咖啡酸锗抗肝癌作用及其机制的实验研究

目的:探讨咖啡酸锗对H22肝癌小鼠的体内抗肿瘤作用及其诱导细胞凋亡的机制。方法:采用H22肝癌小鼠模型观察咖啡酸锗的体内抗肿瘤作用,透射电镜观察肿瘤细胞超微结构改变,免疫组化方法检测肿瘤组织中bax、bcl-2蛋白表达。结果:咖啡酸锗对小鼠H22移植瘤的生长具有明显抑制作用,高、中浓度组抑瘤率分别为57.0%、40.4%(P<0.01),电镜下可见典型的细胞凋亡形态特征。咖啡酸锗处理后肿瘤组织中bax蛋白表达明显增强,bcl-2表达降低(P<0.05)。结论:咖啡酸锗对H22肝癌小鼠具有明显的体内抗肿瘤作用,同时能够促进肿瘤组织中bax蛋白表达,抑制bcl-2蛋白表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡。     

纳米硒对小鼠移植瘤H22的生长抑制作用及其机制

目的：研究纳米硒对小鼠移植瘤H22的生长抑制作用及其作用机理，探讨纳米硒抗肿瘤治疗的可能性。方法：采用体内抗肿瘤法观察各组的抑瘤率；肿瘤组织切片HE染色、甲基绿-派洛宁染色、透射电镜观察其病理改变；免疫组化法检测Bax蛋白的表达水平；HE切片检测对胸腺脾脏的黟响。结果：纳米硒抑制小鼠移植瘤H22的生长、浸润，减少核分裂，增加凋亡，血管生成减少；电镜见肿瘤细胞的典型凋亡形态，免疫组化显示肿瘤组织的Pax蛋白表达上调，SI、TI无明显降低，脾小体、脾巨噬细胞数升高。结论：一定剂量的纳米硒可能通过增强免疫作用和上调Bax蛋白的表达诱导肿瘤细胞凋亡两种主要途径来实现抗肿瘤作用。     

海星总皂苷抗肿瘤作用的实验研究

目的：对从南海海星Craspidastet hesperus Muller et troschel中分离提取的总苷进行抗肿瘤活性研究。方法：采用体外肿瘤细胞培养和体内抗肿瘤实验方法。测定海星总皂苷的体外和体内抗肿瘤作用。结果：海星总皂苷对体外培养的小鼠移植性肿瘤肉瘤S180、肝癌H22细胞有直接的细胞毒作用;能明显的抑制小鼠生肉瘤S180的生长,延长H22腹水小鼠的生存时间。结论：海星总皂苷具有明显的抗肿瘤活性,可望用于恶性肿瘤的治疗。     

苦参碱对小鼠H22细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察苦参碱在体内和体外的抗肿瘤作用.方法:MTT法检测苦参碱对小鼠腹水瘤细胞H22的体外杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双标记法检测苦参碱对体外培养的H22细胞的诱导凋亡作用;在BALB/C小鼠H22移植瘤模型上观察苦参碱的体内抑瘤活性,透射电镜观察苦参碱治疗后荷瘤小鼠肝癌细胞的超微结构改变;免疫组化法检测荷瘤小鼠肝癌组织中Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:苦参碱在体外能够明显抑制H22细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡;对小鼠肿瘤生长也有明显抑制作用,高、低浓度组抑瘤率分别为60.71%和62.53%;用药组小鼠肿瘤组织中,电镜下可见较为典型的细胞凋亡的形态学改变;肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达增强,与荷瘤对照组相比有显著性差异(P＜0.01).结论:苦参碱在体内外对H22肿瘤细胞生长均有抑制作用,同时可促进肿瘤细胞表达Bax蛋白,抑制Bcl-2表达,诱导肿瘤细胞凋亡.     

TIM2基因修饰的H22细胞体内成瘤作用的研究

目的观察小鼠TIM2基因修饰的H22肝癌细胞在小鼠体内的成瘤作用，初步研究TIM2基因在肿瘤生物治疗中的作用。方法构建TIM2基因的真核表达载体pIRES2-EGFP—TIM2，脂质体法转染H22细胞，体外筛选得到稳定表达TIM2基因的阳性单克隆H22细胞株，用以建立小鼠肝癌移植瘤模型，同时以转染了pIRES2-EGFP空载体的H22-EGFP细胞和H22细胞做为对照，观察不同处理的H22细胞对小鼠的成瘤情况。结果重组真核表达载体pIR3ES2-EGFP—TIM2转染H22细胞后，经体外筛选和鉴定，得到稳定表达EGFP和TIM2基因的阳性单克隆细胞株H22-TIM2，免疫接种小鼠后可明显抑制小鼠肿瘤的发生和发展，小鼠肿瘤组织块的体积明显小于接种H22-EGFP细胞和H22细胞组。此外。接种H22-TIM2细胞组小鼠的生长情况也明显好于其他各组。结论TIM2基因转染H22细胞后可显著降低小鼠H22肝癌细胞的成瘤性，抑制小鼠体内肿瘤的生长。本研究为进一步探讨TIM2在肿瘤生物治疗中的作用提供了初步的实验依据。     

苦参总黄酮体内外抗肿瘤作用实验研究

目的：考察苦参总黄酮（kushenflavonoids，KS—Fs）的体内外抗肿瘤作用。方法：采用甲基噻唑基四唑（methylthiazolyltetrazolium，MTT）比色法检测KS—Fs对多种肿瘤细胞株的生长抑制作用；构建S180肉瘤、H22肝癌和Lewis肺癌小鼠肿瘤模型和人非小细胞肺癌H460、食管癌Eca-109裸小鼠移植肿瘤模型，研究KS—Fs体内抗肿瘤作用；急性毒性试验考察KS—Fs的毒副作用。结果：KS—Fs和苦参酮（kurarinone，Kur）在体外有比苦参总碱（kushenalkaloids。KS—As）更强的细胞毒作用（半数抑制率：KSFs4．9～29．4〉g／ml，Kur2．0～13．1〉g／ml，KSAs〉200／lg／m1）。体内研究表明KSFs和Kur不仅能有效抑制小鼠H22肝癌、S180肉瘤、Lewis肺癌（瘤质量抑瘤率60％～80％），而且能显著抑制人非小细胞肺癌H460和人食管癌Eca109裸小鼠移植肿瘤的生长（瘤质量抑瘤率在41％～47％）。小鼠口服和静脉注射KS—Fs的最大耐受剂量分别大于2．8g／kg和750mg／kg，远远超过苦参碱（口服半数致死量为1．18g／kg），且无明显毒副作用。结论：研究表明KSFs或Kur是新颖的高效低毒的抗肿瘤候选药物。     

姜黄素衍生物FM0807体内外抗肿瘤作用研究

目的研究姜黄素衍生物FM0807的体内外抗肿瘤作用。方法应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测FM0807对多种肿瘤细胞生长的抑制作用;建立H22小鼠移植肿瘤模型进行体内实验,观察尾静脉、腹腔及口服给予FM0807后体内抗肿瘤活性。结果体外抗肿瘤研究表明,FM0807对K562,HL260,MGC-803,HepG2,Sw480等多种人肿瘤细胞均有生长抑制作用,IC50分别为5.21,6.25,7.37,24.72,9.72μg/mL;体内抗肿瘤研究表明,尾静脉、腹腔及口服给予FM0807后对小鼠H22肿瘤生长均有明显抑制作用,抑制率分别达到69.0%,66.3%,52.5%。结论 FM0807体内外均有较强抗肿瘤作用。     

升麻总苷抗肿瘤活性及其对肿瘤细胞周期的影响

目的研究升麻总苷提取物(Total Glycoside of Cimicifuga foetida,TGC)的体内、外抗肿瘤活性及其对人肿瘤细胞周期分布的影响。方法 MTT法检测TGC对人肿瘤细胞株的增殖抑制活性;体内实验观察TGC对小鼠肝癌H22移植瘤和人肝癌裸小鼠异种移植瘤Bel-7402的抑制作用;荧光染色法和流式细胞仪检测其对肿瘤细胞周期的影响。结果 TGC可明显抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,其IC50值为(76.16±2.94)mg·L-1;TGC 0.8 g·kg-1剂量可明显抑制小鼠肝癌H22和人肝癌Bel-7402裸小鼠移植瘤的生长;TGC 50 mg·L-1可明显诱导人肝癌HepG2细胞阻滞于G2/M期,呈现出一定的时-效关系。结论 TGC具有明显的体内、外抗肿瘤作用,其活性可能与阻滞肿瘤细胞周期有关。     

九节龙皂甙体内的抗肿瘤作用

[目的]观察川产九节龙皂甙二种新化合物(AR1，AR2)在动物体内的抗肿瘤作用。[方法]体内接种4株小鼠移植性肿瘤细胞(S180，EAC，B16，HEPA)于腋部皮下，次日分组给药，10日内每天腹腔注射给药一次，计算各组小鼠平均瘤重和抑瘤率。[结果]九节龙皂甙能抑制小鼠肉瘤和小鼠艾氏腹水癌肿瘤细胞的生长，抑瘤率25％～3896；AR1对小鼠黑色素瘤和AR2对小鼠肝癌有一定的抗肿瘤作用。[结论]川产九节龙皂甙能抑制S180、EAC、B16和HEPA小鼠移植性肿瘤的生长，具有抗肿瘤作用。     

复方斑蝥注射液抗小鼠肝癌H_(22)肿瘤作用及机理的初步研究

目的研究复方斑蝥注射液(Compound Cantharis Injection,CCI)的抗肿瘤作用,并观察CCI对小鼠H22肿瘤细胞Fas蛋白表达的影响。方法(1)通过小鼠腋皮下接种H22肿瘤细胞,观察CCI对H22小鼠的抑瘤作用。(2)用免疫组织化学的方法检测该药对小鼠H22肿瘤细胞Fas蛋白表达的影响。结果(1)实验证实,与模型组比较,CCI有显著的抑制小鼠H22实体瘤的作用(p<0.05),该药高剂量对小鼠H22抑制率为34.83%。(2)免疫组织化学结果显示,与模型组比较,CCI能上调Fas蛋白表达(p<0.05)。结论CCI可能通过上调Fas蛋白表达,诱导肿瘤细胞凋亡而抑制H22肿瘤细胞的生长。     

王浆酸锗对U14瘤的抑制作用

目的 观察王浆酸锗体内外对小鼠U14瘤的抑制作用。方法 MTT法评价王浆酸锗体外抑制U14瘤的活性;建立小鼠U14瘤模型,以王浆酸锗高、中、低剂量连续给药10d,分离瘤体,计算肿瘤抑制率,评价其体内抗肿瘤活性。结果 MTT法显示王浆酸锗(1 mg/L, 10 mg/L and 100 mg/L)体外对U14瘤的抑制率分别为18.43%, 33.12% 和 55.20%,IC50为43.60 mg/L;体内活性实验表明王浆酸锗高、中剂量组和低剂量组的抑制率分别为70.0%, 51.8% 和 42.4%。结论 王浆酸锗对小鼠U14瘤有较强的抑制作用。     

Antitumor Effects of the Fibroblasts Transfected TNF-α Gene and its Mutants

Summary: To compare the anti-tumor effects of transmembrane TNF-α (TM-TNF) and secreted TNF-α (S-TNF) in vivo, mouse fibroblasts NIH3T3 were transfected separately with three types of retrovirus containing wild type TNF-α (Wt-TNF), TM-TNF mutant (TM-TNFm), S-TNF mu tant (S-TNFm). Southern blot, RT-PCR, FACS and bioassay were used to investigate TNF-α gene integration, expression and its biological activity. It was found that both fixed cells and supernatant of NIH3T3/Wt-TNF, the fixed cells of NIH3T3/TM-TNFm and the supernatant of NIH3T3/S-TNFm could express high level of TNF-α or its mutants and effectively kill H22 in vitro. The trans fected NIH3T3 were separately injected into the mice at the sites of H22 tumor cell inoculation ac cording to a ratio of 5: 1 or 1: 1 (effector/target cells, E/T) after the third day of H22 challenge,respectively. At the E/T= 5 : 1, the NIH3T3/TM-TNFm induced the highest tumor regression,while NIH3T3/S-TNFm exerted the strongest tumor depressing effect at the E/T= 1 .: 1 in vivo. No obvious side effects were noted throughout the course of treatment. The results suggest that both TM-TNF and S-TNF could cause tumor regression. The anti-tumor effect of TM-TNF would be more powerful and safe than that of S-TNF at the proper E/T ratio.     

蜂王浆冻干粉对小鼠肿瘤的抑制作用

目的研究蜂王浆冻干粉对小鼠肿瘤的抑制作用.方法按每公斤体重0g、0.25g、0.50g、0.75g设对照及低、中、高3个剂量组,经口给予蜂王浆冻干粉30d后,接种小鼠肉瘤180(S180)和艾氏癌腹水型(EAC)两个瘤种.结果在两次重复的小鼠S180和EAC抑瘤试验中发现中剂量组瘤重明显低于阴性对照组(P<0.05),抑制率可达34%;中剂量组荷瘤小鼠平均生存时间均明显高于对照组(P<0.05).结论蜂王浆冻干粉具有抑制肿瘤的作用.     

榄香烯抗肝癌作用的实验研究

目的研究榄香烯对小鼠移植性肝癌(H22)的抗肿瘤作用及其机制。方法建立小鼠移植性肿瘤模型(H22肝癌),腹腔注射不同剂量的榄香烯,观察其抗肿瘤作用(抑瘤率),以免疫学方法检测小鼠治疗后的细胞免疫功能的改变(IL2、T淋巴细胞转化能力),并通过免疫组化的方法检测肿瘤组织癌基因(p53和Bcl-2)的表达。结果榄香烯具有明显的抑瘤作用,抑瘤作用的主要机制是增强小鼠的细胞免疫功能,促进肿瘤细胞凋亡和调节癌基因的表达。结论榄香烯具有显著的抑瘤作用,其作用机制是通过提高荷瘤小鼠机体免疫功能和诱导肿瘤细胞凋亡两条途径来抑制肿瘤的生长。     

Antitumor effects of the fibroblasts transfected TNF-α gene and its mutants

Summary To compare the anti-tumor effects of transmembrane TNF-α (TM-TNF) and secreted TNF-α (S-TNF)in vivo, mouse fibroblasts NIH3T3 were transfected separately with three types of retrovirus containing wild type TNF-α (Wt-TNF), TM-TNF mutant (TM-TNFm), S-TNF mutant (S-TNFm). Southern blot, RT-PCR, FACS and bioassay were used to investigate TNF-α gene integration, expression and its biological activity. It was found that both fixed cells and supernatant of NIH3T3/Wt-TNF, the fixed cells of NIH3T3/TM-TNFm and the supernatant of NIH3T3/S-TNFm could express high level of TNF-α or its mutants and effectively kill H22in vitro. The trans-fected NIH3T3 were separately injected into the mice at the sites of H22 tumor cell inoculation according to a ratio of 5∶1 or 1∶1 (effector/target cells, E/T) after the third day of H22 challenge, respectively. At the E/T=5∶1, the NIH3T3/TM-TNFm induced the highest tumor regression, while NIH3T3/S-TNFm exerted the strongest tumor depressing effect at the E/T=1∶1in vivo. No obvious side effects were noted throughout the course of treatment. The results suggest that both TM-TNF and S-TNF could cause tumor regression. The anti-tumor effect of TM-TNF would be more powerful and safe than that of S-TNF at the proper E/T ratio. LI Qingfen, female, born in 1965, Associate Professor     

双表达B7-1、B7-2基因肿瘤疫苗治疗小鼠肝癌优于单表达疫苗的研究

目的:研究B7-1、B7-2基因对肿瘤的免疫治疗作用。方法:应用转染有B7-1、B7-2基因的肝癌细胞株H22/B7-1、H22/B7-2,建立小鼠肝癌模型,观察小鼠成瘤期、荷瘤小鼠存活期及肿瘤结节大小。结果:各实验组动物都发生肿瘤,接种H22/B7-1 H22/B7-2组成瘤率低,对照组动物肿瘤呈进行性生长;组间成瘤潜伏期不同,与对照组相比,凡接种有H22/B7-2的小鼠肿瘤形成有迟发性;接种转B7基因细胞的小鼠肿瘤生长都较对照组慢;同时接种H22/B7-1和H22/B7-的小鼠能负载大于107的肿瘤细胞。转基因细胞在体外刺激淋巴细胞增殖和诱导CTLs的能力明显增强。结论:B7-1、B7-2都能增强肝癌细胞的免疫原性。B7-2在抗肿瘤早期发挥作用,B7-1随后起放大和调节作用。B7-1与B7-2联用效果优于单一应用。     

枸杞多糖对荷瘤小鼠肿瘤微环境T淋巴细胞亚群及树突状细胞的影响

目的:研究枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)对荷瘤小鼠体内肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群和树突状细胞(dendritic cells,DCs)的影响,探讨LBP对荷瘤机体免疫逃逸的干预作用.方法:用LBP给H22荷瘤小鼠灌胃,连续2周后,测定肿瘤重量,采用流式细胞术检查肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltrating lymphocyte,TIL)中T淋巴细胞亚群和DCs的数量,以及协同刺激分子CD80(B7-1)表达的变化.结果:LBP可明显抑制肿瘤细胞的生长,增加肿瘤浸润CD4 、CD8 细胞的数量.LBP高剂量组CD4 和CD8 细胞数量的百分比高于模型组(P＜0.05).LBP低剂量和高剂量组肿瘤浸润DCs数量及B7-1表达均较模型组升高,但差异无统计学意义.结论:LBP的抗肿瘤作用可能与恢复荷瘤小鼠TIL中CD4 、CD8 的细胞数量、解除机体的免疫抑制状态及增强机体的抗肿瘤免疫功能有关.LBP能否恢复荷瘤机体DCs的表型及功能尚待进一步研究.     

蜂皇浆抗辐射损伤的效应研究

目的探讨研究蜂皇浆抗辐射损伤的营养效应。方法将成年大鼠55只,平均分成3组,2个试验组分别饲以蜂皇浆、蜂皇浆-抗辐射粉喂养;对照组应用蔗糖水饲养,其它饲料3组相同。预饲13 d后,全身照射200 rad。结果表明蜂皇浆有促进白细胞恢复、增加体重、促进大鼠生长、降低照射后大鼠死亡的作用。结论蜂皇浆具有抗辐射损伤的营养效应,有延长寿命、延缓衰退老的作用。     

微波制备IFN-γ处理的小鼠H22肝癌瘤苗的抗瘤作用

目的探讨用微波方法制备IFN-γ处理的小鼠H22肝癌细胞瘤苗(MITTV-H22)对H22细胞型肝癌的预防与治疗作用。方法 (1)预防实验:采用MITTV-H22免疫小鼠3次后接种H22肿瘤细胞,观察小鼠的生存期、肿瘤生长情况及检测淋巴细胞增殖指数。(2)治疗实验:小鼠接种H22肿瘤细胞的同时接种MITTV-H22进行免疫治疗。观察小鼠的生存期,治疗结束后取瘤称重、测瘤体积。结果 (1)预防实验:实验组小鼠于H22肿瘤细胞攻击后7 d经解剖肿瘤接种部位未发现瘤组织。对照组于接种部位出现直径小于0.5cm的包块,成瘤率为100%。实验组小鼠的生存期(115.40 d±11.22 d vs 31.87 d±5.87 d)和淋巴细胞增殖指数(1.51±0.23 vs 1.26±0.18)都优于对照组(P<0.05)。(2)治疗实验:实验组小鼠的平均生存期长于对照组(46.5 d±3.3 d vs 34.0 d±4.6 d,P<0.05);实验组瘤块体积增长速度明显慢于对照组(F=179.318,P<0.05);实验组的平均瘤体积(0.67 cm~3±0.21cm~3 vs 1.84cm~3±0.74 cm~3)、平均瘤质量(0.67 g±0.35 g vs 1.91 g±0.34 g)小于对照组(P<0.05)。结论 MITTV-H22可以有效的抑制肿瘤生长,具有明显的抗瘤效应。