HCMV—IgM捕获ELISA法的建立及其应用

目的　建立检测人巨细胞病毒 (HCMV)抗原特异性 Ig M的酶联捕获技术 (Capturing- EL ISA)。方法　应用 Capturing- EL ISA法检测 12 8份巨细胞病毒感染者血清中抗 HCMV- Ig M,并与常用的间接 EL ISA法进行比较。结果　抗原浓度、抗 HCMV抗体酶结合物浓度对所测得的标本 OD值都有不同程度的影响 ,用最适的实验条件建立的 Cap-turing- EL ISA法特异性及敏感性均高于间接 EL ISA法 ,且不受 RF因子的影响。结论　 Capturing- EL ISA敏感性高、特异性强 ,且简便、快速 ,重复性好 ,具有实际应用价值     

婴幼儿血、尿HCMV-DNA检测在HCMV感染诊断治疗中的应用

目的检测不同年龄段疑似巨细胞病毒感染的患儿血液和尿液中人巨细胞病毒DNA(HCMVDNA)水平,探讨其在婴幼儿巨细胞病毒感染中的诊断敏感性和治疗监测价值。方法采用荧光定量PCR(FQPCR)方法检测194例患儿血液和尿液中的HCMV-DNA水平。检测72例确诊为HCMV肝炎患儿治疗前后尿液HCMV-DNA水平及肝脏生化指标的变化。结果婴儿组(28d至1岁,n=156)和幼儿组(1岁,n=12)尿液阳性检出率均高于血液,差异有统计学意义(P0.05)。45例血液和尿液HCMV-DNA为阳性的患儿,其尿液HCMV-DNA拷贝数(4.52±0.73)明显高于血液(2.19±0.68),差异有统计学意义(t=7.825,P0.001)。72例尿液阳性且临床诊断为HCMV肝炎患儿,治疗前后HCMV-DNA拷贝数差异无统计学意义(t=1.28,P0.05),但肝脏酶类和胆红素下降明显,差异有统计学意义(P0.001)。结论尿液HCMV-DNA检测作为一项无创性检查,对提高婴幼儿巨细胞病毒感染的检出率有重要的价值。HCMV-DNA不能作为HCMV肝炎患儿治疗监测的指标。     

HCMVpp65抗原和IgM抗体检测诊断儿童HCMV活动性感染的比较

目的：比较人巨细胞病毒(HCMV)pp65抗原(以下简称pp65)检测和血清HCMV-IgM抗体(以下简称IgM抗体)检测两种方法对儿童HCMV活动性感染的诊断实用意义。方法：采集临床疑似HCMV活动性感染儿童血标本(共251份)，分离血浆和多形核白细胞，分别用于IgM抗体检测和pp65检测。同时进行荧光定量PCR检测HCMVDNA，与pp65抗原作平行比较。结果：pp65抗原检测的结果与IgM抗体检测的符合率为73.3％。与HCMV DNA检测相比pp65抗原检测法的符合率、特异度和敏感度分别为85．5％，85．2％和86．2％。而且高pp65抗原血症与患者的临床症状密切相关。结论：pp65抗原血症反映该病毒活动状况，可监测HCMV活动性感染。由于儿童患者还存在原发感染的可能性，所以．联合HCMV-IgM的监测来提高临床的诊断率。     

住院患儿血清巨细胞病毒核酸与IgM抗体检测比较研究

目的：比较荧光定量 PCR 法检测人巨细胞病毒核酸（HCMV-DNA）与酶联免疫法检测人巨细胞病毒 IgM 抗体（HCMV-IgM）在住院患儿巨细胞病感染诊断中的价值。方法采用2种不同方法对217例住院患儿血清标本进行同步检测,然后进行结果分析。结果住院患儿 HCMV-DNA 阳性率为22.1％（48／217）,HCMV-IgM 阳性率为27.2％（59／217）,2种方法检测总符合率为87.6％。结论 HCMV-DNA 和 HCMV-IgM 检测对于住院患儿 CMV 感染的诊断有较高的符合率,对 IgM 抗体检测阴性而临床疑似 CMV 感染的患儿,可进行 HCMV-DNA 检测,以提高 CMV 感染的诊断准确率。     

人巨细胞病毒DNA与IgM抗体检测在急性肺炎患者中的应用研究

目的分析人巨细胞病毒(HCMV)DAN与免疫球蛋白M(IgM)抗体检测在急性肺炎患者中的应用价值。方法选择2014年7月至2015年6月该院收治的急性肺炎患者108例,同时进行HCMV DNA和IgM抗体检测,比较并分析检测结果。结果 HCMV DNA和IgM抗体检测阳性率分别为22.22%(24/108)、26.85%(29/108),二者比较差异无统计学意义(P0.05)。29例HCMV IgM阳性标本中,检出HCMV DNA阳性20例,符合率为68.97%;79例HCMV IgM阴性标本中,检出HCMV DNA阴性75例,符合率为94.94%。结论为提高HCMV感染诊断准确性,对于HCMV IgM抗体检测结果为阴性,但疑似HCMV感染可能性较大的患者,应结合临床症状与体征,并进行HCMV DNA检测,从而实现早期确诊和治疗。     

3项指标联合检测对儿童EB病毒感染的诊断价值

目的评价抗EB病毒衣壳抗原IgM抗体(VCA-IgM)、EB病毒衣壳抗原IgG抗体亲合力指数(RAI)、外周血异型淋巴细胞单项及联合检测对儿童EB病毒现症感染的诊断价值。方法收集2016年10月至2018年3月该院儿科收治的,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定EB病毒VCA-IgM为阳性的209例患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测EB病毒DNA,ELISA测定RAI,人工计数外周血异型淋巴细胞百分比。将标本分成EB病毒DNA阳性组和EB病毒DNA阴性组,采用SPSS19.0统计软件对各项指标进行非参数检验,通过Logistic回归和ROC曲线比较独立检测和联合检测各项指标在EB病毒感染诊断中的灵敏度和特异度。结果 EB病毒DNA阳性组的VCA-IgM、外周血异型淋巴细胞百分比均高于EB病毒DNA阴性组,RAI低于EB病毒DNA阴性组,差异有统计学意义(P0.05)。VCA-IgM、RAI、外周血异型淋巴细胞百分比三者均与EB病毒DNA相关(P0.05)。VCA-IgM、RAI、外周血异型淋巴细胞百分比三者单项检测的曲线下面积(AUC)分别为0.633、0.844、0.870,三者联合检测的AUC为0.875,高于各指标单项检测的AUC。结论诊断EB病毒感染的相关指标中,外周血异型淋巴细胞百分比最具有诊断学意义,优于VCAIgM、RAI,三者联合检测优于单项检测,有助于EB病毒感染及其他合并感染的诊断和防治。     

血清肺炎支原体特异性抗体IgM在小儿肺炎支原体感染诊断中的价值

近年来 ,随着对肺炎支原体感染的认识增加 ,人们发现肺炎支原体已成为儿童呼吸系统感染的常见病原体[1,2 ] ,过去由于没有特异性的诊断手段 ,只能依靠非特异性检测手段作为临床的诊断指标 ,使不少的肺炎支原体感染没有得到及时准确诊断 ,近 2年 ,肺炎支原体特异性抗体ＩｇＭ (ＭＰ ＩｇＭ )作为一种新的检测方法应用于临床 ,为临床诊断提供一种检测手段 ,但其敏感性临床报道不多 ,为此我们对临床疑诊肺炎支原体感染的 6 0例呼吸系统感染的患者 ,同时进行血清肺炎支原体特异性抗体ＩｇＭ和冷凝集试验检测 (ＣＡＴ) ,并进行对照比较分析 ,现将…     

人外周血单个核细胞miR-UL112水平在HCMV感染中的诊断价值研究

目的探讨单个核细胞中人巨细胞病毒(HCMV)微小RNA(miR)-UL112-3p、miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏和激发感染的诊断价值。方法选取非肿瘤患者92例[其中HCMV特异性CD8+T淋巴细胞高水平组(简称CD8+细胞高水平组)57例、HCMV特异性CD8+T淋巴细胞低水平组(简称CD8+细胞低水平组)35例]、肿瘤化疗患者30例,提取外周血单个核细胞,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)检测HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-UL112-3p和miR-UL112-5p水平对HCMV潜伏感染的诊断价值。结果肿瘤化疗组HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平明显高于非肿瘤组(P0.05)。非肿瘤组中CD8+细胞高水平组HCMV DNA、miR-UL112-3p及miR-UL112-5p水平明显高于CD8+细胞低水平组(P均0.01);以CD8+细胞低水平组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p水平为标准,CD8+细胞高水平组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p阳性率分别为59.65%、64.91%。分别以1.09、1.52作为miRUL112-3p和miR-UL112-5p诊断HCMV较高水平潜伏感染状态的Cut-off值,敏感性分别为59.65%、64.91%,特异性分别为97.1%、97.1%。以非肿瘤组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p水平的x珋+s(即5.24、6.63)作为诊断HCMV激发感染的标准,肿瘤化疗组miR-UL112-3p、miR-UL112-5p阳性率分别为50.00%、73.33%。结论 miRUL112-3p及miR-UL112-5p对HCMV潜伏和激发感染可能有一定的诊断价值。     

人巨细胞病毒激活感染诊断的进展

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)对人体的感染过程 ,分为初次感染 (原发性感染 )、激活性感染 (复发性感染 )和位于两者之间的潜伏感染。ＨＣＭＶ一旦感染 ,即终生相伴。潜伏的病毒则以基因或基因产物的形式存在于细胞中 ,多种诱因均可使潜伏的病毒被激活 ,引发明显的临床症状 ,其后果非常严重。目前临床检验面临最大的困惑是如何确诊宿主是否处于ＨＣＭＶ激活感染状态 ?近年来随着国内外免疫分子生物学技术的发展 ,人类对ＨＣＭＶ的感染诊断研究取得了新进展。一、病毒分离与鉴定迄今为止 ,从待检样本中分离到一定量的ＨＣＭＶ已成为该病诊断的金…     

肺泡灌洗液聚合酶链反应诊断肺部巨细胞病毒感染价值

】　Objective　To evaluate the diagnostic power of BALF HCMV PCR for HCMV infection of lung.MethedsCompared with venus white blood cell (WBC) and serum anti-HCMV IgM, the power of BALF HCMV DNA PCR was prospectinely investigated.HCMV DNA was measured by means of polymerse chain reaction,and the conservative segment of HCMV DNA was detected with the length of the amplified of HCMV DNA PCR 400bp. Anti-HCMV IgM was measured in ELISA. Results　The sensitivity, specificity and predictive value were respectively (1)BALF HCMV DNA PCR86.67%,96.67%,92.86%;(2)WBC HCMV DNA PCR26.67%,93.33%,66.67%;(3)serum anti-HCMV IgM80.00%,53.33%,46.15%.Conclusion　BALF HCMV PCR is obviously more valuable than the other two methods in the diagnosis of HCMV infection of lung.     

母乳及婴儿尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿人巨细胞病毒感染中的应用

目的:定量检测疑似人巨细胞病毒(HCMV)感染婴儿尿液及对应母亲乳汁中HCMV DNA,评估两者在诊断HCMV感染中的价值,并比较两者浓度之间的关系。方法:选取51例疑似HCMV感染的婴儿,收集其新鲜尿液及对应的母亲乳汁,分别用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)检测HCMV DNA。结果:51例疑似HCMV感染婴儿尿液中,有49例检测出HCMV DNA,阳性率为96.0%(49/51)。51份婴儿母亲乳汁中,有37份检测出HCMV DNA阳性,阳性率为72.5%(37/51)。对37例尿液与乳汁HCMV DNA均为阳性的患儿,分别对尿液与乳汁HCMV DNA浓度取对数,将两者进行相关性分析,结果显示两者之间存在一定的相关性,相关系数为0.332(P<0.05)。结论:婴儿尿液中HCMV DNA检测对于婴儿HCMV的感染具有重要的价值,同时对其母乳HCMV DNA检测,可以发现婴儿尿液和母乳HCMV DNA具有一定的相关性。     

性病门诊患者单纯疱疹病毒（herpes simplex virus，HSV）感染状况分析

目的了解性病门诊患者单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型的血清学流行情况。方法对2010年8月到2011年11月在佛山市第一人民医院皮肤科就诊,拟诊为HSV感染患者的血清标本且均同时检测HSV-1和HSV-2两种血清型,共300份血清标本,其中男217份,女83份。用ELISA方法进行检测,由有经验者按照操作说明书进行测定,用X^2分析进行统计学处理。结果300例HSV感染患者中,其平均年龄为32．95岁,其中男性为217例,女性为83例。HSV-1的感染率明显高于HSV-2的,且存在同时感染的情况。结论HSV感染患者多为中青年,且男性明显多于女性,HSV-1感染率高于HSV-2的,且存在二者同时感染,IgG的阳性率明显高于IgM的,所以对于症状不明显的患者,临床医生应同时检测两种血清型且检测抗体时应同时检测2种抗体,以免漏诊。     

上呼吸道感染患儿肺炎支原体IgM类与低亲和力IgG类抗体的测定

目的探讨上呼吸道感染患儿肺炎支原体（MP）IgM类（MP—IgM）与低亲和力IgG类（MP—IgG）抗体水平及在MP感染早期诊断中的价值。方法分别用被动颗粒凝集试验（PPA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接免疫荧光法（IIF）对小儿上呼吸道感染者血清MP—IgM水平进行测定,同时用IIF法研究其低亲和力MP—IgG水平,对所测结果进行对比研究。结果3种方法所测MP—IgM以ELISA法阳性率最高（60．0％,51／88）,PPA法次之（50．0％,44／88）,而IIF法最低（40．9％,36／88）。各方法间仅PPA法与ELISA法所测结果具有显著相关（P〈0、001）和中等程度的一致性（0．7〉Kappa〉0．4）,而PPA法与IIF法、ELISA法与IIF法检测结果缺乏一致性。88例患儿中,有21例（23．9％）存在低亲和力MP—IgG抗体,其中17例同时有MP—IgM阳性,两者结果亦具有显著的相关（P〈0．001）和一定程度的一致性（0．7〉Kappa〉0．4）。结论低亲和力MP-IgG类抗体有类似于MP—IgM类抗体的早期诊断价值,与MP—IgM联合检测有助于区分MP近期感染与感染后复发或再次感染。     

Comparison of two Cobas Core enzyme immunoassays with other test systems for the detection of cytomegalovirus-specific IgG and IgM antibodies

The new Cobas Core CMV IGM and IgG enzyme immunoassays (Roche Diagnostic Systems, Basle, Switzerland) were evaluated for their ability to detect cytomegalovirus (CMV)-specific IgM and IgG antibodies. Therefore, both were compared with some other commercially available and already established serological tests used in the laboratory diagnosis of CMV infection. These included the Abbott IMx CMV IgM and IgG assays, the Abbott CMV-M EIA, the Gull CMV IgM and IgG immunofluorescence tests, the medac CMV-IgM-ELA, and the Enzygnost anti-cytomegalovirus assay (Behringwerke). A total of 572 serum samples of various categories were examined and the results showed high concordances between all methods, ranging from 84.5% to 94.9%. In a follow-up on renal transplant patients, the times of first detection of seroconversions were compared. Since a high overall agreement between the Cobas Core CMV IgM and IgG enzyme immunoassays and the other test systems were observed, these new assays represent useful and reliable tools for clinical CMV diagnosis. © 1994 Wiley-Liss, Inc.     

Reliability of four methods for the diagnosis of acute infection by Epstein-Barr virus

We studied the reliability of new indirect tests in the diagnosis of acute infection by Epstein-Barr virus (EBV). Studied for all samples were: method 1, the heterophil antibodies (Abs) (Monolatex, Biokit, Germany); method 2, the IgM Abs to EBV with ELISA tests (antigen pools, Enzygnost, Behringwerke, Germany); method 3, EA (Biotest Diagnostics, Germany); and method 4, the IgG avidity test. The reliability of the four tests for the detection of primary infection by EBV was: sensitivity (method 1:89.1%; method 2: 100%; method 3: 79.7%; method 4: 99%); specificity (method 1: 98%; method 2: 100%; method 3:84%; method 4: 100%); positive predictive value (method 1: 97.6%; method 2: 100%; method 3: 73.6%; method 4: 100% method 4: 100%), and negative predictive value (method 1: 90.7%; method 2: 100%; method 3:84%; method 4: 99%). The IgG avidity test (method 4) is simple and automated in the laboratory and is very useful for ascertaining, from a single sample, the time since infection. It is criteria of recent primoinfection higher levels than 55% of IgG with low avidity for the antigen. The investigation of the Abs to antigen pools (method 2) by ELISA of virus had a high reliability, but the investigation of heterophil Abs by latex (method 1) and the Abs IgM to EA (method 2) were lacking in sensibility regarding their use in the diagnosis of the primoinfection. J. Clin. Lab. Anal. 11:78–81. © 1997 Wiley-Liss, Inc.     

Combination of line immunoassays Mikrogen recomLine CMV IgG and recomLine CMV IgG Avidity helps to date the onset of CMV primary infection

CMV IgG avidity assays are widely used and can be helpful in pregnant women to date the onset of CMV primary infection; however, these tests are not standardized and sometimes give inconclusive results. We evaluated the performances of Mikrogen recomLine CMV IgG and IgG Avidity compared to the VIDAS CMV IgG Avidity. On a first sample set of 89 sequential sera collected from 40 women with precisely determined onset of CMV primary infection, the combination of Mikrogen recomLine CMV IgG and IgG Avidity showed an accurate interpretation in 83.1% (74/89), an incorrect result in 4.5% (4/89), and an inconclusive result in 12.4% (11/89) and showed a better sensitivity to diagnose infections <14?weeks compared to VIDAS (85.9% vs. 76.9%). On a second sample set of 89 sera with an intermediate VIDAS CMV IgG Avidity, the combination of line immunoassays provided additional information on the time of infection in 79% (70/89) of the samples. This combination of line assays is useful as additional confirmatory testing and can help to date more precisely the onset of CMV primary infection.     

BALF-GM联合曲霉IgG及IgM抗体对慢性肺曲霉病的诊断价值

目的 探讨肺泡灌洗液半乳甘露聚糖（BALF-GM）联合曲霉IgG、IgM抗体检测在慢性肺曲霉病（CPA）中的诊断价值。方法 将确诊为CPA的88例患者作为研究组,疑似CPA经确诊后排除的64例患者作为对照组。回顾性分析所有患者的BALF-GM、曲霉IgG及IgM抗体水平,采用受试者工作特征（ROC）曲线分析各检测方法BALF-GM、曲霉IgG、IgM及其联合检测对CPA的诊断价值。结果 BALF-GM诊断CPA价值较高,曲霉IgG、IgM等指标及其联合检测的诊断价值较低,BALF-GM联合曲霉IgG/IgM检测灵敏度有明显提高,但特异度下降。研究组BALF-GM、曲霉IgG、IgM含量均高于对照组,2组比较差异均有统计学意义（P均< 0.05）;2组BALF-GM、曲霉IgG、IgM及联合检测阳性率比较差异均有统计学意义（P均< 0.05）。ROC曲线分析显示BALF-GM诊断CPA、BALF-GM+曲霉IgG/IgM联合诊断CPA的曲线下面积均较高,灵敏度、特异度高,曲霉IgG、IgM及IgG/IgM联合检测的诊断价值均较低。结论 BALF-GM诊断CPA具有较高的灵敏度和特异度;BALF-GM联合曲霉IgG/IgM检测可提高其诊断灵敏度,但特异度会显著降低,因此需结合BALF-GM单独检测的高特异度来尽量降低假阴性的发生。     

不同标本巨细胞病毒检测在诊断小儿人巨细胞病毒感染中的应用

目的：探讨尿液、淋巴细胞和母乳的 HCMV-DNA 检测以及血清 HCMV-IgM 检测在小儿人巨细胞病毒（HCMV）感染诊断中的意义。方法用实时荧光定量 PCR检测189例疑似HCMV感染患儿尿液、淋巴细胞和母乳的HCMV-DNA ,用化学发光法检测其血清HCMV-IgM ,并分年龄分性别对其阳性率进行分析比较。结果新生儿组母乳HCMV-DNA阳性检出率（60.3％）显著高于尿液（5.2％, P〈0.001）和淋巴细胞（12.1％,P〈0.001）,也显著高于血清 HCMV-IgM 阳性率（3.4％,P〈0.001）;婴儿组母乳（48.1％）与尿液（55.0％）HCMV-DNA 阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）,但两者均显著高于淋巴细胞 HCMV-DNA 阳性率（22.1％, P〈0.001）和血清 HCMV-IgM 阳性率（24.4％, P〈0.001）;婴儿组的尿液 HCMV-DNA、血清 HCMV-IgM 阳性率均显著高于新生儿组（ P〈0.01）;两组各指标男女阳性率差异均无统计学意义（ P〉0.05）;母乳 HCMV-DNA 阳性率与尿液、淋巴细胞 HCMV-DNA 阳性率及血清 HCMV-IgM 阳性率均呈显著正相关（r ＝0.630,P ＝0.000;r ＝0.413,P ＝0.000;r ＝0.341,P ＝0.000）。结论联合尿液、淋巴细胞HCMV-DNA 和血清HCMV-IgM 检测有助于患儿HCMV 感染的辅助诊断;在无法联合检测的条件下,婴儿首选尿液 HCMV-DNA 检测可获得较高检出率;母乳 HCMV-DNA检测并正确喂养有助于预防HCMV感染。