HDAC1 siRNA转染对肺腺癌NCI-H1299细胞增殖及凋亡的影响

目的 通过HDACl siRNA转染肺腺癌细胞株NCI-H1299,观察HDACs中HDACl对肺腺癌细胞增殖、周期和凋亡的影响,明确HDACl在肺腺癌细胞生长中的作用.方法 MTT法检测不同时间点HDACl siRNA转染对NCI-H1299细胞体外增殖的影响,流式细胞术榆测RNA干扰后细胞周期及凋亡率的变化;Western印迹法检测细胞内组蛋白H4乙酰化水平的变化.结果 HDACl siRNA转染NCI-H1299细胞后,HDACl在转录和表达水平均下降,组蛋白H4乙酰化表达增高.siRNA干扰后NCI-H1299细胞的体外生长抑制呈时间依赖性,流式细胞术检测结果显示细胞阻滞于G2/M期,细胞凋亡增加.结论 HDACl siRNA转染能有效地抑制HDACl在NCI-H1299细胞中的表达,增加NCI-H1299细胞中组蛋白的乙酰化,并影响NCI-H1299细胞相关生物学行为,抑制肺腺癌细胞的生长,为HDACl基因治疗应用于肺腺癌奠定了基础.     

丹参酮ⅡA抑制非小细胞肺癌NCI-H520细胞生长的研究

目的:探讨丹参酮ⅡA抑制非小细胞肺癌NCI-H520细胞生长及其分子机制。方法:用不同浓度的丹参酮ⅡA(0,5,10,20μM)处理非小细胞肺癌NCI-H520细胞后,采用MTT法检测非小细胞肺癌NCI-H520细胞活力;采用流式细胞计检测非小细胞肺癌NCI-H520细胞周期;应用免疫印迹方法检测蛋白表达水平。结果:丹参酮ⅡA显著抑制非小细胞肺癌NCI-H520细胞生长,并呈浓度依赖方式;流式细胞检测到丹参酮ⅡA处理非小细胞肺癌NCI-H520细胞后,细胞周期S期细胞比例较处理前显著增多(P<0.05);免疫印迹实验检测到丹参酮ⅡA处理非小细胞肺癌NCI-H520细胞后,细胞周期蛋白Cyclin E及CDK2抑制剂P27较处理前显著上调(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA可能通过上调P27抑制CDK2,导致非小细胞肺癌细胞NCI-H520细胞周期S阻滞。     

槐耳清膏对肺腺癌细胞增殖凋亡及相关基因表达的影响

目的：探讨槐耳清膏抑制肺腺癌细胞增殖、促进细胞凋亡的抗肿瘤作用的分子机制。方法应用不同浓度槐耳清膏处理肺腺癌细胞,细胞增殖活性利用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色法检测,细胞凋亡应用 Annexin V‐FITC／PI双染流式细胞术检测,细胞中相关基因表达利用免疫技术检测。结果 CFSE 染色结果发现槐耳能够明显抑制肺腺癌细胞的增殖,并具有浓度和时间依赖性;Annexin V‐FITC／PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡结果发现槐耳能够促进肺腺癌细胞凋亡,具有浓度和时间依赖性;免疫蛋白印迹实验结果发现在肺腺癌细胞中,槐耳能够抑制相关基因 EZH2、β‐catenin 和 bcl‐2的表达。结论在肺腺癌细胞中槐耳清膏抗肿瘤作用的分子机制可能是通过抑制 EZH2／β‐catenin 信号通路,抑制肺腺癌细胞增殖、促进细胞凋亡。     

油菜花粉脂溶性提取物对人肺腺癌细胞A549杀伤作用的实验研究

目的:探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人肺腺癌细胞A549的杀伤效应.方法:以人肺腺癌细胞A549为研究对象,电镜观察用药前后A549细胞形态,应用CCK-8法检测BPE对A549细胞增殖的影响,用流式细胞术检测BPE对A549细胞周期和凋亡的影响.RT-PCR检测bax/bcl-2基因表达.结果:BPE对A549细胞增殖有抑制作用,在一定浓度范围内,呈量一效关系,当BPE浓度为1 000 μg/mL时,A549细胞增殖的抑制率达到最高,为76.54%.透射电镜下可见细胞核固缩,染色质凝集或边聚,胞浆内出现空泡,并有凋亡小体出现.流式细胞仪检测结果显示A549细胞周期比例分布出现变化,G0/G1期细胞比例呈下降趋势,而S期和G2-M期比例则上升;随着时间的延长,细胞凋亡率上升.RT-PCR检测显示BPE的作用效应不是通过bax/bcl-2基因实现的.结论:BPE可抑制人肺腺癌细胞A549的增殖,诱导细胞的凋亡.     

慢病毒载体介导siRNA对裸鼠移植人肺腺癌A549抑瘤作用的实验研究

目的研究慢病毒载体介导siRNA抑制survivin基因表达后对人肺腺癌A549细胞体内增殖能力的影响以及对裸鼠移植人肺腺癌的抑瘤活性。方法应用裸鼠成瘤实验测定致瘤能力的改变，采用RT-PCR和Western-blot测定干扰后survivin基因及其蛋白的表达水平；流式细胞术检测肺癌细胞凋亡指数和增殖指数。结果靶向survivin基因的siRNA可以有效抑制survivin基因的表达，使survivin-mRNA表达减少50％-80％，蛋白表达减少60％；流式细胞术检测细胞凋亡率明显提高（P〈0．01），降低了在裸鼠体内成瘤的能力。结论RNA干扰survivin基因表达后明显抑制了人肺腺癌A549细胞的体内增殖能力；siRNA介导的survivin基因下调可明显抑制肿瘤细胞在体内的生长。     

西达苯胺联合抗骨髓瘤药物对骨髓瘤细胞的增殖及凋亡的影响

目的:探讨西达苯胺联合抗骨髓瘤药物对骨髓瘤细胞的增殖及凋亡的影响.方法:用CCK-8法检测细胞的增殖抑制,流式细胞术检测细胞的凋亡变化.结果:西达苯胺以时间、剂量依赖性方式抑制骨髓瘤细胞的增殖(NCI-H929,r=0.720;MM.1s,r=0.636),同时促进原代骨髓瘤浆细胞的凋亡.在NCI-H929细胞系上,西...     

苦参碱对食管癌细胞凋亡及Bcl－２、Bax表达的影响

目的:探讨中药提取物苦参碱(Matrine)对食管癌(esophagus carcinoma)细胞系的凋亡诱导作用及其发生机制。方法:体外培养食管癌细胞,用不同浓度的苦参碱对体外培养的食管癌细胞进行干预。分别采用MTT、免疫细胞化学染色、流式细胞仪检测的方法,观察其对食管癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用;并对凋亡相关Bcl-2与Bax蛋白表达的变化进行定性检测。结果:经不同浓度的苦参碱处理后的食管癌细胞,其生长受到明显的抑制,细胞凋亡指数随药物浓度增加而明显增加;苦参碱作用组Bax表达明显高于对照组。结论:一定浓度的苦参碱能抑制食管癌细胞的增殖,促进其凋亡;其机制可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。     

姜黄素对大鼠肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对肺纤维化大鼠肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法:将体外培养的正常大鼠肺成纤维细胞(NLF)和肺纤维化大鼠肺成纤维细胞(MLF)分别于不同浓度的姜黄素中孵育;观察细胞生长状态变化;MTT法检测吸光值,计算细胞抑制率;流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:姜黄索对MLF有抑制作用,存在剂量依赖(r=0.723;P<0.01)与时间依赖性(r=0.625,P<0.05)。流式细胞分析显示,姜黄素处理组MLF凋亡率较阴性对照组(4.29%)显著升高(P<0.01),并呈药物浓度依赖性。姜黄素不能抑制NLF增殖,对其凋亡影响无显著性。结论:姜黄素在体外对MLF具有抑制增殖、诱导凋亡的作用;而对NLF无明显影响。提示姜黄素可以通过诱导肌成纤维细胞的凋亡而起到抗纤维化的作用。     

三氧化二砷对SPCAⅠ/人肺腺癌细胞株抗增殖及诱导凋亡作用的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对SPCAⅠ/人肺腺癌细胞株的抗增殖效应及诱导细胞凋亡的作用。方法将SPCAⅠ/人肺腺癌细胞株培养传代,分别加入不同浓度的三氧化二砷,作用24小时后,分别以酶标仪检测细胞抑制率、FACSAr-ia流式细胞仪检测细胞凋亡率、倒置显微镜观察凋亡细胞形态。结果不同浓度的三氧化二砷体外对人肺腺癌细胞株SPCA/Ⅰ均有直接的抑制作用,其抑制率与所用药物浓度呈正相关;三氧化二砷体外对人肺腺癌细胞株SPCAⅠ/有诱导凋亡的作用,细胞凋亡率明显增加。倒置显微镜见细胞由原来贴壁生长而逐渐脱落、外形变圆、体积缩小、折光性增强,核染色质凝集,细胞裂解。结论三氧化二砷能通过诱导细胞凋亡,直接抑制人肺腺癌细胞株SPCAⅠ/增殖。     

三氧化二砷对SPCA/I人肺腺癌细胞株抗增殖及诱导凋亡作用的研究

目的 探讨三氧化二砷( As2 O3)对SPCA/I人肺腺癌细胞株的抗增殖效应及诱导细胞凋亡的作用.方法 将SPCA/I人肺腺癌细胞株培养传代,分别加入不同浓度的三氧化二砷,作用24小时后,分别以酶标仪检测细胞抑制率、FACSAria流式细胞仪检测细胞凋亡率、倒置显微镜观察凋亡细胞形态.结果 不同浓度的三氧化二砷体外对人肺腺癌细胞株SPCA/I均有直接的抑制作用,其抑制率与所用药物浓度呈正相关;二氧化二砷体外对人肺腺癌细胞株SPCA/I有诱导凋亡的作用,细胞凋亡率明显增加.倒置显微镜见细胞由原来贴壁生长而逐渐脱落.外形变圆、体积缩小、折光性增强,核染色质凝集,细胞裂解.结论 三氧化二砷能通过诱导细胞凋亡,直接抑制人肺腺癌细胞株SPCA/I增殖.