丙酮酸对大鼠移植小肠黏膜组织超氧化物歧化酶活力的影响

目的丙酮酸对大鼠移植小肠缺血再灌注损伤具有保护作用,本研究旨在探索影响移植小肠黏膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力是否为其作用途径之一。方法选用近交系成年雄性SD大鼠,按随机数字表法分为3组:假手术组,行剖腹、左侧肾切除术;建立小肠移植缺血再灌注动物模型,分为移植组和丙酮酸处理组,后者分别于供体小肠阻断血流、灌洗前10 min向肠腔内注入10 ml含0.26 g多聚葡萄糖的营养液和含0.32 g分析纯丙酮酸的营养液。分别留取缺血45、90 min和再灌注30、180 min小肠组织标本,观察小肠组织损伤病理变化并进行Chiu’s评分,采用黄嘌呤氧化酶法测定小肠组织中的SOD活力。结果①缺血再灌注不同时相移植组小肠组织损伤程度均重于其他两组(P0.01),而丙酮酸处理组小肠组织损伤程度与假手术组差异无统计学意义。②小肠黏膜组织匀浆中SOD活力随着缺血以及再灌注时间的延长而逐渐降低,再灌注30 min时SOD活力下降迅速,至再灌注180 min时回升,但仍未恢复至正常水平。移植组各时间点与假手术组及丙酮酸处理组比较均明显降低(P0.01)。丙酮酸处理组小肠组织中SOD活力与假手术组比较变化不明显。结论丙酮酸对大鼠移植小肠缺血再灌注损伤具有保护作用,可能是通过保护和恢复大鼠移植小肠组织中SOD的活力,进而减轻氧自由基损伤的途径起作用。     

大鼠肝小肠联合移植模型的建立

本文报告一种封闭群大鼠进行的肝小肠联合移植模型。术中供体肝与小肠整块游离和灌注，分开切取。供肝原位、供肠异位移植于受体大鼠。主要血管用Ｋａｍａｄａ袖套法吻合，正式实验２１次，３天以上存活率为４３％。结果表明：减少手术时间和简化操作技术是提高成功率的关键因素和基本原则。     

袖套式血管吻合法建立肝肠联合移植的实验研究

目的 建立一种新肝肠联合移植手术模型,探讨移植肝脏对移植小肠的保护作用.方法Wistar大鼠同种异体肝肠联合移植,供体手术时门静脉和肠系模上动脉进行双重冷灌注,用冷新霉素液冲洗小肠肠腔并清洁.受体手术的先进行肝脏移植,再进行小肠移植,门静脉、肝下下腔静脉袖套式吻合,肠系膜上动脉在显微镜下与左肾动脉油套式吻合,供体肠系膜上静脉袖套式与受体左肾静脉吻合,回肠下端在左下腹部造□,完成肝肠联合移植.结果 手术成功率为62.5%(15/24),手术平均存活为11.2天.手术后组织学发现:移植肝脏和小肠发生排斥反应.结论(1)袖套式血管吻合技术在大鼠身上建立的肝肠联合移植模型是可行的.(2)肝肠联合移植后移植的肝脏不能起到保护移植小肠的作用.     

L-精氨酸预处理对大鼠小肠移植缺血再灌注损伤的影响

我们应用大鼠小肠移植模型，在供肠获取前不同时间点给予供体L-精氨酸（L-Arg），观察其对缺血．再灌注损伤（IRI）小肠细胞凋亡的影响，现将结果报道如下。     

大鼠辅助性肝—小肠联合移植模型

目的 介绍一种新的大鼠辅助性肝－小肠联合移植模型。方法 整块切取全部小肠和60％的肝脏。同时切取腹腔动脉及肠系膜上动脉的动脉段以确保移植器官的血供。供体小肠的静脉血通过供体完整的门静脉回流，将供体左肾静脉水平肝下下腔静脉斜形切断吻合于受体两肾静脉之间的下腔静脉，供体腹主动脉和受体腹主动脉端侧吻合。切除受体的小肠，通过小肠端－端吻合重建肠道。结果 整个手术时间平均为130min。3个月的生存率为8％（16／20）。移植后90d，对3只大鼠行剖腹探查及组织这检查，观察到移植物的形态及功能均正常。观察移植后12个月的5只大鼠，肝功能正常，移植肝及小肠均呈正常的组织学结构。结论 大白鼠辅助性肝－小肠联合移植是可行的。     

大鼠辅助性肝-小肠联合移植模型

目的　介绍一种新的大鼠辅助性肝 -小肠联合移植模型。方法　整块切取全部小肠和6 0 %的肝脏。同时切取腹腔动脉及肠系膜上动脉的动脉段以确保移植器官的血供。供体小肠的静脉血通过供体完整的门静脉回流。将供体左肾静脉水平肝下下腔静脉斜形切断吻合于受体两肾静脉之间的下腔静脉 ,供体腹主动脉和受体腹主动脉端侧吻合。切除受体的小肠 ,通过小肠端 -端吻合重建肠道。结果　整个手术时间平均为 130min。 3个月的生存率为 8% (16 2 0 )。移植后 90d ,对 3只大鼠行剖腹探查及组织学检查 ,观察到移植物的形态及功能均正常。观察移植后 12个月的 5只大鼠 ,肝功能正常 ,移植肝及小肠均呈正常的组织学结构。结论　大白鼠辅助性肝 -小肠联合移植是可行的。     

大鼠小肠移植模型的改进

目的：在传统小肠移植模型基础上改进操作方法并试图建立一个操作简便、并发症少、稳定的大鼠小肠移植模型.方法：显微镜下切取供肠的范围包括近端空肠、门静脉及其带肠系膜上动脉的腹主动脉袖.动脉吻合采用供体带肠系膜上动脉的腹主动脉袖与受体的腹主动脉端侧吻合,静脉吻合采用供体的门静脉用袖套法与左肾静脉端端吻合,移植肠两端造瘘.结果：正式实验100次,手术成功率91%.供体手术控制在50 min以内,受体手术控制在80 min以内,手术时间约为150 min.结论：完全在显微镜下建立大鼠小肠移植模型并将手术方法加以改进能在手术视野清晰、术中操作定位准确、局部创伤小的基础上使手术时间缩短,并发症更少,存活率更高.     

大鼠异位节段小肠移植模型的建立

目的建立大鼠异位节段小肠移植模型。方法对100只雄性SD大鼠施行50次异位节段小肠移植，采用肠系膜上动脉-腹主动脉端侧吻合以及门静脉-左肾静脉套管吻合重建供肠血管，远端肠管腹壁造瘘。结果预实验阶段移植25只，存活3只，成功率12％；正式实验阶段25次手术，成功21次，成功率84％；供体手术时间（60±5）min，移植肠修整时间（15±5）min，受体手术时间（100±10）min。结论大鼠小肠移植中注重手术操作中的细节问题是建立稳定模型的关键。     

门脉建立侧袖式大鼠肝/小肠整块联合移植模型

目的 建立大鼠肝、小肠整块联合移植模型.方法 用Wistar大鼠行同种异体肝、小肠整块联合移植.肝肠联合移植整块切取移植物时,保留门静脉完整性,利用供体腹段下腔静脉在门静脉侧壁上建立一侧袖,并安置套管.然后按kamada二套管法行原位肝移植,动脉重建通过供体腹主动脉与受体腹主动脉行端侧吻合以建立肠系膜上动脉及肝固有动脉血供.回肠末端在右下腹造瘘.结果 手术成功率为86%,动物平均存活时间大于30 d.病理组织学检查发现移植肝和小肠结构正常.结论 用门脉建立袖套式血管吻合技术施行大鼠肝、小肠整块联合移植模型是可行的.     

脾细胞移植诱导大鼠小肠移植微嵌合体形成的实验研究

目的研究脾细胞输注移植促进微嵌合体形成与大鼠小肠移植免疫耐受的关系。方法制备供体大鼠的脾细胞悬液,于移植前四周将脾细胞悬液经舌静脉注入受体大鼠体内,行同种异体节段性小肠移植,PCR技术检测雌性受体外周血及皮肤Y染色体特异性DNA片段证实微嵌合体形成,通过移植肠段病理组织学变化观察急性排斥反应与微嵌合体形成的关系。结果大鼠接受小肠移植后的存活时间显示,对照组移植后平均存活时间为7.1±1.2d,显著少于实验组的18.4±3.6d(P<0.05),差异具有统计学意义。预先经脾细胞输注的实验组小肠移植受体的微嵌合体检出率高于对照组;嵌合体阳性的受体急性排斥反应较嵌合体阴性者轻。结论脾细胞输注移植可促进小肠移植嵌合体形成,微嵌合体形成可诱导大鼠小肠移植的免疫耐受。     

骨髓细胞胸腺内注射对移植肠CD4、 CD8和CD25的影响

目的 探讨异基因骨髓注射在大鼠小肠移植中的免疫耐受作用和意义.方法 选用近交系大鼠F344/N和Wistar/A进行全小肠异位移植,实验组在异基因移植前7d取供体BMC行受体胸腺内注入,对照单纯同基因及异基因大鼠移植模型了解异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能否减少移植后急性排斥反应的发生,观察其生存时间、病理结果及CD4、CD8、CD25的变化.结果 (1)A组移植大鼠平均存活时间为(7.33±1.03) d;B组为(43.76 ±4.57) d;C组为(55.28±7.48)d.(2)异基因大鼠异位全小肠移植术后3、7、15 d可出现典型的轻、中、重度排斥反应,而同基因组和实验组中未出现排斥反应.(3)异基因移植组术后CD4、CD25+,高于其他组(P＜0.05).而CD8的变化差异无统计学意义(P＞0.05).结论 移植术前7d异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能显著减少小肠移植后急性排斥反应的发生,并可以抑制移植肠CD4、CD25细胞的表达.     

大鼠原位和异位小肠移植慢性排斥反应模型的制作与比较

目的比较大鼠原位和异位小肠移植慢性排斥反应模型的建模效果。方法采用F344(RT11vr)大鼠作为供体,Lewis(RT11)大鼠作为受体,构建异系异位和原位大鼠小肠移植模型(各8只),术后0~14 d给予皮下注射环孢素。观察术后受体的体质量变化及存活时间。采用苏木素-伊红(HE)染色观察肠组织病理学变化,酒精苏木素染色后观察肠组织胶原纤维和弹性纤维的变化。计算两组受体大鼠的成模率。结果异位和原位小肠移植大鼠均能长期存活,大部分超过90 d。原位小肠移植组大鼠术后第3日恢复正常饮食,于术后14 d左右体质量可恢复至术前水平,之后缓慢增长,但大部分原位小肠移植大鼠在术后150 d出现持续的体质量下降,且不能被环孢素逆转。异位小肠移植组大鼠术后第1日恢复进食,于术后25~30 d才能恢复至术前的体质量水平,术后30~90 d期间,体质量逐渐上升并保持在较高水平。原位小肠移植组大鼠术后90 d的小肠组织未出现慢性排斥反应的病理学改变且未见明显纤维化,术后163 d和术后200 d的小肠组织出现慢性排斥反应的病理学改变,且出现移植小肠系膜纤维化。异位小肠移植组大鼠术后90 d和术后200 d的小肠组织均出现典型的慢性排斥反应的病理学改变和移植小肠系膜纤维化。异位小肠移植组全部出现特征性病理改变,成模率为100%,与原位小肠移植组成模率75%比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论应用F344→Lewis大鼠组合建立原位和异位小肠移植模型,术后给予小剂量环孢素,均可在术后不同时间点出现慢性排斥反应。与原位大鼠小肠移植模型相比,大鼠异位小肠移植模型建模操作简单,慢性排斥反应成模时间较短,病理改变程度相对一致,更适合用于实验研究。     

转化生长因子-β1因子在小肠移植物中的表达及意义

转化生长因子-β1 (TGF-β1)是近年来发现的与器官移植慢性排斥反应密切相关的因子之一.我们通过观察大鼠小肠移植物中TGF-β1因子的变化,探讨其在小肠移植中的作用及意义. 一、材料与方法 选用近交系F344( RT11vr)大鼠和Lewis( RT11)大鼠作为小肠移植的供体和受体.参照传统手术方法构建大鼠小肠移植模型[1].异系移植受体大鼠术后肌注环孢素,术后29 d停止给药.同系对照组肌注同体积生理盐水.分别于术后第7、28、60天切取部分移植物.采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)技术检测TGF-β1 mRNA转录水平.应用SP法进行移植物的TGF-β1免疫组织化学检测.应用SPSS 13.0统计软件分析.     

输入供体血对延长大鼠移植胰腺功能存活的初步研究

目的探索供体血输入同种大鼠对诱导胰腺移植耐受的可能性.方法用雄性Wistar大鼠作为实验的供受体,胰腺移植当天取供体大鼠全血1 ml,注入糖尿病受体大鼠腹腔,辅以短期的硫唑嘌呤(Aza). 结果移植胰腺功能存活时间为28～112天(平均64.2天),与单纯用硫唑嘌呤组(10.2天)或单纯输入供体血液组(9.8天)相比,移植胰腺功能存活时间显著延长(P<0.01).结论移植前短期使用免疫抑制剂以及移植当天输入供体血液,能延长大鼠移植胰腺功能存活时间.     

三套管法大鼠原位小肠移植动物模型的改进

目的 对三套管法大鼠原位小肠移植动物模型进行改进,提高原位小肠移植的成功率.方法 取106只SD大鼠作为供、受体进行同种同基因原位无造瘘全小肠移植,动静脉吻合采用改良三套管法,其中受体肠系膜上静脉套管采用手术显微镜下套管.供体小肠近端与受体近端空肠端端吻合,远端与受体升结肠端端吻合.手术后存活超过3d即认为手术成功.结果 手术成功率为90.6％ (48/53),供体小肠热缺血时间为0,冷缺血时间为(30±2.48) min,手术成功后7d存活率为97.9％ (47/48).结论 在三套管技术的基础上,采用手术显微镜辅助下肠系膜上静脉套管,大大提高了该动物模型的成功率,缩短了手术技术的成熟时间.     

大鼠原位节段小肠移植模型的改进

目的 建立一种简便、稳定的大鼠原位节段小肠移植模型.方法 供、受体均为雄性SD大鼠,各40只,采用供体肠系膜上动脉-腹主动脉漏斗状袖片与受体肾下腹主动脉端侧吻合,供体门静脉与受体左肾静脉Cuff套管袖套吻合.切除受体大部分小肠,供体小肠近、远端分别与受体残留小肠近、远端行端端吻合.结果 供体手术时间(40 ±5)min,受体手术时间(50 ±8) min.热缺血时间(5±2)min,冷缺血时间(15±5) min.动脉吻合时间(5±2)min,静脉吻合时间(4 ±2)min.90.0％ (36/40)的大鼠术后存活时间＞10d.结论 该模型操作简便,手术时间短,模型成活率高,稳定性好.     

大鼠肠系膜血管吻合式小肠移植模型建立及其意义

报告采用大鼠系膜血管吻合式小肠移植模型的制作方法,依此法共施小肠移植手术96只,模型稳定后的51只手术成功率达87.4%。该方法所建立大鼠自体移植模型不仅为利用远交系大鼠研究小肠移植免疫反应提供可靠的阴性对照,而且可做为移植小肠保存、缺血后再灌注损伤等多方面研究的较好模型。     

大鼠肠系膜血管吻合式小肠移植模型建立及其意义

报告采用大鼠系膜血管吻合式小肠移植模型的制作方法，依此法共施小肠移植手术96只，模型稳定后的51只手术成功率达87.4％。该方法所建立大鼠自体移植模型不仅为利用远交系大鼠研究小肠移植免疫反应提供可靠的阴性对照，而且可做为移植小肠保存、缺血后再灌注损伤等多方面研究的较好模型。     

同种异体小肠移植术

同种异体小肠移植术南京军区南京总医院，南京大学医学院临床学院（２１０００２）黎介寿，李宁，尹路，李幼生小肠移植术尚不是定型的手术，它可以是单一的小肠移植，也可以是与其他器官的联合移植．本文将就单独小肠移植作一扼要的讨论．１供体手术理想的供体应是年龄相...     

小肠移植在短肠综合征治疗中的应用

小肠移植是治疗短肠综合征最理想的方法,但由于供体的短缺和其剧烈的排斥反应及因此而导致的远远低于实质脏器移植的成功率,使小肠移植的临床开展受到极大的限制。1小肠移植的发展和现状小肠移植的实验研究早在1902年即已开始,而首例临床小肠移植于1964年由Detterling等开展,至