常压高氧对孤独症模型鼠学习记忆及海马CA1区NF-κB阳性神经元表达的影响

目的 探讨常压高氧对丙戊酸钠(valproic acid, VPA)孤独症模型鼠学习记忆能力及海马CA1区NF-κB阳性神经元表达水平的影响。方法 按Schneider方法制作VPA孤独症动物模型, 随机选取24只分为常压高氧模型组、模型对照组;随机选取同期Wistar孕鼠腹腔注射等量生理盐水后所产下的子代雄鼠作为正常对照组(每组12只)。采用Y型电迷宫测试大鼠学习记忆能力;采用免疫组化和图像分析技术检测模型鼠海马CA1区NF-κB阳性神经元表达水平。结果 常压高氧模型组治疗后大鼠学习记忆能力提高, 表现为Y型电迷宫检测尝试次数减少(31.08±0.99 vs 31.67±0.89, t=2.887, P=0.015), 再现次数增加(3.02±0.67 vs 2.62±0.52, t=-2.379, P=0.036);模型对照组与正常对照组比较, 海马CA1区NF-κB阳性细胞数增加(4.67±1.58 vs 3.00±1.54, t=2.639, P=0.015);常压高氧模型组与模型对照组比较, 海马CA1区NF-κB阳性细胞数减少(3.17±1.27 vs 4.67±1.58, t=2.588, P=0.017)。结论 孤独症的发病可能与海马CA1区NF-κB阳性神经元的表达水平有关, 常压高氧干预可降低模型鼠海马CA1区NF-κB阳性神经元的表达水平, 并改善模型鼠的学习记忆能力。     

大豆黄酮对痴呆模型神经元的抗凋亡作用

目的观察大豆黄酮对神经元细胞内三种与老年痴呆相关蛋白（淀粉样前体蛋白（APP）、β-分泌酶（BACE）、一氧化氮合酶1（NOS1））的表达影响。方法用新生24 h内的SD大鼠,经解剖分离海马,培养海马神经元细胞,生物性状稳定时,用于实验。实验分5组,分别为正常对照组、硝普钠（SNP）诱导凋亡组及三种浓度的大豆黄酮预处理组。培养至第11~12 d使用免疫组化法对海马神经元进行鉴定,并对5组细胞分别进行上述三种痴呆相关蛋白的免疫化学染色分析,采用显微照像系统对免疫组化后的细胞照相,然后通过Digital Imaging System v1.6对细胞免疫组化的图片测出阳性区平均灰度值,进行统计分析。结果 1.成功建立了SD大鼠海马神经元体外培养模型,并建立了SNP诱导的体外培养海马神经元凋亡模型;2.细胞免疫化学染色显示大豆黄酮在试验范围内有剂量依赖关系。与对照组相比,SNP处理的海马神经元的APP、BACE、NOS1的表达显著增加（P〈0.05）;与SNP组相比,低、中浓度大豆黄酮组的细胞内APP和NOS1的表达水平显著降低（P〈0.05）,高浓度大豆黄酮组的细胞内APP、BACE、NOS1的表达水平显著降低（P〈0.05）。结论成功建立了SNP诱导的体外培养海马神经元凋亡模型,大豆黄酮具有抑制神经元凋亡作用,其机制与通过抑制细胞内淀粉样前体蛋白、β-分泌酶和神经型一氧化氮合酶的产生密切相关。     

高功率微波辐射对大鼠海马的损伤效应

目的　研究高功率微波 (highpowermicrowave ,HPM)辐射对大鼠海马形态与功能的影响。方法　采用HPM辐射 5 0只Wistar二级雄性大鼠 ,于辐射后 6h及 1、3、7d通过Y迷宫检测学习和记忆能力的变化 ,并取海马组织 ,经HE染色、尼氏体染色、原位末端标记和免疫组化等技术 ,研究海马组织形态变化、细胞凋亡以及神经元特异性烯醇化酶 (neuron specificenolase ,NSE)和胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)表达的变化。结果　HPM辐射后 ,大鼠的学习和记忆能力与对照组比均明显降低 ;海马组织水肿、疏松 ,血管扩张 ,神经元变性、坏死 ,尼氏体减少或消失。损伤以CA4区和齿状回较重 ,且存在剂量 -效应关系。病变在 7d内呈进行性加重趋势。凋亡细胞明显增加。神经元NSE表达增强 ,组织间隙和血管腔内也可见到NSE的表达。星形胶质细胞中GFAP表达增强 ,呈粗纤维状 ,与对照组比明显变短、变粗。结论　HPM可影响实验大鼠学习和记忆能力 ;引起海马组织形态结构改变 ,以神经元变性、凋亡和坏死 ,尼氏体减少及间质水肿为主 ;NSE和GFAP参与了其病理过程。     

天王补心丹对AD模型大鼠学习记忆及PKC、Aβ的影响

目的：探讨天王补心丹对阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆能力改善的机制。方法：将雄性SD大鼠60只随机分成正常组、对照组、模型组、西药组和中药组,每组12只。除正常组、对照组外,其余三组侧脑室注射β-淀粉样肽（1-40）（Apl-40）制备动物模型,对照组注射同等剂量生理盐水。以Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力,用免疫组化法观测大鼠海马区PKC、AB阳性细胞表达情况。结果：西药组和中药组大鼠海马区神经元β-淀粉样蛋白光密度、阳性细胞数减少,PKC光密度值、阳性细胞增多,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：天王补心丹有改善AD模型大鼠学习记忆障碍的作用。     

断乳前丰富环境对大鼠空间参考记忆及海马CA1区神经元形态学的影响

[目的]探讨断乳前丰富环境对大鼠空间参考记忆和海马CA1区锥体神经元树突结构可塑性的影响.[方法]3窝共30只新生SD大鼠,每窝均随机分为对照组(n=14)和实验组(n=16).实验组大鼠生后10日龄至24日龄每天予以丰富环境暴露20 min,对照组大鼠除不予以丰富环境暴露外,余处理均与实验组相同.生后5周,两组大鼠予以Morris水迷宫测试评估空间参考学习记忆能力.同时,采用高尔基染色法观察断乳前丰富环境对大鼠海马CA1区锥体神经元树突形态的影响,并进行统计分析. [结果]在Morris水迷宫测试中,丰富环境组大鼠的空间参考记忆成绩显著高于对照组.在训练阶段,两组到达平台的平均时间均呈下降趋势.在测试阶段,丰富环境组大鼠的空间记忆保持能力优于对照组[(31.41±5.91)%vs(26.17±5.66)%,F=4.470,P<0.05).高尔基染色显示断乳前丰富环境增加海马CA1区锥体神经元顶树突和基树突的长度[(3.46±0.65)mm vs(2.48±0.57)mm;(2.30±0.48)mm vs(1.93±0.53)mm;F=29.838,P<0.01;F=6.222;P<0.053. [结论]断乳前丰富环境可以促进大鼠空间参考记忆能力,增加海马CA1区锥体神经元顶树突和基树突的长度.     

神经调节素对实验性痴呆大鼠的脑组织IL-21β表达的影响

目的研究神经调节素1β（neuregulin1β,NRG1β）对实验性老年痴呆大鼠脑组织白细胞介素-21β（IL-21β）表达的影响。方法成年健康Wistar大鼠30只,经左侧脑室微量注射淀粉样蛋白β1-40（Aβ1-40）建立实验性痴呆模型,经右侧脑室注射NRG1β干预治疗,Y型电迷宫检测大鼠的认知功能,原位TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法检测IL-21β表达。结果造模成功后,模型组大鼠较对照组认知能力明显下降、TUNEL阳性细胞数明显增多、神经细胞IL-21β蛋白表达增强（P〈0.05）。经NRG1β治疗后,治疗组大鼠较模型组认知能力显著改善、TUNEL阳性细胞显著减少、神经细胞IL-21β表达减弱（P〈0.05）。结论 NRG1β可能下调IL-21β表达,发挥抗炎作用,从而改善动物的学习记忆能力。     

Aβ1-40对PND5大鼠海马线粒体p-drp-1表达的影响及相关分析

目的:探讨Aβ1-40致伤PND5大鼠后对其海马线粒体p-drp-1表达的影响。方法:选取刚出生5天的健康(PND5)大鼠为实验组,同时选同样的PND5大鼠作为对照组,于实验组大鼠海马区注射Aβ1-40试剂1μl。所有大鼠均正常饲养7天后,将实验组海马区神经元制作培养基,对照组海马区神经元制作悬浮液,然后分别运用Western blots技术检测两组大鼠线粒体p-drp-1的表达情况并分析这两组海马神经元线粒体p-drp-1表达的差异性。结果:PND5大鼠经Aβ1-40注射后,提取海马区组织总蛋白,并运用Western blots技术定量检测线粒体动力学调节蛋白p-drp-1,结果显示其表达量明显下降。结论:p-drp-1的表达水平能反映线粒体的分裂程度和神经元的活跃程度,Aβ1-40对神经元的损伤导致疾病的发生和进展。保护线粒体结构和功能的稳定,抑制细胞凋亡的作用可以使疾病得到转归。     

补阳还五汤对痴呆鼠胰岛素及相关蛋白表达影响的实验研究

目的观察补阳还五汤对老年性痴呆大鼠学习记忆能力的保护作用,并探讨其作用机制。方法Wistar雄性大鼠50只,随机分为5组,每组10只,即正常组、假手术组、模型组、补阳还五汤组和脑复康组,采用海马区注射Aβ1-40溶液制作AD大鼠模型。各组大鼠在造模后第7天开始给药治疗,正常组、假手术组与模型组大鼠给予等容积生理盐水,连续21d。脱察AD大鼠学习记忆能力,并用免疫组化法检测大脑海马区胰岛素（Ins）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和胰岛素降解酶（IDE）蛋白表达的影响。结果补阳还五汤可显著降低Aβ1-40所致的AD模型大鼠IDE存腑I内海马中的阳性表达,提高Ins、IGF-1在海马中的阳性表达,起到防治老年性痴呆的作用。     

噪声对大鼠空间学习记忆及海马神经元形态学的影响

[目的]拟观察噪声对大鼠学习记忆及海马神经元的影响,探讨噪声对大鼠学习记忆的影响机制。[方法]将32只Wistar大鼠,随机分为噪声组和对照组,噪声组在80dB(A)噪声下持续暴露1个月,用Morris水迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力。HE染色和透射电镜观察大鼠海马神经元形态和超微结构。[结果]Morris水迷宫定航实验中,噪声组大鼠寻找平台的平均逃避潜伏期均较对照组明显延长(P﹤0.05);空间搜索实验中噪声组大鼠第一次寻找原平台的潜伏期、穿越原平台的次数、时间百分比以及距离百分比,均较对照组明显降低(P﹤0.01)。HE染色光镜下观察发现噪声组大鼠海马组织无明显异常,透射电镜下观察发现噪声组大鼠海马神经元超微结构也未见明显异常。[结论]噪声暴露对大鼠海马神经元无器质性损害。噪声暴露下大鼠学习记忆能力的损害可能只与海马神经元功能改变有关。     

磷脂酰胆碱对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响

目的:探讨大豆磷脂酰胆碱对血管性痴呆大鼠学习记忆能力的作用。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组和磷脂酰胆碱组,采用双侧颈总动脉结扎法(2-VO法)建成血管性痴呆大鼠模型,分别通过Morris水迷宫系统和免疫荧光方法观察各组大鼠行为学和海马CA3区脑源性神经营养因子的变化。结果:长期服用磷脂酰胆碱可明显改善血管性痴呆模型大鼠的Morris水迷宫测试成绩,同时海马CA3区BDNF阳性细胞数目明显增多,光密度值减弱。结论:长期服用磷脂酰胆碱可对抗大鼠脑缺血后所致的学习记忆的损害。     

p38MAPK信号转导通路参与血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡机制及Egb761保护作用的研究

目的观察应用银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,Egb761)后血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠空间认知功能的变化、海马细胞凋亡及海马中p38MAPK磷酸化表达的变化,探讨银杏叶提取物对大鼠海马的保护作用机制。方法应用用两血管法制作VD大鼠模型,将60只雄性Wistar大鼠随机分成假手术组(SOG组)、VD组和Egb组。Egb组大鼠给予Egb761100 mg·kg-1·d-1腹腔注射,VD组和SOG组给予等量的2ml生理盐水,一月后测试各组大鼠的空间认知能力,TUNEL法检测海马CA1区细胞凋亡,蛋白印迹法观察大鼠海马区p38MAPK磷酸化变化。计数资料采用t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果 1,2,3 dEgb组大鼠隐蔽平台逃避潜伏期[分别为(47.72±6.91)s、(42.84±4.19)s、(36.49±3.16)s]明显小于VD组隐蔽平台逃避潜伏期[(86.25±7.57)s、(79.17±8.43)s、(77.84±6.28)s],差异有统计学意义(P0.05);Egb761组大鼠原平台象限时间[(27.19±4.73)s]大于VD组[(19.26±4.16)s],差异有统计学意义(P0.05)。大鼠海马CA1区细胞凋亡、磷酸化p38MAPK的表达的比较:Egb组明显低于VD模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Egb761可能是通过减少磷酸化P38MAPK的表达而抑制p38MAPK信号转导通路,显著改善VD大鼠的学习记忆能力,同时抑制海马区细胞凋亡,这可能是其参与血管性痴呆治疗的作用机制之一。     

模拟高原低压低氧对大鼠学习记忆行为和海马GABA表达的影响

[目的]探讨模拟高原低压低氧环境对大鼠学习记忆行为和海马区γ-氨基丁酸表达的影响. [方法]将大鼠置于模拟海拔6 000 m的低压舱内24 h建立模拟高原环境,用Morris水迷宫测定大鼠的空问学习记忆能力;用免疫组织化学方法观察其海马区γ-氨基丁酸(γ-aminobutiric acid,GABA)免疫反应神经元的数量变化. [结果]在Morris水迷宫试验中,模拟高原环境组大鼠寻找平台的潜伏期较正常对照组明显延长(P＜0.01),末次跨台次数较对照组减少(P＜0.05).与对照组相比,模拟高原环境组大鼠海马区GABA阳性神经元数量显著下降(P＜0.001). [结论]模拟高原低压低氧环境可使大鼠学习记忆能力下降,这可能与海马区GABA表达减少有关.     

祛风除湿中药独活对痴呆大鼠脑内凋亡蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的 探讨祛风除湿中药独活对β淀粉样蛋白(amyloid β protein,Aβ)脑内注射所致大鼠痴呆模型的保护作用.方法 24只雄性Wistar大鼠行颅内Aβ海马CA1区内注射术后,随机分为4组,独活组、吲哚美辛组、假手术组和模型组,每组6只,分别给予中药独活、吲哚美辛及生理盐水灌胃.进行水迷宫实验检测逃避潜伏期,在实验4周末处死大鼠,检测凋亡蛋白Bcl-2/Bax在大鼠脑中表达的情况.结果 除假手术组外,其他3组逃避潜伏期均有不同程度延长(P＜0.05);与模型组比较,其他3组Bcl-2/Bax大鼠脑中的表达有所不同,独活组可提高Bcl-2/Bax的比值(P＜0.05).结论 独活可以改善痴呆模型大鼠的学习记忆能力,并能上调Bcl-2表达,抑制Bax表达,提高Bcl-2/Bax的比值,对痴呆大鼠神经细胞的凋亡有抑制作用.     

牛磺酸对β淀粉样肽海马注射大鼠学习记忆能力和细胞因子的影响

目的:观察牛磺酸对β-淀粉样肽1-40海马注射致痴呆大鼠的学习记忆能力与炎性细胞因子的影响,为牛磺酸应用于防治Alzheimer病提供依据。方法:SD大鼠,随机分为正常对照组、Aβ注射模型组、牛磺酸0.3g/kg·d、0.6g/kg·d剂量组。灌胃给予牛磺酸7d后,除对照组外,其它组均双侧海马注射10μg Aβ1-40,2w后进行Morris水迷宫测试,取海马组织,用放射免疫法进行IL-6、TNF-α测定。结果:与模型组大鼠比较,牛磺酸大剂量组逃脱潜伏期与游泳距离显著缩短;撤去站台后,在目标象限搜索距离比延长;海马组织IL-6、TNF-α含量显著减少。结论:牛磺酸可显著地改善Aβ海马注射致记忆障碍大鼠的学习记忆能力,其原因可能与其抗炎症细胞因子作用有关。     

替普瑞酮诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马热休克蛋白70表达及对其学习记忆能力的影响

目的双侧海马注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病大鼠模型，观察替普瑞酮诱导大鼠海马热休克蛋白70表达及对其行为学的影响。方法72只SD大鼠随机分为替普瑞酮组、模型组与对照组，双侧海马注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病大鼠模型，对照组海马注射等量生理盐水。替普瑞酮组予替普瑞酮800mg／kg／d灌胃，余两组予等量生理盐水灌胃。术后1、7、14和21d并于Y迷宫行为学测试后处死大鼠。采用RT—PCR和western—blot方法，观察各组大鼠海马HSP70表达的变化。结果术后14和21d模型组学习记忆能力较对照组明显减退（P〈0．01），而替普瑞酮组大鼠较模型组有所改善（P〈0．01）。术后7、14和21d模型组大鼠海马HSP70表达较对照组逐渐减少（P〈0．05），替普瑞酮组HSP70表达明显增加（P〈0.05）。结论替普瑞酮能够诱导AD模型大鼠海马HSP70表达，从而减轻神经元损害，改善大鼠的学习记忆能力。     

痴复康方改善PSCI大鼠的空间学习和记忆能力及其作用机制

目的研究痴复康方对卒中后认知障碍(PSCI)大鼠的影响并探讨其机制。方法对48只大鼠双侧颈总动脉结扎制作PSCI模型,分为正常组、模型组、尼莫地平组及痴复康方低、中、高剂量组。通过Morris水迷宫实验测试大鼠的空间学习和记忆能力,病理观察海马组织改变,qPCR法检测海马组织N-甲基-D-天门冬氨酸受体NR2B亚基(NR2B)、钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、高迁移率族蛋白B1 (HMGB-1)、转化生长因子β1 (TGF-β1)、 Smad7 mRNA的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,原平台象限停留时间缩短(P均<0.01);大鼠海马组织神经元减少,细胞排列松散、不规则,部分可见核仁消失、锥体细胞减少;NR2B、 CaMKⅡ、 mRNA表达减少,HMGB-1、 TGF-β1、 Smad7 mRNA表达增加(P均<0.01)。与模型组相比,痴复康方各剂量组随着剂量增加,大鼠逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加,原平台象限停留时间延长(P均<0.01);大鼠海马组织神经元增加,坏死细胞减少,细胞核固缩减少,正常神经元增加,细胞轮廓清晰,排列整齐;NR2B、 CaMKⅡmRNA表达增加,HMGB-1、 TGF-β1、 Smad7 mRNA表达减少(P均<0.01),以高剂量组改善最明显。结论痴复康方能提高PSCI大鼠模型的空间学习和记忆能力,其机制与减少海马神经元坏死,上调海马组织NR2B、CaMKⅡmRNA表达,下调HMGB-1、 TGF-β1、 Smad7 mRNA表达有关。     

噪声对幼鼠学习记忆行为及海马区Glu阳性神经元表达的影响

[目的]拟观察噪声对幼鼠学习记忆及海马区Glu阳性神经元表达的影响,探讨噪声对幼鼠学习记忆能力的影响及其机制.[方法]将24只Wistar幼鼠,随机分为噪声组和对照组,噪声组在90dB(A)噪声下持续暴露1个月,用Morris水迷宫测定幼鼠的空间学习记忆能力,用免疫组化法观察海马区Glu阳性神经元的表达.[结果]在Morris水迷宫试验中,噪声组寻找平台的潜伏期较对照组延长(P<0.05),末次跨台次数较对照组明显减少(P<0.01).噪声组海马区Glu阳性神经元的数量及染色强度较对照组显著降低.[结论]噪声可使幼鼠学习记忆能力下降,这可能与海马区Glu的合成减少,抑制了习得性长时程突触增强有关.     

曼性铝中毒对大鼠海马CA3区神经元突触体素（p38）的影响

目的通过突触体素（Synaptophysin,p38）的表达,探讨铝的神经毒性作用机理。方法40只4～5月龄sD大鼠,随机分为两组：铝中毒组和正常对照组,每组20只,雌雄各半。常规p38免疫组化染色,用细胞形态学计量方法测量p38阳性产物的平均光密度。结果铝中毒组大鼠海马CA3区神经元p38免疫组化染色阳性颗粒减少,阳性产物平均光密度降低,与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论慢性铝中毒引起大鼠海马CA3区p38的减少。这种变化可能是铝的神经毒性作用机理之一。     

黄芪提取物对老年痴呆大鼠海马组织中iNOS的表达及NO含量的影响

目的研究黄芪提取物对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织中诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达和NO含量的影响及其作用机制。方法 SD大鼠海马内注射Aβ25-35制备AD大鼠模型,实验分4组:假手术组、模型组、黄芪组和西药治疗组。黄芪组和西药治疗组分别用黄芪提取物和脑复康灌胃,假手术组和模型组用等剂量生理盐水灌胃。用Morris水迷宫测定各组大鼠的学习记忆能力;Western blot测定各组大鼠海马组织中i NOS蛋白的表达;硝酸还原酶法检测各组大鼠海马组织中NO含量。结果模型组的逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,海马组织中i NOS的表达水平及NO含量均升高,与假手术组比较,差异均有统计学意义(P0.05);黄芪组逃避潜伏期均缩短,单位时间内跨越原平台次数均增多;i NOS表达水平及NO含量下降,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05),其作用效果与西药治疗组相当(P0.05)。结论黄芪提取物对Aβ25-35所致AD模型大鼠学习记忆障碍具有明显的改善作用,其机制可能是黄芪提取物通过抑制i NOS的表达和NO的生成,减轻Aβ25-35毒性作用所致脑组织神经元损伤,从而改善AD的学习记忆障碍。     

β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马组织及Bax、Bcl-2的影响

目的：探讨β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马组织及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法：经过敞箱实验选取得分相近的2-3个月龄SD大鼠80只,按随机数字表法分为四组,每组20只,结合孤养并给予慢性轻度不可预见刺激,复制抑郁模型,于造模成功第2天开始,分别给予氟西汀组和β-细辛醚组1.2 mg/（kg·d）氟西汀和25 mg/（kg·d）β-细辛醚灌胃,模型组与正常组给予等体积生理盐水。于第21天对大鼠处死取脑,免疫组织化学法检测Bax、Bcl-2蛋白相对含量。结果：模型组大鼠海马组织神经元数目减少,散在排列,细胞核发生固缩变形,CA1区,CA3区变化显著。与模型组比较,β-细辛醚组、氟西汀组Bax蛋白表达均显著降低（P〈0.01）。结论：β-细辛醚可以降低大鼠海马组织Bax蛋白表达,促进Bcl-2蛋白表达。