穿心莲内酯对人食管癌Ec9706细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨穿心莲内酯(AD)对人食管癌Ec9706细胞增殖、克隆形成、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:分别以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和平板克隆形成法评价AD对Ec9706细胞增殖和克隆形成的抑制作用;通过流式细胞术、细胞原位凋亡检测(TUNEL)和Annexin·V／PI法观察AD诱导细胞凋亡。结果:AD显著抑制Ec9706细胞的增殖,IC_(50)值为28．6μg·mL~(-1),也显著抑制Ec9706细胞的克隆形成,IC_(50)值为1．7μg·mL~(-1)。AD 30和60μg·mL~(-1)组G_0/G_1期的细胞比例较对照组显著增加[(65．6±1．9)%,(60．5±1．1)% vs．(50．6±0．9)%,P＜0．01],凋亡细胞比例也显著大干对照组[(17．9±2．6)%,(39．4±1．7)％vs．(0．5±0．2)%,P＜0．01]。结论:AD抑制人食管癌Ec9706细胞的增殖和克隆的形成,阻滞细胞周期于G_0/G_1期并诱导细胞凋亡。     

壳聚糖纳米颗粒对K562细胞增殖的影响

目的 评价壳聚糖纳米颗粒对K562细胞增殖的影响,并探讨相关机制。方法 采用MTT法对壳聚糖纳米颗粒的最佳作用时间和作用浓度进行筛选,免疫荧光技术和透射电镜技术考察壳聚糖纳米颗粒对K562细胞形态的影响,流式细胞仪检测壳聚糖纳米颗粒对线粒体膜电位、细胞内ROS含量和Ca²⁺浓度的影响。结果 壳聚糖纳米颗粒(15 μg·mL^-1)可以明显诱导K562细胞出现凋亡改变,表现为：细胞核变小,出现核聚缩等现象。同时线粒体膜电位崩解,ROS含量增加,Ca²⁺浓度增加。结论 壳聚糖纳米颗粒对K562细胞的增殖有抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

黄芪多糖对食管癌细胞增殖与凋亡的影响及其分子机制研究

目的 研究黄芪多糖（APS）对食管癌细胞的调控作用。方法 分别在活体水平和细胞水平添加不同浓度的APS,研究其对裸鼠成瘤及食管癌细胞增殖和凋亡的影响。活体水平：向裸鼠体内注射食管癌细胞和不同浓度APS后,检测肿瘤的生长趋势和抑瘤率;细胞水平：采用EdU染色和流式细胞术检测不同浓度APS处理后,食管癌细胞的细胞周期和凋亡情况。qPCR、Western blotting和Co-IP试验探讨APS对食管癌进行调控的分子机制。结果 向裸鼠食管癌移植瘤模型体内注射APS可抑制肿瘤的增殖,且随着剂量的增加,其抑癌效果亦增强。APS可抑制食管癌细胞增殖,促进其凋亡。TP73、FBXW7的表达随APS浓度的增加而增加,Ki67、BCL-2的表达随APS浓度的增加而降低。Co-IP试验发现,APS能够与TP73蛋白结合。过表达TP73可抑制食管癌细胞增殖并促进其凋亡,沉默TP73则与之相反。结论 本研究揭示了APS对食管癌的调控作用及其可能的分子机制,为食管癌的治疗及APS的应用提供了一定的研究基础。     

番茄红素对EC-9706细胞增殖及细胞周期的影响

目的：研究番茄红素对人食管癌细胞EC-9706的增殖及细胞周期的影响。方法：MTT法检测番茄红素对EC-9706增殖的抑制作用,采用流式细胞仪检测同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期和凋亡的变化。结果：番茄红素能够明显抑制EC-9706细胞的生长,呈现时间和剂量依赖性;且诱导细胞凋亡;并阻滞细胞周期于S期。结论：番茄红素可抑制EC-9706细胞的增殖,其机制可能为诱导细胞凋亡和改变细胞周期。     

As2O3联合热疗对人食管癌EC-1细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨As2O3联合热疗对人食管癌细胞株EC-1增殖的抑制作用及机制.方法:人食管癌细胞株EC-1细胞分为对照组、As2O3组、热疗组及As2O3+热疗组.采用MTT法测定细胞的增殖情况,应用流式细胞术检测细胞周期变化,TUNEL法观察细胞凋亡.结果:与对照组相比,As2O3组和(或)热疗组24、48、72 h后的EC-1细胞生存率均降低,As2O3+热疗组的细胞生存率低于单纯As2O3组和热疗组(P＜0.05或P＜0.01).As2O3+热疗组G0/G1期细胞低于热疗组,G2/M期细胞比例高于热疗组和As2O3组,As2O3+热疗组S期细胞比例低于As2O3组,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).As2O3组和As2O3+热疗组的细胞凋亡率均高于对照组,As2O3+热疗组高于As2O3组和热疗组,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:As2O3联合热疗具有协同抗食管癌作用,其机制可能与联合应用后增强诱导食管癌细胞凋亡、细胞周期特异性治疗及细胞周期调控剂联合增效有关.     

氧化苦参碱对人食管癌细胞株Eca109增殖及凋亡的影响

目的:观察氧化苦参碱(Oxy)对食管癌细胞株Eca109的抑制增殖及诱导凋亡作用。方法:培养食管癌细胞株(Eca109),以MTT比色法、生长曲线、及流式细胞术测定Oxy对食管癌细胞株Eca109抑制增殖及诱导凋亡的作用。免疫沉淀法并ERK活性试剂盒测定ERK活性;免疫印记法测定p-ERK1/2、Cyclin D1、p21waf/cip1、Bax及Bcl-2表达。结果:MTT实验及生长曲线显示Oxy明显抑制Eca109细胞增殖,流式细胞术显示Oxy可诱导Eca109细胞凋亡;免疫沉淀法显示Oxy可抑制ERK活性,免疫印记法显示Oxy抑制p-ERK1/2、Cyclin D1及Bcl-2表达,同时上调p21waf/cip1和Bax表达,Bax/Bcl-2比值增加。结论:氧化苦参碱可以抑制食管癌细胞株Eca109增殖,机制与影响ERK及下游CyclinD1、p21waf/cip1表达有关;其诱导凋亡途径与上调Bax表达,降低Bcl-2表达有关。     

纳米ZnO颗粒共培养对UVB照射体外人皮肤HACaT细胞株凋亡的影响

目的研究纳米氧化锌(ZnO)颗粒对远紫外光(UVB)照射人皮肤HACaT细胞株凋亡的影响。方法实验细胞分为对照(A)组、纳米ZnO共培养(B)组、UVB照射(C)组和UVB照射ZnO共培养(D)组。采用均匀沉淀法合成纳米ZnO颗粒并运用扫描电镜(SEM)和X-射线衍射(XRD)对其进行表征。使用310nm UVB照射细胞,细胞计数试剂盒8(CCK-8)观察细胞增殖,流式细胞术观察细胞凋亡,Western blot观察细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)表达。结果经SEM表征,ZnO颗粒平均粒径为(40±6)nm。纳米ZnO孵育细胞不会影响细胞的增殖,也不会导致细胞发生显著的凋亡;UVB照射细胞能抑制细胞增殖并导致细胞发生大量早期凋亡,而纳米ZnO能显著降低UVB照射细胞抑制率及凋亡率(P<0.05)。结论纳米ZnO能很好的保护HACaT细胞免受UVB的影响。     

α-细辛醚对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨α-细辛醚调控内质网应激对食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响。方法 实验分为空白组和低、中、高剂量实验组。空白组给予不含药物的RPMI-1640培养基进行培养;低、中、高剂量实验组分别给予含25,50和100 mg·L^-1α-细辛醚溶液的RPMI-1640培养基进行培养。用噻唑蓝法检测细胞增殖率,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中免疫球蛋白重链结合蛋白（BIP）、C/BEP环腺苷酸反应元件结合转录因子同源蛋白（CHOP）及葡萄糖调节蛋白78（GRP78）mRNA的表达水平。结果 低、高剂量实验组和空白组的细胞增殖能力（OD值）分别为0.78±0.14,0.50±0.09和0.92±0.12,BIP mRNA相对表达量分别为7.68±2.08,3.27±0.94和13.07±2.35,CHOP mRNA相对表达量分别为1.22±0.33,2.39±0.63和0.91±0.30,GRP78 mRNA相对表达量分别为2.11±0.59,5.86±1.47和0.84±0.31。低、高剂量实验组的上述指标与空白组相比,差异均有统计学意义（均P<0....     

鱼藤素对食管癌EC-109细胞增殖的抑制作用及部分机制

<正>氧化和抗氧化失衡在肿瘤发生发展过程中的作用被越来越多的学者所关注~([1-2])。本实验拟通过安全有效的体外实验来观察鱼藤素在食管癌细胞中的作用效果,同时观察慢性氧化应激相关通路在其中的作用机制。1材料与方法1.1药物与试剂鱼藤素(deguelin)购自Sigma公司,p-Akt兔抗人单克隆抗体、Nrf2兔抗人单克隆抗体、HO-1鼠抗人单克隆抗体均购自美国Santa Cruz公司。     

甲氟奎对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

目的 研究甲氟奎对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制.方法 运用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)法检测甲氟奎(5、10、15、30μmol/L)对食管鳞癌细胞KYSE140的增殖的调控,筛选最适浓度30μmol/L;用β连环素(β-catenin)信号通路激活剂Wnt3a或二甲基亚砜(DMSO)与30...     

CDCA7基因在食管鳞癌细胞系中的表达及其对细胞增殖凋亡的影响

目的明确CDCA7基因在食管鳞癌各种细胞系中的表达量及其对细胞表型的影响。方法 (1)实时聚合酶链反应(real-time PCR)和蛋白质印迹法检测食管鳞癌细胞系及永生化食管上皮细胞系中的CDCA7基因的表达水平;(2)构建CDCA7基因的敲除载体pLKO.1-purosh RNA-CDCA7;(3)将pLKO.1-puro-sh RNA-CDCA7和对照空载体pLKO.1-puro转染到内源性高表达CDCA7基因的食管鳞癌细胞系ECA109中;(4)用real-time PCR和蛋白质印迹法验证筛选出的单克隆细胞;(5)四甲基偶氮唑盐(MTT)试验、克隆形成试验、细胞凋亡试验验证CDCA7基因敲除后对细胞表型的影响。结果 (1)在食管鳞癌的各种细胞系中,ECA109是内源性高表达CDCA7基因的细胞系之一;(2)成功构建了pLKO.1-puro-sh RNA-CDCA7的敲除质粒,并筛选出稳定敲除CDCA7基因的单克隆细胞株;(3)MTT、克隆形成试验结果显示,敲除CDCA7基因可以降低食管鳞癌细胞的增殖能力和克隆形成能力;(4)细胞凋亡试验结果显示,敲除CDCA7基因能够加速食管鳞癌细胞的凋亡。结论 CDCA7基因的敲除能够对食管鳞癌细胞系的细胞表型产生影响,会抑制癌细胞的增殖能力和克隆形成能力,加速癌细胞的凋亡。     

吉马酮对人肺癌A549细胞系增殖、凋亡的影响

目的研究吉马酮对人肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法用MTT比色法检测吉马酮对A549细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡率;采用电子显微镜观察吉马酮作用细胞后亚细胞结构的变化。结果吉马酮对人肺癌A549细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈剂量效应关系;流式细胞仪结果显示,吉马酮可以诱导A549细胞凋亡,凋亡率与药物呈剂量效应关系;电子显微镜下经吉马酮处理后的细胞可见染色质浓聚、染色质边集等典型的凋亡改变,而空白对照组没有变化。结论吉马酮可以抑制肺癌A549细胞的增殖、诱导细胞凋亡。     

泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究泛素蛋白酶体抑制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:将泛素蛋白酶体抑制剂MG-132加入胃癌细胞SGC7901,用四氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制效应,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫细胞化学检测生存素的表达。结果:MG-132对胃癌细胞有显著的抑制作用,24,48h的IC50分别为80.9,9.1μmol·L-1;MG1325.0μmol·L-1作用胃癌细胞24,48,72,96h后,细胞凋亡率分别为(4.2±s0.6)%,(30±4)%,(47±6)%,(53±6)%,生存素在胃癌细胞中呈高表达,经MG132作用后,表达明显降低。结论:MG132能显著抑制胃癌细胞的增殖、诱导其凋亡,并下调生存素的表达。     

姜黄素对人食管癌EC9706细胞增殖及侵袭的影响

目的探讨姜黄素(Curcumin)对人食管癌EC9706细胞增殖、细胞凋亡及侵袭的影响及其分子机制。方法应用0、40、80、120、160μmol/L姜黄素处理EC9706细胞24~72h后,采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖抑制率;RT-PCR检测转录因子Ets-1及MMP9(基质金属蛋白酶)mRNA的表达。结果姜黄素作用后,EC9706细胞生长明显减慢,抑制率5.5%~76.2%(P<0.05),呈时间-剂量效应关系;Ets-1及MMP9 mRNA表达降低,且两者之间有相关性,有统计学意义(P<0.01)。结论姜黄素能明显抑制EC9706细胞的增殖及侵袭能力,其机制可能与抑制Ets-1及MMP9表达相关,这可能是姜黄素抑制肿瘤细胞增殖及侵袭的机制之一。     

外源性腺苷三磷酸和腺苷对食管癌TE-13细胞株凋亡的影响

目的　探讨腺苷三磷酸 (ATP)和腺苷 (ADO)是否具有诱导人食管低分化鳞癌细胞株TE 13凋亡的作用。方法　MTT法 ,AO/EB双荧光染色法 ,琼脂糖凝胶电泳 ,流式细胞仪方法。结果　ATP在0 .1～ 1.0mmol·L- 1或ADO在 0 .0 1～ 1mmol·L- 1浓度范围内 ,可不同程度地抑制TE 13细胞的增殖 ,ATP和ADO作用 72h后 ,对TE 13细胞的最大抑制率分别达 (80 .5± 6 .2 ) %和 (74 .0± 5 .3) %。细胞经0 .3mmol·L- 1的ATP或ADO处理 4 8h后 ,细胞形态出现了凋亡特征 ;电泳可见明显的“梯状”条带 ;ATP和ADO可浓度依赖性地诱导细胞的凋亡 ,1mmol·L- 1的ATP和ADO诱导细胞的凋亡率分别为 (16 .6± 1.1) %和 (16 .9± 1.2 ) %。结论　ATP和ADO均有诱导食管癌TE 13细胞凋亡的作用