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1.
目的探讨人肺腺癌细胞株A549总RNA转染的人树突状细胞(DCs)在体外诱导特异性抗肿瘤免疫反应的能力。方法利用密度梯度离心法从血细胞分离机新鲜采集的外周富集血中分离出单个核细胞(PBMCs),贴壁获得单核细胞,加入重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白细胞介素-4(rhIL-4)进一步诱导为树突状细胞(DCs),同时利用提取的A549细胞总RNA转染DCs来制备疫苗,并与T细胞混合培养诱导扩增细胞毒性T淋巴细胞(CTLs);实验分为转染A549细胞总RNA的DC组、未转染DC组和转染空脂质体DC组,分别以流式细胞术(FCM)鉴定DCs表型、酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-12、IFN-γ分泌水平、3H-TdR掺入检测T细胞增殖能力及乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定杀伤肿瘤活性并比较各组差异。结果1)转染总RNA组DCs表面CD40、CD80、CD83、HLA-DR的表达较未转染组DCs和转染空脂质体组DCs均有升高,CD40在3组的表达率分别为(69.01±7.67)%、(19.28±3.51)%和(39.62±2.72)%;CD80在3组的表达率分别为:(74.39±6.46)%、(15.48±3.03)%和(25.70±2.92)%;CD83在3组的表达率分别为:(81.79±4.61)%、(13.29±2.34)%和(31.42±1.97)%;HLA-DR在3组的表达率分别为:(76.53±5.13)%、(49.23±4.05)%和(29.94±3.53)%,差异有统计学意义(P<0.05);2)转染总RNA组DCs的IL-12和IFN-γ分泌水平较未转染组及转染空脂质体组明显升高(P<0.05),3组IL-12分别为(543.24±68.33)、(77.11±27.65)和(167.78±31.84)pg/ml;3组IFN-γ分别为:(122.95±32.84)、(41.06±10.97)和(56.08±15.96)pg/ml;3)3H-TdR掺入试验所得的cpm,3组分别为(7437±720)、(3 807±476)和(4 543±719),阳性对照组为:16 739±91,差异有统计学意义(P<0.05);4)LDH释放法可见转染A549总RNA的DC组的特异性杀瘤活性(58.54±8.27)%,明显高于未转染组(36.03±4.03)%和转染空脂质体组(33.47±8.21)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论人肺腺癌细胞A549总RNA转染的DC疫苗体外诱导的特异性抗肿瘤免疫能力显著增强,有望为肺腺癌的治疗提供新的手段。  相似文献   

2.
甲基莲心碱增强阿霉素抗肿瘤作用的体外实验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的观察甲基莲心碱(neferine,Nef)在体外对阿霉素(adriamycin,ADR)抗肿瘤作用的影响以探讨其化疗增敏作用。方法以人乳腺癌细胞(MCF-7/S)和人骨肉瘤细胞(Soas-2)为细胞模型,采用MTT法检测药物的细胞毒性,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡。结果1、5、10μmol/L Nef对细胞无明显细胞毒性,但可使ADR对人乳腺癌细胞(MCF-7/S)和人骨内瘤细胞(Soas-2)的IC50下降。不同浓度ADR分别与5,10μmol/L Nef合用24h后,MCF-7/S细胞和Soas-2细胞的凋亡率分别较不合用Nef时增加。结论Nef能增强ADR的体外抗肿瘤作用,可能是一种化疗增敏剂。  相似文献   

3.
目的研究新型伊立替康衍生物ZBH-1208体外对肿瘤细胞的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测分析ZBH-1208对人宫颈癌HeLa细胞、人非小细胞肺癌A549细胞、人小细胞肺癌NCI-H446细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌SW1116细胞、人胃腺癌SGC-7901细胞、人肝癌SMMC-7721细胞及人胚肾293细胞的生长抑制作用,计算IC50值;流式细胞术检测ZBH-1208对肿瘤细胞周期及活化Caspase-3表达的影响。结果 ZBH-1208对肿瘤细胞的生长具有抑制作用,呈剂量-时间依赖关系。ZBH-1208作用各肿瘤细胞后IC50值在0.002μmol/L-0.265μmol/L之间,而对照组伊立替康(CPT-11)的IC50值在0.464μmol/L-52.111μmol/L之间,两者相比较差异均有统计学意义(P0.05)。流式细胞术检测结果显示,ZBH-1208诱导肿瘤细胞发生G2/M期阻滞,百分比到达90%以上;并且诱导活化形式Caspase-3表达增加。结论与CPT-11相比,新型化合物ZBH-1208具有高效低毒、起效快的特点,可使肿瘤细胞发生细胞周期阻滞,并诱导肿瘤细胞凋亡,具有进一步研究开发的价值。  相似文献   

4.
近年来,生物治疗由于它抗肿瘤的独特特点,在恶性肿瘤的治疗中发挥着重要作用。树突状细胞(DendriticCells,DC)作为肿瘤生物治疗中的一种,近年来研究的比较多,尤其在递呈抗原抗肿瘤方面。本实验通过抗原负载的DC对食道癌细胞体外杀伤作用进行研究。  相似文献   

5.
目的采用体外药敏试验的方法通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者术后标本对目前常用化疗药物的敏感性,为肺癌个体化化疗提供依据。方法收集自2012年1月至2013年1月在本院就诊的NSCLC患者共计41例,使用 MTT法检测不同药物对肺癌细胞的抑制率,计算其敏感性指标,同时分析肺腺癌和鳞癌对化疗药物的耐药情况。结果紫杉醇(PTX)、长春瑞滨(NVB)、顺铂(DDP)、草酸铂(L-OHP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、多西紫杉醇(Docetaxel)、环磷酰胺(CTX)、羟基喜树碱(CPT)、依托泊苷(VP-16)的敏感率均在30%以上,提示 NSCLC对以上药物敏感;而伊立替康(CPT-11)、长春新碱(VCR)、吡柔比星(THP)、多柔比星(ADM)、表柔比星(EPI)、异环磷酞胺(IFO)、卡铂(CBP)的敏感率均低于30%,提示在 NSCLC 化疗过程中应用以上药物可能存在耐药,非小细胞肺腺癌和鳞癌对 VCR、CPT、VP-16、THP、ADM、EPI这6种药物敏感度相比较差异均有显著性(P < 0.05),而对其他10种化疗药物的敏感度两者比较差异均无显著性(P >0.05)。结论体外药敏试验的总体符合率较高,肺鳞癌和肺腺癌对于不同化疗药物的敏感性存在差异,其药敏试验的结果能够对临床化疗药物的经验性的选用起指导作用。  相似文献   

6.
黄酮类化合物是一类低分子植物成分,具有C6-C3-C6基本构型,为植物体多酚类代谢物,主要成分为黄酮及黄酮醇类、二氢黄酮及二氢黄酮醇类、黄烷醇类、异黄酮及二氢黄酮类、双黄酮类以及查尔酮、花色苷等[1]。黄酮类化合物已被认为是中蒙药材中对降低罹患癌症风险率潜在有益的一种成分。这种化合物被报道有抗氧化特性、诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖、血管再生的功能[2]。槲皮素是一种在自然界广泛分布的黄酮类化合物,具有诸多方面的生物活性,如抗氧化、清除氧自由基、降低血压、扩张冠状血管、抗炎、抗肿瘤以及抗血小板聚集等。目前已受到国内外学者的广泛关注,尤其是其抗肿瘤及抗氧化方面的  相似文献   

7.
背景:造血生长因子可分别作用于不同的造血细胞和细胞的不同分化阶段。红细胞生成素可促进晚期红系祖细胞的增殖分化,白细胞介素3为多潜能集落刺激因子,对多种造血细胞的分化成熟具有促进作用。目的:观察细胞因子的不同组合及人参总皂苷对CD34 细胞体外定向诱导分化为红系血细胞的影响。设计:观察对比实验。单位:重庆医科大学。材料:实验于2002-07/2004-01在重庆医科大学组织胚胎学教研室、基础医学研究所、重庆市生物化学与分子药理学重点实验室完成。正常人骨髓细胞来自第三军医大学大坪医院胸外科无血液系统疾病患者手术摘除的肋骨,所有患者知情同意。人参总皂苷和试剂由重庆中药研究所惠赠。胎牛血清、FITCCD34 抗体、FITC标记同型对照小鼠IgG1为BectonDickinson公司产品,CD71 抗体为SantaCruz公司产品,血小板生成素、Flt-3配基、干细胞因子、白细胞介素-3为SantaCruz公司产品,红细胞生成素为Amgen公司。方法:应用阴性分选策略,以StemsepTM系统从正常人骨髓细胞中分离CD34 造血干/祖细胞。经造血细胞因子不同组合(白细胞介素3 红细胞生成素、干细胞因子 白细胞介素3 红细胞生成素、Flt-3配基 血小板生成素 干细胞因子 白细胞介素3 红细胞生成素)进行液体培养,并以干细胞因子 白细胞介素3 红细胞生成素为对照组,在其中加入终浓度分别为10,20,50,70,100mg/L人参总皂苷为加药组,检测细胞总数、CD71 细胞比例;在CD34 细胞培养体系中加入不同剂量的人参总皂苷(剂量同前)为药物组,以不加人参总皂苷为对照组,通过甲基纤维素半固体培养法检测人参总皂苷诱导CD34 造血干/祖细胞向红系祖细胞(早期红系祖细胞、晚期红系祖细胞)增殖与分化能力。主要观察指标:①不同的细胞因子组CD34 细胞体外增殖情况。②人参总皂苷对CD34 细胞定向诱导分化为红系血细胞的影响。③人参总皂苷对CD34 细胞形成红系祖细胞能力的影响。结果:①各因子组合中以Flt-3配基 血小板生成素 干细胞因子 白细胞介素3 红细胞生成素细胞因子组合诱导CD34 细胞分化为红系血细胞的能力最强,2周时CD71 细胞比例为(61.20±5.31)%。②人参总皂苷20mg/L是液体培养诱导CD34 细胞向红系分化的最佳浓度,与干细胞因子 白细胞介素3 红细胞生成素协同作用CD34 细胞2周后,CD71 细胞比例从(48.39±5.07)%增加到(56.20±1.40)%。③人参总皂苷10~50mg/L均能提高CD34 细胞形成早期红系祖细胞、晚期红系祖细胞的集落产率。结论:含有Flt-3配基 血小板生成素 干细胞因子 白细胞介素3 红细胞生成素的细胞因子组合,可诱导CD34 细胞定向生成大量的红系细胞;人参总皂苷能促进CD34 细胞定向诱导分化为红系血细胞。  相似文献   

8.
薯蓣皂苷元对人胃癌SGC-7901细胞体外作用的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨薯蓣皂苷元对人胃癌SGC-7901细胞株的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测不同浓度薯蓣皂苷元对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术检测薯蓣皂苷元对SGC-7901细胞凋亡的影响。结果 MTT结果显示,薯蓣皂苷元体外可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性,作用244、8、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为62.90、31.83和18.21μg.mL-1;流式细胞检测表明,8、163、2、64μg.mL-1的薯蓣皂苷元分别作用SGC-7901细胞122、43、6 h,对细胞周期没有明显影响,但能明显诱导SGC-7901细胞发生凋亡,同样具有显著的时间-剂量依赖性。结论薯蓣皂苷元具有抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖、诱导其凋亡的作用,但对SGC-7901细胞周期没有明显影响。  相似文献   

9.
三七总皂苷对肠黏膜屏障保护作用的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:应用大鼠肠缺血/再灌注损伤模型,探讨三七总皂苷(PN S)的肠黏膜屏障保护作用。方法:用阻断肠系膜上动脉(SM A)60 m in后恢复血流方法制备肠缺血/再灌注损伤模型。将60只健康SD大鼠按随机数字表法分组:①模型组(n=10);②假手术组(n=10);③PN S静脉组(n=20):SM A开放前15 m in给予PN S 100 m g/kg静脉注射;④PN S口服组(n=20):给予PN S胃内灌服,每日3次,每次50 m g/kg,共3 d,在最后一次给药2 h后进行手术。再灌注3 h后分别观察血浆内毒素水平,肝、脾和肠系膜淋巴结的细菌移位率及小肠组织病理学改变。结果:①模型组、PN S静脉组和PN S口服组大鼠肠道细菌移位率均明显高于假手术组(P均<0.01);而模型组的细菌移位率也明显高于PN S静脉组和PN S口服组(P均<0.05)。②模型组、PN S静脉组和PN S口服组大鼠血浆内毒素水平也明显高于假手术组(P均<0.01);而模型组血浆内毒素水平也明显高于PN S静脉组和PN S口服组(P均<0.05)。③光镜下Ch iu分级、电镜观察模型组损伤较PN S静脉组和PN S口服组严重,两个PN S治疗组差异无显著性(P>0.05)。结论:PN S对缺血/再灌注3 h的大鼠肠黏膜屏障具有一定保护作用。  相似文献   

10.
目的 观察竹节参总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及机制.方法 将雄性Wistar大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、地奥心血康组50.0 mg·kg-1、竹节参总皂苷50.0 mg·kg-1组及100.0 mg·kg-1组.结扎大鼠心脏冠状动脉左前降支(LDA)30 min再灌注120 min,制备心肌缺血再灌注损...  相似文献   

11.
肿瘤抑素抗肿瘤相关肽对人卵巢癌细胞作用的体外研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨肿瘤抑素(Tumstatin)185-203位氨基酸(19肽)对卵巢癌细胞(SKOV3)的治疗作用。方法使用NTS、Annexin/PI和蛋白印迹的方法检测肿瘤抑素19肽对SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,以及Bcl-2、BAX等凋亡相关蛋白的表达情况。检测了19肽对SKOV3细胞侵袭能力的影响,同时应用RT-PCR的方法检测基质金属蛋白-2(matrix metallopmteinase-2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制物-2(tissue inhibitors of metallopmteinase-2,TIMP-2)和膜型基质金属蛋白-1(membrane-type 1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)mRNA表达量的变化情况。结果19肽能够有效抑制SKOV3细胞的增殖,诱导细胞凋亡,而降低Bcl-2的表达,激活caspase通路可能是其诱导细胞凋亡的分子机制之一。此外该19肽能够有效抑制SKOV3细胞的侵袭,这与抑制MT1-MMP的表达进而抑制MMP-2的膜结合活性相关。结论肿瘤抑素19肽可以通过诱导凋亡和抑制细胞侵袭对体外培养的SKOV3产生杀伤和抑制作用。  相似文献   

12.
自心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)被发现以来,其扩张血管、降压、增加血管通透性、利钠利尿等心血管系统方面的作用已得到认可,近年来发现ANP在抗肿瘤方面具有潜在的巨大价值。  相似文献   

13.
目的:探讨三七总皂苷(PNS)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的保护作用及可能机制。方法:以弗氏完全佐剂(FCA)制备AA大鼠模型,于造模第12天起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,疗程12d。足容积法测量大鼠继发侧足肿胀度;放免法测定血清白细胞介素IL-1、IL-6、肿瘤坏死因子TNF-α含量;HE染色法检测大鼠关节病理组织学改变;RT-PCR法检测AA大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)中TNF-αmRNA的表达。结果:PNS(100,200mg.kg-1)能明显抑制AA大鼠继发性足肿胀,改善关节病理损伤程度,降低血清IL-1、IL-6、TNF-α的含量,同时抑制PMΦ中TNF-αmRNA的表达。结论:PNS对AA大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与调节细胞因子的产生有关。  相似文献   

14.
三七总皂苷的作用机制研究进展   总被引:7,自引:2,他引:7  
三七为五加科植物人参三七的干燥根,主产于云南、广西等地,野生或栽培;其性甘、微苦、温;入肝、胃、大肠经。三七主要成分有三七总皂苷(PNS)、三七素、黄酮、挥发油、氨基酸、糖类及各种微量元素等。近年来,国内外学者对三七进行了广泛的药理研究和临床试验,使三七的应用领域得到了拓展。现将PNS的药理研究综述如下。  相似文献   

15.
重楼总皂苷对脓毒症大鼠的保护作用研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 观察重楼总皂苷对脓毒症大鼠的保护作用并探讨其作用机制.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型,观察重楼总皂苷对CLP大鼠死亡率的影响.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测术后2、6、12、24和48 h大鼠血清肿瘤坏死因子-a(TNF-a)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;光镜下观察72 h大鼠肺组织病理学变化.分离大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ),用ELISA检测重楼总皂苷对LPS(100/μg/L)诱导大鼠PMΦ释放TNF-a及IL-1β的影响.结果 重楼总皂苷组大鼠死亡率明显低于模型组(50.0%比85.0%,P<0.05).重楼总皂苷各浓度组血清TNF-a和IL-1β水平较模型组相应时间点明显降低(P<0.05或P<0.01);肺组织病理学观察显示肺损伤程度较轻.体外实验表明,5、10、20和40 mg/L重楼总皂苷均可显著降低LPS刺激PMΦ释放TNF-a和IL-1β的水平(P均<0.01);且各浓度组间TNF-a水平差异无统计学意义(P均0.05);而5 mg/L组IL-1β水平显著高于10 mg/L组(P<0.05),但与20 mg/L组和40 mg/L组比较差异无统计学意义(P均0.05).结论 重楼总皂苷能抑制CLP大鼠巨噬细胞活化并减轻肺损伤程度,对CLP大鼠具有保护作用.  相似文献   

16.
目的 探讨三七总皂苷(PNS)调控miR-1231对高糖诱导的肾小球系膜细胞(HMCs)增殖及炎症反应的影响。方法 将人肾小球系膜细胞(HMCs)分为空白对照组(CON),高糖组(HG)和三七总皂苷组(PNS)。采用CCK-8法检测PNS对高糖下HMCs增殖的抑制作用。采用Real-time PCR法检测miR-1231在各组的相对表达量,生物信息学分析法筛选与miR-1231相关的信号通路及其参与的生物学功能。采用ELISA法和Western blot法检测炎症因子的分泌情况。结果 CCK-8结果表明,与高糖组相比PNS在浓度为6.25~200μg/mL状态下,对细胞过度增殖的抑制作用呈现明显的浓度依赖性(P<0.05),且50μg/mL的PNS已能够显著改善高糖诱导下HMCs的异常增殖(P<0.01)。PCR的结果显示,与对照组相比,高糖组miR-1231表达显著下降;与高糖组相比,PNS干预后显著升高(P<0.01)。对miR-1231进行生物信息学分析,预测到miR-1231的靶基因有IGF1、TMED1、GSTT2等;用GeneOntology和KEGG数据...  相似文献   

17.
背景:绞股蓝对实验性脑缺血大鼠具有脑保护功能,血管性痴呆大鼠同样具有海马神经元的缺血缺氧性损伤,绞股蓝对此是否也有保护作用?目的:观察绞股蓝总皂苷(gypenosides,GP)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)阳性神经元及核酸的保护作用。设计:随机对照研究。地点和对象:研究在武警医学院中心实验室进行,二级雄性wistar大鼠30只,体质量240—260g,由天津市医学实验动物中心提供。干预:采用随机数字法将30只雄性大鼠分为对照组、模型组及给药组。模型组用改进的Pulsinelli 4-血管阻断方法建立大鼠VD模型。给药组:灌胃给药GP200mg/kg,按照大鼠VD模型的制备方法进行手术。对照组:同样进行手术但不灼烧颈动脉,不夹闭颈总动脉。主要观察指标:①大鼠海马nNOS表达。②大鼠海马DNA和RNA荧光染色强度。结果:模型组大鼠海马CAl区和CA3区nNOS阳性神经元数分别为(20.47&;#177;4.22)个和(25.47&;#177;3.52)个,明显少于对照组【(24.73&;#177;5.72)和(37.13&;#177;5.10)个】(P&;lt;0.05),DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度(反映DNA和RNA含量)也明显减弱。给药组海马CA1区和CA3区nNOS阻性神经元数分别为(30.00&;#177;3.63)个和(38.00&;#177;5.00)个,比模型组明显增多(P&;lt;0.001);给药组海马DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于模型组,且与对照组相似。结论:GP可明显增强血管性痴呆大鼠海马nNOS阳性神经元的表达,对海马神经元DNA和RNA损伤有保护作用。  相似文献   

18.
树突状细胞(Dendritic cell,DC)连接先天和适应性免疫。其特点是捕获抗原和加工,迁移到淋巴器官和表达抗原特异性淋巴细胞活化的各种共刺激分子的能力强。近年来国内外对树突状细胞抗肿瘤作用的研究已进入了Ⅰ 、Ⅱ临床实验阶段。我们选用脐血为原料诱导扩增DCs,使其诱导特异性的T细胞杀伤活性,杀伤肿瘤细胞,为DC疫苗临床应用寻找有效的途径。  相似文献   

19.
神经胶质瘤是颅内肿瘤中最常见的一种,占颅内肿瘤50%以上,具有侵袭性生长,手术难以完全切除,术后复发率高的特点。临床常规化疗药物不能有效通过血脑屏障,且易导致中枢神经系统甚至全身的毒副作用,使它们的应用受到限制。抑胶素作为一种特异性氯离子通道阻滞剂,它能特异性与胶质瘤细胞表面的氯离子通道结合,进而杀死瘤细胞,是高效低毒、不易发生耐药的抗胶质瘤药物。  相似文献   

20.
目的:探索人参皂苷Rb1、Rg1不同浓度对体外培养神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和分化的影响。方法:对胎鼠大脑皮质源性NSCs进行体外培养、鉴定;用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入法测定不同浓度的人参皂苷Rb1、Rg1及对照组(空白组)对NSCs增殖的影响,通过计算Brd U/DAPI比值,确定其促增殖的适宜浓度;荧光免疫细胞化学技术检测各组Tuj1、GFAP及DAPI(4′,6-diamidino-2-phenylindole)的表达,计算Tuj1/DAPI、GFAP/DAPI百分比,比较人参皂苷Rb1、Rg1对NSCs分化为神经元和神经胶质细胞的效率。结果:(1)所培养的细胞经鉴定为NSCs后,增殖实验中除人参皂苷0.1μmol/L Rg1(P0.05)外,其余各组Rg1和Rb1的Brd U/DAPI比值均显著性增加(P0.05),Rb1和Rg1均能促进体外培养的NSCs增殖,其适宜浓度Rb1、Rg1分别为1μmol/L、10μmol/L。(2)人参皂苷Rb1(10μmol/L)组GFAP/DAPI百分比与对照组相比显著增高(P0.05),而人参皂苷Rg1组GFAP/DAPI百分比及两种人参皂苷Tuj1/DAPI比值与对照组相比无显著性差异(P0.05)。结论:人参皂苷Rg1、Rb1在一定浓度范围内可促进体外NSCs增殖。Rb1能促进NSCs分化为星形胶质细胞。  相似文献   

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