新疆产中麻黄不同地理群体遗传关系的RAPD分析

 目的建立新疆3个不同地理群体的中麻黄(Ephdera intermedia)指纹图谱,进行遗传多样性分析。方法通过20个10碱基随机引物对新疆3个不同地理群体的中麻黄进行PCR扩增，并用人工栽培种作为对照，通过计算遗传相似性系数，建立UPGMA聚类图。结果共扩增出153个多态位点，建立了它们的基因组DNA指纹图谱。结论不同地理群体中存在丰富的遗传多样性；相距越远，群体间相似性程度越低；人工栽培种与同一产地野生种具有相似的遗传特性。     

红景天属4种植物RAPD分析与分类鉴定

目的 用RAPD技术对红景天属(Rhodiola L．)的大花红景天R．crenulata、长鞭红景天R．fastigiata、狭叶红景天R．kirilowii和高山红景天R．sachalinensis 4种药用植物进行分子水平鉴定。方法 CATB法提取红景天属原植物总DNA，以200条随机引物进行随机扩增。结果 用OPA4(AATCGGGCTG)、OPB7(GGTGACGCAG)、OPB18(CCACAGCAGT)、OPX14(ACAGGTGCTG)和OPZ13(GACTAAGCCC)作随机扩增引物进行随机扩增时，可得到识别这些物种基因组DNA的多态片段。结论 RAPD法能有效地鉴别红景天类药材，把大花红景天、长鞭红景天、狭叶红景天和高山红景天区分开。     

半夏遗传多样性的RAPD分析

目的对半夏的遗传多样性、亲缘关系进行研究。方法采用RAPD分子标记技术,使用80个随机引物对其遗传多样性进行了研究。结果半夏物种水平上的多态性比率为88.06%,其中野生半夏(88.06%)比栽培半夏(84.31%)要高。在群体水平上,野生半夏多态位点比率的加权平均值(82.61%)比栽培半夏(84.31%)略低。结论半夏由野生转栽培对其遗传多样性影响不大,各个产地半夏种内遗传差异小;但钟祥野生半夏多态位点数最高,遗传信息最丰富,质量优。     

栀子遗传多样性及遗传分化的RAPD分析

 目的应用随机扩增多态性DNA(random amplifed polymorphic DNA,RAPD)标记技术对栀子8个种群遗传多样性和遗传分化进行研究。方法18种随机引物对92个个体进行检测,应用POPGENE软件和AMOVA软件对结果进行处理。结果共得到120个可重复的位点,其中多态位点75个,多态百分率为62.5%。各种群内多态位点百分率在39.17%～68.83%之间,平均为56.98%。河南南阳(POP1)种群最高,其次是江西新干县野生种群(POP7),最低是江西抚州水栀子种群(POP3)。Shannon指数和Nei指数均反映出栀子各种群具有较高的遗传多样性。Shannon指数为0.431 3,各种群Shannon指数在0.2256～0.380 6之间,Nei指数为0.289 2,各种群Nei指数在0.148 2～0.263 0之间。AMOVA揭示种群内遗传多样性占总遗传多样性的76.05%,而种群间遗传多样性只占23.95%。运用POPGENE也得出种群内遗传变异(69.34%)大于种群间(30.66%)的结论。种群间的遗传分化系数为0.306 6。栀子种群间的基因流为1.130 6,遗传相似度平均为0.129 09,遗传距离平均为0.880 72。根据遗传距离聚类分析,河南南阳种群(POP1)与江西樟树新干种群(POP4,POP5,POP6,POP7)聚为一类,湖南种群(POP8)与江西抚州栀子种群(POP2)聚为一类,江西抚州水栀子种群(POP3)与其他各种群间的遗传关系较远。结论目前,虽然野生资源逐年减少以及多年栽培中的品种选育,栀子遗传多样性仍较丰富,且种群内大于种群间,种群间存在较少的遗传分化。     

药用植物华南忍冬居群遗传多样性的RAPD分析

目的:分析药用植物华南忍冬5个居群的遗传多样性和分化程度.方法:应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增可分析位点.结果:10条随机引物扩增出100个可分析位点,多态位点百分率(PPL)为87.00%.经POPGENE分析发现,华南忍冬居群平均水平的多态位点百分率为58.86%,Nei′s基因多样性(H)为0.2647,Shannon′s信息指数(I)为0.4022,具有较高水平的遗传多样性.居群间遗传分化程度较高(Gst=0.3839);地理距离与遗传距离之间具有显著相关性(r=0.8504,P=96.80%),表明地理隔离效应是导致居群间遗传分化的重要因素.根据遗传距离(POPGENE软件)和遗传相似系数(NTSYS-pc软件)的UPGMA聚类分析,罗浮山居群(LFS)和新兴居群(XX)先聚在一起,再与南宁居群(NN)聚成一类,而徐闻居群(XW)和海口居群(HK)聚成另一类.结论:基于华南忍冬的物种保护与资源利用,建议加强现有自然居群的就地保护,促进居群的自然更新;建立种质资源库,从中选育优良品系用于药材的规范化种植.     

野生红景天的RAPD和ISSR遗传多样性分析

目的采用RAPD和ISSR分子标记进行野生红景天种间亲缘关系及种内的遗传多样性分析。方法用CTAB法提取基因组DNA,然后通过筛选得到的11个RAPD及11个ISSR引物对不同采集地的4种野生红景天进行遗传多样性分析。结果 11条RAPD引物共扩增出96条条带,多态性百分比为90.62%;11条ISSR引物共扩增出102条条带,多态性百分比为100%。ISSR多态性的检测能力优于RAPD;聚类分析结果表明,ISSR法、RAPD和ISSR联用法均将17个样品聚为3大类;RAPD将样品聚为4大类。结论 2种标记均可用于红景天属植物种间亲缘关系与种内遗传多样性研究;4种红景天种内存在一定的遗传差异,种间基因流较小。     

我国仙茅属植物遗传关系的RAPD分析

目的从分子水平研究我国仙茅属(Curculigo Gaertn.)植物的遗传关系。方法对我国仙茅属植物7个国产种30个单株进行RAPD分析。运用Popgene Version1.31软件计算相关参数,采用UPGMA聚类法进行聚类分析。结果 11个RAPD引物共扩增出157条带,其中有145条呈多态性。我国仙茅属植物的遗传多样性极为丰富,在物种水平上,多态位点百分率(PPB)为92.36%,平均每个位点的有效等位基因数(Ne)为1.493 7,Nei’s基因多样性指数(H)为0.300 1,Shannon’s多样性信息指数Hsp为0.457 7。在种内水平上,PPB=5.09%,Ne=1.036 6,H=0.020 4,种内Shannon’s多样性信息指数(Hpop)为0.029 8。Nei’s基因多样性指数计算的种间遗传分化系数(Gst=0.931 3)与Shannon’s分化系数(0.934 9)基本一致,均说明大部分遗传变异存在于种间。种间基因流(Nm)为0.036 9,说明种间基因流动较少,遗传分化程度较高。两种间的Nei’s遗传一致度(I)的范围为0.520 8～0.823 7。根据Nei’s遗传距离进行UPGMA聚类,基于RAPD分子标记的聚类结果与传统分类一致。结论我国仙茅属植物的遗传多样性十分丰富,且种间的遗传差异大于种内的遗传差异。     

石斛的分子生物学鉴定-基于RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术分析了15种石斛属药用植物，选用10个有效引物扩增出99条DNA片段，用于遗传多样性分析、构建UPGMA聚类图。分析结果表明：RAPD方法能有效鉴别所试石斛属植物，其多态位点百分率为84．85％，表现出丰富的遗传多样性。     

药用黄芪的遗传多样性RAPD分析

目的：对药用黄芪的遗传多样性进行研究,为黄芪的保护利用提供参考。方法：采用随机扩增多态DNA（RAPD）方法对15份黄芪基因组进行扩增,所获数据通过NTSYS-pc v2.1和POPGENE v1.3进行分析。结果：从47条引物中筛选出12条条带清晰且重复性好的引物用于实验和统计分析,共扩增出85个位点,多态性位点占78.16%。聚类分析显示,所有供试黄芪可明显聚为三类。结论：本研究中来自四个省份的黄芪具有较高的遗传多样性;材料间遗传距离的远近与其地理来源有一定相关性,其中四川理塘的野生黄芪与其他材料遗传距离较大,推测与其独特的生境有关。说明保护黄芪多样性应尽可能广泛收集不同来源地的种质资源。     

药用金荞麦遗传多样性的RAPD分析

目的:对野生金荞麦进行遗传多样性研究.方法:通过RAPD技术对7个野生金荞麦居群共87个个体进行遗传多样性分析.结果:用12个随机引物共扩增出85条清晰条带,其中75条具多态性,平均多态性位点比率为88.24%,Nei's基因多样性指数H=0.310 3,Shannon多样性指数I=0.563 2,遗传分化指数G_(st)=0.192 4.结论:金荞麦种内具有较高的遗传多样性,遗传变异主要存在于居群内部,遗传多样性与地理关系表现出明显的相关性.RAPD可以作为研究遗传多样性及遗传分化的有效标记.     

岩白菜素药源植物资源研究进展

岩白菜素具有镇咳祛痰的功效,作为传统用于治疗呼吸系统疾病的特效药,市场需求量大.目前已有20科37属88种植物均含有岩白菜素的研究报道,其中虎耳草科鬼灯檠属、岩白菜属、落新妇属,紫金牛科紫金牛属植物较为普遍,西南鬼灯檠、羽叶鬼灯檠和岩白菜是提取岩白菜素的主要植物资源,含有3.0%以上的岩白菜素.我国西南和西北地区是岩白菜素药源植物资源的主要分布区,但近年来野生资源迅速减少,有必要开展主要药源植物的保护与繁育及种植研究.     

三种哥纳香属药用植物叶的比较解剖研究

目的 哥纳香属植物是重要的抗癌药物资源，研究叶的结构有利于正确识别该属植物。方法 利用离析法和石蜡切片法研究金平哥纳香、大花哥纳香和云南哥纳香3种植物的叶表皮和结构。结果 3种植物叶的形态结构非常相似，但仍存在着许多差别。金平哥纳香叶的表皮细胞内不含晶体，叶肉组织中含许多纤维状石细胞；而大花哥纳香和云南哥纳香叶的表皮细胞内含晶体，叶肉组织中不含纤维状石细胞。大花哥纳香的单列表皮毛通常为3个细胞，且其叶远轴面不具败育气孔器，每毫米叶宽含7个油细胞和25个粘液细胞，主脉中的维管束组织由10个小的维管束构成，而云南哥纳香的单列表皮毛为2个细胞，叶远轴面具许多败育气孔器，每毫米叶宽含4个油细胞和16个粘液细胞，主脉中的维管组织由12个小的维管束构成。结认 利用叶的表皮特征和内部结构可以鉴别上述3种植物。     

浙江产香茶菜属植物8个居群的RAPD分析

目的 从DNA分子水平上探讨香茶菜属植物种群变异特点。方法 从70个随机引物中筛选出10个具有较高多态性检测能力的引物。用这10个随机引物对浙江境内3种香茶菜的8个居群进行了RAPD分析，对得出的RAPD结果应用SPSSl0．0进行的聚类分析和应用CANOC03．10进行的除趋势对应分析。结果 共检测出144个位点，其中单态位点11个，占7．64％，多态位点133个，占92．36％。分析结果表明，浙江产香茶菜不同种、同一种的不同居群间存在明显的遗传分化，其中种间的差异要大于种内，大萼香茶菜Isodon macrocalyx居群间的差异要比香茶菜I.amethystoides居群的小。结论 香茶菜形态与化学成分的变异有一定的遗传学基础。     

Effect of different plant growth regulators on callus and adventitious shoots induction, polysaccharides accumulation and antioxidant activity of Rhodiola dumulosa

ObjectiveAs a medicinal plant, the resource of Rhodiola dumulosa is deficient along with the large collection. For the protection and utilization of R. dumulosa, the influence of plant growth regulators (PGRs) on callus induction and adventitious shoots differentiation, polysaccharide production and the antioxidant activity were tested.MethodsInternodes of R. dumulosa were used as explants and cultured on MS medium plus different plant growth regulators (PGRs). The anti-oxidative activities of polysaccharides were evaluated using radical scavenging assays.ResultsBy response surface plot, 0.85 mg/L N6-benzyladenine (BA), 0.34 mg/L naphthaleneacetic acid (NAA) and 0.33 mg/L 2,4-dicholorophenoxyacetic acid (2,4-D) were the optimal factors for callus induction (90.03%) from internodes explants on MS medium. The fresh weight of green callus increased 47.26 fold, when callus was inoculated on MS + thidiazuron (TDZ) 0.5 mg/L + NAA 2.0 mg/L. Adventitious buds regenerated from callus on the media of MS were fortified with BA 1.0 mg/L plus NAA 0.5 mg/L, and the induction rate was 40.00%. MS plus indole-3-butyric acid (IBA) 1.0 mg/L produced the highest rooting rate with 10 to 15 roots in a length of 2–3 cm per shoot. The content of total polysaccharides in callus developed on MS + TDZ 0.5 mg/L + NAA 2.0 mg/L and MS + BA 1.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L was as high as 1.72%−2.15%. At the dose of 0.5 mg/mL polysaccharides extracted from different callus induced on MS + NAA 2.0 mg/L + TDZ 0.5 mg/L or MS + BA 1.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L or MS + BA 0.5 mg/L + 2,4-D 0.5 mg/L, the ABTS radical eliminating percentages were 82.78%, 80.18% and 68.59%, respectively, much higher than that of wild plant.ConclusionA rapid micropropagation system for R. dumulosa has been developed. The combination of TDZ and NAA or BA and NAA can increase the yield of the total polysaccharides. The polysaccharides isolated from callus and whole wild plants had stronger free radicals scavenging activities, indicating that polysaccharides from R. dumulosa are the potential pharmaceutical supplements.     

大花红景天尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA的克隆及分析

目的 克隆大花红景天Rhodiola crenulata尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA,并利用生物信息学对其编码区与启动子进行分析.方法 以大花红景天为样品,采用优化的CTAB法提取大花红景天基因组DNA,并利用hiTAIR-PCR 技术经过3次步移获得大花红景天UDPGT (RcUDPGT)基因DNA序列,并利用生物信息学对其进行分析.结果 克隆得到RcUDPGT基因的DNA序列2 977 bp,其中包含1 499 bp的编码区域(包括82 bp的内含子序列)和1500 bp的编码区5,上游侧翼域序列(包括启动子区域).生物信息学分析证明该序列为UDPGT基因且与其他植物UDPGT同源,具有亲水性且定位于细胞质中,三级结构预测表明该基因编码的蛋白具有UDPGT功能结合位点.启动子分析表明其存在光响应、厌氧响应、热响应、低温响应、压力与防御响应和花色素苷合成响应元件等.结论 克隆的RcUDPGT基因结构完整,具有典型的功能结合位点,为红景天分子生物学与代谢工程研究提供参考.     

微波辅助提取红景天苷的工艺研究

目的 优选红景天中红景天苷的微波辅助提取工艺.方法 利用HPLC法测定红景天中红景天苷,运用正交试验,以红景天苷转移率为考察指标,筛选最佳微波提取工艺;并将其与加热回流提取法及超声提取法进行比较.结果 微波提取红景天中红景天苷的最佳提取工艺参数:微波功率中档(462 W),料液比为1∶10,提取3次,每次90 s,在此条件下,红景天中红景天苷的转移率高达99.86％.结论 微波辅助提取工艺具有效率高、时间短、能耗低、环保等优点,为红景天苷的工业化生产和新药开发提供了参考.     

滇白珠及其同属药用植物研究进展

综述民族药滇白珠及同属药用植物的资源、化学、药理、临床、产品开发等方面的研究。国内外对同属15种药用植物,特别是平铺白珠树和芳香白珠进行过研究。今后应着重在治疗风湿性关节炎方面进行药理和临床研究,以便开发成中药新药。     

大花红景天再生体系的优化及抗性筛选

目的 优化大花红景天再生体系并建立抗性筛选最佳条件,为建立大花红景天高效遗传转化体系奠定基础。方法 以大花红景天叶片为外植体,观察再生过程各阶段在不同配比的6-BA、NAA、IBA诱导下的诱导率及生长状况,并利用梯度筛选出外植体对卡那霉素（Kan）和抗潮霉素（Hyg）的抗性。结果 MS＋3.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA＋700 mg/L L-Pro为叶片不定芽分化的最佳培养基,分化率达到92%;MS＋700 mg/L L-Pro为根培养基;200 mg/L Kan、10 mg/L Hyg为大花红景天遗传转化的最佳筛选压;培养过程中添加10 mg/L Vc能有效抑制酚类物质的外泌。结论 优化了大花红景天植株再生体系,筛选出适宜于大花红景天遗传转化体系的Kan和Hyg筛选压。     

HPLC法同时测定不同产地大花红景天中6种活性成分

目的对青藏高原不同产地大花红景天Rhodiola crenulata中没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸进行分析研究,建立定量分析方法,为其进一步利用提供依据。方法采用30%乙醇提取样品;Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱;检测波长275 nm,柱温25℃。结果没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸分别在38.2~382.0 ng/m L(r=0.999 8)、301.0~3 010.0μg/m L(r=0.999 9)、19.8~198.0 ng/m L(r=0.999 6)、17.1~171.0 ng/m L(r=0.999 6)、4.5~45.0 ng/m L(r=0.999 8)、6.38~63.80 ng/m L(r=0.999 4)呈良好的线性关系,加样回收率均符合定量测定要求。结论该方法简便,快速,准确,可用于同时对青藏高原大花红景天中6种活性成分的测定。     

石斛属几种植物遗传关系的SRAP和RAPD比较分析

目的 利用SRAP和RAPD两种分子标记技术对9份石斛种质进行遗传多样性研究.方法 用40对SRAP引物组合和36个RAPD引物分别对供试石斛的基因组DNA进行扩增.结果 SRAP引物组合共扩增条带1 977条,多态性比率为90.2%,遗传相似系数GS值变化范围为0.330 2～0.789 2.RAPD引物共扩增出281条带,多态性比率为87.1%,GS值变化范围为0.494 2～0.773 1.利用两种标记得到的聚类结果存在一定的差异,SRAP聚类结果与传统的基于形态特征建立的分类结果比较一致,较好地体现了供试品种的亲缘关系、地域特性.在9个石斛供试种间,SRAP的标记指数MI值(16.46)是RAPD标记MI值(3.67)的4.5倍,表明SRAP具有更大的标记效率.结论 两种标记皆可有效应用于该属植物种质资源的遗传多样性分析.而SRAP标记在石斛的遗传多样性与亲缘关系的研究中,则表现出了极大的优越性.