枸杞多糖对高糖干预的人晶状体上皮细胞中SIRT1及SIRT6表达的影响

目的 研究枸杞多糖(LBP)对高糖干预的人晶状体上皮(HLEB3)细胞中沉默信息调节因子1(SIRT1)及沉默信息调节因子6(SIRT6)表达水平的影响。方法 将对数生长期的HLEB3细胞随机分为对照组(CON组,5.5 mmol·L^-1)、高糖组(HG组,55.5 mmol·L^-1)、HG+12.5 mg·L^-1LBP组、HG+25 mg·L^-1LBP组、HG+50 mg·L^-1LBP组,培养24 h后,分别用相应培养基干预48 h,用显微镜观察各组细胞的形态及密度变化;采用CCK-8试剂盒检测各组细胞的存活率;采用免疫荧光法对各组细胞中SIRT1和SIRT6蛋白进行定位检测;采用Western blot法测定各组细胞中SIRT1与SIRT6蛋白的表达水平。结果 光镜下观察发现,CON组HLEB3细胞主要呈梭形贴壁生长,HG组细胞形态呈不规则状,细胞密度降低;与HG组相比,HG+12.5 mg·L^-1LBP组、HG+25 mg·L^-1     

FoxO1在糖脂代谢机制中的研究进展

FoxO1是叉头转录家族O亚族的一类代谢性调节因子,通过磷酸化、乙酰化、泛素化修饰等方式调控多种基因的表达.FoxO1可以结合于PDX-1基因的启动子上,通过抑制其转录活性,抑制胰岛β细胞增殖、增加其去分化并促进其凋亡.同时,FoxO1还可以促进糖异生G6Pase和PEPCK基因的表达,增加胰岛素抵抗.此外,FoxO1...     

IGF1对高糖下内皮细胞增殖及移行的影响

目的 观察高糖下胰岛素样生长因子1 ( IGF1 )对高糖下人脐静脉内皮细胞( HUVEC)增殖和移行的影响,并探讨其可能影响机制. 方法 体外培养HUVEC,分为对照组、高糖组、高渗组、高糖 +IGF1 组和高糖 +IGF1 +AZD5363组,四甲基偶氮唑蓝( MTT)比色法检测内皮细胞增殖,Tran-swell小室观察细胞移行. 实时荧光定量PCR测定丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)及叉头转录因子1(FoxO1)的mRNA水平. 免疫组化法测定内皮细胞 Akt、p-Akt、FoxO1 和 p-FoxO1的蛋白表达,并行半定量分析. 结果 与对照组比较,高糖组细胞存活率、移行率明显降低,FoxO1 mRNA表达明显升高,FoxO1/p-FoxO1蛋白表达增加,Akt/p-Akt比值增加,差异均有统计学意义( P<0. 05 ). 与高糖组比较,高糖+IGF1组细胞存活率、移行率明显增加, FoxO1 mRNA的表达明显降低,FoxO1/p-FoxO1蛋白表达降低,Akt/p-Akt蛋白表达降低,差异均有统计学意义( P<0. 05 );高糖+IGF1 +AZD5363组细胞存活率未见明显差异,移行未增加, FoxO1 mRNA的表达明显降低( P<0. 05 ) , FoxO1/p-FoxO1 未见明显差异. 5组Akt mRNA的表达差异无统计学意义. 结论IGF1能改善高糖对内皮细胞增殖移行的抑制作用,其机制可能是IGF1激活Akt 进一步调节FoxO1的表达.     

过表达SIRT1对高糖诱导RVECs细胞的影响及对VEGF和PEDF表达的影响

目的:探讨过表达沉默信息调节因子-1(SIRT1)对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞(RVECs)增殖、凋亡的影响.方法:构建SIRT1过表达慢病毒载体,感染体外培养的RVECs细胞.实验分3组:(1)正常对照组(NG组):不处理;(2)高糖组(HG组):33 mmol/L葡萄糖处理;(3)SIRT1过表达慢病毒组(SIRT1组):33 mmol/L葡萄糖处理,同时转染SIRT1过表达慢病毒.采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测细胞SIRT1、血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)的表达.采用噻唑蓝比色法和原位末端标记法(TUNEL)检测细胞增殖、凋亡情况.结果:与NG组较,HG组细胞SIRT1表达降低,VEGF和PEDF表达增加,细胞增殖率增加、凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与HG组比较,SIRT1组细胞SIRT1表达增加,VEGF和PEDF表达降低,细胞增殖率降低、凋亡率增加,差异均有统计学意义(P<0.05).Pearson分析显示,SIRT1表达与VEGF和PEDF呈负相关(r=-0.814,P=0.005;r=-0.593,P=0.029).结论:过表达SIRT1能够抑制高糖诱导的RVECs细胞增殖、促进凋亡,并下调细胞VEGF和PEDF表达.     

miRNA-370沉默对酒精性肝病大鼠的保护作用及机制研究

目的:探究微小RNA（miRNA）-370沉默对酒精性肝病（ALD）大鼠的作用及机制。方法:32只Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为4组:正常组（普通饲料）、模型组（40%酒精灌胃+隔日高脂饲料饲养）、空载组（40%酒精灌胃+隔日高脂饲料饲养+尾静脉注射含空载质粒的腺病毒）和沉默组（40%酒精灌胃+隔日高脂饲料饲养+尾静脉注射含si-miRNA-370质粒的腺病毒），每组各8只。用40%酒精灌胃联合隔日高脂饲料饲养法构建ALD大鼠模型。酶联免疫吸附法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）表达水平；实时荧光定量PCR法检测miRNA-370、沉默信息调节因子6（SIRT6）mRNA和Nrf2 mRNA表达水平；蛋白质免疫印迹法检测SIRT6和Nrf2表达水平。结果:与正常组比较，模型组SOD、GSH-Px、SIRT6 mRNA、Nrf2 mRNA、SIRT6和Nrf2水平降低，丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、甘油三酯（TG）、MDA和miRNA-370水平升高，差异均有统计学意义（q=10.306、14.839、9.040、10.645、5.836、8.775、11.098、10.066、8.569、4.976、12.435，均P＜0.05）。与空载组比较，沉默组SOD、GSH-Px、SIRT6 mRNA、Nrf2 mRNA、SIRT6和Nrf2水平升高，ALT、AST、TG和miRNA-370水平降低，差异均有统计学意义（q=5.731、9.537、14.524、29.569、8.888、16.233、8.144、6.818、5.329、21.317，均P＜0.05）。结论:MiRNA-370沉默可改善ALD大鼠肝脏损伤，升高SOD和GSH-Px水平，其机制可能与调控SIRT6和Nrf2表达有关。     

SIRT1对糖尿病胃轻瘫小鼠胃排空的影响及机制

目的 研究沉默信息调节因子1（silent information regulator 1,SIRT1）对糖尿病胃轻瘫小鼠胃排空率的影响及机制。方法 雄性C57BL/6J小鼠采用数字法随机分为空白组、模型组、溶剂对照组、白藜芦醇（resveratrol,Res）组,每组8只。除空白组以外,其余小鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）造模,空白组小鼠给予等量的柠檬酸缓冲液腹腔注射。造模成功后,Res组小鼠给予Res 30 mg·kg^-1·d^-1腹腔注射,溶剂对照组小鼠给予等量DMSO0.9%（质量分数）氯化钠注射液溶液腹腔注射,持续6周。6周后采用固体胃排空法测胃排空率,比色法检测小鼠胃窦组织中总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）浓度,免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法（Western blotting,WB）检测胃窦组织中SIRT1、BTB-CNC异体同源体1（BTB and CNC homology 1,Bach1）、酪氨酸激酶受体（tyrosine kinase receptor,c-kit）和血红蛋白氧合酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）的表达变化。结果 与空白组小鼠相比,模型组小鼠胃排空率明显下降,与模型组小鼠相比,Res组小鼠胃排空率明显升高（P<0.05）;与空白组小鼠相比,模型组小鼠胃窦组织中T-SOD活力下降,MDA含量升高,与模型组小鼠相比,Res组小鼠T-SOD活力升高,MDA含量下降（P<0.05）;模型组小鼠胃窦组织中SIRT1、c-kit、HO-1较空白组下降,而Bach1浓度高于空白组;Res组小鼠SIRT1、c-kit、HO-1均较模型组上升,而Bach1浓度低于模型组（P<0.05）。结论 上调SIRT1可以通过调控Bach1和HO-1蛋白浓度,减轻糖尿病胃轻瘫小鼠胃组织中的氧化应激,维持小鼠正常的胃排空。     

miRNA-138 调控卵巢上皮癌细胞对顺铂敏感性的机制研究

目的 探讨miRNA-138 和沉默信息调节因子2 相关酶1（SIRT1）的差异表达对卵巢上皮癌顺铂化疗敏感性的影响。方法 选取2014 年1 月-2017 年1 月在牡丹江医学院红旗医院妇科就诊卵巢上皮癌患者80 例。根据患者对顺铂化疗的敏感性分为顺铂敏感组和顺铂耐药组。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot 检测卵巢上皮癌组织中miRNA-138 和SIRT1 的表达水平;培养SKOV3 细 胞, 分别转染miRNA-138 的类似物（miRNA-138 mimic） 和抑制物（miRNA-138 inhibitor） 后,qRTPCR检测SIRT1 miRNA 的表达变化,并采用MTT 法检测细胞对顺铂的敏感性;SIRT1 miRNA 3''-UTR 野生型（wt）和突变型（mut）萤光素酶报告质粒与miRNA-138 mimic 共转染,双荧光素酶报告系统分析荧光素酶活性。结果 铂敏感组miRNA-138 表达水平高于顺铂耐药组,而SIRT1 表达水平低于顺铂耐药组,差异有统计学意义（P <0.05）;过表达miRNA-138 可降低SIRT1 的表达,提高SKOV3 细胞对顺铂的敏感性,而抑制miRNA-138 可提高SIRT1 的表达,降低SKOV3 细胞对顺铂的敏感性,差异有统计学意义（P <0.05）;miRNA-138 mimic 与SIRT1 miRNA 3''-UTR 野生型质粒共转染,荧光素酶活性降低（P <0.05）,而与SIRT1 miRNA 3''-UTR 突变型质粒共转染,荧光素酶活性无变化（P >0.05）。结论 miRNA-138 可能通过SIRT1 调控卵巢上皮癌细胞对顺铂的敏感性,可作为卵巢上皮癌顺铂化疗耐药治疗的靶点。     

硫化氢通过调控沉默信息调节子1抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤

目的 观察外源性硫化氢（H2S）对高糖诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）氧化应激损伤的保护作用及其可能机制。方法 用25 mmol/L D-葡萄糖（高糖）、外源性H2S供体硫化氢钠（NaHS）（5×10-5、1×10-4、5×10-4、1×10-3和5×10-3mol/L）及沉默信息调节子1（SIRT1）特异性抑制剂尼克酰胺（40 mmol/L）处理HUVECs细胞株24 h。实验分为对照组、高糖组、甘露醇组、NaHS（5×10-5、1×10-4、5×10-4、1×10-3、5×10-3mol/L）组、高糖＋NaHS（5×10-5、1×10-4、5×10-4、1×10-3和5×10-3mol/L）组和高糖＋NaHS（10-3 mol/L）＋尼克酰胺组。采用MTT比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞内的内活性氧（ROS）水平,Western bolt法检测SIRT1的表达。结果 与对照组比较,高糖组细胞活力显著降低[OD值分别为（0.76±0.09）和（0.18±0.01）,t=5.34,P〈0.05],细胞内ROS水平显著增加[ROS水平分别为（356.18±42.96）au和（1183.63±84.31）au,t=6.72,P〈0.05]。与高糖组比较,高糖＋NaHS（5×10-4、1×10-3和5×10-3 mol/L）组细胞活力显著增加[OD值分别为（0.18±0.01）、（0.39±0.05）、（0.68±0.04）和（0.51±0.08）,t1=3.16,t2=3.95,t3=3.86,均P〈0.05],细胞内ROS水平显著降低[ROS水平分别为（1183.63±84.31）、（874.32±85.36）、（628.65±54.27）和（439.56±53.64）au,t1=3.46,t2=3.97,t3=5.13,均P〈0.05]。与对照组比较,高糖组细胞中SIRT1蛋白表达显著下调[蛋白相对表达量分别为（0.48±0.04）和（0.17±0.03）,t=3.94,P〈0.05]。与高糖组比较,高糖＋NaHS（10-3mol/L）组细胞中SIRT1表达显著上调[蛋白相对表达量分别为（0.17±0.03）和（0.59±0.08）,t=4.36,P〈0.05]。SIRT1抑制剂尼克酰胺取消了NaHS抑制高糖诱导的HUVECs细胞活力的降低[高糖＋NaHS组和高糖＋NaHS＋尼克酰胺组OD值分别为（0.52±0.04）和（0.23±0.03）,t=2.98,P〈0.05]和细胞内ROS水平的增加[高糖＋NaHS组和高糖＋NaHS＋尼克酰胺组ROS水平分别为?     

SIRT1对内分泌与代谢的调节

沉默信息调节因子2(SIR2)发现于酵母细胞中的,其参与酵母交配型基因沉默、端粒区基因沉默和重组,维持基因的稳定性,并与物质代谢和长寿有着很大的关系。后来发现SIR2在转录调节过程中具有很关键的催化作用即组蛋白去乙酰化酶活性。进一步研究发现SIR2特别是哺乳动物的同源基因SIRT1在调节内分泌信号方面起着重要的作用。本文主要对SIR2在insulin/IGF-1通路、肝脏、白色脂肪组织、特别是在胰岛β细胞内分泌与代谢的调节作用做一综述。     

miRNA-497与miRNA-195基因簇在宫颈癌组织中的表达及预测靶基因的生物信息学分析

目的探讨miRNA-497-195基因簇在宫颈癌组织中的表达,并对其预测的靶基因进行生物信息学分析,为miRNA-497-195基因簇在宫颈癌发生中的作用机制研究提供理论基础。方法收集2010年3月～2012年3月在广西壮族自治区人民医院就诊患者的宫颈标本,利用miRNA芯片技术检测宫颈病变组织中miRNA表达谱,用real-time RT-PCR进行验证;采用real-time RT-PCR检测miRNA-497和miRNA-195在宫颈病变组织中的表达情况,并用Spearman法进行miRNA-497与miRNA-195相关性分析。通过生物信息学预测miRNA-497和miRNA-195的靶基因,并对其靶基因进行GO（gene ontology）功能富集分析及信号转导通路富集分析。结果芯片结果显示,宫颈癌及高度鳞状上皮内瘤变中miRNA-195和miRNA-497表现为下调（均P〈0.05）。real-time RT-PCR结果显示,miRNA-497和miRNA-195在宫颈癌组织中表现为下调,且表达存在显著性相关（r=0.983,P〈0.05）。miRNA-497和miRNA-195预测靶基因大量重合,且集合功能也大量重合,并富集于细胞周期调控、生物学过程调控、转录调控、基因表达及核苷酸代谢过程等生物学过程,以及蛋白结合、核酸结合、蛋白激酶活性、连接酶活性等分子功能（P〈0.01）;KEGG通路分析涉及癌症通路、p53信号通路、GnRH信号通路、细胞外因子信号通路等信号传导通路及直肠癌、前列腺癌、甲状腺癌、黑色素瘤、慢性粒细胞性白血病、非小细胞肺癌等疾病通路（P〈0.05）。结论 miRNA-195和miRNA-497在宫颈癌组织中呈现低表达,二者表达呈显著正相关,miRNA-497-195基因簇可能是宫颈癌的抑制因子。miRNA-497和miRNA-195预测靶基因功能大量重合,并显著富集在与肿瘤发生相关的信号通路中。     

白藜芦醇对喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的增强作用及其机制

目的:探讨白藜芦醇提高喉癌Hep-2细胞株对顺铂(DDP)敏感性的作用,并阐明其作用机制。方法:Hep-2喉癌细胞随机分为空白对照组和DDP组(终浓度分别为3、6、12和24 μmol·L^-1)培养6、12、24及48 h。CCK-8法检测各组细胞生存率;选出DDP的最佳作用浓度6 μmol·L^-1和作用时间24 h。Hep-2喉癌细胞株经培养后随机分为对照组、DDP组、白藜芦醇组、sirtinol组、白藜芦醇+sirtinol组、白藜芦醇+DDP组、sirtinol+DDP组和白藜芦醇+sirtinol+DDP组。CCK-8法检测各组细胞生存率;采用免疫荧光法观察各组细胞中Sirt1蛋白的表达强度;Annexin Ⅴ-FITC Kit法检测各组细胞凋亡率。结果:CCK-8检测,与对照组比较,DDP组和白藜芦醇组细胞生存率明显下降(P<0.01);与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞生存率明显下降(P<0.01);与白藜芦醇+sirtinol+DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞生存率明显下降(P<0.05)。细胞免疫荧光法检测,与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞中Sirt1 蛋白的平均免疫荧光强度明显升高(P<0.01);与白藜芦醇+sirtinol+DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞中Sirt1 蛋白的平均免疫荧光强度明显升高(P<0.01)。Annexin Ⅴ-FITC Kit检测,与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞凋亡率均明显升高(P<0.01);与白藜芦醇+sirtinol+DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。结论:白藜芦醇提高Hep-2喉癌细胞株对DDP的敏感性,其机制可能与提高喉癌细胞中Sirt1蛋白表达有关联。     

miRNA-34a对无血清培养诱导心肌细胞凋亡的影响及机制研究

目的：探讨miRNA-34a（miR-34a）对无血清培养诱导的大鼠心肌细胞凋亡及B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）表达水平的影响。方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,实验分实验组（转染miR-34a inhibitor）、空白对照组（无转染miR inhibitor）和阴性对照组（转染随机合成NC microRNA片段）。转染24h后无血清培养饥饿诱导细胞凋亡,Western bolt法检测Caspase-3及Bcl-2的表达。结果实验组细胞Caspase-3表达低于空白对照组和阴性对照组（P＜0.05）。Bcl-2表达明显高于空白对照组和阴性对照组（P＜0.05）。结论转染miR-34a inhibitor可以下调miR-34a的表达,减少无血清培养诱导H9C2细胞的凋亡,Bcl-2的表达增加可能参与了其保护机制。     

miRNA-331对大肠癌细胞HCT116生物学功能的影响

目的 探讨miRNA-331对大肠癌细胞HCT116增殖、迁移和侵袭等生物学功能的影响.方法 将HCT116细胞转染miRNA-331 mimics后,通过MTT实验、克隆形成实验检测miRNA-331对大肠癌细胞增殖的影响;Transwell实验检测miRNA-331对HCT116细胞迁移和侵袭的影响.结果 转染miRNA-331 mimics的HCT116细胞在MTT实验中第1天～第5天的吸光度值与对照组相比显著减低;克隆形成实验中,转染miRNA-331 mimics后,HCT116细胞形成克隆的能力被削弱;Transwell实验显示,与阴性对照相比,转染miR-NA-331 mimics后,HCT116细胞的迁移能力明显下降.结论 miRNA-331表达上调可抑制HCT116细胞的增殖、迁移能力,表明miRNA-331有潜在的抑癌作用.     

赖氨藤黄酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

目的: 研究赖氨藤黄酸(GAL)对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响并探讨其作用机制,为GAL 抗乳腺癌的临床研究和应用提供理论依据。方法: 选取处于对数生长期的MCF-7细胞,并随机分为空白对照组、不同剂量 (0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和8.00 μmol·L^-1)GAL组和不同剂量(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和8.00μmol·L^-1)藤黄酸组,采用MTT法检测各组MCF-7细胞48 h增殖活性。选取对数生长期的MCF-7细胞,2 μmol·L^-1 GAL作用MCF-7细胞不同时间(0、6、12、24、36、48和60 h),采用MTT法检测作用不同时间后各组MCF-7细胞增殖活性。流式细胞术和Hoechst 33258染色检测各组MCF-7细胞24 h时凋亡情况,采用Western blotting 法检测各组MCF-7细胞24 h时凋亡相关蛋白的表达水平。结果: 细胞培养24 h 后,不同剂量GAL组MCF-7细胞存活率低于空白对照组(P<0.05),随剂量增加和作用时间延长细胞存活率下降(P<0.05)。流式细胞术和Hoechst 33258染色,与空白对照组比较,不同剂量GAL组MCF-7细胞凋亡率明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。Western blotting检测,与空白对照组比较,不同剂量GAL组细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白表达水平明显降低 (P<0.05),而caspase-3切割片段蛋白的表达水平明显高于对照组 (P<0.05)。结论: GAL 通过抑制SIRT1蛋白表达水平和上调caspase-3切割片段蛋白的表达水平诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

虎杖苷对实验性哮喘小鼠气道炎症的影响及其机制

探讨虎杖苷（PD）对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘小鼠气道炎症的影响,阐明其可能作用机制。     

NMN在糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化中的作用及其机制

目的：探讨烟酰胺单核苷酸（NMN）对糖尿病肾病（DN）大鼠肾细胞纤维性变的作用,阐明NMN通过沉默信息调节因子1（Sirt1）和AKT途径缓解肾实质细胞纤维化的机制。方法：采用链脲佐菌素（STZ）制备SD大鼠2型糖尿病模型,模型大鼠随机分为实验组（n=30）和对照组（n=10）：实验组大鼠分为糖尿病+NMN组（n=15,连续皮下注射NMN）和糖尿病+PBS组（n=15,大鼠注射200 μL无菌PBS）,之后断头处死大鼠,取肾脏组织进行切片和蛋白提取,Westen blotting法和免疫共聚焦法检测2组大鼠肾小球细胞中Sirt1、AKT、p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达水平。采用高浓度葡萄糖（200 mmol·L^-1）处理大鼠肾小球系膜HBZY-1细胞3~6 d后,随机将培养细胞分为4组（分别给予0、50、100和200 μmol·L^-1 NMN）,以给予5.6mmol·L^-1葡萄糖不给予NMN的细胞作为对照组,继续培养24 h后收集细胞提取蛋白,采用Westen blotting法检测各组HBZY-1细胞中Sirt1、AKT和p-FoxO3a蛋白表达水平。结果：与糖尿病+PBS组比较,糖尿病+NMN组大鼠肾实质细胞中Sirt1和AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,糖尿病+NMN组大鼠肾实质细胞中p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达水平升高（P<0.01）。与对照组（给予5.6 mmol·L^-1葡萄糖）比较,50 μmol·L^-1NMN组HBZY-1细胞中Sirt1和AKT蛋白表达水平升高（P<0.05）,100和200 μmol·L^-1NMN组HBZY-1细胞中Sirt1、AKT和p-FoxO3蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。结论：NMN能够通过调节Sirt1与AKT蛋白表达提高DN大鼠肾小球细胞中内源性p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达,NMN及其类似物可能具有潜在预防或治疗DN大鼠肾小球纤维化的作用。     

食管癌患者miR-182表达水平及其对预后的影响

目的探讨miR-182在食管癌患者组织中的基因表达及其对预后的影响。方法采用实时荧光定量PCR 检测59 例食管癌标本和癌旁组织中miR-182 表达水平;并分析其表达水平与患者的临床病理特征和随访结局之间的关系。结果相较于癌旁组织,食管癌组织中miR-182 表达水平增高（P <0.05）;miR-182 表达水平与肿瘤分化程度、浸润深度、是否发生转移以及临床分期相关（P <0.05）,与性别、年龄以及肿瘤大小无关系（P >0.05）;生存分析显示miR-182 高表达组总体生存期低于低表达组（P <0.05）;Cox 多因素回归分析结果显示miR-182 表达水平可作为食管癌患者预后不良的标志之一。结论miR-182 在食管癌组织中高表达,其高表达提示预后较差,可作为食管癌潜在的预测分子标志物。     

miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达及对胃癌生物学行为的影响

目的:探讨miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达情况及对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:应用实时荧光定量PCR法分析31例胃癌组织和癌旁组织样本以及人胃癌细胞系SGC-7901、MKN45、人正常胃黏膜上皮细胞系GES1中miRNA-101的表达水平;建立miRNA-101重组腺病毒载体感染胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,对照组为感染阴性对照病毒的胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,MTT法检测miRNA-101对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力.结果:胃癌组织中miR-101表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01);miR-101在细胞系SGC-7901和MKN45中的表达量明显低于人正常胃黏膜上皮细胞系GES1(P<0.01).孵育48 h后MKN45细胞miRNA-101组的细胞增殖能力低于其对照组(P<0.05);而孵育72 h后SGC-7901细胞和MKN45细胞的miRNA-101组细胞增殖能力均亦低于相应对照组(P<0.05).迁移试验结果显示,miRNA-101组迁移的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数明显低于相应对照组(P<0.01);侵袭实验结果显示,miRNA-101组侵袭的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数亦明显低于其对照组(P<0.01).结论:miRNA-101在胃癌组织和胃癌细胞系中表达下调,转染miRNA-101可明显降低SGC-7901和MKN45细胞的增殖、迁移、侵袭能力,miRNA-101可能参与了胃癌疾病的发生及发展.