MORC4在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨染色质重塑蛋白家族CW型锌指结构蛋白4(MORC4)在结直肠癌（CRC）中的表达及其对CRC细胞生物学行为的影响。方法 收集2018年1月至2019年2月台州市第一人民医院经手术切除的CRC组织及癌旁组织,选择CRC细胞系（HCT-15、SW480、SW620、DLD-1、HCT116）和人结肠上皮细胞株（NCM460）。采用q RT-PCR方法检测80例CRC组织及其相应的癌旁组织中MORC4 mRNA的表达。采用免疫组化法检测150例CRC组织及60例癌旁组织中MORC4蛋白表达情况,分析MORC4蛋白高表达与患者临床病理特征的关系。绘制Kaplan-Meier生存曲线分析MORC4蛋白表达与CRC患者预后关系。选择MORC4 mRNA表达水平较高的DLD-1细胞为研究对象,构建MORC4敲低细胞DLD-1（敲低组）及空白对照组、阴性对照组,采用细胞增殖/凋亡检测（CCK-8）法、划痕实验及Transwell细胞侵袭实验检测CRC细胞的增殖、迁移及侵袭情况。结果 相比癌旁组织,CRC组织中MORC4 mRNA表达水平及MORC蛋白表达率均显著升高（均P<0.05）。...     

PCBP3 过表达对结直肠癌细胞 增殖和迁移的影响

目的 探讨多聚胞嘧啶结合蛋白（PCBP）3 过表达对结直肠癌（CRC）细胞增殖和迁移的影响。 方法 收集 2022 年 5 至 6 月在嘉兴市第一医院行 CRC 切除术患者的 CRC 组织及癌旁正常组织标本各 10 份,比较 CRC 组织与癌旁正常组 织中 PCBP3 mRNA 及蛋白表达水平。取人 CRC 细胞系 HCT116、HT29,使用含有 PCBP3 CDS 区序列的过表达质粒分别转染 HCT116 和 HT29 细胞（设为 HCT116 过表达组、HT29 过表达组）,未经转染的 HCT116 和 HT29 细胞分别设为 HCT116 对照组、 HT29 对照组,检测 PCBP3 过表达对 CRC 细胞增殖、侵袭能力以及 E-钙黏蛋白（E-cadherin）、裂解的胱天蛋白酶 3（Cleaved Caspase-3）蛋白表达水平的影响。 结果 CRC 组织中 PCBP3 mRNA 及蛋白表达水平均明显低于癌旁正常组织（均 P＜ 0.05）。与对照组比较,PCBP3 过表达可明显减弱 HCT116 和 HT29 细胞增殖和侵袭能力（均 P＜0.05）,上调 HCT116 和 HT29 细 胞 E-cadherin、Cleaved Caspase-3 蛋白表达水平（均 P＜0.05）。 结论 PCBP3 过表达能抑制 CRC 细胞增殖和侵袭,可能通 过上调 E-cadherin、Cleaved Caspase-3 蛋白表达水平发挥作用。     

JS-K 对人结肠癌细胞HCT116 增殖及凋亡的影响

目的 研究JS-K 对人结肠癌细胞HCT116 增殖及凋亡的影响。方法 不同浓度JS-K 处理 HCT116 细胞48 h 后,采用MTS 法检测JS-K 对HCT116 细胞增殖活性的影响;PI 单染流式细胞术检测 JS-K 对HCT116 细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测JS-K 对HCT116 细胞凋亡的 影响;Texas Red-X 鬼笔环肽荧光染色观察细胞骨架形态;实时荧光定量聚合酶链反应检测Bcl-2 家族基 因mRNA 表达。结果 JS-K 对人结肠癌细胞HCT116 增殖有抑制作用,且呈浓度和时间依赖性（P <0.05）。 JS-K 诱导HCT116 细胞被阻滞在G2/M 期（P <0.05）。JS-K 可致HCT116 细胞发生晚期凋亡（P <0.05）。 JS-K 可改变HCT116 细胞骨架形态、微丝结构与分布。随着JS-K 浓度增加,促凋亡基因Bax、Bik、Bim、 Puma mRNA 相对表达量上调,抗凋亡基因Mcl-1 mRNA 相对表达量下调（P <0.05）。结论 JS-K 对人结肠 癌HCT116 细胞增殖有明显抑制作用,通过调节Bcl-2 家族基因表达,阻滞细胞G2/M 期,促进细胞发生晚 期凋亡。     

ZNF667-AS1在结直肠癌组织中的表达及其对细胞增殖的影响

目的探讨ZNF667-AS1在结直肠癌（CRC）组织中的表达及其对细胞增殖的影响。方法以2017年3月至2019年3月上海交通大学医学院附属新华医院手术切除的24例CRC组织及癌旁（距离癌组织5cm处）正常组织cDNA及CRC细胞系（HCT116、SW480、Lovo）、结直肠上皮细胞系（NCM460）为实验对象,采用RT-qPCR法检测ZNF667-AS1mRNA表达;构建ZNF667-AS1过表达细胞模型,采用RT-qPCR检测ZNF667-AS1mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力。结果与癌旁正常组织比较,CRC组织中ZNF667-AS1mRNA相对表达量明显降低（P＜0.05）。与结直肠上皮细胞系NCM460比较,CRC细胞系（HCT116、SW480、Lovo）ZNF667-AS1mRNA相对表达量均明显降低（均P＜0.05）。HCT116、SW480细胞中,过表达组ZNF667-AS1mRNA相对表达量均明显高于空载组（均P＜0.05）。HCT116、SW480细胞的过表达效率均明显高于空载组（均P＜0.05）。ZNF667-AS1过表达组与对照组第24h时450nm波长处的吸光度值（OD450）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,第48、72、96h时OD450明显降低（均P＜0.05）。ZNF667-AS1过表达组所形成的克隆数明显少于对照组（P＜0.05）。结论ZNF667-AS1在CRC组织中呈低表达,过表达ZNF667-AS1可抑制CRC细胞增殖及克隆形成能力。     

LINC01285促进结直肠癌细胞的增殖和转移

目的 探究长链非编码RNA LINC01285在结直肠癌（CRC）中的表达特点及临床意义,阐明潜在的生物学功能及调控机制。方法 基于Starbase生物数据库检索LINC01285在CRC及癌旁组织中的表达量;收集本单位结直肠癌患者的CRC样本及周围正常样本各70例,分组为肿瘤组与非肿瘤组;利用荧光定量PCR实验（RT-qPCR）验证本中心CRC队列、肿瘤细胞中LINC01285的表达量,并分析其与患者临床病理参数及无瘤生存时间的关系。采用脂质体转染技术构建LINC01285低表达细胞株并分为si-Control（对照组）、si-LINC01285-1（敲低组1）、si-LINC01285-2（敲低组2）3个组,采用CCK-8实验、流式细胞学、Transwell 法及蛋白印迹法检测 LINC01285 对结直肠癌细胞的增殖、凋亡及转移能力的影响及潜在的调控机制。结果Starbasev3.0 公共数据库获取 TCGA-COAD 转录组测序数据发现 LINC01285 在癌组织中的表达量明显高于正常组织（P=0.00016）;RT-qPCR结果显示：与非肿瘤组相比,LINC01285在肿瘤组表达水平显著上调（P=0.0002）,其表达量与肿瘤组织学分化程度（P=0.036）、T分期（P=0.000）、淋巴结转移（P=0.001）、TNM分期（P=0.000）、Duke分期（P=0.009）和无瘤生存时间（P=0.0102）密切相关。相比于正常结直肠粘膜细胞,CRC细胞（尤其在SW620和HT-29）内LINC01285的表达水显著高表达（P<0.001）。相比于 si-Control 组,脂质体转染的细胞（si-LINC01285-1、si-LINC01285-2）内 LINC01285 表达量显著下降（P<0.001）。同时相比于si-Control组,LINC01285敲低CRC细胞组的增殖能力明显降低（P<0.001）、早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率明显升高（P<0.05）。相比于si-Control组,LINC01285敲低组的CRC细胞迁移和侵袭能力显著下降（P<0.001）,且上皮-间质转化相关通路的E-钙粘蛋白表达量显著升高（P<0.001、N-钙粘蛋白显著下调（P<0.001）。结论 LINC01285的表达与CRC的预后高度相关,可调节上皮-间质转化通路影响CRC细胞的增殖、凋亡与转移能力。     

RNF2在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨环指蛋白2（RNF2）在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响。方法 采用免疫组织化学法检测RNF2在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达，并利用过表达的慢病毒转染HCT116细胞构建过表达RNF2的HCT116细胞系，通过CCK-8法、划痕实验、Transwell实验检测过表达RNF2对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响。结果 结直肠癌组织中RNF2阳性表达率高于癌旁正常组织（P <0.05）；不同年龄、组织学类型、分化程度、Dukes分期、淋巴结转移的结直肠癌患者的RNF2表达阳性率比较，差异有统计学意义（P <0.05）；HCT116组、HCT116-control组、HCT116-RNF2组HCT116细胞增殖、迁移能力及侵袭能力比较，差异有统计学意义（P <0.05）；HCT116-RNF2组细胞增殖速度、迁移能力及侵袭能力均高于HCT116-control组和HCT116组（P <0.05）。结论 RNF2在结直肠癌中呈高表达，且过表达RNF2可促进结直肠癌细胞迁移、增殖、侵袭能力，可为结直肠癌治疗提供新的治疗靶点。     

G蛋白信号调节因子-13通过调控β-catenin抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的：探究G蛋白信号调节因子-13（RGS13）在结直肠癌（CRC）进展中的作用。方法：使用TCGA数据库和实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）在mRNA水平分析CRC组织和细胞中RGS13 的表达量，使用免疫组织化学染色（IHC）和蛋白质印迹法（Western blot）在蛋白水平进一步分析。用ATP细胞活力检测实验、软琼脂克隆集落形成实验和细胞迁移侵袭实验检测RGS13对CRC细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并通过Western blot、RT-qPCR等实验探究其下游分子机制。结果：RGS13在CRC组织与细胞系中低表达（P ＜0.01），RGS13 表达越低，患者的无病生存期越短（P =0.017）。RGS13 的下调可显著促进CRC细胞的增殖、迁移与侵袭（P ＜0.01），表明RGS13在CRC进展中发挥抑癌作用。机制上，RGS13通过下调Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin的蛋白水平，进而降低癌基因c-Myc、MMP7 和CCND1等的表达水平（P ＜0.01），发挥对CRC的抑制作用。结论：RGS13可能通过下调β-catenin发挥抑制CRC进展的重要作用。     

BCL6B抑制结直肠癌细胞HCT116增殖、迁移及其可能机制研究

目的：探讨B细胞淋巴瘤6B（B cell lymphoma 6 member B,BCL6B）对人结直肠癌细胞HCT116增殖、迁移的影响及机制。方法：采用定量聚合酶链反应（quantitative polymerase chain reaction,qPCR）和Western blot检测和比较人正常肠上皮细胞FHC及人结直肠癌细胞HCT116中BCL6B的内源性表达;用脂质体法将pcDNA3.1-BCL6B转入HCT116细胞,同时设转入空载体的对照组;运用MTT法、流式细胞术、划痕愈合及Transwell试验检测BCL6B对癌细胞增殖、周期及迁移能力的影响;采用Western blot检测细胞中β-连环蛋白（β-catenin）、磷酸化的糖原合成酶激酶-3β（p-GSK3β）、细胞周期蛋白（CyclinD1）、基质金属蛋白酶-7（matrix metalloproteinase-7,MMP-7）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达。结果：qPCR和Western blot结果显示,与正常肠上皮细胞FHC相比,BCL6B在结直肠癌细胞HCT116中呈明显低表达（P=0.017）;转染pcDNA3.1-BCL6B后,细胞内BCL6B表达水平明显升高（P=0.000）。与阴性对照组相比,BCL6B组HCT116细胞4 d时的增殖活性降低41.79%（P=0.040）,且G1期细胞百分比增加62.09%（P=0.001）;同时,BCL6B组HCT116细胞48 h划痕愈合率及穿膜细胞数均明显减少（P=0.001）。Western blot结果表明,BCL6B组HCT116细胞内β-catenin、p-GSK3β、CyclinD1和MMP-7的表达水平较阴性对照组分别降低65.66%（P=0.028）、62.03%（P=0.001）、60.87%（P=0.021）和50.88%（P=0.030）,E-钙黏蛋白的表达升高63.64%（P=0.018）。结论：BCL6B可抑制结直肠癌细胞HCT116的增殖及迁移,其机制可能涉及Wnt/β-catenin通路的抑制。     

DNA损伤后细胞凋亡与周期停滞中△40P53的作用

目的 探讨HCT116 p53-/-细胞△40P53在脱氧核糖核酸(DNA)损伤时细胞凋亡和细胞周期停滞中的作用,明确△40P53与野生型P53的不同作用.方法 荧光素酶报告基因和免疫印迹法检测△40P53在DNA损伤后转录活性和表达情况,流式细胞技术检测DNA损伤后细胞周期停滞情况,乳酸脱氢酶(LDH)检测分析DNA损伤后细胞凋亡情况,分析△40P53的生物学功能.结果HCT116 p53+/+细胞中bax和p21基因的启动子活性在甲烷磺酸甲酯(MMS)刺激时比无MMS刺激时高3～5倍,HCT116 p53-/-细胞中bax和p21基因的启动子活性在有无MMS刺激时无显著不同;免疫印迹表明有和无MMS刺激的细胞△40P53保持在较高水平,野生型P53经MMS刺激过度表达;LDH法检测50 μg/ml的MMS刺激后52.2％的HCT116 p53+/+细胞凋亡,而只有32.5％的HCT116 p53-/-细胞凋亡,差异有统计学意义(t=84.2,P＜0.05);流式细胞仪检测MMS处理后88％的HCT116 p53-/-细胞进入G2/S期细胞,66％的HCT116 p53+/+细胞进入G2/S期细胞.结论 经MMS刺激的HCT116 p53-/-细胞的△40P53不能诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞.     

长链非编码RNA HSALNT0000015对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）HSALNT0000015对结直肠癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测80例结直肠癌组织及配对的15例癌旁组织,同时检测人结直肠癌细胞（Lovo、SW480、HT-29、HCT116）和正常人肠黏膜上皮细胞HIEC中lncRNA HSALNT0000015的表达水平;将HCT116细胞分为空白组、对照组及实验组,分别不感染慢病毒、只感染空载质粒及感染sh-HSALNT0000015-慢病毒,采用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,免疫印迹法检测转录因子Slug、上皮钙黏素（E-Cadherin）及波形蛋白（Vimentin）的表达。结果 结直肠癌组织lncRNA HSALNT0000015表达水平高于癌旁组织（P?<0.05）。结直肠癌细胞中lncRNA HSALNT0000015的表达水平均高于正常人肠黏膜上皮细胞（P?<0.05）。细胞培养12、24、48及72 h后,实验组光密度值（490 nm）低于空白组和对照组（均P?<0.05）。敲减lncRNA HSALNT0000015后,HCT116迁移及侵袭能力下降（均P?<0.05）,E-cadherin表达水平上升（P?<0.05）,转录因子Slug和Vimentin表达水平下降（均P?< 0.05）。结论 lncRNA HSALNT0000015可能通过上皮间质转化过程促进结直肠癌细胞迁移及侵袭。     

lncRNA TUG1调控miRNA-145促进结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的探讨lncRNA TUG1调控miRNA-145促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。方法选择人结肠癌细胞HCT116,并将细胞分为6组,培养48 h后进行后续实验;采用qRT-PCR法检测各组细胞TUG1与miRNA-145的表达水平;采用MTT检测各组细胞的增殖情况;采用划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力;采用双荧光素酶报告基因实验验证TUG1与miRNA-145的靶向关系。结果与人正常结肠黏膜上皮细胞株NCM460相比,结肠癌细胞株HCT116中TUG1相对表达水平明显升高,miRNA-145相对表达水平明显降低（P < 0.01）;miRNA-145与TUG1 3'-UTR存在结合位点。与TUG1 siRNA阴性对照组相比,TUG1 siRNA组HCT116细胞中TUG1表达水平明显降低（P < 0.01）,HCT116细胞增殖活性降低（P < 0.05）,细胞划痕相对宽度明显增加,细胞侵袭数目明显减少（P < 0.05）;与miRNA NC组相比,miRNA-145 mimic组HCT116细胞中miRNA-145表达水平明显升高,HCT116细胞增殖活性降低（P < 0.05）,细胞划痕相对宽度明显增加,细胞侵袭数目明显减少（P < 0.01）;与TUG1 siRNA阴性对照组相比,TUG1 siRNA组HCT116细胞中miRNA-145表达水平升高（P < 0.05）;与si-TUG1+miRNA NC组相比,TUG1 siRNA+miRNA-145 inhibitor组HCT116细胞中miRNA-145表达水平降低（P < 0.05）,HCT116细胞增殖活性增强,细胞划痕相对宽度减小,细胞侵袭数目增加（P < 0.05）。结论结肠癌HCT116细胞中TUG1表达上调,miRNA-145表达下调,干扰TUG1表达可通过靶向上调miRNA-145的表达,抑制结肠癌HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭。     

同种异体移植物炎症因子-1在结直肠癌细胞增殖、迁移及凋亡中的作用

目的探讨同种异体移植物炎症因子-1（AIF-1）在结直肠癌（CRC）进展中的作用以及可能的作用机制。方法采用免疫组 织化学染色和Western blot的方法检测70例CRC患者癌组织及癌旁正常组织中AIF-1的表达水平,并分析AIF-1的表达与临床 病理特征的相关性。然后将AIF-1过表达质粒（AIF-1）和阴性对照质粒（NC）转染至CRC细胞株SW480,探讨AIF-1在体外细 胞中的功能。EdU增殖实验和流式细胞术用来评估细胞增殖和细胞周期;Transwell迁移实验和Annexin V-APC/7-AAD凋亡检 测试剂盒用来分析细胞迁移和凋亡;SB203580用来阻断p38 MAPK通路。最后用western blot的方法检测CDK4,Cyclin D1, P21,P27,MMP2,MMP9,Bax,Bcl-2,Bcl-xl,p38和p-p38的表达水平。结果AIF-1在结直肠癌组织中的表达明显低于癌旁正常 组织,其表达水平与淋巴结转移（P=0.008）,TNM分期（P=0.003）和肿瘤大小（P=0.023）密切相关。体外增殖和周期实验结果显 示,过表达AIF-1 于SW480 细胞后能降低EdU细胞阳性率以及阻滞细胞的G1 期（P<0.05）;且Western blot 结果显示过表达 AIF-1于SW480细胞后能抑制CDK4、Cyclin D1的蛋白表达,增强P21、P27的蛋白表达。Transwell迁移结果显示过表达AIF-1 能抑制SW480细胞的迁移（P<0.001）,伴随着MMP2和MMP9的蛋白水平的下调。此外,AIF-1过表达能诱导SW480细胞凋亡 （P<0.01）,增强Bax和p-p38的蛋白水平,减弱Bcl-2和Bcl-xl的蛋白水平,而利用SB203580可以明显改善AIF-1过表达引起的 凋亡。结论AIF-1通过抑制细胞增殖和细胞迁移以及诱导细胞凋亡在结直肠癌中发挥肿瘤抑制作用,且AIF-1通过激活p38 MAPK途径促进细胞凋亡。     

FAM96A在结肠癌组织中的表达差异及其对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察FAM96A在60例结肠癌组织中的表达,分析其表达差异与结肠癌生物学特征的关系,并探讨FAM96A对结肠癌细胞系HCT116细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应( Real-time PCR)和Western blot法检测FAM96A蛋白在60 例结肠癌组织及配对癌旁组织中的表达,并统计分析FAM96A蛋白表达差异与结肠癌临床病理特征之间的相关性.采用脂质体转染法将含人FAM96A 全长序列的 pcDNA3. 1-myc-FAM96A 重组质粒转染至HCT116细胞中,分别采用MTT法及流式细胞技术检测FAM96A过表达对HCT116 增殖和凋亡的影响.结果 Western blot结果显示FAM96A 蛋白在癌旁组织中的表达水平显著高于结肠癌组织(t=16. 328, P＜0. 05). FAM96A蛋白表达差异与本研究中60例结肠癌患者的淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及是否发生远处转移之间差异有统计学意义(P＜0. 05),与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度之间差异无统计学意义( P＞0. 05). MTT法及流式细胞技术检测结果显示:FAM96A组吸光度( A)值显著低于对照组(P＜0. 05). FAM96A 组的细胞凋亡率高于对照组( t =30. 015,P＜0. 05).结论 FAM96A在人结肠癌组织中表达显著下降,其表达水平与结肠癌的发生发展、侵袭转移密切相关.过表达FAM96A可抑制结肠癌细胞增殖且诱导其凋亡.     

miR-200a在结直肠癌细胞系中的表达及其对高转移细胞系Lovo的影响

目的检测结肠癌细胞系中miR-200a对高转移细胞系Lovo的影响。方法采用荧光定量PCR法检测6种结肠癌细胞系
HCT116、HT29, LS174T、SW480、SW620和Lovo中miR-200a的表达水平,在高转移细胞系Lovo中瞬时转染miR-200a mimics
使其高表达miR-200a,检测高表达miR-200a后Lovo细胞增殖、迁移、细胞同质黏附能力和凋亡等情况的变化。结果miR-200a
在6种细胞系中存在差异性表达,其中具有高转移潜能的Lovo中表达最低,成瘤但不转移的细胞系HCT116表达最高。在Lovo
细胞高表达miR-200a后,Lovo细胞的增殖和迁移能力明显减弱、细胞同质黏附能力增强且凋亡增加。结论miR-200a在结肠
癌细胞系中表达失常,其作用可能与结肠癌细胞的侵袭和转移有关,高表达miR-200a 能抑制Lovo细胞增殖和迁移、增强细胞
间黏附能力、促进凋亡,其分子机制有待进一步研究。
     

长链非编码RNA CCAT2在肝癌中的作用及其机制

目的 探讨长链非编码RNA CCAT2(LncRNA CCAT2)在肝癌中的作用及机制.方法 选取我院2013年1-6月60例肝癌及其癌旁组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测其组织中CCAT2的表达,同时培养正常肝细胞L02和人源性肝癌细胞系HepG、H2P、SMMC和HLE细胞,采用qRT-PCR检测细胞中CCAT2的表达,采用siRNA干扰细胞CCAT2表达后,在24、48、72、96 h用CCK-8检测SMMC和HLE细胞增殖;Transwell实验分析细胞迁移和侵袭情况;采用流式细胞仪分析CCAT2对SMMC和HLE细胞周期分布和凋亡的影响;Western blot检测P53、Bcl-2、Caspase-8蛋白的表达.结果 在肝癌组织和肝癌细胞中,CCAT2的表达显著升高(P均＜0.05),CCAT2高表达的患者预后和生存率均较低(P均＜0.05).肝癌细胞中低表达的CCAT2能显著抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭(P均＜0.05).肝癌细胞中低表达的CCAT2也能使肝癌细胞周期停留在Go/G1期并促进细胞凋亡(P均＜0.05).采用siRNA干扰细胞CCAT2表达后,肝癌细胞中P53和Caspase-8蛋白的表达显著升高(P均＜0.05),Bcl-2蛋白的表达显著降低(P＜0.05).结论 CCAT2在肝癌组织和细胞系中高表达,siRNA干扰CCAT2表达后能够抑制细胞增殖、迁移、侵袭以及促进肝癌细胞的凋亡,其机制可能通过升高P53和Caspase-8蛋白的表达和降低Bcl-2蛋白的表达有关.     

昆明山海棠总生物碱对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究昆明山海棠总生物碱(total alkaloids of tripterygium hypoglaucum hutch,THHta)对人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用MTT法检测THHta对HCT116细胞增殖的抑制作用;用倒置及荧光显微镜观察THHta作用后HCT116细胞形态的变化;流式细胞术检测THHta对HCT116细胞周期及凋亡的影响,Western bolt检测凋亡相关caspase-3及PARP蛋白表达.结果 THHLa能显著抑制HCT116细胞增殖,抑制率与剂量和时间呈依赖关系.THHta作用HCT116细胞48、72 h的IC_(50)值小于20 μg/ml.THHta(10μg/ml)能诱导HCT116细胞G_0/G_1期比例增加及细胞凋亡,caspase-3活化及PARP蛋白剪切显著增强.结论 THHta能显著抑制HCT116细胞增殖,并可诱导HCT116细胞G_0/G_1期阻滞及细胞凋亡.     

华蟾素抑制结肠癌细胞增殖转移的实验研究

目的:观察华蟾素对结肠癌细胞HCT116细胞增殖、迁移的影响,探讨其可能的作用机制。方法:常规体外培养结肠癌细胞HCT116细胞系,采用CCK-8法检测不同浓度华蟾素作用不同时间对HCT116细胞增殖的抑制作用,细胞划痕实验和Transwell小室法检测华蟾素对细胞迁移能力的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达水平。结果:CCK-8法检测结果表明,华蟾素对HCT116细胞的生长有明显抑制作用,其抑制作用随药物浓度和作用时间的增加而增强(P0.05);细胞划痕实验和Transwell小室法结果显示,随华蟾素药物浓度的增加,HCT116细胞迁移能力下降(P0.05);Western blot结果表明,华蟾素能够明显抑制HCT116细胞MMP-9的蛋白表达并上调E-Cadherin的蛋白表达(P0.01),但对MMP-2蛋白的表达无显著影响(P0.05)。结论:华蟾素能够抑制人结肠癌细胞的增殖和转移,其机制可能与其抑制MMP-9和上调E-Cadherin的蛋白表达有关。