POLD3、p53在肝癌中的表达及临床意义分析

目的探讨DNA聚合酶δ3(eukaryote DNA polymeraseδ3,POLD3)、p53在肝细胞癌(以下简称"肝癌",Hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及临床意义。方法收集进行了根治性切除的HCC患者108例,并收集相应的手术切除标本。采用免疫组化EnVision法分别检测肝癌组织及癌旁组织中POLD3、p53蛋白的表达;分析POLD3、p53在肝癌组织中的表达与临床病理参数之间的关系。结果 (1)POLD3、p53在肝癌组织中的表达率均高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.001)。(2)p53在肝癌中的表达与组织学分化有关(P<0.001),与其他指标无关(P>0.05)。(3)POLD3在肝癌中的表达与组织学分化有关(P<0.05),与其他指标无关(P>0.05)。(4)POLD3和p53在肝癌组织中的表达呈正相关性(r=0.276,P=0.004)。结论 (1)POLD3异常表达促进肝细胞癌的增殖、分化。(2)p53基因突变在某种程度上是导致POLD3在肝癌组织中高表达的原因之一。     

POLD1基因在非小细胞肺癌中表达的生物信息学分析及相关性研究

目的 应用生物信息学方法探究POLD1基因在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC中的表达及临床意义。方法 应用TIMER数据库分析POLD1在NSCLC及正常肺组织中的表达差异,UALCAN数据库进一步验证并分析POLD1在不同临床亚组间的表达。利用GEPIA、TIMER数据库探索POLD1表达水平与NSCLC患者预后的关系,cBioPortal、STRING数据库研究POLD1在NSCLC中突变及蛋白相互作用,TISIDB数据库探索POLD1表达与NSCLC肿瘤免疫浸润的关系。结果 POLD1在肺腺癌及肺鳞癌组织中表达均高于正常组织。POLD1低表达的肺腺癌患者较高表达患者预后更好,POLD1与肺鳞癌患者预后无明显相关性。突变分析发现1.2%的肺腺癌患者及1.8%的肺鳞癌患者携带POLD1突变,主要为错义突变。蛋白互作分析发现POLD1可能与POLD2、POLD3、POLD4、POLE、RPA1、PCNA、MSH6、MSH2、FEN1蛋白有相互作用,功能集中于DNA复制、错配修复等。此外,POLD1与NSCLC组织中免疫细胞浸润相关。结论 P...     

余甘子中没食子酸抑制高糖诱导胰岛β细胞凋亡

目的 探究余甘子中没食子酸对高糖诱导胰岛β细胞凋亡的保护作用, 为从中药中发现治疗糖尿病的天然化合物提供一定参考依据.方法 体内实验造模:以wistar雄性大鼠作为体内研究对象, 腹腔注射50mg/kg STZ, 造模成功后口服给予25 mg/kg的没食子酸, 阳性药选用西格列汀, 给药4周后, 取血、摘取胰腺, 进行HE染色, 采用Western blot法测定高糖状态下胰腺组织中NLRP3、TXNIP蛋白表达;体外实验造模:以胰岛瘤细胞株INS-1细胞作为体外研究对象, 建立高糖诱导细胞凋亡模型, 在无糖RPMI1640完全培养基中添加25mmol/L葡萄糖培养INS-1细胞, 以没食子酸为受试样品, 将实验分为正常对照、高糖模型、没食子酸低、中、高剂量组.采用MTT法测定细胞活性, 采用QPCR法、Western blot法测定高糖状态下INS-1细胞中NLRP3、TXNIP的m RNA表达, 检测NLRP3、TXNIP蛋白表达.结果 (1) INS-1细胞在葡萄糖浓度为25 mmol/L的培养基中培养48 h后, 与对照组比较, 凋亡率升高 (P<0.01) , 表明高糖状态下细胞凋亡模型建立成功. (2) 10、5、2.5μmol/L的GA分别处理对照组和高糖模型组细胞, 对照组细胞存活率没有明显变化 (P>0.05) .体内实验中与对照组比, 高糖模型组中INS-1细胞中NLRP3、TXNIP的蛋白表达具有统计学差异 (P<0.05) ;GA处理后蛋白表达水平明显下调, 有统计学差异 (P<0.05) , 体外实验中与对照组比, 高糖模型组中INS-1细胞中NLRP3的蛋白表达有统计学差异 (P<0.01) , GA处理后蛋白表达水平明显下调 (P<0.01) ;TXNIP的蛋白表达水平上调 (P<0.05) ;GA处理后蛋白表达水平明显下调 (P<0.05) ; (3) 与对照组比, 高糖模型组中INS-1细胞中NLRP3、TXNIP m RNA表达水平均上调 (P<0.01) ;GA处理后蛋白表达水平明显下调 (P<0.01) .结论 将细胞置于添加25 mmol/L浓度葡萄糖的无糖RPMI1640完全培养基中培养48 h.GA对正常INS-1细胞增殖无影响, GA具有保护高糖状态下INS-1细胞凋亡的作用, 其机制可能与GA下调NLRP3、TXNIP的基因表达有关.     

肝癌及不同发育阶段小鼠肝组织中DNA-PKcs的表达及其对细胞增殖作用的研究

目的:研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA dependent protein kinase catalytic subunit,DNA-PKcs)在小鼠不同发育阶段肝脏组织和肿瘤组织中的表达,明确其促细胞增殖和在肿瘤发生发展中的作用及机制。方法:采用免疫组织化学方法和蛋白印迹检测小鼠不同发育阶段肝脏组织和肿瘤组织中DNA-PKcs的蛋白表达。通过干扰RNA技术沉默肝肿瘤HepG2细胞中DNA-PKcs的表达,通过细胞增殖实验和裸鼠致瘤实验观察肿瘤细胞增殖和致瘤能力的变化。蛋白印迹法检测细胞增殖相关信号通路蛋白p-GSK3β和c-myc的表达水平。结果:在发育过程中,随着细胞增殖能力降低,肝组织中DNA-PKcs表达水平下降,在成年鼠肝组织中DNA-PKcs只有微弱表达。而在肿瘤组织细胞中DNA-PKcs表达显著增高(P<0.01)。细胞生长曲线结果显示,DNA-PKcs表达抑制后,HepG2细胞增殖能力受到明显抑制(P<0.01),致瘤能力也显著降低。信号通路蛋白分析发现DNA-PKcs抑制导致GSK3β磷酸化水平和c-myc蛋白水平降低(P<0.01)。结论:DNA-PKcs表达水平与肝脏细胞的增殖能力...     

PTEN和Caspase-3在大肠癌中的表达及临床意义

目的 检测大肠癌组织中PTEN和Caspase-3的蛋白表达,了解与大肠癌临床病理的相关因素.方法 采用S-P免疫组化法,检测PTEN和Caspase-3在各组织中的表达及意义.结果 PTEN在正常大肠组织、大肠腺瘤、大肠癌组织中的表达率分别为100%、70%和51.61%;而癌旁组织的阳性表达率60.87%,与癌组织相似,两者有明显的同步表达性(P<0.01).大肠癌中PTEN蛋白的阳性表达率明显低于非癌组(P<0.05). Caspase-3在正常黏膜、大肠腺瘤及大肠癌中的阳性表达率分别为93.33%、60%、45.16%.在癌旁组织的表达率为52.17%.正常黏膜组织Caspase-3的表达高于大肠腺瘤和大肠癌(P<0.05).PTEN表达随肿瘤分化程度的降低、临床分期提高而降低(P<0.05).Caspase-3阳性表达随肿瘤分化程度的降低而降低(P<0.05).大肠癌组织中PTEN与Caspase-3的表达呈正相关(r=0.675,P<0.01).结论 PTEN、Caspase-3的表达下调与大肠癌的发生、发展有关,二者可作为判定大肠癌生物学行为和预后的临床参考指标.     

NuSAP1在胃腺癌中的表达及临床病理意义*

目的：探讨核仁纺缍体相关蛋白1(nucleolar spindle associated protein 1, NuSAP1)在人胃腺癌(gastric adenocarcinoma, GA)中的表达及与临床病理参数、患者预后的相关性。方法：应用免疫组织化学方法检测88例GA及癌旁组织中NuSAP1蛋白的表达和定位，分析NuSAP1表达与GA临床病理指标、Ki-67细胞增殖指数及与预后的相关性。结果：NuSAP1蛋白阳性信号定位于癌细胞核。88例GA组织中NuSAP1蛋白低表达43例，高表达45例，NuSAP1蛋白在GA组织中的表达显著高于癌旁组织(P＜0.001)；NuSAP1蛋白表达与GA组织分化差(P=0.005)，TNM分期高(P＜0.001)，Ki-67增殖指数(P＜0.001)呈正相关。Kaplan-Meier生存曲线显示：NuSAP1高表达组患者总生存期显著低于低表达组(P=0.001)。结论：GA组织中NuSAP1高表达可能影响GA增殖、侵袭等过程，GA患者组织中检测NuSAP1的表达可能有提示预后的价值。     

表皮生长因子受体基因突变和切除修复交叉互补蛋白1蛋白表达与肺腺癌患者临床病理特征及预后的关系

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和切除修复交叉互补蛋白1(ERCC1)蛋白表达与肺腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集2010年3月至2011年6月在南阳市第一人民医院及新乡医学院第一附属医院手术治疗的160例肺腺癌患者的肺腺癌组织标本,应用扩增阻滞突变系统在荧光定量聚合酶链反应仪上检测EGFR基因19及21外显子突变情况,同时采用免疫组织化学法检测组织中ERCC1蛋白表达,分析EGFR基因突变、ERCC1蛋白表达与肺腺癌患者临床病理特征及预后的关系。结果 EGFR基因突变在女性、无吸烟史、肿瘤直径<5 cm患者中较高(P<0.05),而与肺腺癌患者的年龄、病理分期及淋巴结转移情况无关(P>0.05);ERCC1蛋白表达与病理分期有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、是否吸烟、肿瘤直径及淋巴结转移无关(P>0.05)。EGFR基因发生突变的肺腺癌病理组织中ERCC1蛋白低表达者多,EGFR基因未发生突变的肺腺癌病理组织中ERCC1低表达较少,二者比较差异有统计学意义(χ~2=7.253,P<0.01)。EGFR突变阳性患者的无进展生存期(PFS)长于EGFR突变阴性患者(χ~2=9.567,P<0.01);ERCC1蛋白低表达患者的PFS长于ERCC1蛋白高表达患者(χ~2=10.025,P<0.01)。结论肺腺癌EGFR突变者ERCC1蛋白倾向于低表达,存在EGFR基因突变或者ERCC1蛋白低表达的患者PFS更长。     

人乳头瘤病毒16/18、Bcl-2和Survivin在宫颈癌组织中的表达

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)16/18、Bcl-2、Survivin在宫颈癌组织中的表达及意义。方法收集2010年4月至2012年7月湖北省肿瘤医院保存的宫颈癌组织标本80例、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织标本70例及正常宫颈组织标本32例,采用原位杂交法检测3种组织中HPV16/18和Survivin的表达,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2表达,并分析其表达情况与宫颈癌临床病理特征的关系。结果 Survivin mRNA在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为6.25%、45.71%和77.50%,Bcl-2蛋白在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为3.13%、40.00%和71.25%,HPV16/18 DNA在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为3.13%、51.43%和83.75%,3种组织中Survivin mRNA、Bcl-2蛋白、HPV16/18 DNA阳性表达率比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Survivin mRNA、Bcl-2蛋白及HPV16/18 DNA在CIN组织中的表达与CIN分级有相关性,Survivin mRNA、Bcl-2蛋白及HPV16/18 DNA在CINⅢ级中的阳性表达率显著高于CINⅠ、Ⅱ级(P<0.01)。Bcl-2蛋白的表达与宫颈癌组织分化程度及淋巴结转移有相关性(P<0.01),但与宫颈癌组织类型、临床分期及肿瘤生长类型无显著相关性(P>0.05)。Survivin mRNA、HPV16/18 DNA表达与宫颈癌的组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有相关性(P<0.01,P<0.05),但与宫颈癌的组织类型及肿瘤生长类型无相关性(P>0.05)。结论 HPV16/18、Bcl-2和Survivin的高表达可能与宫颈癌的发生发展有关,HPV16/18、Bcl-2和Survivin的检测有助于宫颈癌的早期诊断、手术疗效评价及预后判断。     

原发性肝细胞癌患者Galectin-3和Galectin-9的表达及其与预后的关系

目的： 探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者肿瘤组织及其瘤旁组织中半乳糖凝集素3（Galectin-3）和半乳糖凝集素9（Galectin-9）的表达及其与预后的关系,阐明Galectin-3和Galectin-9在HCC发生发展过程中的意义。方法： 采用免疫组织化学法检测197例HCC患者肿瘤组织和131例瘤旁肝组织中Galectin-3和Galectin-9的表达水平;分析2种蛋白的表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果：Galectin-9表达阳性率在HCC肿瘤组织和瘤旁组织中差异无统计学意义（P>0.05）,高分化肿瘤组织中Galectin-9表达水平明显高于低分化肿瘤组织（P<0.05）,脉管浸润者Galectin-9表达水平低于无脉管浸润者（P<0.05）;Galectin-9高表达患者术后生存时间显著长于低表达和阴性表达患者（P<0.05）。肿瘤组织中Galectin-3表达阳性率显著高于瘤旁组织（P<0.01）,但其表达水平与患者各临床病理特征及术后长期生存无关联。调整影响因素后多因素分析,仅丙肝感染（RR=2.86,95%CI：1.13～7.30,P=0.027）、多发肿瘤（RR=2.38,95%CI：1.39～4.07,P=0.002）、肿瘤直径>5 cm（RR=2.13,95%CI：1.21～3.76,P=0.009）和脉管浸润（RR=1.96,95%CI：1.07～3.62,P=0.030）成为影响HCC患者术后长期生存的独立影响因素。结论：Galectin-9表达水平与HCC患者肿瘤组织分化程度和脉管浸润有关联,但Galectin-9和Galectin-3表达水平与HCC患者的预后无关联。     

胃癌组织中PTEN、caspase-3表达与临床病理特征的关系

目的:探讨PTEN、caspase-3在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的相关性。方法:用免疫组织化学Envison法检测73例胃癌及20例正常胃黏膜组织中PTEN、caspase-3的表达情况。结果:①PTEN和caspase-3在胃癌组织中表达下调,阳性表达率分别为39.7%(29/73)和21.9%(16/73)。②PTEN表达随肿瘤分化程度的降低、浸润深度加深、淋巴结转移增多、临床分期提高而降低,青年组比中老年组表达低。③caspase-3阳性表达随肿瘤分化程度的降低、临床分期提高而降低。④胃癌组织中PTEN与caspase-3的表达呈正相关(r=0.653,P<0.01)。结论:PTEN、caspase-3的表达下调与胃癌的发生、发展有关,二者可作为判定胃癌生物学行为和预后的临床参考指标。