产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药表型和基因型分析

目的:分析临床分离大肠埃希菌耐药性、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率及耐药基因之间的关系。方法:用K-B法检测117株大肠埃希菌耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,用PCR法检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果:117株大肠埃希菌产ESBLs 49株,阳性率41.9%。产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率100%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率>95%,对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦耐药率<20%,未检测到亚胺培南耐药株。非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株。49株产ESBLs菌株PCR均扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,未扩增到其他基因型。DNA序列分析证实为CTX-M-14亚型、CTX-M-3亚型和广谱酶TEM-1亚型基因。结论:大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著;耐药基因以CTX-M-14亚型为主,其次为CTX-M-3亚型,尚未检出其他ESBLs基因。TEM-1亚型广谱内酰胺酶基因在大肠埃希菌中普遍存在。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型分型及耐药分析

[目的]了解大连市中心医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌耐药基因型及耐药情况。[方法]收集该院2005年11月-2006年2月连续不重复产ESBLs大肠埃希菌40株,采用美国国家临床实验室标准化委员会推荐的表型确认方法进行筛选。在此基础上,分别用针对TEM、SHV、CTX-M-Ⅰ、CTX-M-Ⅱ、CTX-M-Ⅲ、CTX-M-Ⅳ型β-内酰胺酶基因的六对特异性引物对每株细菌进行聚合酶链反应（PCR）,毛细管电泳方法检测所有产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因。应用K-B纸片扩散法检测产ESBLs大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性。[结果]毛细管电泳结果显示,40株产ESBLs大肠埃希菌中,仅携带一种基因型的分别为SHV型1株（2.50%）,CTX-M-Ⅰ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅱ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅲ型2株（5.00%）,CTX-M-Ⅳ型4株（10.00%）。有18株（46.15%）同时携带两种或两种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型共同存在;药物敏感试验结果显示,产ESBLs大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素均表现出较高的耐药性,对碳青霉烯类药物（亚胺培南和美洛培南）的耐药率最低。[结论]该院产ESBLs大肠埃希菌近期流行的主要基因型别为CTX-M型,而且多基因携带情况常见;碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型分析

目的 了解我院临床分离大肠埃希茼产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率和基因型分布情况.方法 确证试验鉴别临床分离大肠埃希菌中产ESBLs株,PCR扩增CTX-M耐药基因,PCR.RFLP和DNA测序确定CTX-M基因型.结果 确证实验证明,88株大肠埃希菌中有57株ESBLs阳性,其中54株CTX-M基因扩增阳性.PCR-RFLP分析发现,10株携带CTX-M-1组基因,39株携带CTX-M-9组基因,另外5株同时携带CTX-M-1和CTX-M-9组基因.测序证实7株CTX-M-9组扩增产物均为CTX-M-14型,3株CTX-M-1组扩增产物均为CTX-M-3型.结论 大肠埃希菌中产CTX-M型ESBLs的检出率较高,其基因型以CTX-M-14和CTX-M-3型为主.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌耐药性及基因型检测

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠埃希菌的分子流行病学及对常用抗菌药物的耐药情况.方法 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的初筛试验采用纸片法,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其ESBLs基因片段;用K-B琼脂扩散法进行菌株的药敏试验.结果 124株大肠埃希菌中共检出54株产ESBLs (43.5%).在耐药性检测中,其对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的耐药率分别为3.7%、0.0%和5.6%,PCR扩增基因型阳性结果为TEM型23株、SHV型13株、CTX-M型41株、OXA型8株,其基因型以CTX-M型为主.结论 本院大肠埃希菌产ESBLs率显著升高,应引起重视;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带两种或两种以上耐药基因;其治疗首选药物建议使用亚胺培南、头孢哌酮/ 舒巴坦和哌拉西林/ 他唑巴坦.     

深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型

目的分析深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法对50株产ESBLs大肠埃希菌分别用TEM、SHV、CTX-M和OXA-1群基因引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果 92%菌株检出CTX-M型ESBLs,测序结果显示,以CTX-M-14型ESBLs为主,其次为CTX-M-55型。结论 CTX-M-14型和CTX-M-55型是深圳地区大肠埃希菌ESBLs的主要基因型。     

2009~2010年大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性及产ESBLs菌株的分析

目的：了解2009~2010年新疆维吾尔自治区人民医院临床分离的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药性变化,为临床合理用药提供依据。方法：采用全自动微生物分析仪VITEK32、2Compact进行细菌鉴定,采用VITEK-GNS药敏试验卡及Kirby-Bauer法。使用WHONET 5.4软件对数据进行统计分析。结果：2009年大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中产ESBLs株分别为64.8％（728/1123）,48.5％（351/724）,产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为0,检出对美罗培南、亚胺培南耐药的产ESBLs的大肠埃希菌,对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株（P＜0.05）。2010年大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中产ESBLs株分别为62.2％（699/1124）、53.2％（336/631）,2种菌产ESBLs株对测试的抗菌药物的耐药率均高于非产ESBLs株。检出对美罗培南、亚胺培南耐药的产ESBLs肺炎克雷伯菌,检出对美罗培南耐药的大肠埃希菌。结论：产ESBLs菌株在临床的检出率越来越高,耐药率明显高于非产ESBLs株,且呈多药耐药性,给临床诊治带来极大困难;加强产ESBLs菌株的监测及耐药性分析,指导临床合理应用抗菌药物,对控制产ESBLs菌株的播散和流行具有重要意义。     

杭州市产超广谱β-内酰胺酶菌株耐药性和基因型分布研究

目的了解杭州市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ES-BLs基因型分布.方法采用浓度梯度法(Etest)测定分离自杭州市五家医院的51株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对12种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),通过聚合酶链反应(PCR)法及克隆测序分析其所产生的ESBLs基因型.结果 51株菌株对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮舒巴坦、头孢他啶和哌拉西林/三唑巴坦的敏感率为60.00%～80.00%,而对其它抗菌药物敏感率较低,对头孢噻肟的敏感率仅为5.88%.51株菌株有47株产CTX-M型ESBLs,其中CTX-M-14最多见,其次为CTX-M-3、CTX-M-24、CTX-M-22.结论杭州市产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性严重,ESBLs基因型以CTX-M型为主.     

ICU产ESBLs大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的了解医院重症监护病房(ICU)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括TEM、CTX-M-1群、DHA、SHV、oprD2、GES、OXA和VIM。结果 51株产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药,对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的耐药率分别为2.0%、8.0%和11.8%,其余14种抗生素的耐药率为54.9%~100.0%。51株产ESBLs大肠埃希菌共检出TEM、CTX-M-1群、SHV和oprD2等4种β-内酰胺酶基因,其阳性率分别为76.50%、37.3%、5.9%和31.4%。结论 ICU分离的产ESBLs大肠埃希菌多重耐药严重,携带的β-内酰胺酶基因以TEM为主。     

多重PCR检测临床产ESBLs大肠埃希菌的耐药基因型研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性、产ESBLs的阳性率及耐药基因之间的关系。方法采用Kirby-Bauer(K-B)琼脂扩散法检测120株临床分离的大肠埃希菌对18种抗生素的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,运用多重PCR技术检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果120株大肠埃希菌产ESBLs的有51株,阳性率为42.5%。120株大肠埃希菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的大肠埃希菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢类抗菌药物的耐药率高达100%;51株产ESBLs菌株其中46株扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,2株扩增到SHV基因,1株OXA型基因,未检出PER和VEB型。结论大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著,碳青酶烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物;产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型别为CTX-M型和TEM型。     

两种产β-内酰胺酶细菌的检测方法和耐药性的研究

目的:了解产β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌的耐药性及比较两种ESBLs检测方法的临床应用。方法:使用双纸片协同试验、纸片表型确证试验检测2005年1月至2006年5月我院分离的302株克雷伯菌属细菌和大肠埃希菌,比较两种方法的检出率及其差异;使用国际标准平皿二倍稀释法测定148株产ESBLs细菌抗生素的耐药率、中介率、敏感率。结果:两种检测产ESBLs细菌方法比较检出率无明显差异;148株产ESBLs大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌对亚胺培南、美罗培南均敏感,氨苄西林、哌拉西林、头孢唑林、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、复方新诺明、庆大霉素、头孢哌酮耐药率在60%以上。结论:纸片表型确证试验和双纸片协同试验是临床检出产ESBLs菌株最迅速、最简便、最经济的方法;产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌对大多数广谱β-内酰胺类抗生素高度耐药,亚胺培南、美罗培南是治疗产ESBLs大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌的最佳药物。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的:了解某医院分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性和基因型,为临床合理用药提供依据。方法:收集大肠埃希菌544株,其中161株为产ESBLs菌株。采用VITEK 2 Compact分析仪进行药敏检测,双纸片协同试验确证产ESBLs菌株,PCR法扩增耐药基因。结果:产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药率高于不产ESBLs菌株（P<0.05~P<0.01）。161株产EBSLs菌株携带CTX-M-9型基因98株、TEM型84株、CTX-M-1型62株、OXA-2型15株、OXA-10型7株、SHV型5株。CTX-M-1型和TEM+CTX-M-1型菌株对头孢他啶的耐药率分别为43.5%、59.1%明显高于CTX-M-9型和TEM+CTX-M-9型菌株15%、11.8%的耐药率（P<0.05和P<0.01）。结论:该院产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M与TEM型,产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药性高于不产ESBLs菌株。     

南京地区产超广谱β-内酰胺酶菌的流行病学调查

目的:了解南京地区产ESBLs菌基因型的流行情况。方法:用TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型ESBLs的特定引物进行扩增并对扩增产物进行测序分析确定基因型。结果:30株产ESBLs大肠埃希菌和30株产ESBLs肺炎克雷伯菌未发现TEM型、SHV型、OXA型ESBLs,51株产CTX-M型ESBLs,主要为CTX-M-3、CTX-M-14。9株未扩增到ESBLs基因型。结论:南京地区产ESBLs菌基因型主要以CTX-M型为主。     

产CTX型超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌基因分析及耐药特征

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌blaCTX-M基因分型及相应耐药特征。方法 采用双纸片法检测ESBLs, PCR检测blaCTX-M及blaCTX-M-1、-2、-8、-9、25组基因,肉汤稀释法检测抗菌药物MIC值。结果 83株大肠埃希菌中,45株ESBLs表型确证实验阳性,PCR扩增结果显示44株blaCTX-M扩增阳性,其中12株单独检测出blaCTX-M-1组,29株单独检测出blaCTX-M-9组,3株同时具有blaCTX-M-1组和blaCTX-M-9组,未检测出blaCTX-M-2、-8、-25组。所有菌株对亚胺培南皆敏感,对头孢唑林、头孢噻肟、头孢曲松皆耐药。CTX-M-1组菌株对头孢他啶、头孢吡肟的耐药率皆为91.6%(11/12),氨曲南耐药率为100%,左旋氧氟沙星、庆大霉素耐药率分别为100%和83.3%(10/12)。CTX-M-9组菌株对头孢他啶、头孢吡肟耐药率分别为44.8%(13/29)、41.4%(12/29),氨曲南耐药率为55.2%(16/29),左旋氧氟沙星耐药率为89.7%(26/29)、庆大霉素耐药率为58.6%(17/29)。CTX-M-1、-9两组菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南耐药率差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 产ESBLs大肠埃希菌基因型以blaCTX-M为主, blaCTX-M-9组在blaCTX-M基因中占优势。CTX-M-9组菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南敏感性高于CTX-M-1组。     

临床大肠埃希氏菌耐药性检测及超广谱β-内酰胺酶流行病学调查

目的了解广州地区临床大肠埃希氏菌耐药及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况。方法对临床分离鉴定的57株大肠埃希氏菌进行5大类15种抗菌药物的耐药性检测。通过表型确认试验筛选出产ESBLs菌株,采用PCR法检测15种临床重要且常见的耐药基因。结果 57株大肠埃希氏菌对15种抗菌药物产生了不同程度的耐药性。其中有23株产ESBLs,ESBLs产生率为40.4%;24株产TEM,13株产CTX-M(其中,8株产CTX-M-55、4株产CTX-M-14、1株产CTX-M-27),2株产OXA-1。结论广州地区大肠埃希氏菌耐药情况依然严峻。同时,ESBLs流行趋势发生了变化:以前以流行CTX-M-9型为主,现在以CTX-M-1型和CTX-M-9型同时流行为主要特征。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及对常用抗生素的耐药情况. 方法:用1999年NCCLS推荐的初筛试验从77株肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其基因型;用微量液体稀释法做药敏实验. 结果:将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法确证,用头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,77株肺炎克雷伯菌中共检出45株产ESBLs (58.1%);而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为27株. PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 19株、SHV型8株、CTX-M型36株、OXA型11株. 结论:近年来肺炎克雷伯菌产ESBLs率显著升高;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带多种耐药基因;亚胺培南仍为首选药物, 头孢哌酮/ 舒巴坦、哌拉西林/ 他唑巴坦为候选药物.     

超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的了解临床产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(E. coli)和肺炎克雷伯菌(K. pneumoniae)的发生率、耐药性,以便于对ESBLs进行监测和治疗。方法对102株E.coli和78株K. pneumoniae采用美国临床实验室标准委员会(NCCLS)规定的ESBLs表型筛选和确证试验确定ESBLs的发生率,并检测产ESBLs的E. coli和K. pneumoniae的耐药性。结果13.7%(14/102)的大肠埃希菌和26.9%(21/78)的肺炎克雷伯菌产ESBLs;产ESBLs菌株对亚胺培南耐药率为0%,除对阿米卡星、头孢西丁、替卡西林/克拉维酸联合酶抑制剂耐药率较低外,对三代头孢菌素、磺胺类和喹诺酮类药物均出现较高耐药。结论对产ESBLs菌株引起的感染,亚胺培南为首选。     

铜陵地区产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

目的了解本地区医院分离出的产超广谱产β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌菌株的构成比及耐药特征,为临床制定合理的抗感染治疗方案提供参考。方法2003年10月1日至2004年9月30日从本地区五家医院各类临床标本分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌作为受试菌,采用Kirby-Bauer纸片扩散法和ESBLs确认试验进行ESBLs的检测及耐药性测定。结果产ESBLs的大肠埃希菌检出率为31%,肺炎克雷伯菌为31.6%,产ESBLs的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌株较不产ESBLs的菌株对各种临床常用抗生素耐药性明显增高,并表现出多重耐药。产ESBLs的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌株对临床常用的头孢呋辛、头孢噻肟、头孢哌酮、头孢曲松、氨曲南、阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦的耐药率均超过70%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率在50%左右,对氟喹诺酮类的耐药率在41.7%～72.7%,未发现对亚胺培南的耐药株。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌如此高的检出率应引起临床上高度重视,碳青霉烯类抗生素应该作为治疗产ESBLs菌严重感染的首选药物。     

大肠埃希菌中OXA型超广谱β-内酰胺酶基因分布

目的了解郑州地区OXA型ESBLs在大肠埃希菌中基因分布状况。方法收集郑州大学第一附属医院和河南省人民医院2006年1月至2007年10月临床分离产ESBLs大肠埃希菌108株，采用聚合酶链反应（PCR）扩增OXA型ESBLs基因全长序列，采用DNA脱氧核酸测序确定基因型别。结果108株产ESBLs菌株中8株携带OXA型ESBLs基因，测序结果显示8株均为OXA-1型。结论郑州地区大肠埃希菌OXA型ESBLs以OXA-1型为主。