急性应激对背、腹侧海马成年神经再生的影响

目的考察急性应激对背、腹侧海马成年神经再生的影响。方法给予C57BL/6J小鼠单次皮下注射皮质酮急性应激造模,剂量为50,100 mg·kg~(-1)。皮质酮注射1周前给予小鼠腹腔注射Brdu 50 mg·kg~(-1),分别于皮质酮注射后第1,7,21天灌注取脑,通过Brdu和DCX免疫荧光染色,观察急性应激对小鼠背、腹侧海马神经干细胞增殖(第1天)、分化(第7天)、迁移(第21天)、存活(第7天短时程存活、第21天长时程存活)的影响。结果皮质酮注射后第1天,与对照组相比,皮质酮100 mg·kg~(-1)组背侧海马Brdu阳性细胞数目显著减少(P<0.01),皮质酮50和100 mg·kg~(-1)组背侧海马非成熟神经元DCX数目显著减少(P<0.05);但与对照组相比,皮质酮50和100 mg·kg~(-1)组腹侧海马Brdu阳性细胞数目和DCX数目无显著差异。皮质酮注射后第7天,与对照组相比,皮质酮50和100 mg·kg~(-1)组背侧海马Brdu阳性细胞存活数目和DCX数目无显著差异;但与对照组相比,皮质酮50和100 mg·kg~(-1)组腹侧海马Brdu阳性细胞存活数目显著增加(P<0.05),皮质酮100 mg·kg~(-1)组腹侧海马DCX数目显著增加(P<0.01)。皮质酮注射后第21天,与对照组相比,50和100 mg·kg~(-1)皮质酮组背、腹侧海马Brdu阳性细胞存活数目以及迁移数目无显著差异。结论急性应激对背、腹侧海马成年神经再生影响不同。急性应激抑制背侧海马神经干细胞增殖,但对腹侧海马神经干细胞增殖无影响;急性应激对背侧海马神经干细胞分化和短时程存活无影响,但急性应激促进腹侧海马神经干细胞分化和短时程存活;急性应激对背、腹侧海马神经干细胞迁移能力和长时程存活均无影响。     

氯胺酮对大鼠学习记忆功能及海马神经元的影响

目的了解多次氯胺酮给药对学习记忆功能的影响及机制。方法SD大鼠30只随机分为高剂量组、低剂量组和1个对照组,高、低剂量组大鼠分别予以氯胺酮50和10 mg/kg腹腔注射给药,1次/d,连续7 d。对照组予以等量生理盐水。用水迷宫测试各组大鼠寻找隐匿台的逃避潜伏期和空间搜索能力,原位检测海马神经元凋亡情况,电子显微镜观察神经元超微结构变化。结果高剂量组逃避潜伏期显著延长(P<0.01),并且空间搜索能力明显降低(P<0.01);高剂量组海马神经元凋亡指数显著高于对照组(P<0.01);电子显微镜显示高剂量组海马神经元有明显变性。结论多次使用氯胺酮对学习记忆有损害,这种损害作用可能与海马神经元病变有关。     

LW-AFC对肿瘤坏死因子α致情绪障碍小鼠模型的作用

目的肿瘤坏死因子α(TNF-α)是精神性应激和非精神性应激(如感染、疾病)致情绪障碍的主要参与因素。本实验室前期研究表明,六味地黄汤活性成分群复方LW-AFC可以改善急性及慢性应激小鼠情绪障碍,并且降低海马和皮质TNF-α水平,提示调节TNF-α表达或功能可能是LW-AFC发挥抗应激作用的重要环节。本研究拟以TNF-α致情绪障碍小鼠为模型,观察LW-AFC的作用,为进一步研究TNF-α在LW-AFC抗应激中的作用及机制奠定基础。方法将40只BALB/c小鼠按体质量、自主活动距离随机分成5组:对照组、TNF-α处理组(ip)、LW-AFC给药组、伊那西普(TNF-α拮抗剂)处理组(ip)和伊那西普对照组(ip)(每组8只)。高架十字迷宫(EPM)实验前,LW-AFC 1.6 g·kg~(-1)连续灌胃给药14 d,伊那西普2.5 mg·kg~(-1)连续腹腔注射3 d,其他各组给予等量去离子水,EPM实验前1 h,TNF-α处理组、LW-AFC给药组和伊那西普(TNF-α拮抗剂)处理组腹腔注射TNF-α0.2 mg·kg~(-1)。结果 TNF-α处理组小鼠表现出明显焦虑样行为,表现为小鼠在封闭臂时间明显增加(P<0.01),开放臂时间明显减少(P<0.01);伊那西普对照组对EPM实验小鼠无影响。LW-AFC可以改善TNF-α致模型小鼠焦虑样行为,表现为小鼠在开放臂时间延长(P<0.01),在封闭臂时间明显减少(P<0.01);伊那西普预处理与LW-AFC预防给药结果类似,有改善小鼠焦虑样行为的作用。结论六味地黄汤活性成分群复方LW-AFC可以改善TNF-α所致小鼠焦虑样情绪,提示这可能是LW-AFC对应激小鼠具有保护作用的基础之一,为进一步作用机制研究奠定了基础。     

丙泊酚复合皮质酮对大鼠海马pCaMKⅡ表达的影响

目的 探讨丙泊酚复合皮质酮对大鼠海马神经元Ca2＋/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（calcium/calmodulin dependent kinase Ⅱ,pCaMKⅡ）表达水平及细胞超微结构的影响。方法 36只21 d龄Wistar大鼠随机分为正常对照组、丙泊酚组、丙泊酚＋皮质酮组3组,分别以生理盐10 mL·kg-1、丙泊酚100 mg·kg-1、丙泊酚100 mg·kg-1＋皮质酮10 mg·kg-1进行腹腔注射,连续用药8 d,每组随机取6只以免疫组织化学法检测大鼠海马CA1区pCaMKⅡ的表达水平,取其余大鼠的海马组织制备透射电镜超薄切片以观察海马神经元超微结构变化。结果 与正常对照组相比较,丙泊酚组和丙泊酚＋皮质酮组2组大鼠海马CA1区神经元的pCaMKⅡ表达水平明显降低（P〈0.05）;与丙泊酚组相比较,丙泊酚＋皮质酮组pCaMKⅡ的表达更低（P〈0.05）。电镜分析表明,丙泊酚组和丙泊酚＋皮质酮组2组大鼠的海马神经元及细胞器发生了不同程度的改变。结论 连续8 d使用100 mg·kg-1丙泊酚,大鼠海马CA1区神经元pCaMKⅡ的表达下调;丙泊酚复合皮质酮进一步抑制pCaMKⅡ的表达,损伤大鼠海马神经元结构。     

丙泊酚麻醉对新生期大鼠海马BDNF及Trk-B的影响

目的观察新生期大鼠丙泊酚麻醉对空间学习记忆能力发育的影响。方法 7日龄SD大鼠45只,随机平均分为3组:空白对照组,不做任何处理;丙泊酚麻醉组,腹腔注射丙泊酚25 mg.kg-1,每20 min给予首次剂量的1/2,麻醉维持2 h;中长链脂肪乳注射组,腹腔注射脂肪乳25 mg.kg-1,每隔20 min给予首次剂量的1/2。待麻醉后4 h,每组随机处死6只,免疫组化法分析海马的caspase-3表达,蛋白免疫印迹法测定BDNF和Trk-B的水平。其余同窝饲养至40 d时行Morris水迷宫测定。结果与对照组比较,丙泊酚麻醉组海马BDNF及Trk-B表达明显减少、caspase-3表达明显增加(P<0.05),脂肪乳组与对照组差异无显著性。Morris水迷宫实验中,丙泊酚组大鼠寻找隐藏平台潜伏期较对照组明显延长(P<0.05),在记忆保留实验中丙泊酚组大鼠穿越平台次数明显少于对照组(P<0.05),脂肪乳组与对照组均无明显差异。结论新生期大鼠丙泊酚麻醉可影响空间认知功能发育,该效应可能与新生期海马内神经元凋亡增加,BDNF途径抑制有关。     

Effects of gabapentin on apoptotic neurons in hippocampus of rats with status epilepticus

目的 研究加巴喷丁(GBP)对癫痫持续状态(SE)大鼠海马区神经元凋亡的影响.方法 SD大鼠48只随机分为对照组、戊四氮致痫组(PTZ组)、GBP组、GBP干预组(干预组),每组12只.戊四氮溶液60 mg·kg-1·d-1腹腔注射诱发SE.干预组致痫后给予GBP 600 mg·kg-1·d-1;GBP组仅给予GBP 600 mg·kg-1·d-1;对照组和PTZ组给予0.9%氯化钠溶液灌胃.采用头皮针状电极单极导联法观察大鼠痫性放电的脑电图.缺口末端标记法(TUNEL)检验凋亡阳性细胞.结果 TUNEL阳性细胞在PTZ组显著高于对照组(P<0.01);GBP组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);干预组表达低于PTZ组(P<0.05).结论 戊四氮致SE大鼠海马CA1和CA3区神经元TUNEL阳性细胞显著增加,GBP能显著减少TUNEL阳性细胞.     

促肾上腺皮质激素释放激素受体1拮抗剂CP154526对大鼠海马神经元凋亡的影响

目的观察促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体1拮抗剂CP154526对海马神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠海马神经元,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,然后分为4组:正常对照组(Con)、CRH刺激组(CRH)、CRH和CP154526共同刺激组(CRH+CP)、CP154526刺激组(CP)。TUNEL、流式细胞术AnnexinⅤ-PI法检测神经元凋亡率;Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3表达水平。结果 10-8mol·L-1的CRH作用于海马神经元后,细胞存活率下降(P<0.05);50 mmol·L-1的CP154526可明显提升神经元存活率(P<0.05)。与正常对照组相比,CRH刺激后神经元凋亡率增加,Bax/Bcl-2比值增高,caspase-3表达增加;加用CP154526可明显降低神经元凋亡率、Bax/Bcl-2比值及caspase-3表达水平;而单独应用CP154526对凋亡没有明显影响。结论一定浓度的CRH可诱导海马神经元细胞凋亡,其受体1拮抗剂CP154526可有效减轻细胞凋亡,发挥神经保护作用。     

金钗石斛总生物碱改善链脲佐菌素所致大鼠海马神经元损伤

目的观察金钗石斛总生物碱(DNLA)对侧脑室内注射链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠海马神经元损伤的作用。方法将50只雄性SD大鼠随机分为5组:空白对照组、空白给药组、模型组、低剂量组和高剂量组(每组n=10)。双侧侧脑室注射STZ建立大鼠海马神经元损伤模型,空白给药组、高剂量组每日1次灌胃DNLA 40 mg·kg~(-1),低剂量组每日1次灌胃DNLA 20 mg·kg~(-1),空白对照组及模型组灌胃等体积溶媒,连续给药28 d。Nissl染色观察海马神经元存活情况,Western blot检测糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、Tau蛋白、蛋白磷酸酶2A-α(PP2A-α)蛋白表达以及p-Ser9-GSK-3β、pY216-GSK-3β、pSer199-Tau、p-Ser396-Tau、p-Ser404-Tau、p-Ser422-Tau、p-Thr231-Tau水平。结果模型组较空白对照组大鼠海马CA3区存活神经元数目明显减少(P<0.01),海马p-Ser9-GSK-3β水平降低(P<0.05),pSer199-Tau、p-Ser396-Tau、p-Ser404-Tau、p-Ser422-Tau、p-Thr231-Tau水平增高(P<0.05)。高剂量组较模型组大鼠海马CA3区存活神经元数目明显增加(P<0.01),海马p-Ser9-GSK-3β水平上调及pSer199-Tau、p-Ser396-Tau、p-Ser404-Tau、p-Ser422-Tau、p-Thr231-Tau水平降低(P<0.05)。结论DNLA明显改善STZ诱导的大鼠海马神经元的损伤和丢失,并可激活GSK-3β,抑制Tau蛋白过度磷酸化。     

人参皂苷Rg1对小鼠1—甲基—4—苯基—1，2，3，6—四氢吡啶诱导的黑质神经元凋亡的保护作用

目的:探讨人参皂苷Rg1对抗1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的C57BL小鼠黑质神经元凋亡的可能机制.方法:MPTP(30 mg·kg~(-1)·d~(-1)×5 d)腹腔注射制备C57BL小鼠帕金森病模型,同时预防组分别以不同剂量人参皂苷Rg1(2.5、5.0、10.0 mg·kg~(-1)·d~(-1)×8 d)于MPTP注射前预先腹腔注射小鼠.用Nissl染色和TH组化染色观察黑质损害情况,TUNEL染色检测细胞凋亡,同时运用免疫组织化学方法检测caspase-3的活性片段以及Bcl-2、Bcl-xl、Bax、iNOS和 nNOS的表达情况.结果:人参皂苷Rg1(5.0和10.0 mg/kg)预处理能使黑质致密带Nissl阳性神经元和TH阳性神经元的脱失减少,同时降低了TUNEL阳性率,并伴有Bcl-2和Bcl-xl表达增加,Bax和iNOS表达减少以及抑制caspase-3的激活.结论:人参皂苷Rg1预处理对MPTP诱导的小鼠黑质神经元凋亡有明显的保护作用,其作用可能是通过降低iNOS和Bax蛋白表达,增加Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达以及抑制caspase-3的激活来实现的.     

淫羊藿苷对侧脑室注射链脲佐菌素所致大鼠学习记忆损伤的保护作用

目的观察淫羊藿苷(Ica)对侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)所致大鼠痴呆模型的保护作用。方法雄性SD大鼠分为假手术组、STZ模型组、Ica给药组。除假手术组外,所有大鼠双侧侧脑室注射STZ(3 mg·kg-1)模拟散发性老年性痴呆,假手术组只注射等体积的溶剂,制模前后分别给予Ica(40 mg·kg-1·d-1)灌胃3周。给药结束后采用Morris水迷宫观察大鼠行为学改变,血糖仪检测空腹血糖,收集海马组织观察乙酰胆碱酯酶(Ach E)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达情况。结果侧脑室注射STZ后Morris水迷宫结果显示大鼠找到水下平台的逃避潜伏期显著延长(P<0.05),记忆功能受损,海马组织Ach E和TGF-β1蛋白水平增高(P<0.05),而双侧侧脑室注射STZ并不影响大鼠空腹血糖值(P>0.05);给予Ica后大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),海马组织Ach E和TGF-β1蛋白高表达状态缓解(P<0.05)。结论 Ica对侧脑室注射STZ引起认知功能损伤具有保护作用,其机制可能与改善海马组织Ach E和TGF-β1蛋白的高表达相关。     

激动NMDA受体甘氨酸位点可改善皮质酮致海马长时程增强损伤

目的研究N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体甘氨酸位点与皮质酮(CORT)致长时程增强(LTP)损伤之间的关系。方法应用雄性BALB/c小鼠,采用皮下注射CORT50 mg·kg~(-1)造模,60 min后进行电生理实验。NMDA受体甘氨酸位点激动剂300 nmol/只D-丝氨酸,300 nmol/只L-丝氨酸,100 nmol/只甘氨酸(侧脑室注射)和100 mg·kg~(-1)D-氨基酸氧化酶抑制剂MPC(腹腔注射)在CORT前30 min注射,1 mg·kg~(-1)NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂L-701,324在D-丝氨酸和MPC前30 min腹腔注射。结果与正常小鼠相比,CORT可显著损伤小鼠海马的LTP(P<0.01),D-丝氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸和MPC均可显著改善CORT引起的海马LTP损伤(P<0.01),甘氨酸位点拮抗剂L-701,324可阻断D-丝氨酸和MPC对CORT致海马LTP损伤的改善作用(P<0.01)。结论激动NMDA受体甘氨酸位点可改善CORT致海马LTP损伤,提示CORT引起的LTP损伤可能与NMDA受体功能下降相关。     

转导血红素氧合酶-1蛋白减轻脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤

目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对脑缺血/再灌注损伤沙土鼠海马神经元的影响。方法构建11R(11个精氨酸残基)-HO-1蛋白,50只沙土鼠随机分为5组(n=10):脑缺血/再灌注组(C组),沙土鼠行脑缺血/再灌注损伤。脑缺血/再灌注+生理盐水组(S组)、脑缺血/再灌注+11R组(R组)、脑缺血/再灌注+5 mg·kg-111R-HO-1组(H1组)和脑缺血/再灌注+25 mg·kg-111R-HO-1组(H2组),各组沙土鼠腹腔分别注射5 mg·kg-1生理盐水、5mg·kg-111R蛋白、5 mg·kg-111R-HO-1蛋白或25 mg·kg-111R-HO-1蛋白,3 h后行脑缺血/再灌注损伤。24 h后取沙土鼠海马,电镜下观察海马组织线粒体的变化,检测海马神经元凋亡、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平。结果C组、S组和R组3组间海马神经元线粒体变性率、神经元凋亡率、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平变化无差异(P>0.05);H1组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs C组、S组和R组,P<0.01);H2组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs H1组,P<0.01)。结论 HO-1蛋白转导减轻了脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤。     

番茄红素对高脂血症模型大鼠脑血管和神经元的保护作用

目的研究番茄红素对高脂血症所致脑血管和神经元损伤的保护作用。方法 SD大鼠在饲喂高脂饮食的同时每天ig给予番茄红素5,25,45,65,85,105和125 mg·kg~(-1),同时设正常对照组、高脂模型组和氟伐他汀钠10 mg·kg~(-1)组,实验期4周。用试剂盒检测血清和脑总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)、总抗氧化能力(T-AOC)、白细胞介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)和一氧化氮(NO)水平;Western蛋白印迹法检测脑组织密封蛋白5、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和磷酸化P38蛋白(p-P38)水平;尼氏染色观察海马CA1和CA3区神经元形态变化并对其计数;高效液相色谱法检测血清番茄红素浓度。结果实验第4周末,与高脂模型组相比,番茄红素25～85 mg·kg~(-1)组血清和脑TC,TG,LDL-C,Ox-LDL,IL-1,TNF-α,VCAM-1,VEGF及脑NO,GFAP,p-P38水平降低(P<0.01),血清T-AOC,NO及脑密封蛋白5水平和脑海马区神经元数升高(P<0.01),105和125 mg·kg~(-1)组仅血清TC,TG,LDL-C及血清和脑IL-1,TNF-α水平降低(P<0.05),血清NO水平升高(P<0.01)。番茄红素干预剂量与血清番茄红素浓度呈二次曲线关系(P<0.01),其中65和85 mg·kg~(-1)组血清番茄红素浓度高于其他各组(P<0.01)。结论番茄红素主要通过影响血液中胆固醇水平以减少Ox-LDL生成,减轻炎性反应,减轻对血管内皮的损伤,维护血脑屏障通透性,间接降低星型胶质细胞活化程度,减少脑P38蛋白磷酸化及IL-1,TNF-α和NO分泌,发挥脑血管和神经元保护作用。     

基质金属蛋白酶-9表达下调在异丙酚麻醉诱发大鼠学习记忆障碍中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达下调在异丙酚麻醉诱发大鼠学习记忆障碍中的作用。方法 7 d龄SD大鼠随机分为3组(n=18):对照组(NS组)和多次异丙酚麻醉组(RP组)连续7 d分别腹腔注射生理盐水和异丙酚,单次异丙酚麻醉组(SP组)前6天连续腹腔注射生理盐水,d 7注射异丙酚。各组随机选取6只大鼠进行动脉血气和血糖监测,剩余大鼠行Morris水迷宫测试其学习记忆能力,Western bolt法检测MMP-9、BDNF、caspase-3的表达;TUNEL染色法测定海马神经元的凋亡。结果与NS组和SP组相比,RP组大鼠逃逸潜伏期明显延长,探索时间和穿越平台次数明显减少(P<0.05),海马MMP-9、m BDNF表达减弱,pro BDNF表达、pro BDNF/m BDNF比值增加(P<0.05),神经元凋亡细胞数量明显增多,pro-caspase-3表达减低,cleaved-caspase-3表达增高(P<0.05)。而SP组与NS组相比,各结果差异均无显著性(P>0.05)。结论多次注射异丙酚导致新生大鼠远期学习记忆能力下降,可能与海马MMP-9表达下调,pro BDNF、m BDNF成熟转换障碍以及海马神经元凋亡发生有关;而单次注射异丙酚对此影响不明显。     

柚皮苷改善CCL2所致大鼠学习记忆障碍及其机制

目的探究柚皮苷改善CCL2诱导大鼠学习记忆障碍及其机制。方法56只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组(CCL2)、阳性药(CCL2+memantine)组、柚皮苷低(CCL2+25 mg·kg^-1柚皮苷)、中(CCL2+50 mg·kg^-1柚皮苷)、高(CCL2+100 mg·kg^-1柚皮苷)剂量组。除空白、假手术组外,各组均通过脑部定位将CCL2注射至大鼠海马制作学习记忆障碍模型。Morris水迷宫检测各组大鼠的学习和记忆水平;HE染色观察大鼠海马CA1区神经元形态;试剂盒检测海马SOD、GSH-PX活力和MDA含量;qRT-PCR检测凋亡基因caspase-3、caspase-8、Bax、Bcl-2 mRNA的相对表达。结果与模型组相比,各柚皮苷给药组大鼠逃避潜伏期及游泳路程均明显减少,平台穿越次数增加;海马CA1区神经元排列紧密且形态良好;SOD、GSH-PX活力升高,MDA含量降低;凋亡基因caspase-8、caspase-3、Bax mRNA相对表达量减少;Bcl-2表达量增加。结论柚皮苷能明显改善CCL2所致大鼠学习记忆功能障碍,其机制与柚皮苷的抗氧化和抗凋亡效应有关。     

尼莫地平对邻苯二甲酸二丁酯所致小鼠学习记忆障碍的拮抗作用

目的探究尼莫地平(Nim)对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)所致KM小鼠学习记忆障碍的拮抗作用。方法 36只♂KM小鼠随机分成4组:对照组、50 mg·kg~(-1)DBP组、2mg·kg~(-1)Nim组及DBP+Nim组,实验周期28 d后,检测各组小鼠潜伏期,脑海马的钙调蛋白(Ca M)、钙/钙调素依赖性蛋白激酶II(Ca MKII)、蛋白激酶C(PKC)、细胞色素C(Cyt C)、caspase-3、ERK1/2、p-ERK1/2水平,并通过观察HE、Nissl染色及TUNEL检测脑海马CA1区病理学变化。结果与50 mg·kg~(-1)DBP组比较,DBP+Nim组小鼠学习记忆能力有所改善,海马组织CA1病理学损伤及凋亡程度降低,PKC、Cyt C、caspase-3水平及p-ERK1/2表达量降低,Ca M、Ca MKII水平上升,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论DBP可影响Ca2+相关蛋白、上调p-ERK1/2表达,诱导KM小鼠脑海马神经元损伤及凋亡,而Nim改善DBP所致小鼠的学习记忆障碍,可能与其可拮抗胞内Ca2+浓度增加,降低DBP暴露后小鼠脑组织p-ERK1/2及caspase-3水平有关。     

依达拉奉对1-溴丙烷诱导大鼠中枢神经系统损伤的保护作用

目的观察1-溴丙烷(BP)的中枢神经毒性,从神经炎症角度探索依达拉奉(Edv)的保护机制。方法成年雄性Wistar大鼠每天ig给予BP 800 mg·kg~(-1)制备模型,4 h后分别ip给予Edv 1,3和5 mg·kg~(-1),连续12 d。自给药第7天采用Morris水迷宫首先进行连续5 d的定位航行实验,检测大鼠的逃避潜伏期和游泳总距离;第6天进行空间探索实验,测定大鼠穿越原平台位置的次数,评价空间记忆能力。行为学实验结束后,每组随机取4只大鼠制作全脑冰冻切片,进行尼氏染色和免疫组化染色,另8只大鼠分别采用ELISA和硝酸还原酶法检测大鼠大脑前额叶皮质肿瘤坏死因子α(TNF-α)和一氧化氮(NO)含量。结果 Morris水迷宫实验结果显示,定位航行实验第2~5天BP 800 mg·kg~(-1)组大鼠的逃避潜伏期分别比正常对照组增加了60.8%,81.9%,124.0%和323.3%,游泳总距离增加47.0%,66.4%,106.0%和277.6%(P<0.05,P<0.01);空间探索实验中,BP组大鼠穿越平台次数也较正常对照组明显减少(P<0.01);病理形态学观察发现,BP组大鼠大脑前额叶皮质小胶质细胞激活明显,神经元丢失;大脑组织中NO和TNF-α含量分别比正常对照组增加147.6%(P<0.05)和18.7%(P<0.01)。给予BP同时给予不同剂量的Edv,其中Edv 5 mg·kg~(-1)组大鼠第4天和第5天的逃避潜伏期分别比BP组减少38.4%和44.3%(P<0.01),游泳总距离减少34.5%和43.3%(P<0.05,P<0.01);同时给予Edv组大鼠大脑前额叶皮质小胶质细胞活化和神经元丢失明显减轻,NO及TNF-α含量也明显降低,Edv 1,3和5 mg·kg~(-1)组NO分别降低53.8%,55.4%和59.8%,TNF-α分别降低12.2%,15.8%和22.2%(P<0.05,P<0.01)。结论 Edv可能通过抑制脑内炎症减轻BP的中枢神经毒性。     

多次氯胺酮麻醉对大鼠学习记忆的影响

目的观察多次使用氯胺酮对学习记忆的影响及剂量效应关系。方法30只SD大鼠随机分为高剂量组、低剂量组和对照组,高、低剂量组大鼠分别予以氯胺酮50 mg/kg和10 mg/kg腹腔注射麻醉,每日1次,连续7日。对照组予以等容生理盐水。用Morris水迷宫测试各组大鼠寻找隐匿台的逃避潜伏期和空间搜索能力,用电镜观察海马神经元超微结构。结果高剂量组逃避潜伏期显著延长(P<0.01),并且空间搜索能力明显降低(P<0.01),对照组与低剂量组之间有关指标无显著性差异。电镜观察显示高剂量组海马神经元有明显变性。结论高剂量氯胺酮多次麻醉对学习记忆有损害作用。     

硫酸茯苓多糖对抑郁症大鼠海马AMPA受体表达的影响

目的探讨硫酸茯苓多糖(SP)是否通过调节α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体的表达而生产抗抑郁作用。方法实验设假手术组、抑郁症模型组、SP(25,50和100 mg·kg~(-1))剂量组及SP(100 mg·kg~(-1))+GYKI 52466(3 mg·kg~(-1))剂量组,每组12只。大鼠卵巢摘除加慢性不可预知性温和应激(CUMS)法诱导抑郁症动物模型。连续灌胃和腹腔注射给药21 d。糖水消耗、强迫游泳及敞箱试验观察大鼠行为变化。尼氏染色观察大鼠海马神经元病理变化。免疫组化法观察海马脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。Western蛋白印迹法检测海马AMPA受体GluR1、磷酸化GluR1及c AMP反应元件结合蛋白(CREB)、p-CREB和BDNF蛋白表达。结果与模型组相比,SP各给药组大鼠强迫游泳不动时间明显降低而自发活动明显增加,同时糖水摄入量及糖水偏爱百分比明显升高(P<0.05,P<0.01),海马神经元损伤显著减轻,GluR1和GluR1磷酸化水平及p-CREB和BDNF表达均明显升高。但与SP(100 mg·kg~(-1))剂量组相比,SP+GYKI 52466组大鼠强迫游泳不动时间又明显增加而自发活动又明显减少,糖水摄入量及糖水偏爱百分比又明显降低,海马GluR1和p-GluR1及p-CREB和BDNF表达又明显降低(P<0.01)。结论 SP具有抗抑郁作用,其机制可能通过增强海马GluR1受体功能,进而上调海马p-CREB和BDNF蛋白表达有关。     

红景天苷对骨关节炎大鼠软组织损伤和免疫失衡的调节作用

目的探究红景天苷(salidroside,Sal)对大对骨关节炎大鼠软组织损伤和免疫失衡的调节作用。方法利用SD大鼠膝前交叉韧带切断法(anterior cruciate ligament transected,ACLT)建立骨关节炎模型,分别设置健康对照组,模型组(ACLT组),ACLT+Sal(10 mg·kg~(-1))组,ACLT+Sal(25 mg·kg~(-1))组,ACLT+Sal(50 mg·kg~(-1))组,连续腹腔注射给药2周。HE染色和番红O染色观察软骨损伤,MASOON染色观察纤维增生。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎症因子,利用蛋白质免疫印迹(Western Blot)技术检测肿瘤凋亡、HIF-1α及其下游靶基因等相关分子表达。结果与ACLT组比较,随着Sal用药剂量(10 mg·kg~(-1)组、25 mg·kg~(-1)组及50 mg·kg~(-1)组)逐渐增大,软骨细胞损伤和纤维增生逐渐减轻,细胞凋亡相关因子Caspase-3及基质金属蛋白酶-13表达水平显著下降,而细胞增殖因子Ki67表达水平则逐渐上升(~(##)P<0.01,图3),炎症因子TNF-α、IL-7和IL-23表达水平均显著下降、而IL-10则显著升高(~(##)P<0.01,图4),HIF-1α、TIMP-1和TGF-β1表达水平均逐渐上升(~(##)P<0.01,图5)。结论 Sal能够降低骨关节炎大鼠软组织损伤和炎症反应,同时上调HIF-1α、TIMP-1和TGF-β1。