首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 46 毫秒
1.
重组γ-干扰素作用人Tenons囊成纤维细胞体外研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的体外研究人重组γ-干扰素对人Tenons囊成纤维细胞作用。方法以人Tenons囊成纤维细胞作为实验对象,分别加入0.1~10~6U/ml人重组γ-干扰素(IFN-γ)、0.001~10mg/L丝裂霉素(MMC)、0.1~103mg/L 5-氟尿嘧啶(5-Fu)孵育48h,然后以MTT法进行检测。结果高浓度和低浓度IFN-γ实验组OD值较对照组升高(P<0.05),中间浓度 IFN-γ实验组 OD值较对照组低(P<0. 05)。 IFN-γ的抑制率较 MMC及5-Fu低(P<0. 005)。结论 IFN-γ对体外培养的人Tenons囊成纤维细胞具有促增殖及抑制增殖双向调控作用,其抗增殖作用较MMC及5-Fu弱。  相似文献   

2.
目的 观察Bevacizumab(贝伐单抗)对转化生长因子(transforminggrowthfactor,TGF)-β2诱导下的人Tenon囊成纤维细胞转分化的抑制作用,探讨抗新生血管药物抑制青光眼术后滤过泡瘢痕化的机制。方法 用含体积分数10%胎牛血清的DMEM高糖型培养基对人Tenon囊成纤维细胞株进行体外常规培养和传代。实验分为空白对照组、TGF-β2处理组(加入终浓度为10μg?L-1的TGF-β2DMEM完全培养基)及Bevacizumab干预组(加入10μg?L-1的TGF-β2和1.0g?L-1的BevacizumabDMEM完全培养基),置于37℃、体积分数5%二氧化碳培养箱中培养48h,并分别应用细胞免疫荧光染色技术和WesternBlot实验检测Bev-acizumab对TGF-β2刺激下人Tenon囊成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin,α-SMA)表达的影响。结果 α-SMA蛋白主要表达在细胞质中,免疫荧光染色结果显示TGF-β2处理组可以见到α-SMA的荧光表达,而Bevacizumab干预组α-SMA蛋白表达受到抑制。WesternBlot结果显示空白对照组、TGF-β2 处理组及Bevacizumab干预组α-SMA蛋白相对表达量分别为0.630±0.038、1.130±0.071和0.340±0.033,Bevacizumab干预组α-SMA蛋白相对表达量低于空白对照组和TGF-β2处理组(均为P<0.05)。结论 Bevacizumab可明显抑制TGF-β2诱导下人Tenon囊成纤维细胞α-SMA蛋白的表达,抑制成纤维细胞表型转化。  相似文献   

3.
目的 评价Avastin(贝伐单抗)在体外对翼状胬肉成纤维细胞的增殖抑制作用以及细胞毒性。方法 通过不同浓度Avastin(0.25g?L-1、0.50g?L-1、1.00g?L-1、1.50g?L-1、2.50g?L-1)处理人翼状胬肉成纤维细胞12h、24h、48h、72h,观察成纤维细胞的增殖抑制、药物细胞毒性以及凋亡蛋白的表达。WST-1试剂检测细胞增殖,LDH试剂盒检测细胞毒性,West-ernblot方法检测增殖蛋白以及凋亡蛋白的表达。结果 48h及72hAvastin组与正常组相比光密度(OD)值差异有统计学意义(P=0.034、P=0.016)。与12h相比,0.25g?L-1Avastin组及0.50g?L-1Avastin组作用24h、48h、72h后细胞增殖抑制率均无明显提高(均为P>0.05),1.50g?L-1Avastin组及2.50g?L-1Avastin组作用48h、72h后细胞增殖抑制率均明显提高(均为P<0.05)。与0.25g?L-1Avastin组相比,0.50g?L-1Avastin组在各个时间点(除12h外)细胞增殖抑制率均无明显提高(均为P>0.05),1.50g?L-1Avastin组、2.50g?L-1Avastin组在各个时间点抑制率均明显提高(均为P<0.05)。Avastin各浓度组与LDH最大释放组(加入裂解酶)对翼状胬肉成纤维细胞LDH释放率差异均有统计学意义(均为P<0.05),各浓度组之间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。Avastin可抑制p-CyclinD1表达,促进Caspase3的表达,与细胞对照组相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。结论 Avastin可以通过抑制p-CyclinD1以及促进Caspase3的表达抑制翼状胬肉成纤维细胞的增殖,但无细胞毒性,进一步证实了该药物的安全有效性。  相似文献   

4.
汉防己甲素对体外人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制效应   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人眼Tenon囊成纤维细胞(Tenon’s capsule fibroblasts,TCFs)的抑制效应。方法:用组织块和混合消化液培养法体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞,并对培养的传代细胞进行形态学的鉴定。采用MTT法检测不同浓度的汉防己甲素(10-4,10-5,10-6,10-7mol/L)及0.2g/L丝裂霉素(MMC)对人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制作用。结果:人眼Tenon成纤维细胞体外生长良好,经光镜和免疫组化观察证明该细胞为成纤维细胞。MTT法证实,随着Tet药物浓度的增大,TCFs增生活性降低,对应的TCFs抑制率升高。结论:Tet对人眼Tenon囊成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用。  相似文献   

5.
研究证实表皮生长因子(EGF)不影响培养人眼视网膜色素上皮(RPE)细胞cAMP的基础水平,但促进异丙肾上腺素激活β_2受体后诱导cAMP水平升高的效应,并呈量效依赖关系。EGF对腺嘌呤核苷A_2受体激动剂NECA诱导cAMP水平升高的效应没有明显影响。细胞增殖分析表明,EGF刺激人眼RPE细胞增殖,而DibutyrylcAMP和异丙肾上腺素抑制EGF刺激增殖的效应。结果提示,在人眼RPE细胞EGF和β2受体之间存在受体间交互作用。  相似文献   

6.
李秋明  陆道炎 《眼科研究》1996,14(4):233-235
通过观察维拉帕米,肝素,地塞米松在体外对牛晶体上皮细胞(BLEC)增殖和细胞内Ca^+的影响评价一它们抑制后囊混浊的价值。结果维拉帕米呈浓度依赖性抑制BLEC增殖(P〈0.05(10mg/L)或P〈0.01(≥20mg/L)和降低细胞内Ca^+并能增强肝素的增殖抑制作用肝素500mg/L时可明显抑制增殖(P〈0.01)和降低细胞内Ca^++500mg/L以上抑制作用不随浓度增加而增强,地塞米松对B  相似文献   

7.
探索体外培养兔眼Tenon囊成纤维细胞的简便方法。把兔结膜和结膜下组织剪碎后直接接种在培养瓶中,加入DMEM培养液进行培养,省略胰蛋白酶消化过程或者组织块干固贴壁过程。此方法简单而且有效。本文对此进行了详细的介绍,同时还介绍了如何分离培养时混杂生长的结膜上皮细胞,并且对体外培养的兔Tenon囊成纤维细胞的生长速度进行了研究。  相似文献   

8.
本文对兔皮肤成纤维细胞进行了体外培养,应用噻唑兰比色法(MTT法)对榄香烯和地塞米松进行药物筛选,结果发现:榄香烯对培养的成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用,并使细胞形态发生显著变化,其50%抑制率浓度(ID50)为0.008mg/ml;地塞米松对该细胞增殖的作用呈双重性,低浓度刺激细胞增生,高浓度抑制细胞增殖,其50%抑制率浓度为168mg/ml。此两种药物50%抑制率浓度联合应用,对培养的成纤维细胞增殖的抑制作用(抑制率:62.8%)较单用榄香烯(抑制率:52.4%,P<0.01)或单用地塞米松(抑制率:55.2%p<0.01)明显增强。并对此两种药物抗增殖的作用机理进行初步探讨。  相似文献   

9.
阿霉素联合地塞米松防治增殖性玻璃体视网膜病变的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
研究体外细胞培养中阿霉素、地塞米松对兔成纤维细胞生长的抑制作用及有效浓度。为增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)的药物预防提供新线索。 方法将传代培养的细胞,在加药培养后48h,应用噻唑兰比色法(MTT法)对阿霉素、地塞米松抑制成纤维细胞的作用进行检测,分别求得2种药物50%抑制率浓度(ID50)及 2种药物半数抑制率浓度(ID50)联合应用对细胞的增殖抑制率(%)。 结果阿霉素对细胞生长有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性改变,其50%抑制率浓度(ID50)为0.57mg·L-1;地塞米松对细胞增殖作用呈双重性,低浓度刺激细胞增生,高浓度则抑制细胞生长,其50%抑制率浓度为154mg·L-1。上述2种药物50%抑制率浓度联合应用,其细胞增殖抑制率为66.3%,与2种药物半数抑制率浓度单用时细胞增殖抑制率相比,差异非常显著(P<0.01)。 结论阿霉素、地塞米松在一定浓度下能有效抑制体外成纤维细胞的生长,并提示二者合用可能是一种有价值的防治 PVR的用药方式。  相似文献   

10.
王津津  陈凤华  杨永升  崔云  李根林 《眼科》2003,12(1):55-57,T004
目的:研究精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸(Arg-Gly-Asp-Ser,RGDS)肽对人Tenon囊成纤维细胞与纤维连接蛋白(FN)粘附、增殖的影响。方法:在传代培养的人Tenon囊成纤维细胞中加入不同浓度的RGDS(1、0.1、0.001g/L),用未贴壁细胞记数法及MTT法测定RGDS肽对人Tenon囊成纤维细胞粘附、增殖的影响。结果:RGDS肽能抑制成纤维细胞在FN上的粘附,呈浓度效应特点,能抑制成纤维细胞的增殖,呈浓度及时间效应特点。结论:在细胞水平上证实RGDS肽可阻止人Tenon囊成纤维细胞对FN的粘附和增殖,具有避免青光眼滤过术后瘢痕化形成的应用前景。  相似文献   

11.
目的从细胞培养水平探讨后囊混浊形成机理和术后血-房水屏障破坏、晶体皮质残留等对其的影响。方法用考马斯亮蓝(CoomassieBB)染色、倒置显微镜和电镜观察培养的牛晶体上皮细胞(bovinelensepithelialcels,BLEC)的增殖和分化规律,用Giemsa染色比色法观察胎牛血清、房水、晶体皮质等对BLEC增殖的影响。结果在体外培养条件下BLEC可在第1~7代内分化为晶体纤维细胞,表现为细胞体积增大,形状渐趋长条形和梭形,细胞骨架逐渐增多;胎牛血清呈浓度依赖性促进BLEC增殖(P<0.05);高浓度房水(占培养液1/3)抑制BLEC增殖(P<0.01),晶体皮质、晶体核、玻璃体均促进BLEC增殖(P<0.01)。结论晶体上皮细胞的分化在后囊混浊形成中起重要作用;术后血-房水屏障破坏、晶体皮质残留和玻璃体脱出可通过刺激晶体上皮细胞增殖促进后囊混浊形成。  相似文献   

12.
目的 对眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞(basalcellcarcinoma-associatedfibroblasts,BCAFs)及眼睑正常成纤维细胞(normalfibroblasts,NFs)进行分离、培养、纯化和鉴定,初步研究BCAFs与NFs细胞形态、生长增殖等生物学性状的差异。方法 用组织块贴壁法培养获得原代眼睑BCAFs和眼睑NFs,通过胰蛋白酶差速消化法和反复传代法进行细胞的分离、纯化;通过倒置相差显微镜对照观察BCAFs和NFs细胞形态,应用免疫细胞化学染色检测细胞表达的特异性蛋白鉴定BCAFs,MTT法检测细胞生长增殖特性。结果 在接种后3d便可见原代BCAFs从组织块爬出,呈放射状生长,约7d铺满瓶底。NFs生长缓慢,接种后4d才见稀疏的NFs在组织块周围生长,约11d铺满瓶底。传代后的BCAFs在形态上未发生明显改变,但生长速度增快,与NFs在形态结构特征和生长方式上存在差异;眼睑BCAFs和NFs的免疫细胞化学染色,前者波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞活化蛋白呈阳性,细胞角蛋白呈阴性,后者仅波形蛋白呈阳性,角蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞活化蛋白均呈阴性;与NFs相比,眼睑BCAFs生长增殖较快,倍增时间较短。结论 与眼睑NFs相比,BCAFs在形态结构、蛋白表达、生长方式等方面均有差异,且增殖能力强。  相似文献   

13.
目的探讨体外培养原代人眼Tenon’s囊成纤维细胞的方法及其生长特性,为抗纤维化研究提供靶细胞模型。方法取翼状胬肉及斜视手术患者的Tenon’s囊组织,用组织块法培养原代成纤维细胞。用免疫荧光方法鉴定细胞。对细胞进行传代、冻存和复苏的观察。对复苏后的细胞行MTT法检测其活力并绘制生长曲线。结果人眼Tenon’s囊成纤维细胞可以在体外用组织块方法培养出来,呈典型的长梭形。免疫荧光鉴定细胞波形蛋白染色阳性。细胞多次传代后依然生长迅速,3 d即可长满瓶底。复苏后细胞2~6 d处生长对数期,增殖能力良好。结论人眼Tenon’s囊成纤维细胞体外生长状态良好,可以液氮冻存,复苏后细胞活力较强,可以用于抗纤维化增生的基础研究。  相似文献   

14.
目前,表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)是否以Ca2+及cAMP为第二信使尚存在分歧。本研究分别以Ca2+结合荧光染料(Fur...  相似文献   

15.
目的 研究RNA干扰基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)表达对体外培养的人晶状体上皮细胞(humanlensepithelialcells,hLECs)增殖、移行的影响。探讨RNA干扰技术抑制LECs增殖、移行的可行性,以探索防治后发性白内障的新方法。方法 设计构建含有靶向MMP-2的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)质粒载体和不含靶向MMP-2的shRNA阴性对照质粒载体,体外转染hLECsSRA01/04,分别标记为MMP-2沉默组和阴性对照组;以等体积培养液代替转染质粒培养作为空白对照组。实时荧光定量PCR和Westernblot检测转染后24hMMP-2mRNA及MMP-2蛋白的表达水平。MTT比色法测定细胞转染后24h、48h以及72h时hLECs的增殖能力。细胞划痕实验方法测定转染后24h、48h时hLECs的移行愈合率。结果 转染24h后MMP-2沉默组mRNA及其蛋白的相对表达水平分别为0.202±0.075、80.856±2.165,与空白对照组1.041±0.163和184.419±3.584比较分别下降了80.6%和55.1%,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而阴性对照组与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);MTT比色法检测结果显示,各时间点的细胞增殖能力MMP-2沉默组与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),而2组较空白对照组均有所下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);细胞划痕实验示转染24h与48h后MMP-2沉默组的移行愈合率分别为(20.36±4.14)%和(23.19±5.62)%,较空白对照组(41.26±4.57)%和(67.61±8.80)%以及阴性对照组的(36.28±2.28)%和(74.48±9.21)%均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),阴性对照组与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 靶向MMP-2shRNA可以有效降低hLECsSRA01/04MMP-2mRNA和蛋白表达,抑制细胞的移行,但尚不能认为对细胞增殖能力有影响。RNA干扰MMP-2的表达可有效抑制hLECs的移行。  相似文献   

16.
兔角膜成纤维细胞培养及其生长抑制的实验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
张建华  王康孙 《眼科研究》1999,17(4):247-249
目的 了解丝裂霉素C(MMC)及透明质酸(HA)对准分子激光屈光性角膜切削术后及正常兔角膜成纤维细胞增殖的影响。方法 对兔角膜成纤维细胞体外培养,观察MMC及HA对细胞生长的影响。结果 MMC及HA对兔2有膜成纤维细胞生长具有明显的抑制作用。  相似文献   

17.
γ—干扰素在青光眼滤过性手术伤口愈合中的调节作用   总被引:8,自引:0,他引:8  
近年来,以丝裂霉素C和5-氟尿嘧嘧啶为代表的抗瘢痕药物的应用,极大地提高了青光眼滤过性手术的成功率。本文就γ-干扰素对人类Tenon氏囊成纤维细胞及其功能的影响做一综述。  相似文献   

18.
目的研究生长抑素stilamin(SS-14肽)和sandostatin(SS-8肽)对人晶上皮细胞(HLEC)增殖及胶原合成的影响。方法采用MTT比色法和3H-脯氨酸(3H-Proline)掺入法检测了SS-14肽和SS-8肽对人晶体上皮细胞(HLEC)增殖及胶原合成的抑制作用。结果SS-8肽浓度为10-10mol/L、SS-14肽浓度为10-9mol/L时能明显抑制HLEC增殖和胶原合成,且呈剂量依赖关系,50%抑制浓度(ID50)SS-8肽为10-8mol/L,SS-14肽为10-7mol/L。结论SS-14肽和SS-8肽可以通过抑制HLEC的增殖及胶原的合成而抑制后囊混浊。  相似文献   

19.
研究成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)对人晶体上皮细胞(humanlensepithelialcels,HLECs)的促增殖作用。方法:采用免疫组织化学检查(ABC法)来检测人晶体上皮细胞上bFGF蛋白水平,并用图像分析进行相对定量。结果:定性及定量地证明了人晶体上皮细胞有bFGF蛋白存在。结论:阐明了人晶体上皮细胞本身存在的bFGF以蛋白的形式参与了术后后囊混浊的形成。  相似文献   

20.
张兰兰  刘琼  于健  唐晓娟  徐静 《眼科新进展》2016,(11):1011-1015
目的 本研究探讨转化生长因子-β(transforminggrowthfactor,TGF-β)体外刺激豚鼠巩膜成纤维细胞,观察豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmus-cleactin,α-SMA)的表达。方法 原代培养豚鼠巩膜成纤维细胞并鉴定,MTT法检测豚鼠巩膜成纤维细胞的增殖,培养液分别加入20ng·mL-1 TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3,分别于12h、24h、48h、72h,Real-timePCR检测α-SMAmRNA,Western-blotting和免疫荧光化学法检测其蛋白表达。结果 与对照组相比,TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.05),其中TGF-β1促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖作用最强(P<0.05);TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3均增加α-SMA的表达(均为P<0.001),TGF-β3促进α-SMA表达作用最强(P<0.001)。结论 TGF-β通过调控细胞外基质合成参与调控巩膜组织重塑。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号