五味子醇提物对小鼠老化模型脑神经递质的影响

目的探讨五味子醇提物对小鼠脑老化模型脑乙酰胆碱酯酶(AChE)、单胺类神经递质的影响。方法小鼠颈背部皮下连续40d注射5%D-半乳糖造脑老化模型,另设空白对照组,皮下注射生理盐水。从第11天分别灌服相应药物,1次/d。于最后1次给药后2h,小鼠断头取脑,测脑匀浆AChE活性和单胺类神经递质含量。结果与模型组相比,大剂量组可显著降低模型小鼠脑AchE活力,显著提高脑去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)水平,明显提高5-羟色胺(5-HT)水平。结论五味子醇提部位可调节中枢神经递质的合成,有利于学习记忆,有抗脑老化作用。     

菟丝子醇提物对胃癌SGC7901细胞凋亡的影响

目的 探讨菟丝子(CCL)醇提物诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的作用.方法 以CCL(10、50、100 mg/L)作用于人胃癌SGC7901细胞,同时设DMSO和培养液作为对照组.采用HE染色法观察细胞形态变化,琼脂糖凝胶电泳法分析SGC7901细胞的DNA片段化.结果 HE染色镜下可见较为典型的凋亡形态学变化:细胞变小,核皱缩,荧光强度增强,核仁消失,新月体样改变,凋亡小体形成等;琼脂糖电泳出现明显的梯状条带,并存在剂量依赖性,而对照组未出现梯状条带.结论 CCL能够诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡.     

甘肃党参水提物对衰老模型小鼠脑细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的 研究甘肃党参水提物对衰老模型小鼠脑细胞凋亡及相关基因表达的影响,初步明确其延缓衰老的作用机制.方法 50只昆明种小鼠随即分为5组,分别为青年对照组,D-半乳糖衰老模型组及党参低、中、高剂量组; 采用D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型,测定各组小鼠各剂量胸腺指数和脾脏指数;流式细胞仪观察海马细胞凋亡的变化;免疫组化法检测Bcl-2基因在海马及皮质神经元中的表达.结果 甘肃党参水提取物与衰老模型组比较,小鼠胸腺、脾指数明显升高(P＜0.05);抑制脑细胞凋亡;使细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达上调,党参水提物各组海马结构及皮质神经元内Bcl-2表达阳性比衰老模型组强.结论 党参水提物可提高机体免疫功能,上调Bcl-2的表达,抑制神经细胞凋亡.     

大鼠脑出血后脑红蛋白在脑组织中的表达及其对细胞凋亡的影响

目的 研究实验性大鼠脑出血后脑组织中脑红蛋白的表达及其对细胞凋亡的影响.方法 随机将86只大鼠分为正常对照组、假手术组及脑出血组,应用立体定向技术,将自体未抗凝血注入大鼠基底节区制备脑出血模型.分别在造模后6、24、48、72小时断头取脑制作标本,采用TUNEL染色检测脑组织中细胞凋亡、荧光定量RT-PCR检测脑红蛋白mRNA表达、免疫组化分析脑红蛋白的表达.结果 脑出血后6h血肿周围脑组织脑红蛋白及TUNEL染色阳性细胞表达升高,其中脑红蛋白48h达高峰,72h开始下降,而细胞凋亡72h达高峰,表达均明显高于假手术组和正常对照组,差异有统计学意义（P ＜0.05,＜0.01）;脑红蛋白的表达与细胞凋亡数呈正相关（r=0.51,P＜0.05.结论 脑出血后脑红蛋白表达上调,可能对脑出血继发神经损伤起重要的保护作用.     

谷氨酰胺对幼年内毒素血症大鼠脑组织细胞凋亡超微结构的影响

目的 研究谷氨酰胺对内毒素血症所致脑损伤的保护作用.方法 将健康10日龄Wistar大鼠72只随机分为四组,对照组腹腔注射生理盐水,内毒素组腹腔注射内毒素+等量生理盐水;谷氨酰胺A组腹腔注射20% 的N-(2)-L-丙氨酰-L谷氨酰胺1.346 g/kg,1 h后腹腔注射上述剂量内毒素;谷氨酰胺B组同时腹腔注射上述剂量的谷氨酰胺和内毒素.于注射后2、6、72 h处死大鼠取大脑组织,利用透射电镜观察各组大鼠脑组织细胞超微结构改变.结果内毒素组注射内毒素后2 h时神经细胞明显肿胀,核膜模糊,不连续,内质网排列不规则,核糖体脱颗粒;6 h时神经细胞出现核染色质浓缩,核仁边集;72 h时出现神经细胞核破碎的凋亡改变.谷氨酰胺A组和B组脑组织均未见凋亡改变.结论 谷氨酰胺可通过减少神经细胞凋亡减轻内毒素血症所致脑损伤,此为临床相关疾病的治疗提供了理论依据.     

刺五加对大鼠迟发性脑血管痉挛脑组织细胞凋亡的影响

目的探讨刺五加在防治蛛网膜下腔出血(SAH)、迟发性脑血管痉挛(DCVS)及其所致的迟发性脑缺血中的作用机制.方法"枕大池二次注血"建立大鼠SAH-DCVS动物模型,采用TUNEL法和流式细胞术动态观察刺五加对大鼠SAH-DCVS脑组织细胞凋亡的影响.结果TUNEL检测发现刺五加组在SAH后随着给药时间的延长和给药次数的增加,与同期单纯注血组比较海马、皮质、基底节区及血管内皮细胞、血管平滑肌细胞可见凋亡细胞明显减少,有明显的药物时间依赖性;流式细胞仪检测亦发现刺五加组凋亡率明显降低,与相对应单纯注血组比较均有明显差异(P＜0.001).结论刺五加可以通过抑制细胞凋亡,防治SAH-DCVS及其所致的迟发性脑缺血、迟发性神经细胞损伤.     

五味子纳米醇提液对衰老小鼠脑神经细胞DNA损伤的保护作用

目的探讨衰老小鼠脑神经细胞凋亡、DNA损伤和bcl-2基因的表达及五味子醇提取液对上述指标的影响。方法D-半乳糖致衰小鼠为研究对象,观察五味子及其纳米微粒的醇提液对脑组织SOD活性、MDA含量、神经细胞凋亡及DNA损伤,bcl-2基因的表达情况。结果衰老小鼠脑神经细胞MDA含量、DNA损伤率和细胞凋亡率明显增加(P<0.01),SOD活性及bcl-2基因表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。灌服五味子醇提取液可提高SOD活性,降低MDA含量,增强神经细胞DNA损伤的修复能力,减少凋亡细胞数,增加bcl-2基因表达;五味子纳米微粒醇提液疗效优于常规醇提液。结论五味子醇提取液对D-半乳糖致衰小鼠脑神经细胞具有保护作用。     

细胞凋亡与衰老

衰老是指增龄过程中机体出现的多器官渐进性功能减退,其确切机制并不清楚,有多种学说,如自由基学说、端粒学说和细胞凋亡学说等.     

四君子汤对衰老小鼠脑组织caspase-3表达及活性的影响

目的 研究四君子汤对衰老小鼠脑组织caspase-3表达及活性的影响.方法 雄性KM小鼠分为青年对照组、老年对照组和四君子汤组.四君子汤组每日灌胃四君子汤,其余两组动物灌胃等量蒸馏水,共8 w.应用免疫组化法检测海马caspase-3表达,分光光度法检测caspase-3酶活性.结果 与青年对照组比较,老龄对照组小鼠海马caspase-3阳性细胞明显增多(P<0.05),脑组织caspase-3活性升高(P<0.01);与老龄对照组比较,四君子汤组海马caspase-3表达减少(P<0.05),脑caspase-3活性下降(P<0.01).结论 四君子汤可能减慢细胞凋亡速度延缓衰老.     

APP17肽对D-半乳糖脑老化模型小鼠神经元凋亡的影响

目的观察D-半乳糖脑老化小鼠(DGAM)海马内凋亡相关蛋白Fas、Fas配体(Fas-L)、核因子κB(NFκB)、C-Fos、C-Jun的表达及其脑神经元是否发生凋亡,并观察APP17肽的作用. 方法用D-半乳糖(D-gal)制造脑老化小鼠模型,给模型小鼠皮下注射APP17肽进行预防或治疗.D-gal皮下注射8周后,小鼠灌注取脑,行脑切片,一部分切片做免疫组织化学染色,观察各组小鼠海马内凋亡相关蛋白Fas、Fas-L、NFκB、C-Fos、C-Jun的表达;另一部分切片用凋亡试剂盒检测神经元是否发生凋亡. 结果对照组小鼠海马内Fas、Fas-L、C-Fos、C-Jun阳性染色神经元的数目分别为20.60±4.60、20.00±4.24、9.93±3.79、13.44±4.18,DGAM组小鼠上述各种抗体的阳性染色神经元数目分别为42.80±15.83、38.53±8.13、23.25±5.18、23.47±8.49,DGAM组比对照组明显增加(P＜0.05).DGAM组海马内NFκB的阳性染色神经元数目为13.93±5.31,比对照组小鼠的23.93±3.69明显减少(P＜0.05).用APP17肽预防或治疗后小鼠上述各种蛋白质的表达恢复到接近对照组小鼠的水平.对照组小鼠未发现凋亡的神经元;DGAM组小鼠脑神经元出现大量凋亡,用APP17肽预防或治疗后,神经元凋亡的数目与对照组小鼠接近. 结论 DGAM海马内凋亡相关蛋白表达异常,脑神经元发生凋亡.APP17肽可恢复各种凋亡相关蛋白的表达,阻止神经元凋亡,维持神经元的正常功能.     

广州管圆线虫幼虫致小鼠脑组织细胞凋亡研究

目的建立广州管圆线虫幼虫实验感染ICR小鼠动物模型,对其脑组织细胞凋亡情况进行检测。方法对小鼠动物模型脑组织切片,HE染色观察凋亡细胞的形态变化,再利用TUNEL法进行组织细胞凋亡水平检测及Western-blot方法检测不同感染时期小鼠脑组织中Caspase3表达水平变化,对广州管圆线虫幼虫致小鼠脑组织细胞凋亡进行综合评价。结果HE染色发现感染鼠脑组织细胞形态变化,经TUNEL法观察到感染鼠大脑、小脑、脑干部分均有不同程度的细胞凋亡,细胞凋亡率分别为20%、50%和70%,且用Western-blot方法分析Caspase3结果显示随着幼虫感染小鼠时间的延长,活性Caspase3表达量增加,即细胞凋亡程度增加。结论证实广州管圆线虫幼虫可诱导小鼠脑组织细胞凋亡,且随感染时间的延长组织凋亡水平亦增加。     

Bcl-2、Fas和Bax凋亡调控基因在限食和脑老化小鼠海马神经元中的表达

目的 通过细胞凋亡调控基因Bcl-2、Fas和Bax在限食及脑老化小鼠海马神经元中的表达,研究限食与脑老化的关系.方法 3月龄ICR雄性小鼠40只,随机分为4组:脑老化模型组、脑老化模型限食组、限食对照组、对照组,每组10只.10 w后进行为期7 d Morris水迷宫实验,实验完毕后进行Bcl-2、Fas和Bax免疫组织化学染色.结果 ①Fas、Bax阳性神经元数目脑老化模型组显著高于脑老化模型限食组、限食对照组显著低于对照组;与此相反,Bcl-2阳性神经元数目在脑老化模型限食组显著高于脑老化模型组,限食对照组显著高于对照组.②Morris水迷宫实验测试:脑老化模型组逃避潜伏期显著大于其他各组;撤台后小鼠的记忆性搜台游泳路程结果各组小鼠间均无显著差异.结论 限食可明显降低脑内凋亡相关基因Fas、Bax的表达,同时上调抗凋亡相关基因Bcl-2的表达,从而发挥抗脑细胞凋亡及防止脑老化性学习能力下降的作用.     

茜草多糖对衰老模型小鼠脑细胞凋亡影响的实验研究

目的 探讨茜草多糖延缓衰老作用机制及其对脑细胞凋亡的影响和作用机制.方法 采用D-半乳糖衰老模型小鼠作为研究对象,提取茜草多糖,观察茜草对脑细胞凋亡、Bel-2、线粒体细胞色素C(cytC)和ca2 含量的影响.结果 D-半乳糖衰老模型小鼠脑细胞凋亡率明显增加,而Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.01),线粒体cytC和Ca2 含量明显下降(P＜0.01),茜草多糖可明显降低凋亡细胞数(P＜0.01),增加BOl-2的表达(P＜0.05),提高线粒体cytC水平和ca2 含量(P＜0.01).结论 茜草多糖具有延缓脑细胞衰老的作用,可通过①上调Bcl-2蛋白的表达,②保护线粒体避免cytC的释出,③提高线粒体Ca2 缓冲含量,从而发挥抑制脑细胞凋亡的作用.     

莪术油对小鼠肝癌细胞原位凋亡的影响

目的:揭示莪术油对小鼠肝癌细胞凋亡的影响。方法:用莪术油进行2次小鼠肝癌体内抑制实验。以细胞原位凋亡TUNEL染色方法,评估莪术油对小鼠肝癌细胞凋亡的影响。结果:莪术油对小鼠肝癌细胞的抑癌率分别为51.85％和51.16％,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);经莪术油作用过的小鼠HepA肝癌细胞的原位凋亡指数(AI)为6.64±1.26,与对照组2.32±0.82比较差异有显著性(P<0.01)。结论:莪术油抑制小鼠肝癌生长的机理可能与其诱导肝癌细胞凋亡有关。     

海风藤提取物对D-半乳糖脑老化模型小鼠行为学、海马神经细胞线粒体膜电位及凋亡的影响

目的研究海风藤提取物对D-半乳糖(D-gal)脑老化模型小鼠行为学、海马神经细胞线粒体膜电位及凋亡的影响。方法用D-gal复制小鼠脑老化模型,随机分为模型组和海风藤治疗组,正常对照组采用健康昆明种小鼠。海风藤组每天给予腹腔注射海风藤注射液1次,每次1ml/100g体重;模型组和正常对照组给予等量2.5%二甲基亚砜;10w后成模。应用水迷宫试验观察小鼠学习记忆功能的变化,应用流式细胞术分析海马神经细胞凋亡率和线粒体膜电位的变化。结果①水迷宫结果显示,模型组小鼠第3、4、5天游完全程的时间和错误反应次数均较正常对照组增多(P<0.05);海风藤组小鼠的行为学障碍明显轻于模型组(P<0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义。②模型组小鼠海马神经细胞凋亡发生率显著增加(P<0.01)、线粒体膜电位明显降低(P<0.01);海风藤组海马神经细胞凋亡发生率低于模型组(P<0.01)、线粒体膜电位高于模型组(P<0.01);与正常对照组接近。结论D-gal脑老化模型小鼠存在学习和记忆功能障碍,且其海马神经细胞凋亡率增加、线粒体膜电位降低;海风藤能够明显改善该小鼠的学习和记忆能力,其作用机制可能是通过稳定线粒体膜电位、抑制凋亡的发生而实现的。     

党参水煎剂对亚急性衰老模型小鼠胸腺自由基代谢和细胞凋亡的影响

目的通过动物实验研究党参水煎剂延缓衰老的作用机制。方法 SPF级小鼠随机分为空白对照组、衰老模型组、维生素E组、党参低剂量组和党参高剂量组,采用D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型;观察党参水煎剂对小鼠胸腺组织形态的影响;检测小鼠胸腺组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用流式细胞仪检测胸腺组织细胞凋亡率。结果党参高、低剂量组胸腺组织病理明显改善,MDA含量降低,SOD活性升高,胸腺细胞凋亡率显著降低(均P<0.05)。结论党参水煎剂能改善小鼠胸腺组织病理形态和自由基代谢失调的状况,抑制细胞凋亡,延缓胸腺萎缩,提高机体免疫功能,延缓免疫衰老进程。     

何首乌饮对衰老大鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法选用18月龄Wistar大鼠为自然衰老动物模型,以12月龄大鼠作为青年对照,采用原位末端标记法和流氏细胞术分别检测何首乌饮灌胃用药60 d和30 d的18月龄大鼠睾丸组织细胞凋亡率变化和DNA含量的变化。结果与青年对照组相比,自然衰老组睾丸细胞凋亡率明显增高,单倍体和4倍体细胞明显减少并以二倍体为主,G_1/G0期细胞明显增多(P<0.05),细胞增殖指数明显降低(P<0.05);而何首乌饮用药后与自然衰老组相比,细胞凋亡率明显降低(P<0.05);4倍体和单倍体比例明显增加(P<0.05),与青年对照组无显著性差异(P>0.05);细胞增殖指数明显升高(P<0.05),G_1/G_0期细胞明显减少(P<0.05)。结论何首乌饮可以抑制生精细胞凋亡,促进细胞增殖,达到延缓睾丸组织衰老的效果,但其具体作用机制有待研究。     

菟丝子提取物对衰老小鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

目的研究菟丝子水煎剂对D-半乳糖所致衰老模型小鼠细胞凋亡的抑制作用。方法 30只小鼠按体重随机分为青年对照组、模型组、菟丝子给药组。激光共聚焦显微镜测定细胞内钙、免疫组化法检测bcl-2和bax表达、流式细胞仪检测心肌细胞凋亡。结果菟丝子组与衰老模型相比细胞内钙显著降低(P<0.05),bcl-2/bax比值高于模型组,心肌细胞凋亡指数减少(P<0.05)。结论菟丝子对D-半乳糖致衰老小鼠的心肌细胞凋亡有抑制作用。     

艾滋病病人脑组织细胞凋亡及HIV核心蛋白p24的原位检测

为研究细胞凋亡与艾滋病两者之间的关系及探讨艾滋病的发病机理，采用细胞ＤＮＡ片段特异性标记法及免疫组织化学方法对艾滋病病人及对照组病人脑组织中的凋亡细胞及ＨＩＶ核心蛋白Ｐ２４（ＨＩＶ－Ｐ２４）进行原位检测。观察组２３例艾滋病病人，其中有８例合并艾滋病脑病，另１５例无脑病。８例（８／８）艾滋病脑病的脑组织标本及１３例（１３／１５）无脑病艾滋病脑组织标本中均可检出凋亡细胞及ＨＩＶ－Ｐ２４。对照组１９例非艾滋病病人，仅３例（３／１９）脑组织中可检出凋亡细胞。无脑病艾滋病病人的脑组织凋亡细胞阳性率（８６．７％）高于ＨＩＶ－Ｐ２４的阳性率（６０．０％），并且艾滋病人神经原细胞ＨＩＶ－Ｐ２４阳性率较低。实验结果揭示艾滋病脑病的发生与细胞凋亡具有一定的关系，ＨＩＶ可能通过某些中间环节而诱导神经组织发生细胞凋亡。