人成釉细胞瘤中蛋白激酶C-α表达与端粒酶活性的关系

目的:研究蛋白激酶C-α(PKCα)在人成釉细胞瘤(AB)中的表达及与端粒酶逆转录酶(hTERT)的关系,探讨其临床生物学意义。方法:用原位杂交和免疫组化SP法分别检测了AB中hTERT mRNA及PKCα蛋白的表达。同时选取牙源性角化囊肿(OKC)16例,正常口腔黏膜7例做对比研究。结果:hTERT mRNA在AB中阳性率为94.4%(51/54),OKC中为87.5%(14/16)及1/7正常口腔黏膜有hTERT mRNA表达,组间差异有显著性(P<0.001)。伴随AB的复发与恶变hTERT的表达逐渐增高。PKCα在AB中阳性表达为85.1%(46/54),OKC中为56.2%(9/16),4/7正常口腔黏膜有PKCα阳性,组间差异有显著性(P<0.01),伴随AB的复发与恶变PKCα阳性表达也随之增高(P<0.05)。hTERT阳性表达与PKCα阳性表达之间经Kendall相关分析rk=1.000,P=0.005呈高度正相关。结论:hTERT与AB的发生发展及临床生物学行为相关,端粒酶活性的释放激活与PKCα的高表达可能正相关。     

人成釉细胞瘤中端粒酶活性与细胞周期素A的表达

目的　研究端粒酶hTERT基因在人成釉细胞瘤 (ameloblastoma,AB)中的表达及其与细胞周期素A (cyclinA)和相关因子 p53蛋白、增殖细胞核抗原 (proliferationcellnuclearantigen ,PCNA)的关系 ,探讨其临床生物学意义。方法　用免疫组化 (SP法 )和原位杂交技术分别检测了AB中细胞周期素A、p53蛋白和PCNA ,hTERTmRNA的表达 ,同时以正常口腔粘膜和牙源性角化囊肿(odontogenickeratocyst,OKC)为对照。 结果　在正常口腔粘膜中只有 1例hTERT阳性 (1 / 7) ,cyclinA、p53蛋白、PCNA三者之间表达有着相似共性。OKC中表达在基底或副基底层细胞核中 ,有1 4例hTERT阳性 (1 4 / 1 6) ,4例cyclinA阳性 (4/ 32 )、1 1例p53蛋白阳性 (1 1 / 2 5) ,5例PCNA阳性(5/ 9)。hTERTmRNA在AB中表达率为 94 4% (51 / 54) ,cyclinA为 66 7% (40 / 60 ) ,p53蛋白为85 7% (42 / 4 9) ,PCNA为 78 1 % (2 5/ 32 ) ,hTERT与cyclinA、p53蛋白、PCNA之间经Kendall相关分析 ,rs 分别为 0 91 4、0 848、0 80 4 ,P <0 0 5。结论　随着组织学分级增高 ,hTERTmRNA与cyclinA、p53蛋白、PCNA阳性率及信号强度均增高。在AB中端粒酶的活性表达与p53蛋白的蓄积有关 ,与细胞的增殖、分化有关 ,并受cyclinA调节 ,在S期中有较高表达     

扭曲基因在成釉细胞瘤中的表达及其意义

目的 探讨扭曲基因(twist)在人成釉细胞瘤CAME)中的表达及其意义.方法 用免疫组化法检测40例AME标本和10例根尖囊肿标本中Twist的表达情况;用蛋白质印迹技术检测5例AME和1例根尖囊肿组织中Twist的表达情况,分析其临床病理意义.结果 Twist在AME和根尖囊肿组织中的阳性率分别为75.0%和20.0%,在AME中的表达明显高于根尖囊肿组织(P＜0.05);Twist在一般型AME中的表达水平明显高于单囊型(P＜0.05).与根尖囊肿组织相比较,Twist在AME中表达明显上调(P＜0.05),但单囊型AME与根尖囊肿相比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Twist在AME中高表达可能与AME的发生发展密切相关.     

人成釉细胞瘤中细胞周期素B1的异常表达

目的 :探讨人成釉细胞瘤 (ameloblastoma ,AB)中G2 /M期周期素B1临床生物学意义。方法 :采用免疫组化 (S P法 )对 73例AB(原发组 3 2例、复发组 3 3例、恶变组 8例 )进行了同期素B1检测 ,同时选取牙源性角化囊肿 (odontogenickeratocyst ,OKC) 19例 ,正常口腔黏膜 7例进行对比研究。结果 :cyclinB1(细胞周期蛋白B1)在正常口腔黏膜 2例中核阳性 ,7例OKC中的棘层细胞核为阳性。 46例AB核为阳性。三者相比P <0 .0 0 1。在AB中伴随复发与恶变核阳性表达增加 ,其中原发AB 13例 ,复发AB 2 5例 ,恶变AB 8例核为阳性 ,三者相比P <0 .0 5。结论 :cyclinB1与AB的发生复发及恶变的临床生物学行为相关 ,在G2 /M调控点上可能存在异常细胞周期进程。     

Survivin蛋白在人成釉细胞瘤中的表达及意义

目的:探讨survivin在成釉细胞瘤中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学S-P法检测70例成釉细胞瘤(ameloblastoma, AB)、 15例恶性AB、30例正常口腔黏膜中survivin的表达。采用SPLUS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:AB、恶性AB中survivin明显表达,恶性AB中阳性表达率最高,为100%,其次为AB(82.9%);正常口腔黏膜轻微表达,其阳性率为30%,各组间差异显著(P<0.05)。结论:AB中survivin高表达,且明显高于正常口腔黏膜。Survivin可能参与AB的发生与发展,AB的侵袭性增加和恶变与survivin的高表达相关。     

人成釉细胞瘤中端粒酶与抑癌基因p53的表达

目的探讨端粒酶hTR、hTERT基因在人成釉细胞瘤(Ameloblastoma,AB)中的表达,并与p53蛋白相比较,探讨其临床生物学意义。方法用原位杂交及免疫组化技术,检测54例AB的hTR和hTERT的表达及49例AB的p53蛋白,将二者进行分析,同时以7例口腔黏膜为对照。结果94.4%(51/54)的AB有hTR、hTERTmRNA的表达,81.2%(13/16)和87.5%(14/16)的牙源性角化囊肿(Odontogenickeratocyst,OKC)及2/7和1/7例的正常口腔黏膜分别有hTR和hTERTmRNA表达,3组相比差异有显著性(P<0.001)。hTR与hTERT在AB中表达具有相关性(rs=1.000,P<0.001)。p53蛋白在85.7%(42/49)AB、44%(11/25)OKC、33.3%(1/3)正常口腔黏膜上皮的细胞核为阳性。hTERT与p53蛋白的rs=0.754,P<0.001,hTR与p53蛋白的rs=0.536,呈正相关,P<0.001。结论hTR和hTERT在AB中的检出率高于p53蛋白,其间具有一定相关性(P<0.001),并与AB的生物学行为有关。     

成釉细胞瘤中bmp2基因突变的发现

目的：分析成釉细胞瘤组织中ｂｍｐ２成熟肽基因片段的序列,探讨ｂｍｐ２基因突变存在的可能性以明确其病理机制。方法：提取肿瘤组织中的ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ方法得到ｂｍｐ２成熟肽基因片段,克隆后进行序列测定和分析。结果：首次发现成釉细胞瘤组织中有ｂｍｐ２基因突变：ＡＡＧ→ＡＡＡ,ＧＡＧ→ＡＡＧ,并引起相应多肽的结构改变。结论：成向细胞瘤中存在ｂｍｐ２基因突变,并有可能在病理机制中起重要作用。     

E-钙粘素表达与成釉细胞瘤生物学特性的关系研究

目的探讨E-钙粘素与成釉细胞瘤复发和侵袭的关系。方法采用免疫组织化学LABC方法,检测28例成釉细胞瘤组织中E-钙粘素蛋白的表达。结果28例成釉细胞瘤中,12例E-钙粘素正常表达(42.9%);正常表达者的阳性物在肿瘤外层(周边)细胞的染色较强,内层(中央)细胞染色相对减弱;而在E-钙粘素异常表达者,肿瘤内层细胞阳性染色较强,外层细胞阳性染色较弱或缺失;异常表达病例的复发率明显高于正常表达者(P<0.01)。结论E-钙粘素异常表达与成釉细胞瘤复发密切相关,可能是成釉细胞瘤局部侵袭的机制之一。     

bcl-2和bax在成釉细胞瘤中的表达

目的:通过检测凋亡相关基因bcl-2和bax在成釉细胞瘤(am elob lastom a,AB)中的表达,探讨AB发生发展中细胞凋亡的作用及其与AB临床生物学行为的关系。方法:采取免疫组化法对75例AB(原发31例,复发37例,恶变组7例)进行BCL-2和BAX蛋白检测,正常口腔黏膜(norm al oralmucosa,NOM)和牙源性角化囊肿(odontogen ic keratocyst,OKC)做对照。同时采用原位杂交法检测了20例AB、12例OKC中的bcl-2和baxmRNA表达。结果:BCL-2蛋白阳性表达率在AB中为88.0%(66/75),OKC中为74.3%(26/35),NOM中为44.4%(4/9)(P<0.001),主要在AB外周层细胞和少数星网状层细胞中表达。BAX蛋白阳性率AB为74.7%(56/75),OKC为65.7%(23/35),NOM为77.8%(7/9)(P<0.001),BAX在AB的外周层和星网状层细胞都有强度相似的表达。伴随着AB的复发恶变BCL-2蛋白表达增强,而BAX蛋白表达则不同:复发组阳性率较原发组高,但恶变组低。BCL-2与BAX蛋白表达呈中度负相关(rκ=-0.331,P<0.001)。结论:AB中凋亡抑制蛋白表达多于凋亡促进蛋白表达,凋亡抑制在AB的发生、发展中起着重要作用。bcl-2和bax在不同组织及良、恶性AB中的表达方式及强度有差异。     

成釉细胞瘤性牙瘤1例

成釉细胞瘤性牙瘤（或称牙瘤造釉细胞瘤）是一种临床上非常罕见的颌面肿瘤。本文报道我院最近收治的成釉细胞瘤性牙瘤1例,对成釉细胞瘤性牙瘤临床表现,病理及诊疗进行探讨。     

p21WAF1、细胞周期蛋白E mRNA及p27KIP1蛋白在成釉细胞瘤中的表达

目的研究细胞周期蛋白E(cyclin E)、周期素依赖激酶抑制因子p21WAF1 mRNA和p27KIP1蛋白在人成釉细胞瘤(AB)中的表达,探讨其临床生物学意义.方法用原位杂交法分别检测了54例AB中cyclin E和 p21WAF1 mRNA,免疫组化SP法检测p27KIP1蛋白的表达.结果 cyclin E mRNA在AB浆核中有较强的表达,阳性率为66.7%(36/54),伴随AB的复发与恶变,cyclin E mRNA阳性率有所增加,原发AB、复发AB、恶性AB组间差异有统计学意义(P<0.05).牙源性角化囊肿(OKC)中cyclin E阳性率为50.0%(8/16).p21WAF1 mRNA在AB浆核中表达强度减弱且有较多的丢失,阳性率为22.6%(12/53),伴随AB复发与恶变阳性率表达下降.OKC p21WAF1阳性率为37.5%(6/16).p27KIP1蛋白在AB细胞核中大部分丢失,AB阳性率为16.7%(9/54),OKC 中p27KIP1阳性率为6.3%(1/16).AB中,cyclin E与p21WAF1 、p27KIP1均呈中度负相关(rk=-0.440, rk=-0.519, P=0.001).结论 AB的发生、浸润与细胞的增殖活性相关,且受cyclin E的高表达及p21WAF1 、 p27KIP1的低表达等多种因子共同调控.     

端粒酶hTR和hTERT在人成釉细胞瘤中的表达

目的 探讨端粒酶hTR、hTERT基因表达在人成釉细胞瘤(ameloblastoma，AB)和牙源性角化囊肿(odontognic keratocysty，OKC)中的意义，探讨其在AB、OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法 采用mRNA原位杂交方法对口腔颌骨内54例AB、16例OKC及7例口腔正常粘膜，进行了hTR、hTERT mRNA的检测。结果94．4％(51／54)AB有h1、R、hTERTmRNA的表达，81．2％(13／16)、87．5％(14／16)OKC及2／7和1／7正常口腔粘膜分别有hTR、hTERTmRNA表达，3组相比差异有显著性。hTR与hTERT在AB中表达具有相关一致性。端粒酶表达与AB不同组织学类型、病损发生部位、单房与多房无关，在AB外周细胞及星网状多边形细胞中有表达，有角化退变样细胞及颗粒样细胞缺乏表达。结论 hTR、hTERT活化在AB和OKC的发生、发展中起重要作用，有可能成为判断AB预后的可靠指标。     

基质金属蛋白酶-10在人成釉细胞瘤中的表达

目的　研究基质金属蛋白酶 - 10 (Matrixmetalloproteinase,MMP - 10 )在成釉细胞瘤 (ameloblastoma ,AB)中的表达 ,结合临床病理探讨其生物学行为。方法　用免疫组化SP法检测 37例ABMMP - 10的表达 ,同时以牙源性角化囊肿 (odontogenic ,keratocyst,OKC) 9例为对照。 结果　MMP - 10在 1例 (11.1% )OKC棘层细胞中有强阳性表达 ,基底层细胞表达较弱或丢失。在AB的外周层及星网状层细胞中强阳性表达 2 3例 (6 2 .2 % )。MMP - 10中AB与OKC相比P <0 .0 0 1。随着AB的复发阳性表达强度增加 ,表达率升高 ,原发AB ,7例阳性(4 3.8% ) ,复发AB ,16例阳性 (76 .2 % ) ,原发与复发AB相比 P <0 .0 5。MMP - 10的表达与患者的年龄、性别、部位、病理分型无关 (P >0 .0 5 )。结论　MMP - 10的高表达与AB的临床生物学行为相关 ,可能为该肿瘤侵袭性生长的因素之一。     

miR-200a在成釉细胞瘤中的表达及意义

目的：研究miR-200a的表达与人成釉细胞瘤之间的相关性。方法：应用RNAhybrid和miRanda软件预测β-catenin基因可能的靶向miRNA;选择30例人成釉细胞瘤标本和5例正常牙胚标本,应用实时荧光定量PCR方法检测标本中miR-200a的表达情况。结果：RNAhybrid和miRanda软件分别在β-catenin mRNA第68～96碱基和第69～94碱基位置预测到一个miR-200a结合位点。与正常牙胚组织标本相比,miR-200a在人成釉细胞瘤组织标本中的表达存在明显的下调,差异显著（P〈0.05）。结论：miR-200a的表达改变与人成釉细胞瘤相关,miR-200a可能为β-catenin的靶基因之一。     

同源盒基因HOXC 13在成釉细胞瘤中的表达

目的研究HOXC13 mRNA在成釉细胞瘤（ameloblastoma，AB）中的表达，探讨其发生的意义。方法采用原位杂交法检测47例AB（原发AB 29例，复发AB 14例，恶变AB 4例），同时选取骨纤维异样增殖症2例，牙源性角化囊性瘤（keratocystic odontogenic tumor，KCOT）10例，正常口腔黏膜上皮7例作对照。结果HOXC13 mRNA AB中阳性率为97．9％（46／47），10例KCOT中7例为HOXC13 mRNA阳性表达，但在7例正常口腔黏膜细胞中仅3例为HOXC13 mRNA阳性表达，AB、KCOT、正常黏膜三组间差异有统计学意义（χ^2=21．665，P=0．001），但角化及颗粒样变退化细胞却为阴性。在部分AB间质成纤维细胞质中也有阳性表达，2例骨纤维异常增殖症纤维也为阳性。结论在AB中存在HOXC13的高表达；HOXC13 mRNA在AB上皮中的表达有异质性，该基因可促进上皮的增殖，其丢失可导致上皮细胞的角化和退变。     

骨形成蛋白及其mRNA在成釉细胞瘤中的表达

目的：检测成釉细胞瘤中的ＢＭＰ的表达,探讨成釉细胞瘤的发生及病理机理。方法：采用免疫组化和原位杂交的方法,检测２４例成釉细胞瘤标本中ＢＭＰ蛋白和ＢＭＰ－２、－４ｍＲＮＡ表达。结果：成釉细胞瘤中的柱状上皮层和星网状细胞层中均有ＢＭＰ－２、－４ｍＲＮＡ和ＢＭＰ蛋白的表达,ＢＭＰ－２、－４ｍＲＮＡ的杂交信号强度在柱状上皮层小于星网状细胞。结论：ＢＭＰ的表达为探讨成釉细胞瘤的来源提供了分子基础;ＢＭＰ可能参与了肿瘤病理机理及生物学行为的形成。     

基质金属蛋白酶-2活性与成釉细胞瘤侵袭力的关系

目的：探讨基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）活性与成釉细胞瘤体内、外侵袭力的关系。方法：通过MMP-2活性抑制剂R031—9790降低MMP-2活性进行干预处理，采用成釉细胞瘤细胞原代培养、瘤组织块裸鼠肾包膜下移植、MTT、Western印迹、体外侵袭试验、组织学和免疫组织化学等方法，观察MMP-2活性与成釉细胞瘤体内、外侵袭的关系。采用SPSS10．0统计软件包对上述数据进行χ^2检验和单因素方差分析。结果：R031-9790各处理组和对照组的生长曲线无显著差异（P〉0．05）。R031-9790对成釉细胞瘤细胞的体内、外侵袭均有显著的抑制作用（P〈0．01）。并可增加Ⅳ型胶原在瘤组织的阳性表达，减少E-钙黏素在瘤组织的异常表达，同时在体内、外均不影响成釉细胞瘤细胞MMP-2的表达。结论：MMP-2活性与成釉细胞瘤的侵袭直接相关；R031-9790可通过降低MMP-2活性而抑制成釉细胞瘤的侵袭；活性MMP-2可能通过调节Ⅳ型胶原及E-钙黏素的表达。影响成釉细胞瘤的侵袭。