实验

目的：探讨DTPA-生物素和hIgG的99mTc标记方法,并观察标记物在体内、外的稳定性及其在正常小鼠体内分布。方法：99mTc标记DTPA-生物素采用直接标记法,99mTc标记hIgG采用2-巯基乙醇还原法,标记率及放化纯测定采用纸层析法,并分别观察99mTc-生物素和99mTc-IgG在生理盐水（NS）中的稳定性;取24只正常小鼠,分为两组,分别经尾静脉注入99mTc-生物素和99mTc-hIgG,注入剂量为7.4MBq/100μl,于注入后1h、3h、6h、12h行SPECT显像并处死小鼠分离各脏器,测量放射性计数,计算各脏器每g组织百分注射剂量（%ID/g）。结果：99mTc标记DTPA-生物素的标记率〉80%,99mTc标记hIgG的标记率〉70%,99mTc-hIgG的放化纯〉90%;在NS中温育12h未观察到99mTc-生物素和hIgG放化纯度明显降低;体内生物分布显示99mTc-生物素肾内摄取高,主要经泌尿系统排泄;99mTc-hIgG在体内主要分布于肝、脾、肾,且在血液中存留时间较长。结论：99mTc标记DTPA-生物素和hIgG具有良好的标记率及体外稳定性,小鼠体内分布实验表明,99mTc-生物素和99mTc-hIgG体内分布的明显不同,为下一步基于亲和素-生物素系统预定位技术各组分的应用提供实验依据。     

抗人结肠癌单克隆抗体SC3A在荷瘤裸鼠体内的放射免疫定位研究

本文用~(131)I标记自制的抗人结肠癌单克隆抗体SC3A,进行荷人结肠癌裸鼠体内生物学分布和肿瘤的放射免疫显像研究。结果在注射~(131)I饲—SC3A后24～120h,肿瘤部位的放射性均显示出选择性浓聚,以72～120h的影像最为清晰;而注射~(131)I—鼠IgG则呈全身均匀性分布,无肿瘤部位选择性波聚影像。在72h,13种器官的T/NT均大于2,肿瘤LI为6.94,与扫描显像结果吻合。这些都表明SC3A在生物体内对结肠癌具有良好的选择性和导向作用,抗体可对其供临床体内进一步应用提供了依据。     

抗人肺癌单抗LC-1IgM片段对人肺癌免疫放射定位的研究

具有免疫活性的抗人肺癌单抗LC-I IgM经2.5%胰蛋白酶处理后,通过Sephadex G25或G-50柱分离获得LC1-IgM片段.ELISA检测表明单抗IgM片段有免疫活性,并通过SDS-PAGE分离、观察到单抗IgM片段的分子量主要是Fab和F(ah’)_2.此LC-l IgM片段用维生素C还原后与还原~(99m)Tc进行标记,纸层析分析标记率达90%以上.标记物确认无热原反应并无菌过滤后,从静脉注入肺癌患者或肺病患者体内,经24h后,SPECT扫描,同位素能浓聚于肺癌病灶上,显像十分清晰.55例患者中.肺癌患者48例,阳性率81.25%;肺部其它疾病患者7例,阴性率85.11%     

188Re-CEA人/鼠嵌合抗体在裸鼠人结肠癌模型中的定位研究

目的 :评价1 88Re标记抗CEA人 鼠嵌合抗体在人结肠癌裸鼠模型中的肿瘤靶向性。方法 :于裸鼠尾静脉注入1 88Re CEA人 鼠嵌合抗体后 2 4、4 8、72、96h分别测定荷瘤小鼠体内组织放射性分布 ,于不同时相分别对尾静脉注射1 88Re CEA嵌合抗体及1 88Re C5 0鼠单抗的裸鼠行放免显像。结果 :1 88Re CEA嵌合抗体注射后 9 5h ,肿瘤部位开始有放射性浓聚。以后随时间的增加 ,肿瘤部位放射性持续存在并维持较高水平 ,而周围组织放射性逐渐清除。1 88Re CEA人 鼠嵌合抗体与1 88Re C5 0抗体一样在肿瘤中有很高的摄取。肿瘤组织在注射1 88Re CEA人 鼠嵌合抗体 2 4h后 ,摄取放射性占总注入量的百分比为11 0 5 % ,随时间的延长稍有增加。 96h时所有脏器T NT比均大于 2 0。结论 :1 88Re CEA人 鼠嵌合抗体可特异地浓聚于结肠癌组织 ,有望用于临床诊断和治疗。     

131I标记重组人表皮生长因子体内抑制乳腺癌生长的实验研究

研究 1 31 I标记重组人表皮生长因子 (1 31 I- Recombinant hum an epiderm al growth factor,1 31 I- rh EGF)对荷人乳腺癌裸鼠肿瘤生长的抑制作用。1 31 I- rh EGF在荷人乳腺癌裸鼠体内的组织分布实验证实 1 31 I- rh EGF的生物活性及乳腺癌组织对 1 31 I- rh EGF的摄取 ,通过给药后荷人乳腺癌裸鼠肿瘤的生长实验观察 1 31 I- rh EGF对肿瘤生长的影响 ,用透射电镜和病理组织学检查分别观察 1 31 I- rh EGF治疗后肿瘤细胞的超微结构变化和组织病理学变化。1 31 I-rh EGF的组织分布显示 ,荷人乳腺癌裸鼠的肿瘤组织对 1 31 I- rh EGF有明显摄取。肿瘤生长观察结果显示 ,静脉注射和瘤体内注射 1 31 I- rh EGF均能明显抑制肿瘤的生长 ,抑瘤率 (82 .0 0 %和 80 .70 % )显著大于 1 31 I(7.4 9% )和 1 31 I- HSA(6 .91% ) (P<0 .0 5 )。透射电镜和病理学观察均显示 ,静脉注射和瘤体内注射 1 31 I- rh EGF均能明显杀伤、杀死肿瘤组织细胞。实验表明 ,1 31 I- rh EGF能抑制裸鼠体内的人乳腺癌细胞生长 ,可望成为受体介导放射性靶向治疗乳腺癌的新药物     

Immunocapture of prostate cancer cells by use of anti-PSMA antibodies in microdevices

Patients suffering from cancer can shed tumor cells into the bloodstream, leading to one of the most important mechanisms of metastasis. As such, the capture of these cells is of great interest. Circulating tumor cells are typically extracted from circulation through positive selection with the epithelial cell-adhesion molecule (EpCAM), leading to currently unknown biases when cells are undergoing epithelial-to-mesenchymal transition. For prostate cancer, prostate-specific membrane antigen (PSMA) presents a compelling target for immunocapture, as PSMA levels increase in higher-grade cancers and metastatic disease and are specific to the prostate epithelium. This study uses monoclonal antibodies J591 and J415—antibodies that are highly specific for intact extracellular domains of PSMA on live cells—in microfluidic devices for the capture of LNCaPs, a PSMA-expressing immortalized prostate cancer cell line, over a range of concentrations and shear stresses relevant to immunocapture. Our results show that J591 outperforms J415 and a mix of the two for prostate cancer capture, and that capture performance saturates following incubation with antibody concentrations of 10 micrograms per milliliter.     

Technetium-99m-labeled monoclonal antibodies for immunoscintigraphy. Simplified preparation and evaluation

Ascorbic acid incubated with monoclonal antibodies (22 degrees C, 60 min, pH 6.5) at a molar ratio of 3500:1, reduced 2.7 +/- 0.2% of the available disulfides to sulfhydryl groups that strongly bind 99mTc, and provided greater than 95% labeling efficiency for several IgM, IgG and F(ab')2 antibodies. The colloid formation was consistently less than 3% and the stability of the tracer when challenged with DTPA and cysteine was excellent. The immunospecificity of labeled antibodies as determined by immobilized specific antigen assay was 84 +/- 1% for IgM and 82.6 +/- 1.1% for IgG antibodies. For in vivo evaluation in mice bearing experimental abscesses and tumors, corresponding 125I-labeled antibodies served as controls. The liver uptake was similar (P = 0.76 and P = 0.12) for 99mTc or 125I labeled antinuclear antibody TNT-1 in mice bearing abscesses as well as for 99mTc-TNT-1-F(ab')2 and 125I-TNT-1-F(ab')2 in mice bearing tumors. Higher but statistically insignificant (P = 0.08, 0.18, and 0.73) urinary excretion was noted for 99mTc-antibodies. For corresponding 99mTc- and 125I-labeled antibodies, the abscess to muscle ratios (3.3 +/- 0.5 vs. 3.4 +/- 0.8) and tumor to muscle ratios (10.04 +/- 4.4 vs. 10.54 +/- 3.0) were similar. The high 99mTc-TNT-1-F(ab')2 uptake permitted excellent scintigraphic visualization of tumors whereas the nonspecific 99mTc-HSA did not (tumor/muscle ratio: 2.4 +/- 0.3). This method is simple, reliable, and adaptable to an instant labeling technique.     

胃癌单克隆抗体1D1-2在荷瘤裸鼠体内的放射免疫显像

本文应用人胃癌组织及细胞株移植建立了裸大鼠和裸小鼠两种胄癌移植模型。用~(125)I和~(131)I标记抗人胃癌单克隆抗体1D1-2,体外试验表明碘化1D1-2具有特异性的结合活性。注入荷瘤裸鼠体内72h后,显示该抗体高度浓集于肿瘤组织,浓聚指数为4.5,而正常组织仅为1.3,T/NT比分别为2～12倍,与胃组织比为3.2倍、放射免疫显像显示出清晰的肿瘤图像。提示单克隆抗体1D1-2应用于肿瘤定位诊断及导向治疗的可能性。     

In vivo detection of human hepatoma secreting hepatitis B surface antigen in nude mice with radiolabeled monoclonal antibodies that recognize distinct epitopes

Hepatitis B surface antigen (HBsAg), produced by a human hepatoma which had been transplanted into athymic nude mice, was specifically detected in vivo by 131I-labeled monoclonal antibodies (McAb) directed against distinct epitopes of HBsAg (anti-HBs). Significantly higher levels of radioactivity were present in the hepatoma secreting HBsAg when compared to either a non-HBsAg producing epidermoid tumor or most other tissues obtained from nude mice treated with the 131I-labeled anti-Hbs McAb. A radiolabeled control McAb that did not recognize HBsAg failed to discriminate between either the HBsAg positive and negative tumors or other tissues from nude mice. These data demonstrate the in vivo immunological specificity of anti-HBs McAb for HBsAg associated with a hepatoma tumor.     

量子点探针对人肝癌裸鼠模型的体内靶向成像研究

目的研究量子点标记靶向探针对人肝癌裸鼠模型的体内成像技术。方法将巯基乙酸修饰的水溶性量子点结合鼠抗人甲胎蛋白（AFP）单克隆抗体制备成水溶性量子点-AFP-Ab复合物探针。荧光、紫外光光谱分析及透射电镜研究其特性。通过直接免疫荧光法,用该复合物探针特异性识别肝癌细胞株HCCLM6 AFP抗原。将体外培养的肝癌细胞株HCCLM6通过皮下接种和尾静脉注射裸鼠分别建立人肝癌裸鼠模型和肺转移模型。尾静脉注射量子点-AFP-Ab探针,用蓝光二极管照射获得活体荧光成像;用掺Ti蓝宝石激光器照射,对肿瘤部位和正常部位进行光谱分析。取血清检测丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、尿素氮和肌苷水平。取裸鼠肝、脾、肾、肺、心和脑6种主要实质性器官行振荡切片,共聚焦显微镜观察,研究量子点-AFP-Ab探针在裸鼠体内的非特异性摄取。结果量子点-AFP-Ab复合物探针具有激发光谱宽、荧光强度高的特点,能特异性与肝癌细胞AFP抗原高亲和力结合,在体内能特异性靶向肿瘤组织进行活体成像,无明显急性毒性。光谱分析显示量子点-AFP-Ab复合物探针主要分布于肿瘤的外周部位,少数该探针被肝、脾和肺非特异性摄取。结论量子点-AFP-Ab复合物探针具有优良的光学特性和生物相容性,能够进行肝癌体内靶向成像,将有助于肝癌的分子靶向研究。     

Comparison of two peptide radiotracers for prostate carcinoma targeting

OBJECTIVES:

Scintigraphy is generally not the first choice treatment for prostate cancer, although successful studies using bombesin analog radiopeptides have been performed. Recently, a novel peptide obtained using a phage display library demonstrated an affinity for prostate tumor cells. The aim of this study was to compare the use of a bombesin analog to that of a phage display library peptide (DUP-1) radiolabeled with technetium-99m for the treatment of prostate carcinoma. The peptides were first conjugated to S-acetyl-MAG3 with a 6-carbon spacer, namely aminohexanoic acid.

METHODS:

The technetium-99m labeling required a sodium tartrate buffer. Radiochemical evaluation was performed using ITLC and was confirmed by high-performance liquid chromatography. The coefficient partition was determined, and in vitro studies were performed using human prostate tumor cells. Biodistribution was evaluated in healthy animals at various time points and also in mice bearing tumors.

RESULTS:

The radiochemical purity of both radiotracers was greater than 95%. The DUP-1 tracer was more hydrophilic (log P = -2.41) than the bombesin tracer (log P = -0.39). The biodistribution evaluation confirmed this hydrophilicity by revealing the greater kidney uptake of DUP-1. The bombesin concentration in the pancreas was greater than that of DUP-1 due to specific gastrin-releasing peptide receptors. Bombesin internalization occurred for 78.32% of the total binding in tumor cells. The DUP-1 tracer showed very low binding to tumor cells during the in vitro evaluation, although tumor uptake for both tracers was similar. The tumors were primarily blocked by DUP-1 and the bombesin radiotracer primarily targeted the pancreas.

CONCLUSION:

Further studies with the radiolabeled DUP-1 peptide are recommended. With further structural changes, this molecule could become an efficient alternative tracer for prostate tumor diagnosis.