丹皮酚体外对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨丹皮酚对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响。方法 HSC加入丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h后,MTT比色法和锥虫蓝染色法检测HSC的存活率。HSC与丹皮酚33.2 mg·L-1分别作用6,12,24,36和48 h,锥虫蓝染色法检测HSC的存活率。HSC与丹皮酚1.66～69.7 mg·L-1作用48 h用细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性测定试剂盒检测细胞上清中LDH活性。丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1与HSC作用24 h分别用光学显微镜、Hoechst 33258染色和流式细胞术检测HSC细胞形态、细胞凋亡和凋亡率;丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h用流式细胞术检测细胞周期。结果 MTT实验结果表明,丹皮酚16.6～49.8 mg·L-1对HSC增殖具有明显抑制作用,且具有浓度效应关系(r=0.955,P<0.05),作用48 h时IC50值为105.4 mg·L-1。锥虫蓝染色实验结果表明,丹皮酚对HSC存活率的抑制作用不仅具有浓度效应关系(r=-0.936,P<0.05),浓度为33.2 mg·L-1时还具有时间效应关系(r=-0.965,P<0.05)。丹皮酚16.6～69.7 mg·L-1作用48 h无明显细胞毒性。流式细胞仪检测结果显示,丹皮酚8.3～49.8 mg·L-1作用24 h能显著促进HSC细胞凋亡(P<0.05),且具有浓度效应关系(r=0.920,P<0.05)。丹皮酚33.2和49.8 mg·L-1作用48 h可调节细胞周期,G0/G1期细胞增加(P<0.01),S期细胞减少(P<0.01),具有浓度依赖性(r=0.980,P<0.05)。结论丹皮酚具有促进HSC凋亡和抑制HSC增殖的作用,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。     

丹皮酚对大肠癌HT-29细胞的增殖抑制作用及其机制的探讨

目的采用定量和定性相结合的方法观察丹皮酚对HT-29细胞的增殖抑制作用并对其可能的作用机制进行探讨。方法用MTT法和流式细胞仪定量测定丹皮酚对HT-29细胞的抑制率及细胞凋亡率,选用TUNEL法及细胞免疫组化从形态学方面探寻丹皮酚对HT-29细胞作用的可能机制。结果丹皮酚在0.024~1.504 mol.L-1剂量下对体外培养的大肠癌HT-29细胞的增殖均有抑制作用,呈现明显的浓度效应关系;在此浓度(0.024~1.504 mol.L-1),分别作用24,48,72和96 h,抑制率随之增加,呈明显的时间效应关系;经1.504 mol.L-1的丹皮酚处理的HT-29细胞,细胞凋亡率明显增加与阴性对照有明显差异;流式细胞仪检测在G1期前出现sub-G1峰,S期细胞增多,G1、G2期细胞减少,随着丹皮酚浓度的增加,HT-29细胞的凋亡率逐渐增加,每个实验组的凋亡率与对照组相比差异有显著性(P<0.05);丹皮酚作用HT-29细胞可使Fas/FasL表达增加。结论丹皮酚可能通过上调大肠癌HT-29细胞Fas/FasL蛋白的表达而诱导细胞凋亡是其抑制大肠癌细胞增殖的机制之一。     

高山红景天对实验性大鼠肝纤维化的抑制作用

目的：观察单方生药高山红号天对大鼠实验性肝纤维化的治疗效果,并探讨其作用机制。方法：用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,将实验动物随机分为正常对照组（A）、模型组（B）、秋水仙碱组（C）、红景天高剂量组（D）、红景天低剂量组（E）。除正常对照组外,其余4组均用四氯化碳诱发肝纤维化。各组于造模第8周末处死动物,分别用放射免疫法检测血清层粘连蛋白（LN）,Ⅲ型前肢原（PCⅢ）,透明质酸（HA）及Ⅳ型胶原（CⅣ）;检测ALT、AST、ALB、STP;作HE染色。结果：与模型组大鼠比较．经该中药治疗．大鼠血清中LN、PCⅢ、HA、CⅣ和ALT、AST水平明显降低（P〈0．01）;ALB水平显著升高（P〈0．01）;大鼠肝组织病理学检测改善显著。结论：单方生药高山红景天能有效地减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤和抑制肝纤维化的作用,其机制是通过抑制肝HSC增殖,降低ECM的分泌．促进胶原纤维降解而达到的。     

丹皮酚对单侧输尿管梗阻后小鼠肾纤维化的抑制作用

目的研究丹皮酚对单侧输尿管阻梗后(UUO)小鼠肾纤维化、炎症以及细胞凋亡的抑制作用。方法通过单侧输尿管结扎术建立小鼠UUO模型,通过Masson染色研究UUO后小鼠肾脏组织中间质性胶原的沉积情况。通过免疫组化和免疫荧光实验研究小鼠肾组织中胶原蛋白等纤维化相关蛋白的沉积情况,并且研究丹皮酚对UUO中炎症和肾脏细胞凋亡的影响。结果丹皮酚可明显降低UUO后小鼠肾组织中间质性胶原的沉积,降低胶原蛋白和纤维粘连蛋白在细胞质基质中的沉积。丹皮酚可明显降低肾组织中CD68和CD11b以及促凋亡因子Bax的表达,并可增加抗凋亡因子Bcl-2的含量。结论在本试验条件下,一定剂量的丹皮酚可明显降低UUO后小鼠肾脏中纤维化水平,抑制其炎症和细胞凋亡。     

肝纤维化发生机制的研究进展

各种病因引起的慢性肝病及某些有毒物质所致的肝脏损伤，都可能具有肝细胞炎症、坏死，并继发纤维化的病理特征。它是向肝硬化发展的中；和环节。近年来，随着医学分子生物技术的应用，人们对其发生机制进行了深入广泛地探讨，并有了不少新认识，逐渐改变了传统肝纤维化不可逆转的观点，明确提出了肝纤维化完全有可能发生逆转的论点；可以这样说，肝纤维化的研究已成了目前世界医学攻关中的一个热点课题。现将应用分子生物学技术研究肝纤维化发生机制的细胞学基础、细胞外基质的研究及细胞因子的作用三个最活跃的领域综述如下。1肝纤维化发…     

川芎嗪干预大鼠实验性肝纤维化的研究

目的研究川芎嗪对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用,并探讨其剂量-效应关系。方法90只SD雄性大鼠随机取80只以40%四氯化碳皮下注射,其余10只予以相同容量生理盐水皮下注射作为正常对照组(N组)。8周后,造模组随机处死16只,经肝组织活检证实肝纤维化形成(模型对照组,M组)。剩余肝纤维化大鼠随机分成3组:分别为川芎嗪低剂量治疗组(T1组,川芎嗪一日1次20mg/kg腹腔内注射)、高剂量治疗组(T2组,川芎嗪一日1次80mg/kg腹腔内注射)、空白对照组(R组,生理盐水一日1次腹腔内注射),疗程8周。试验结束时,全部大鼠采血后处死,分别行HE染色评估肝纤维化程度、Masson染色评估肝组织中胶原纤维百分比、生化法检测血清谷丙转氨酶及谷草转氨酶水平。结果T1、T2组大鼠肝纤维化程度较R组明显减轻,胶原面积密度降低,血清转氨酶下降,且T2组改善优于T1组。结论川芎嗪具有逆转肝纤维化的作用,且高剂量疗效更显著。     

川芎嗪抑制肝纤维化作用机制的研究进展

肝脏慢性损伤,包括病毒性肝炎、酗酒、药物作用及代谢性疾病等,均可导致肝纤维化.肝纤维化是一个可逆过程,病程进展导致的肝硬化是不可逆的,因此在纤维化早期进行及时诊断及有效的治疗,可减缓或防止发展为肝硬化.近年来研究发现,中药川芎中的有效成分(川芎嗪)在治疗肝纤维化中发挥了较好的治疗效果,本文对川芎嗪治疗肝纤维化的作用机制进行综述.     

酒精性肝纤维化中肝星状细胞活化的机制研究进展

肝星状细胞(HSC)活化是各种病因所致肝纤维化过程中的关键环节。在酒精性肝病的发展过程中,乙醇和代谢产物乙醛可改变机体氧化还原状态,活化枯否细胞,释放大量细胞因子,诱导HSC活化、增殖和胶原合成,形成肝纤维化。本文将对酒精性肝纤维化中HSC活化的机制和相关靶点加以综述,为开发抗肝纤维化药物和临床治疗提供新的思路。     

红花对实验性大鼠肝纤维化的抑制作用

目的：观察红花对实验性大鼠肝纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法：在CCl4诱导实验性大鼠肝纤维化3周后．给予红花5.0g/kg,每天1次腹腔注射．同时设正常对照及CCl4对照组。分别用放免法检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、3型前肢原(PCⅢ)。HE及VG法染色观察组织的病理变化。免疫组织化学法检测肝组织Desmin的表达。结果：红花治疗组大鼠肝组织纤维化程度计分、血清HA、LN、PCⅢ浓度、肝组织中Desmin染色阳性细胞面积低于CCl4对照组,差异显著。结论：红花抑制肝星状细胞的激活和转化．具有一定的抗肝纤维化作用。     

丹皮酚对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用(英文)

目的探讨丹皮酚对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法建立H2O2致PC12细胞损伤模型,采用MTT法测定细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞内活性氧含量,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞内丙二醛(MDA)含量。结果PC12细胞经H2O2100μmol.L-1处理10 h可致细胞存活率下降,并能诱导细胞凋亡,LDH释放量及细胞内活性氧和MDA含量明显增加;丹皮酚(12,25和50μmol.L-1)预处理1 h可提高细胞存活率,减少细胞凋亡、LDH释放量及细胞内活性氧和MDA含量。结论丹皮酚对H2O2诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

鬼箭羽醇提物对四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的作用

目的探讨鬼箭羽醇提物对四氯化碳(CCl_4)致小鼠肝纤维化的作用与机制。方法 80只C57BL/6♂小鼠随机分成8组:正常组、CCl_4组、鬼箭羽醇提物早期治疗组(EAE)和后期治疗组(EAL),治疗组再分别分为低、中、高剂量组(EAE-L/M/H,EAL-L/M/H),每组10只。腹腔注射CCl_4制备肝纤维化模型,共30 d,EAE和EAL分别于前15 d和后15 d灌胃不同剂量EA。处死后,HE和Masson染色观察肝组织与胶原纤维变化,ELISA检测血清(ALT)、(AST)、(TNF-α)变化,免疫组化和Western blot检测α-SMA、CollagenⅠ的表达。结果与正常组相比,EA各组的肝指数、ALT、AST、TNF-α及α-SMA、CollagenⅠ的表达呈剂量依赖性的低于模型组(P<0.05或P<0.01);EAE和EAL各组肝组织形态与胶原纤维变化也明显呈剂量依赖性优于模型组;且EAE组在HE染色、Masson染色及α-SMA、CollagenⅠ的表达方面,效果明显优于EAL组(P<0.05)。结论 EA呈剂量依赖性阻止CCl_4所诱导的小鼠肝纤维化,且早期治疗效果明显,其机制可能与抑制TNF-α的生成,进而影响α-SMA、CollagenⅠ的表达有关。     

CCl4诱导大鼠肝纤维化模型的建立

目的：构建肝纤维化大鼠动物模型。方法：取雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠80只,通过腹腔注射以橄榄油稀释10N的四氟化碳．1mL／kg．每周1次．共8周．建立大鼠肝纤维化动物模型。造模结束时处死动物。酶联免疫吸附法检测血清ALT、AST水平．HE染色及免疫荧光法观察大鼠肝组织病理学变化和胶原沉积。分别观察在造模第5、6、7、8周时各项指标的变化。结果：建模第5周即可见肝功异常．血清AL丁和AST明显升高（P〈0．05）。第6周肝脏假小叶形成。大鼠肝脏有明显的纤维化病灶。于第7周始最为典型。大鼠HE染色中可见肝组织病变区域多,面积大,正常肝小叶结构破坏．肝细胞索排列紊乱．胶原纤维明显增生。呈较宽的务索状分隔肝小叶,弥漫分布,形成假小叶。建模成功率高达80．0％。结论：CCL诱导可成功建立大鼠肝纤维化模型。     

楤木皂苷抗四氯化碳致大鼠肝纤维化作用

目的观察楤木皂苷对四氯化碳致大鼠肝纤维化的保护作用。方法采用质量分数为40%的四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,MASSON染色观察肝组织病理学改变,采集血清检测肝功能及透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、三型胶原蛋白(typesⅢ-collagen,COI-Ⅲ)含量的变化。结果楤木皂苷可抑制肝假小叶的形成和胶原纤维沉积,改善肝功能,降低血清中HA、LN、COI-Ⅲ的含量(P<0.05)。结论楤木皂苷有显著的抗肝纤维化的作用。     

大蒜素、川穹嗪与万古霉素联用抗MRSA的作用研究

目的探讨中成药大蒜素、川穹嗪分别与万古霉素联合应用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抑制作用。方法临床分离5株MRSA,采用K-B法测定细菌对苯唑西林、头孢唑林、头孢曲松、红霉素、妥布霉素和万古霉素的敏感性;采用微量稀释法分别测定大蒜素、川穹嗪和万古霉素对MRSA的最低抑菌浓度MIC,采用棋盘稀释法测定大蒜素、川穹嗪分别与万古霉素联用时对MRSA的MIC,计算联合指数FICI。结果 5株MRSA均为多耐药菌株,仅对万古霉素敏感。大蒜素、川穹嗪对MRSA的MIC与对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)即标准株ATCC29213的MIC比较无统计学差异。大蒜素与万古霉素在体外联合应用时,万古霉素的MIC为(0.60±0.22)μg/mL,与单用万古霉素时的MIC(2.40±0.89)μg/mL比较有统计学差异(P=0.004);川穹嗪与万古霉素在体外联合应用时,万古霉素的MIC为(0.40±0.37)μg/mL,与单用万古霉素时的MIC=(2.40±0.89)μg/mL比较有统计学差异(P=0.002)。万古霉素加大蒜素的平均FICI为0.32±0.13,呈协同作用,万古霉素加川穹嗪的平均FICI为0.65±0.09,呈相加作用。结论大蒜素、川穹嗪对MRSA有一定抑制作用。大蒜素、川穹嗪与万古霉素联合使用时具有协同或相加作用,大蒜素、川穹嗪可能成为万古霉素的增敏剂用于治疗MRSA引起的感染。     

糖尿病高糖高脂对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的作用研究

目的探讨糖尿病高糖高脂状态对四氯化碳(CCl_4)诱导的化学性肝纤维化进展的影响。方法采用高脂饲料及链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,四氯化碳诱导肝纤维化模型,高脂饲料、STZ及CCl_4诱导糖尿病合并肝纤维化模型,动态监测各组大鼠体重、血糖及相关血清学指标;HE染色观察各组大鼠的肝脏病理学变化;Western blot、q-PCR检测各组大鼠肝组织中α-SMA和Collagen Ⅰ的表达。结果与对照组大鼠相比,糖尿病组和糖尿病合并肝纤维化组大鼠体重明显下降,血糖血脂均升高,肝纤维化组无明显差异;HE染色及血清AST/ALT检测表明,与对照组大鼠肝组织相比,糖尿病大鼠、肝纤维化大鼠及糖尿病合并肝纤维化大鼠肝组织均有不同程度的肝损伤,以糖尿病合并肝纤维化组大鼠最为严重;3组大鼠肝组织α-SMA和Collagen Ⅰ表达较对照组也不同程度增加,以糖尿病合并肝纤维化组大鼠最为明显,与单纯糖尿病组和肝纤维化组比较,差异有显著性。结论糖尿病可诱发肝损伤,加剧CCl_4诱导的大鼠肝纤维化病变。     

纳米红色元素硒对CCl_4诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

已知亚硒酸钠和硒蛋氨酸等硒化合物有较高生物活性和毒性 ,灰和黑色零价元素硒几乎无生物活性和毒性[1] 。对于零价元素硒中的红色元素硒 ,目前缺乏研究 ,一般将其视为与灰和黑色元素硒类同 ,无生物利用价值[2 ] 。纳米粒子有大量特性[3] ,纳米红色元素硒以蛋白质为核 ,以红色元素硒为膜和以蛋白质为分散剂的新型纳米粒子。本文研究其对ＣＣｌ4 诱导小鼠急性肝损伤保护作用 ,考查其生物利用和药用价值。1　材料与方法1.1　纳米红色元素硒　通过蛋白质控制元素硒原子聚合 ,形成以蛋白质为核 ,以红色元素硒为膜和以蛋白质为分散剂的纳米红色元…     

芹菜根提取物对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 观察芹菜根提取物对四氯化碳(CCI4)所致大鼠急性肝损伤的作用.方法 50只Wistar大鼠随机分为5组:阴性对照组、模型对照组、阳性对照组、芹菜根高、低剂量给药组,高、低剂量组分别灌胃3、1.5 g/kg芹菜根提取物,阳性对照组灌胃200mg/kg联苯双酯滴丸,阴性对照组及模型对照组以等体积生理盐水灌胃,共7 d.第7天,模型对照组、阳性对照组和各给药组ip CCl4溶液1 mL/kg,正常组注射等体积生理盐水.测定各组大鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT),肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的量,并观察肝组织病理改变.结果 芹菜根提取物能显著降低CCI4所致大鼠血清AST、ALT量的升高及肝组织中MDA的量,增强肝组织中SOD活性.结论 芹菜根提取物对CCI4所致的大鼠急性肝损伤具有一定的保护作用.     

硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化的研究

目的研究硫代乙酰胺对大鼠肝纤维化模型的诱导作用。方法采用0．03％的硫代乙酰胺腹腔注射,每周2次,构建大鼠肝纤维化模型;观察大鼠肝纤维化形成情况。结果与空白组比较,模型组大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、透明质酸（HA）明显升高（P〈0．01）;层粘连蛋白（LN）升高（P〈0．05）。组织病理提示模型组大鼠肝细胞大量坏死,假小叶形成。结论硫代乙酰胺能诱导大鼠形成肝纤维化。     

川芎嗪对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路的影响

目的：观察川芎嗪对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路的影响,探讨川芎嗪治疗肝纤维化的作用机制。方法四氯化碳皮下注射制备大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组、肝纤维化模型组和川芎嗪治疗组,川芎嗪治疗组在造模过程中每天给予盐酸川芎嗪注射液腹腔注射,6周后,乙醚麻醉,腹主动脉采血,产色基质偶氮法鲎试剂定量测定血浆内毒素;肝组织常规HE染色观察肝脏病变,天狼猩红胶原染色、肝组织羟脯氨酸含量测定评测肝纤维化程度;West-blotting法检测肝组织内Nrf2蛋白的表达, TBA法检测肝组织丙二醛（MDA）水平,酶显色定量分析法检测肝组织谷胱甘肽-S-转移酶（GST）含量。结果川芎嗪治疗组与肝纤维化模型组相比,肝损伤较轻,肝纤维化程度明显降低,血浆内毒素含量降低, Nrf2蛋白表达量增多,肝组织中MDA含量降低, GST的含量升高。结论川芎嗪的抗肝纤维化作用可能与其降低内毒素血症,激活肝内Nrf2/ARE抗氧化通路进而使得抗氧化酶GST等含量增加有关。     

川芎嗪对内毒素诱导的急性肺损伤大鼠肺纤维化和炎症反应的调节作用

目的：探索川芎嗪对内毒素诱导的急性肺损伤大鼠肺纤维化和炎症反应的影响及其机制。方法：大鼠随机分为5组：对照组、LPS模型组、LPS+川芎嗪（50,100,200 mg·kg^-1）组。苏木素伊红（HE）染色观察肺组织病变。Masson染色分析肺纤维化。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测白细胞介素（interleukin,IL）-6,IL-1β,肿瘤坏死因子（tTNF-α）和IL-18水平。蛋白印记检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,转化生长因子β1（TGF-β1）,Ⅰ型胶原蛋白（collagen type Ⅰ）,Ⅲ型胶原蛋白（collagen type Ⅲ）,PI3K,P-PI3K,AKT,P-AKT,mTOR和P-mTOR的蛋白水平。结果：LPS模型组大鼠肺组织湿/干重之比高于对照组（P<0.01）。与LPS模型组相比,LPS+川芎嗪（100,200 mg·kg^-1）组大鼠肺组织湿/干重之比降低（P<0.01）。川芎嗪处理可改善LPS模型组大鼠肺组织病变及纤维化。LPS模型组大鼠α-SMA,TGF-β1,collagen type Ⅰ和collagen type Ⅲ表达高于对照组（P<0.01）。与LPS模型组相比,LPS+川芎嗪（50,100,200 mg·kg^-1）组大鼠α-SMA、TGF-β1、collagen type Ⅰ和collagen type Ⅲ表达降低（P<0.01）。与对照组相比,LPS模型组大鼠IL-6、IL-1β、IL-18和TNF-α水平升高（P<0.01）。LPS+川芎嗪（50,100,200 mg·kg^-1）组大鼠IL-6、IL-1β、IL-18和TNF-α水平低于LPS模型组（P<0.01）。LPS模型组大鼠P-PI3K/PI3K,P-AKT/AKT和P-mTOR/mTOR比值高于对照组（P<0.01）。与LPS模型组相比,LPS+川芎嗪（50,100,200 mg·kg^-1）组大鼠P-PI3K/PI3K,P-AKT/AKT和P-mTOR/mTOR比值下降（P<0.01）。结论：川芎嗪可通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路活化减轻内毒素诱导的急性肺损伤大鼠肺纤维化和炎症反应。