哮喘大鼠外周血单个核细胞CD40、CD40L表达和CD40L单克隆抗体对Th1、Th2细胞因子生成的影响

目的 研究哮喘大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)表面CD40、CD40L表速和CD40L单克隆抗体(CD40L McAb)对其细胞因子生成的影响.方法 应用流式细胞仪检测哮喘大鼠PBMCs表面CD40和CD40L表达;RT-PCR检测哮喘大鼠PBMCsCD40和CD40L mRNA表达;CD40L McAb处理哮喘大鼠PBMCs,ELISA检测细胞培养上清中IL-4、IFN-γ含量.结果 和正常大鼠相比,哮喘大鼠PBMCs CD40、CD40L表达增高(P＜0.05);哮喘大鼠PBMCs经CD40L McAb处理后,和未处理组相比,IL-4水平明显降低(P＜0.05),IL-4/IFN-γ比值明显降低(P＜0.05).结论 哮喘大鼠PBMCs存在CD10、CD40L高表达,CD40L McAb可以降低IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值.     

特发性血小板减少性紫癜患者外周血CD40/CD40L的表达及意义

目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血淋巴细胞及血小板上CD40、CD40L和血浆sCD40、sCD40L的表达及意义.方法:采用免疫荧光标记和流式细胞术检测37例ITP患者和30例健康志愿者外周血CD19+CD40+细胞和CD3+CD40L+细胞分别占淋巴细胞的比例及血小板膜表面CD40和CD40L水平,采用ELISA检测血浆sCD40和sCD40L水平.结果:与健康志愿者相比,急性ITP患者外周血CD19+CD40+细胞和CD3+CD40L+细胞均增多(P＜0.05),血浆sCD40水平显著降低(P＜0.01),sCD40L水平显著增高(P＜0.01),血小板膜表面CD40L表达增多(P＜0.05),慢性ITP患者CD3+ CD40L+细胞显著增多(P＜0.01);与治疗前比较,急性ITP患者治疗缓解后血浆sCD40水平显著增高(P＜0.01),sCD40L水平显著降低(P＜0.01),CD3+CD40L+细胞及血小板膜CD40L表达均降低.结论:ITP患者CD40/CD40L共刺激分子存在异常,可能与ITP发病密切相关,治疗缓解后CD40/CD401恢复正常.     

支气管哮喘患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞水平及Foxp3 mRNA表达的分析

目的 观察支气管哮喘(哮喘)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)水平及叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA表达的变化,探讨CD4+ CD25+ Treg在哮喘发病中的作用.方法采用流式细胞仪检测78例哮喘患者(急性发作期组30例,慢性持续期组25例,缓解期组23例)和29例健康志愿者(正常对照组)PBMCs中CD4+ CD25+ Treg的比例;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMCs中Foxp3 mRNA的表达.结果 急性发作期组和慢性持续期组PBMCs中CD4+ CD25+ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达明显低于缓解期组和正常对照组(P＜0.05);缓解期组CD4+ CD25+ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达虽亦低于正常对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05);急性发作期组CD4+ CD25+ Treg的比例及Foxp3 mRNA的表达低于慢性持续期组(P＜0.05).结论 哮喘患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+ CD25+ Treg数量减少,功能下降,可能参与哮喘的发生和发展.     

低浓度二氧化硫对哮喘大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞及转录因子Foxp3表达的影响

目的探讨低浓度二氧化硫(sulfurdioxide,SO2)暴露对哮喘大鼠CD4+CD 25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)数量及转录因子Foxp3表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、低浓度SO2暴露组、哮喘组和低浓度SO2暴露哮喘组,每组15只;哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组吸入雾化生理盐水,低浓度SO2暴露组采用吸入低浓度SO2,低浓度SO2暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度SO2吸入。采用流式细胞术检测外周血CD4+CD 25+Treg细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血和肺组织γ-干扰素(interferon-γ,γ-INF)以及白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)含量;Western blot检测肺组织Foxp3蛋白表达水平。结果哮喘组大鼠CD4+CD 25+Treg为(5.78±1.26)%,低于正常对照组的(9.63±1.37)%;低浓度SO2暴露哮喘组为(3.15±0.82)%,低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P均<0.01)。哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[(23.51±4.86)ng/L和(0.93±0.16)ng/L]高于正常对照组[(11.24±2.53)ng/L和(0.29±0.06)ng/L],差异有统计学意义(P均<0.01);低浓度SO2暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[(36.73±7.46)ng/L和(1.67±0.41)ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P均<0.01);哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[(63.82±21.78)ng/L和(0.49±0.15)ng/L]低于正常对照组[(156.98±60.23)ng/L和(1.58±0.18)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01),低浓度SO2暴露哮喘组γ-INF含量[(10.02±1.68)ng/L和(0.43±0.12)ng/L]低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P<0.01)。哮喘组Foxp3蛋白表达为(8.23±0.56),低于正常对照组的(11.87±0.65)(P<0.05);低浓度SO2暴露哮喘组为(6.05±0.36),低于正常对照组和哮喘组(P<0.05)。结论低浓度SO2暴露可能通过下调CD4+CD 25+Treg数量并抑制Foxp3蛋白表达,进一步加重哮喘的Th1/Th2比例失衡,可能是诱发哮喘发病的因素。     

足月妊娠分娩发动前后孕妇蜕膜中NK细胞及CD4~+CD25~+T细胞的变化

目的:检测足月妊娠分娩发动前后孕妇蜕膜中NK细胞及CD4+CD25+T细胞的变化情况,探讨它们与分娩发动的关系。方法:对40例健康足月孕妇按临产情况分为足月未临产组和足月临产组,收集孕妇蜕膜组织,密度梯度离心法分离出淋巴细胞,流式细胞术(FCM)检测两组中NK细胞、CD4+CD25+T细胞含量。结果:足月临产组的蜕膜NK细胞占蜕膜淋巴细胞的(36.3±6.5)%,足月未临产组蜕膜NK细胞占蜕膜淋巴细胞的(33.9±3.0)%,差异无统计学意义;足月临产组的蜕膜NK细胞表面CDl6的表达明显高于足月未临产组,两者分别为(8.9±1.1)%与(4.6±0.9)%(P<0.05);足月临产组的蜕膜CD4+CD25+T细胞含量明显小于足月未临产组CD4+CD25+T细胞的含量,两者分别为(4.5±0.7)%与(9.1±1.0)%(P<0.05)。结论:足月妊娠分娩发动前、后蜕膜中的NK细胞及CD4+CD25+T细胞发生变化,推测NK细胞与CD4+CD25+T细胞可能参与了分娩发动。     

慢性充血性心力衰竭CD40L的表达及意义

目的通过观察慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血小板CD40L的表达情况来探讨两者之间的关系。方法通过流式细胞术检测CHF患者30例及健康对照者32例外周血血小板CD40L的水平。结果CHF组血小板CD40L水平(15.26±5.62)明显高于对照组血小板CD40L水平(8.78±4.13),差异有统计学意义(P<0.01)。结论本研究结果显示CHF患者血小板CD40L表达较健康对照组有明显增高,说明炎症与CHF的发生和发展有关,而CD40L作为各种免疫和炎症调节的信号通路,在其中可能扮演了重要角色。     

臭氧暴露对哮喘大鼠CD4+CD25highFoxp3+调节性T淋巴细胞数量和Foxp3mRNA表达的影响

目的 探讨低浓度臭氧暴露对支气哮喘大鼠CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量及转录因子Foxp3mRNA表达的影响.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、臭氧暴露组、哮喘组和臭氧暴露哮喘组,每组15只.哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组雾化生理盐水,臭氧暴露组予吸入低浓度臭氧,臭氧暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度臭氧吸入.流式细胞仪检测外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血和肺组织γ-干扰素(γ-INF)以及白细胞介素-4(IL-4)含量;聚合酶链反应(PCR)检测肺组织Foxp3mRNA表达水平.结果 哮喘组大鼠CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞占CD4T细胞的比例为6.12％±1.03％,臭氧暴露组为5.87％±1.26％,均低于正常对照组(9.85％±1.34％);臭氧暴露哮喘组CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞占CD4T细胞的比例为(3.31％±0.85％),低于正常对照组和哮喘组,差异均有统计学意义(P＜0.01).哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[血浆:(21.83±5.12) ng/L,肺组织:(0.89±0.13) ng/L]高于正常对照组[血浆:(10.58±2.73) ng/L),肺组织:(0.32±0.11) ng/L],差异有统计学意义(P＜0.01);臭氧暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[血浆:(35.47±7.24) ng/L,肺组织:(1.58±0.43) ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P＜0.01).哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[血浆:(61.78±23.45) ng/L,肺组织:(0.69±0.21) ng/L]低于正常对照组[血浆:(158.89±60.23) ng/L,肺组织:(1.86±0.29) ng/L],差异有统计学意义(P＜0.01),臭氧暴露哮喘组γ-INF含量[血浆:(10.28±2.63) ng/L,肺组织:(0.46±0.12) ng/L低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P＜0.01).臭氧暴露哮喘组和哮喘组Foxp3mRNA表达低于正常对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 低浓度臭氧暴露可能通过下调CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量并抑制Foxp3mRNA表达,加重哮喘大鼠体内Th1/Th2比例失衡,提示臭氧暴露可能是诱发哮喘发病的因素之一.     

地塞米松对哮喘大鼠气道炎症及CD4+ CD25+ 调节性T细胞的影响

目的 观察地塞米松对支气管哮喘(哮喘)大鼠气道炎症和CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Tr)的影响,探讨地塞米松治疗哮喘的机制.方法 30只Wistar大鼠随机分成正常对照组,哮喘组,地塞米松组.计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,应用HE染色行肺组织病理学检查,流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+ CD25+ Tr的比例.结果 地塞米松组BALF细胞总数及淋巴细胞(Lym)、中性粒细胞(Neu)和嗜酸性粒细胞(Eos)百分率较哮喘组明显减少(P＜0.05,P＜0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).病理组织学显示:地塞米松组较哮喘组肺组织炎性细胞浸润明显减少.哮喘组PBMCs中CD4+ CD25+ Tr比例较正常对照组明显减少(P＜0.05),地塞米松组CD4+ CD25+ Tr比例较哮喘组明显增加(P＜0.05).结论 地塞米松可减轻哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与促进CD4+ CD25+ Tr产生有关.     

CD40和Id4在子宫内膜癌的表达及意义

目的探讨CD40和Id4在子宫内膜癌的表达差异及意义。方法应用免疫组化技术,选取107例子宫内膜癌、50例正常子宫内膜及60例子宫内膜不典型增生,检测CD40和Id4在上述组织中的表达差异。结果 CD40在107例子宫内膜癌中的阳性表达率为68.2%,主要以阳性或强阳性表达为主,阳性表达率显著高于其它两组,差异有统计学意义(P0.05);CD40在子宫内膜癌高分化、中分化及低分化组的表达分别是29.4%、69.2%、74.5%,其阳性表达率随病理组织学分级的升高而升高,高分化组与其他两组比较,差异有统计学意义(均P0.05)。Id4在正常子宫内膜、内膜不典型增生、子宫内癌的阳性表达率呈逐渐升高趋势,子宫内腺膜癌组Id4阳性表达率与正常子宫内膜组、子宫内膜不典型组两组间分别比较,差异均有统计学意义(均P0.05);在子宫内膜癌病理分级中,Id4因子阳性表达率分别为高分化58.8%、中分化66.7%、低分化76.5%,但三组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 CD40、Id4二者的异常表达在子宫内膜癌生物学行为中可能起着重要作用,将来可为子宫内膜癌的生物免疫治疗及基因治疗研究提供新的选择。     

AIHA/Evans综合征患者外周血CD80、CD86及CD4^+CD25^+T细胞的表达及临床意义

目的探究自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia,AIHA)/Evans综合征患者外周血CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达水平及其临床意义。方法选取2014年1月-2017年12月经南阳医学高等专科学校第一附属医院诊治的AIHA/Evans综合征患者60例,以是否处于发作期为准分为发作组与缓解组,其中发作组39例,缓解组21例,另同期随机选取28名健康志愿者作为对照组,比较三组外周血的淋巴细胞共刺激因子CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达水平。结果AIHA/Evans综合征发作组CD80、CD86、CD4^+CD25^+调节性T细胞表达水平分别为(7.21±1.84)%、(6.23±4.42)%、(2.83±1.75)%,发作组CD80、CD86表达水平高于缓解组及对照组,CD4^+CD25^+调节性T细胞表达水平低于缓解组及对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05),但缓解组与对照组CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞表达水平的比较差异无统计学意义。结论AIHA/Evans综合征发作患者外周血CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达水平明显升高,CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞可能在AIHA/Evans综合征发病机制中起着重要作用。     

CD40/CD40L在感染性疾病中的作用

CD40/CD40L是一对重要的免疫协同刺激分子,能够通过诱导细胞活化,上调共刺激分子的表达,促进细胞因子的分泌等在体液免疫和细胞免疫中发挥重要的作用,近年来其在感染性疾病中的作用的研究也已起步,为我们认识感染性疾病的发病及致病机制提供了新的思路。     

CD40基因多态性与Graves病

CD40分子是一个重要的免疫细胞膜分子，属于共刺激分子。CD40／CD40L在体液免疫、细胞免疫和细胞内信号转导方面具有极为重要的作用。该文综述了CD40的分子结构与功能、基因的多态性及与Graves病的关系。     

CD40-CD40L与B细胞肿瘤治疗研究进展

CD40-CD40L配基化是B细胞活化的第二信号,此第二信号在滤泡生发中心中的暗区形成,在B细胞克隆性扩增、B细胞分化成生发中心细胞和记忆B细胞的生成中起重要作用。CD40的持续表达和CD40L的表达缺失可能与B细胞肿瘤的发生以及肿瘤的免疫逃逸相关。     

脂必泰对高脂血症患者CD40/sCD40L的调节作用

目的 探讨脂必泰对高脂血症患者CD40/sCD40L水平的影响.方法 66例原发性高脂血症患者应用脂必泰治疗8周,分别测定治疗前（0周）、治疗4周和8周后CD40和sCD40L的浓度进行对比,同时入选44例健康者作为正常对照组.结果 高脂血症组与正常对照组相比CD40/sCD40L治疗前表达明显上调,而应用脂必泰治疗4周后sCD40L即有显著下降（P〈0.05）;CD40治疗后亦有下降,但未达到统计学意义.结论 高脂血症刺激细胞CD40/sCD40L表达显著增加,脂必泰具有抑制CD40/sCD40L信号转导通路的作用,这可能是其抗炎、抗动脉硬化的重要机制.     

肾病综合征患儿CD44表达及其临床意义

目的探讨原发性肾病综合征(NS)患儿外周血粘附分子CD44的表达特征及临床意义。方法采用流式细胞术对28例NS患儿外周血CD44进行了检测分析,以20例正常儿童作为对照。结果NS活动期患儿CD44表达较正常组显著增高(P<0.01),其中肾炎型肾病组CD44阳性细胞数增高显著,与单纯型肾病组比较差异有统计学意义(P<0.05);NS缓解期CD44表达明显降低(P<0.05),NS患儿CD44表达与24 h尿蛋白呈明显正相关,与血清白蛋白呈负相关(r=0.596及r=-0.482,P<0.05)。结论黏附分子CD44在NS活动期外周血中表达增强,与疾病的轻重有关,提示其在肾小球疾病发展过程中起重要作用。     

大肠癌患者外周血CD_8和CD_(28)检测的临床意义

目的 探讨大肠癌患者外周血淋巴细胞表型CD_8、CD_(28)的变化及其临床意义.方法 应用CD_8、CD_(28)单克隆抗体,采用流式细胞仪技术,对50例大肠癌患者(大肠癌组)CD_8、CD_(28)进行测定,并与30例非肿瘤患者(对照组)进行比较.结果 大肠癌组CD_8的表达显著高于对照组[(32.24±8.38)%比(22.18±7.55)%](P<0.01);而CD_(28)、CD_8~+,CDf的表达低于对照组[(52.03±10.94)%比(60.60±7.98)%,12.18-I-4.28比16.38±4.94](P<0.01).大肠癌组Dukes分期D期患者CD_8~+/CD_(28)~+的表达明显低于Dukes分期B期患者(P<0.05),有淋巴结转移患者CD_(28)、CD_8~+/CD_(28)~+的表达低于无淋巴结转移患者(P<0.01),已浸润浆膜层患者CD_(28)、CD_8~+/CD_(28)~+的表达则低于未浸润浆膜层患者(P<0.01).结论 大肠癌患者CD_8、CD_(28)的表达与肿瘤的生物学行为密切相关.观察淋巴细胞表型CD_8、CD_(28)变化,对大肠癌患者的免疫状态及预后监测具有一定的参考价值.     

CD40 ligand enhances immunogenicity of vector-based vaccines in immunocompetent and CD4+ T cell deficient individuals

Impairment of host immunity, particularly CD4+ T cell deficiency, presents significant complications for vaccine immunogenicity and efficacy. CD40 ligand (CD40L or CD154), a member of the tumor necrosis factor superfamily (TNFSF), is an important co-stimulatory molecule and, through interactions with its cognate receptor CD40, plays a pivotal role in the generation of host immune responses. Exploitation of CD40L and its receptor CD40 could provide a means to enhance and potentially restore protective immune responses in CD4+ T cell deficiency. To investigate the potential adjuvanticity of CD40L, we constructed recombinant plasmid DNA and adenoviral (Ad) vaccine vectors expressing murine CD40L and the mycobacterial protein antigen 85B (Ag85B). Co-immunization of mice with CD40L and Ag85B by intranasal or intramuscular prime-boosting led to route-dependent enhancement of the magnitude of vaccine-induced circulating and lung mucosal CD4+ and CD8+ T cell responses in both normal (CD4-replete) and CD4+ T cell deficient animals, including polyfunctional T cell responses. The presence of CD40L alone was insufficient to enhance or restore CD4+ T cell responses in CD4-ablated animals; however, in partially depleted animals, co-immunization with Ag85B and CD40L was capable of eliciting enhanced T cell responses, similar to those observed in normal animals, when compared to those given vaccine antigen alone. In summary, these findings show that CD40L has the capacity to enhance the magnitude of vaccine-induced polyfunctional T cell responses in CD4+ T cell deficient mice, and warrants further study as an adjuvant for immunization against opportunistic pathogens in individuals with CD4+ T cell deficiency.     

2型糖尿病血小板-单核细胞聚集体水平及其与CD40、CD40L的关系研究

目的:观察2型糖尿病外周血的血小板-单核细胞聚集体、CD62p及其与CD40、CD40L之间关系变化,并探讨2型糖尿病微血管特异病变的发病机制和临床识别和预测的指标。方法:流式细胞术检测2型糖尿病病人血小板-单核细胞聚集体、CD62P以及CD40、CD40L。结果:有微血管病变的糖尿病组的血小板-单核细胞聚集体、CD62p、CD40/M、CD40L/P、CD40L/M均明显高于对照组;无微血管病变的糖尿病组血小板-单核细胞聚集体、CD62p、CD40L/P、CD40L/M均明显高于对照组;有微血管病变的糖尿病组的血小板-单核细胞聚集体、CD62p、CD40/M、CD40L/P、CD40L/M明显高于无微血管病变的糖尿病组。血小板-单核细胞聚集体、CD62p与CD40L/P、CD40L/M有明显的正相关性;血小板-单核细胞聚集体与CD40/M呈显著正相关性。血小板-单核细胞聚集体、CD62p、CD40L/P、CD40L/M与空腹血糖有明显的正相关性。结论:血小板-单核细胞聚集体、CD62p的测定对于糖尿病微血管病变的早期诊断具有重要的临床应用和研究价值。CD40-CD40L可能通过诱导血小板的活化,血小板-单核细胞集聚参与糖尿病微血管病变。     

CD_9及P_(170)在白血病诊治中的表达及其临床意义

目的探讨CD9及P170在白血病患者中的表达与分型、疗效、预后的关系。方法采用SAP法检测了53例白血病患者CD9及P170的表达。结果①淋系白血病(T-ALL、B-ALL及CLL)CD9表达较高,阳性率达52%,与对照组(5.5%)比较差异显著(P<0.01),其中B-ALL表达CD9(73%)高于T-ALL(28%)及CLL(33%)(P<0.05)。②髓系白血病CD9的表达率为59%,特别高表达于M3(82%)、M5(88%)及CML(67%),与对照组比较差异显著(P<0.01)。③白血病NR或复发组P170表达(83%)明显高于CR或PR组(15%)及对照组(11%)(P<0.01)。④白血病CD9及P170的表达之间无相关性(r=0.038,P>0.05)。结论CD9可作为M3及B-ALL的一个鉴别诊断指标,了解白血病P的表达对判断预后及选择化疗方案具有一定指导价值。