白首乌中抗肿瘤活性成分告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷在大鼠体内的代谢产物分析

  目的   研究白首乌中甾苷成分告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷在大鼠体内的代谢情况。   方法   大鼠单剂量灌胃给予20 mg/kg的告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷,分别收集24 h内的血浆、尿液、粪便和胆汁,样品经处理后,采用UPLC-Q-TOF分析,结合MetabolynxTM软件初步鉴定告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷在大鼠血浆、尿液、粪便和胆汁中的代谢产物。   结果   在血浆、尿液、粪便和胆汁样品中发现了告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷的原型、水解及去甲基化代谢物,其中尿液中有原型,血浆和胆汁中有水解产物,粪便中有去2个甲基化产物,胆汁中有去1个和去3个甲基化产物。   结论   告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷在大鼠体内可发生较为广泛的代谢,其中主要代谢类型有水解和去甲基化。      

大鼠灌胃灯盏花素后血浆、胆汁、尿液以及粪便中代谢产物的鉴定

目的对大鼠灌胃灯盏花素后收集的血浆、胆汁、尿液以及粪便中存在的灯盏乙素的代谢产物进行鉴定。方法通过使用HPLC结合光电二极管阵列检测器(DAD),采用梯度洗脱的方法,对比分析给药组大鼠和空白组大鼠的血浆、胆汁、尿液以及粪便样品,并且在相同的液相色谱条件下与对照品的保留时间和紫外吸收特征进行对照来鉴定主要代谢产物。结果从大鼠ig 20、200 mg/kg灯盏花素的血浆中鉴定了代谢产物野黄芩素-6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6-O-β-D-glucuronide,M5);从大鼠ig 20、200 mg/kg灯盏花素的胆汁中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1)、6-O-甲基-灯盏乙素(6-O-methyl-scutellarin,M3)、野黄芩素-6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6-O-β-D-glucuronide,M5)和灯盏乙素(黄芩素苷,scutellarin,M7),从大鼠ig 20 mg/kg灯盏花素的尿液中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1),从大鼠ig 200 mg/kg灯盏花素的尿液中鉴定了代谢产物野黄芩素-6,7-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(scutellarein-6,7-di-O-β-D-glucuronide,M1)、野黄芩素(scutellarein,M2)和灯盏乙素(scutellarin,M7);从大鼠ig 200 mg/kg灯盏花素的粪便中鉴定了代谢产物野黄芩素(scutellarein,M2)。结论灯盏乙素在大鼠体内发生了广泛的代谢,并且主要以其代谢产物的形式存在;灯盏乙素在大鼠体内产生的代谢产物主要通过尿液和胆汁排泄。     

超高效液相色谱-质谱联用分析波尔定在大鼠体内的代谢产物

目的分析鉴定波尔定在大鼠体内的主要代谢产物与代谢途径。方法收集波尔定灌胃后大鼠的血浆、尿液、粪便和胆汁,采用超高效液相色谱-质谱联用分离鉴定其主要代谢产物。结果在大鼠血浆、尿液、粪便和胆汁中共检测到5个代谢产物,为波尔定葡萄糖醛酸和硫酸结合物。结论波尔定在大鼠体内代谢途径主要是Ⅱ相结合代谢,生成葡萄糖醛酸结合物和硫酸结合物。     

短小舌根草苷的制备及其在大鼠体内代谢产物的UPLC-QTOF/MS鉴定

通过AB-8大孔吸附树脂对胆木药材水提液进行吸附,用不同比例的乙醇水溶液对其梯度洗脱,通过分离纯化获得纯度较高的短小舌根草苷单体。用UPLC-QTOF/MS分析技术鉴定大鼠灌胃短小舌根草苷后,尿液、粪便以及胆汁中该成分可能的代谢产物。采用全扫描方式采集所有成分准确MS/MS数据,利用MetaboLynx软件分析处理,获得了纯度较高的短小舌根草苷单体并鉴定出了其在大鼠体内的4种代谢产物。     

UPLCPDA法研究Liguzinediol在大鼠体内的排泄

目的?采用UPLCPDA法对Liguzinediol及其代谢产物在大鼠体内的排泄进行研究。方法?SD大鼠雌雄各6只,尾静脉注射给药10mg/kg,按照时间点分别收集尿液、胆汁、粪便,样品经甲醇处理后,取上清液N₂吹干,流动相复溶。采用UPLCPDA法对大鼠尿液、胆汁、粪便中Liguzinediol及其代谢产物进行测定,通过代谢产物与原型药物的吸收系数之比及分子量折算确定代谢产物的换算因子,计算Liguzinediol在大鼠体内的累计排泄量占剂量的百分比（Dose%）。结果?雌雄大鼠尿液、胆汁及粪便排泄过程略有差异,Liguzinediol及其主要代谢产物在雌性大鼠的尿液、胆汁及粪便的Dose%分别为47.94%、16.67%、0.648%,体内累计Dose%为65.26%;Liguzinediol及其主要代谢产物在雄性大鼠的尿液、胆汁及粪便的Dose%分别为35.00%、20.37%、1.156%,体内累计Dose%为56.53%。结论?采用加换算因子的UPLCPDA法可以简便、快速地对Liguzinediol 在大鼠体内的物质平衡进行探索性研究,为开展药物临床研究提供实验依据。      

液相色谱-串联质谱联用法测定大鼠血浆中葫芦茶苷及其代谢物

目的:研究大鼠分别灌胃和静脉给药葫芦茶苷溶液后,血浆中的葫芦茶苷及其代谢产物.方法:雌性Sprague Dawley大鼠分别经灌胃(10 mg/kg)和静脉注射(2 mg/kg)给予葫芦茶苷溶液后,按设计的时间点从大鼠眼内眦静脉丛采集血液样品,置于肝素化的离心管中,低温离心得血浆.取5、15、30min和1、2h血浆样品各40μL,合并,混匀,加入600 μL甲醇,漩涡振摇5 min,13 000 r/min离心10min,取上清液,在N2下吹干,残渣用50 μL甲醇复溶,再次振摇和离心,取上清液40 μL,利用液相色谱-串联质谱联用仪(LC-MS/MS)进行分析.根据葫芦茶苷在血浆样品中的LC-MS/MS出峰情况,比较空白血浆样品与不同途径给药后相应的生物样品,结果:大鼠血浆中可以检测到葫芦茶苷原形物质,也可检测到脱糖代谢物对羟基桂皮酸.通过中性丢失扫描,确定对羟基桂皮酸再发生结合代谢形成硫酸酯化代谢物.同时,对羟基桂皮酸发生脱氢反应,形成对羟基苯丙酸.结论:给药后大鼠血浆中形成葫芦茶苷多种代谢物,对羟基桂皮酸可能是发挥药效活性的代谢产物.     

基于UHPLC-Q-TOF/MS的地榆化学成分分析及大鼠体内代谢研究

目的  采用超高效液相色谱和-四级杆串联飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)法分析地榆水提物在大鼠血清、尿液及粪便中的原型成分及代谢产物, 探讨地榆中活性成分在大鼠体内的代谢途径。方法  采用Thermo AcclaimTM RSLC 120 C₁₈色谱柱(3.0 mm×100 mm, 2.2 μm), 以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱, 流速0.4 mL·min-1, 进样量3 μL, 柱温40 ℃。运用电喷雾离子源(ESI), 扫描范围m/z 50~1 500, 正、负离子模式采集数据。通过比较灌胃地榆水提物后大鼠血清、尿液和粪便样品和空白组样品的差异, 对原型成分及其代谢产物进行鉴定。结果  灌胃给予地榆水提物后, 从大鼠血清、尿液及粪便中鉴定出69个外源性成分, 包括24个原型成分和45个代谢产物。其中24个原型成分包括16个酚类成分、7个三萜类成分及1个单萜烯醇苷。地榆水提物在大鼠体内的代谢途径主要包括还原、甲基化、脱水、氧化、硫酸化及葡萄糖醛酸结合等。结论  所鉴定出的原型成分和代谢产物可为进一步解析地榆体内代谢过程, 阐明其药效物质基础提供实验依据。      

丹酚酸C在大鼠体内的代谢产物

分离鉴定大鼠灌胃丹酚酸C后血浆和尿液中的代谢产物。代谢样品用强阴离子交换小柱固相萃取方法进行制备后,采用高效液相-四极杆-飞行时间串联质谱(HPLC-ESI/Q-TOF MS/MS),在负离子模式下进行检测,获取数据进行结构鉴定。从大鼠血浆和尿液中检测到丹酚酸C原形成分和5个代谢产物,分别鉴定为caffeic acid(M1),monomethyl-salvianolic acid C-monoglucuronide(M2),dimethyl-salvianolic acid C-monoglucuronide(M3),dimethyl-salvianolic acid C-monoglucuronide(M4),dimethyl-salvianolic acid C(M5)。结果表明丹酚酸C在大鼠体内的主要代谢途径是甲基化和葡萄糖醛酸化反应。     

LC-MS/MS定性分析大鼠尿液中益智提取物的成分及其代谢产物

目的 通过LC-MS/MS法检测大鼠尿液中益智提取物中10种活性成分的存在形式.方法 采用LC-MS/MS法检测灌胃给药后0~4 h、4~8 h、8~24 h大鼠尿液中的益智代谢产物,与给药前大鼠空白尿液MRM图进行比对.结果 实验组大鼠尿液中9种主要活性成分均以原形化合物的形式存在,而未发现山柰酚及其葡萄糖酸代谢产物.结论 大鼠灌胃益智提取物后,益智活性成分在大鼠尿液中的物质形式以原形为主,为理解这些物质在大鼠体内的消除途径提供部分参考依据.     

当药苦苷体内向香豆素类化合物转化过程的研究

目的:探究当药苦苷体内向香豆素类化合物转化的过程。方法:通过设计化学衍生化-LC/MS的方法对可能代谢物进行检测,当药苦苷的体外主要的代谢产物为红百金花内酯,于是采用衍生化的方法提高其检测灵敏度。再经过动物实验和肝微粒孵育进行验证。结果:样品处理后经LC/MS经色谱测定后,专属性、精密度和准确度、稳定性等均满足生物样品分析,大鼠血浆中ECR定量分析,平均最高血药浓度、最长吸收时间、最大药时曲线面积分别为425.8±127.6ng/m L,128.6min,38.8μg/m L·min。结论:大鼠灌胃当药苦苷后血浆经衍生化,成功在血浆中检测到了红百金花内酯,当药苦苷首先在体内被水解变成苷元,大部分苷元经重排变成红百金花内酯,一个二氢香豆素,首次阐明了当药苦苷的大鼠体内代谢产物,发现其可以由单萜类化合物转化为生物碱类和香豆素类化合物,并以代谢物的形式发挥药效。丰富了环烯醚萜类化合物的体内代谢研究方法。     

Identification of metabolites of Radix Paeoniae Alba extract in rat bile,plasma and urine by ultra-performance liquid chromatography–quadrupole time-of-flight mass spectrometry

Ultra-performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry (UPLC–Q-TOF/MS) was developed to identify the absorbed parent components and metabolites in rat bile, plasma and urine after oral administration of Radix Paeoniae Alba extract (RPAE). A total of 65 compounds were detected in rat bile, plasma and urine samples, including 11 parent compounds and 54 metabolites. The results indicated that glucuronidation, hydroxylation and methylation were the major metabolic pathways of the components of RPAE. Furthermore, the results of this work demonstrated that UPLC–Q-TOF/MS combined with MetaboLynx^™ software and mass defect filtering (MDF) could provide unique high throughput capabilities for drug metabolism study, with excellent MS mass accuracy and enhanced MS^E data acquisition. With the MS^E technique, both precursor and fragment mass spectra can be simultaneously acquired by alternating between high and low collision energy during a single chromatographic run.     

UPLC-Q-TOF/MS based metabolomic profiling of serum and urine of hyperlipidemic rats induced by high fat diet

Hyperlipidemia is considered to be a high lipid level in blood, can induce metabolic disorders and dysfunctions of the body, and results in some severe complications. Therefore, hunting for some metabolite markers and clarifying the metabolic pathways in vivo will be an important strategy in the treatment and prevention of hyperlipidemia. In this study, a rat model of hyperlipidemia was constructed according to histopathological data and biochemical parameters, and the metabolites of serum and urine were analyzed by UPLC-Q-TOF/MS. Combining pattern recognition and statistical analysis, 19 candidate biomarkers were screened and identified. These changed metabolites indicated that during the development and progression of hyperlipidemia, energy metabolism, lipid metabolism, amino acid metabolism and nucleotide metabolism were mainly disturbed, which are reported to be closely related to diabetes, cardiovascular diseases, etc. This study demonstrated that a UPLC-Q-TOF/MS based metabolomic approach is useful to profile the alternation of endogenous metabolites of hyperlipidemia.     

藤黄酸在大鼠体内的药代动力学

目的:研究藤黄酸在大鼠体内的药代动力学.方法:大鼠静注单剂量藤黄酸后,采用HPLC法测定大鼠血浆、组织、粪便、胆汁及尿液中的藤黄酸.结果:藤黄酸在大鼠体内的平均消除半衰期仅为15 min.AUC与剂量呈现良好的线性相关性,提示藤黄酸在大鼠体内的处置属于线性动力学.静注给药后藤黄酸主要分布于肝、肺、脾、肾、胃、肠和心脏.静注给药后藤黄酸主要通过胆汁排泄,给药后16 h内藤黄酸在胆汁中的平均累积排泄百分率为36.5%;粪便中仅有少量的藤黄酸排出,其平均累积排泄百分率为1.04%;尿液中未检测到藤黄酸.在大鼠的胆汁中检测到藤黄酸的4个代谢物.藤黄酸平均血浆蛋白结合率为31.1%.结论:静注给药后,藤黄酸迅速从大鼠体内消除,并可在体内广泛分布和代谢,主要以原型和代谢物的形式从胆汁排泄.     

基于液质联用技术的白头翁汤治疗溃疡性结肠炎小鼠血清代谢组学分析

目的 研究白头翁汤给予溃疡性结肠炎小鼠前后内源性代谢物的变化,寻找与治疗溃疡性结肠炎有关的代谢生物标志物,探讨白头翁汤对溃疡性结肠炎模型的调节作用及其可能机制。方法 采用DSS复制小鼠溃疡性结肠炎模型,借助超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术,对各组小鼠血清样本进行测定,采用主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)来筛选差异性代谢物。结果 经分析,对照组、模型组和白头翁汤治疗组血清样本能够得到很好的区分,共鉴定出6种潜在生物标志物,白头翁汤给药后溃结小鼠的内源性代谢物水平发生不同程度的回调。结论 白头翁汤可以使DSS诱导的溃结小鼠的异常代谢有所恢复,其治疗作用可能与机体内6个代谢物及3条相关代谢通路的调节有关。      

片叶苔素D大鼠体内代谢产物的结构鉴定

目的 研究片叶苔素D在大鼠体内的代谢,并对片叶苔素D在大鼠体内代谢产物进行分离与结构鉴定。方法 大鼠按40mg/kg剂量口服片叶苔素D后收集胆汁,采用高效液相色谱仪分离、纯化代谢产物,利用HPLC-MS/MS分析代谢产物,利用NMR鉴定结构。结果 大鼠口服片叶苔素D后,在胆汁中检测到2个Ⅱ相代谢产物,均为片叶苔素D与葡萄糖醛酸的结合产物(片叶苔素D-1’-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸),且两个代谢产物互为旋阻异构体,室温下可互相转化。结论 片叶苔素D在大鼠体内产生与葡萄糖醛酸结合的Ⅱ相代谢产物,且2个代谢产物互为旋阻异构体。