丹参酮ⅡA对高脂血症大鼠PPAR信号通路蛋白表达的影响及其肝脏保护机制的研究

目的:探讨丹参酮ⅡA对高脂血症大鼠过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)信号通路蛋白表达的影响及其对肝脏保护的作用机制。方法:选取SPF级雄性SD大鼠27只,按照随机数字表法将大鼠分为丹参酮组、模型组和空白组,每组9只。空白组大鼠给予普通饲料,丹参酮组和模型组大鼠均给予高脂饲料,连续喂养4周。模型制备成功后,丹参酮组按10 mg/(kg·d)的剂量腹腔注射丹参酮ⅡA磺酸钠,模型组和空白组均腹腔注射等量磷酸盐缓冲生理盐水,连续8周。检测大鼠谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平;观察大鼠肝脏组织HE染色和油红O染色结果;Western blot法检测载脂蛋白A-I (Apoa-I)、细胞色素P4504A1(CYP4A1)、过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠HDL-C、CYP4A1、Apoa-I、PPARα水平均降低(P<0.05,P<0.01),AST、ALT、LDL-C、TG、TC水平均升高(P<0.05)...     

基于PCR array技术探讨化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢信号通路相关基因mRNA表达的影响

目的采用PCR array技术探讨化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢信号通路相关基因mRNA表达的影响,以初步揭示化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢的干预作用。方法 24只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、高脂血症组、化瘀祛痰组。高脂血症组、化瘀祛痰组予高脂饲料喂饲30天后,化瘀祛痰组予化瘀祛痰中药汤剂灌胃,正常组、高脂血症组给予等体积的生理盐水灌胃。30天后,全自动生化分析仪检测各组大鼠血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,HE染色观察肝脏形态变化,油红O染色观察肝脏脂质沉积,PCR array技术检测各组大鼠肝脏脂质代谢信号通路相关基因mRNA表达。结果与正常组相比,高脂血症组血清中TC、TG、LDL-C水平显著升高(P0.01),HDL-C水平显著降低(P0.01),肝细胞形成大量脂质沉积,胞浆内多出现脂肪空泡;与高脂血症组相比,化瘀祛痰组血清中TC、TG、LDL-C水平显著降低(P0.01),HDL-C水平显著升高(P0.05),肝脏脂滴减少。PCR array显示:化瘀祛痰组发生差异改变的基因为Abca1、Apoe、cel、Cyp39a1、Cyp46a1、Cyp7a1、Hmgcr、Ldlr、snx17。结论化瘀祛痰方可能通过调控Abca1、Apoe、cel、Cyp39a1、Cyp46a1、Cyp7a1、Hmgcr、Ldlr、snx17基因,影响胆固醇代谢,发挥其对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢的干预作用。     

基于iTRAQ技术的脾虚高脂血症大鼠肝脏蛋白质组学特征分析

目的:通过i TRAQ技术分析脾虚高脂血症大鼠肝脏蛋白质组学差异,进一步探讨脾虚高脂血症的病理机制。方法:20只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组和脾虚高脂血症组,空白对照组给予普通饲料,脾虚高脂血症组通过高脂饲料结合劳倦过度加饮食不节造模。8周后检测大鼠血脂水平、肝脏形态学变化,并分离提取肝脏总蛋白,通过i TRAQ技术对脾虚高脂血症大鼠肝脏进行蛋白质组质谱检测。结果:脾虚高脂血症大鼠出现血脂代谢异常和肝脏形态学改变,并且蛋白质组结果分析得到305个上调蛋白和263个下调蛋白,共计568个差异蛋白。作者从中挑选出与脂类代谢相关的7个蛋白加以分析。结论:脾虚高脂血症时出现血脂紊乱以及肝脏形态学发生变化可能与7-脱氢胆固醇还原酶和固醇载体蛋白2上调和载脂蛋白AI、载脂蛋白AⅡ和载脂蛋白AV下调有关,与一些糖类代谢相关蛋白也有关。     

吴茱萸经不同比例甘草炮制后肝毒性变化与对CYP450酶调控的相关性分析

目的 通过分析吴茱萸经不同比例甘草炮制后致小鼠肝毒性的差异与肝脏细胞色素P450(CYP450)酶蛋白和mRNA表达变化间的联系,探寻甘草炮制减轻吴茱萸肝毒性的作用靶点,阐释吴茱萸甘草炮制的原理及科学内涵。方法 参照《中国药典》2020版中制吴茱萸的炮制方法制备吴茱萸不同比例甘草炮制品;80只雄性小鼠随机分8组,分别为空白组、对乙酰氨基酚组、吴茱萸生品组、无甘草炮制品组和甘草炮制品(100∶3、100∶6、100∶12、100∶24)组,吴茱萸的给药剂量为30 g·kg^-1;采用酶联免疫法检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)和白蛋白(ALB)水平;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织Cyp1a2、Cyp2c29、Cyp2d22、Cyp2e1、Cyp3a11蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织Cyp1a2、Cyp2c29、Cyp2d22、Cyp2e1、Cyp3a11 mRNA表达;采用两变量回归分析法对AST和ALT水平与CYP450酶蛋白及m...     

丹参酮ⅡA调控PI3K/Akt/mTOR通路对高脂血症大鼠肝脏自噬的影响

目的:基于PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路探讨丹参酮Ⅱ改善高脂血症大鼠肝脏脂质沉积的作用机制。方法:30只SPF级,健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组。正常组每日给予普通大鼠饲料喂饲;模型组、治疗组予高脂饲料喂饲。造模4周后,治疗组予丹参酮ⅡA磺酸钠10 mg/(kg·d)腹腔注射;正常组、模型组予等体积生理盐水腹腔注射。用药8周后,全自动生化分析仪检测大鼠血脂情况,HE、油红O染色观察肝脏组织形态学变化,Western blot技术检测PI3K、p-Akt、p-mTOR及Beclin1蛋白表达。Real time-PCR技术检测Beclin1 mRNA水平。结果:与正常相比,模型组TG、TC和LDL-C水平升高(P<0.05或P<0.01),HDL-C水平降低(P<0.01);与模型组相比,治疗组TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均无明显改变(P>0.05)。形态学结果显示,与模型组相比,治疗组大鼠肝脏脂肪空泡与脂质沉积减少。Western blot结果显示,与正常组相比,模型组PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白水平上调,Beclin1蛋白表达水平下调(P<0.01);与模型组相比,治疗组pAkt、p-mTOR蛋白表达水平下调,Beclin1蛋白表达水平上调(P<0.01),PI3K蛋白表达水平呈下调趋势。Real time-PCR结果显示:与正常组相比,模型组Beclin1 mRNA水平下调(P<0.01);与模型组相比,治疗组Beclin1mRNA水平上调(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA可能通过调控PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路,增强高脂血症大鼠肝脏自噬水平,减少肝脏脂质沉积。     

川陈皮素对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏脂代谢相关因子蛋白及mRNA表达的影响

目的:分析川陈皮素对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏脂代谢相关因子蛋白及m RNA表达的影响,以探讨川陈皮素对非酒精性脂肪性肝病大鼠的保护作用及可能机制。方法:72只SD大鼠适应性喂养2周后,按照随机数字表法分为正常组、模型组、水飞蓟素组以及川陈皮素低、中、高剂量组。采用高脂饲料喂养8周成功复制非酒精性脂肪性肝病大鼠模型后给予相应药物治疗6周,检测大鼠肝脏病理学、肝功能、血脂、氧化和抗氧化指标,同时采用Western Blotting和Real-time PCR法检测肝脏脂代谢相关因子SREBP-1c、CHREBP、ACC、SCD1、PPARα、ACOX1、CPT1A和Cyp450 1A1蛋白及m RNA表达水平。结果:光镜下,正常组肝细胞大小均一,模型组可见大量脂肪空泡及炎细胞浸润;水飞蓟素组以及川陈皮素低、中、高剂量组脂肪空泡数量明显低于模型组,但仍有一定的炎细胞浸润;模型组ALT、AST、TG、TC、MDA高于正常组(P0.05),SOD和GSH低于正常组(P0.05);模型组SREBP-1c、ACC、Cyp450 1A1蛋白及m RNA表达高于正常组(P0.05),CHREBP、SCD1、PPARα、ACOX1、CPT1A蛋白及m RNA表达低于正常组(P0.05)。水飞蓟素组以及川陈皮素低、中、高剂量组ALT、AST、TG、TC、MDA低于模型组(P0.05),SOD和GSH高于模型组(P0.05);水飞蓟素组以及川陈皮素低、中、高剂量组SREBP-1c、ACC、Cyp450 1A1蛋白及m RNA表达低于模型组(P0.05),CHREBP、SCD1、PPARα、ACOX1、CPT1A蛋白及m RNA表达高于模型组(P0.05)。结论:川陈皮素对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏具有明显的保护作用,其作用机理可能是调节脂肪酸代谢,提高抗氧化能力。     

朱砂及其复方对小鼠肝脏细胞色素P450酶基因表达的影响

目的 研究朱砂及其复方朱砂安神丸对小鼠肝脏的急性毒性,并在此基础上探讨其对肝脏细胞色素P450酶基因表达的影响.方法 小鼠随机分为空白对照组,朱砂安神丸高剂量组(20 g·kg-1ig)、朱砂安神丸低剂量组(10 g·kg-1ig)和朱砂组(0.3 g·kg-1ig),各组小鼠均早晨给药1次,8 h后断头处死小鼠,分别检测肝中汞蓄积量,肝功能,肝指数,并应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)的方法检测其对细胞色素P450酶基因表达的影响.结果 与空白对照组相比,朱砂和朱砂安神丸组小鼠肝脏ALT和AST均有所增高,但差异无统计学意义;给药三组小鼠肝脏中汞蓄积量均有所增高,并呈现一定的剂量相关性,但无统计学意义;在对基因表达的影响方面,单次给药后,与空白对照组相比,朱砂组Cyp2a4、cyp2b9、Cyp 2f2、Cyp8b的基因表达下降,cyp3a11和Cyp3a44的基因表达增高:朱砂安神丸低剂量组Cyp2b9和Cyp2f2的基因表达下降;各组对其他基因的表达情况无统计学意义.结论 单次给药后,汞在小鼠肝脏中蓄积很少,对肝脏未造成明显损伤,但朱砂和朱砂安神丸对细胞色素P450酶的基因表达具有一定的诱导和抑制作用.     

丹参酮ⅡA磺酸钠对高脂血症勃起功能障碍大鼠Nrf2/HO-1通路及勃起功能的影响

目的:观察丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对高脂血症(HR)勃起功能障碍(ED)大鼠Nrf2/HO-1通路及对勃起功能的影响。方法:实验共纳入8周龄SD雄性大鼠18只,随机分为正常组、高脂血症组、高脂血症加丹参酮ⅡA磺酸钠组各6只。通过喂养高脂饲料以构建高脂血症大鼠模型,高脂血症加丹参酮ⅡA磺酸钠组每天腹腔注射10 mg/kg的丹参酮ⅡA磺酸钠溶液,高脂血症组每日腹腔注射等量生理盐水。16周后检测大鼠阴茎海绵体内压(ICP)及颈动脉压(MAP),体重及血脂; 使用Western blot分析体内调控抗氧化应激通路的关键蛋白Nrf2和HO-1的表达水平,并检测阴茎海绵体组织内氧化应激水平相关分子丙二醇(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和超氧化歧化酶(SOD)的含量。结果:治疗后,高脂血症加丹参酮ⅡA磺酸钠组和高脂血症组体重较正常组明显增加(P<0.05),高脂血症加丹参酮ⅡA磺酸钠组相比高脂血症组甘油三酯降低,高密度脂蛋白增高(P<0.05); 高脂血症加丹参酮ⅡA磺酸钠组ICP/MAP比值高于高脂血症组(P<0.05); 与正常组相比,高脂血症组大鼠阴茎海绵体组织的GSH和SOD水平下降、MDA含量上升,而丹参酮ⅡA磺酸钠组治疗后能明显提高GSH和SOD水平、降低高脂血症组大鼠MDA水平(P<0.05); Western blot结果显示高脂血症组Nrf2和HO-1的表达水平较正常组升高,而丹参酮ⅡA磺酸钠治疗后Nrf2和HO-1的表达进一步升高(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠治疗可通过上调Nrf2/HO-1并抑制氧化应激水平,进而改善高脂血症大鼠的勃起功能。     

逍遥散对雷公藤致急性肝损伤大鼠肝脏组织Bcl-2、Bax蛋白表达及Caspase-3活性的影响

目的探讨逍遥散防治雷公藤致急性肝损伤的可能作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散组,每组10只。逍遥散组大鼠造模前4天灌胃逍遥散6.75 g/(kg·d),正常组和模型组给予等体积蒸馏水,每天1次。第5天模型组和逍遥散组大鼠灌胃雷公藤水煎剂3.75 g/(kg·d)连续4天,建立大鼠急性肝损伤模型。比较各组大鼠肝脏指数及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,检测肝脏组织B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性。结果与正常组比较,模型组大鼠的肝脏指数和血清ALT、AST水平明显升高,肝脏组织Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax值明显下降,Bax蛋白表达和Caspase-3活性明显升高(P0.05或P0.01);与模型组比较,逍遥散组大鼠的肝脏指数和血清ALT、AST水平明显降低,肝脏组织Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax值明显升高,Bax蛋白表达和Caspase-3活性明显下降(P0.05或P0.01)。结论逍遥散对雷公藤致大鼠急性肝损伤的防控作用可能与其上调肝脏组织Bcl-2蛋白水平和下调Bax蛋白水平、Caspase-3活性,从而改善肝细胞凋亡有关。     

丹参酮ⅡA对大鼠细胞色素P450酶的诱导作用

目的 研究丹参酮ⅡA对大鼠细胞色素P450酶的诱导作用.方法 丹参酮ⅡA 7、20、60、180 mg/(kg·d)4个剂量组,雄性SD大鼠连续ig 7 d,取肝脏组织,应用体外"coclctail"方法 ,反转录-聚合酶链反应,免疫印迹杂交方法 分别检测CYP450酶活性、基因表达和蛋白表达的变化.结果 丹参百同ⅡA能显著诱导CYP1A2及CYP2E1的活性以及基因、蛋白表达,且呈剂量依赖性;高剂量组能增强CYP2C19的活性,但对基因、蛋白表达没有影响;对包括CYP3A1在内的其他亚型没有影响.结论 丹参酮ⅡA对大鼠多种CYP450亚型有诱导作用.     

丹参酮ⅡA对ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇流出相关基因表达的影响

目的:观察丹参酮ⅡA对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样斑块形成及对腹腔巨噬细胞胆固醇逆向转运相关基因的影响。方法:20只Apo E-/-小鼠随机分成模型组、丹参酮ⅡA组,10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。模型组、丹参酮ⅡA组给予高脂饲料喂养,空白组给予普通饲料。丹参酮ⅡA组每日灌胃丹参酮ⅡA(30mg/kg),模型组、空白对照组灌胃予等量生理盐水。检测各组小鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C水平。油红O染色法观察各组小鼠主动脉脂质沉积情况,HE染色观察小鼠主动脉结构变化及动脉粥样硬化程度,采用RT-PCR和Western blot法检测腹腔巨噬细胞ABCA1、ABCG1、CD36的m RNA和蛋白表达,流式细胞术检测巨噬细胞CD36含量。结果:模型组小鼠血清HDL-C水平显著低于空白对照组,血清TG、TC、LDL-C水平显著高于空白对照组;组织形态学显示,模型组小鼠主动脉管腔中明显可见粥样斑块形成,管壁沉积大量脂质,腹腔巨噬细胞ABCA1 m RNA和蛋白表达显著低于空白对照组,ABCG1表达变化不明显,CD36 m RNA和蛋白表达显著高于空白对照组。与模型组比较,丹参酮ⅡA组小鼠血脂水平及动脉损伤水平明显改善;丹参酮ⅡA组巨噬细胞ABCA1基因和蛋白表达显著高于模型组,CD36基因和蛋白表达显著低于模型组,两组ABCG1表达差异无统计学意义。结论:丹参酮ⅡA对Apo E-/-小鼠主动脉斑块形成具有良好的抑制的作用,其机制可能与调控ABCA1及CD36等与巨噬细胞胆固醇流出相关基因及血脂有关。     

丹参酮ⅡA对大鼠心肌缺血再灌注损伤中HMGB1、IL-1β表达及SOD水平的影响

目的探讨丹参酮ⅡA对大鼠心肌缺血再灌注损伤中HMGB1、IL-1β表达及SOD的影响。方法将清洁级成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丹参酮ⅡA高、低剂量组,在缺血前15 min分别向各组大鼠注射生理盐水或丹参酮ⅡA磺酸钠注射液。通过结扎左冠脉前降支40 min,再灌注2 h建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。采用比色法测定SOD的含量,ELISA法测定血清白介素-1β(IL-1β)水平。取心脏,TTC染色法测定心肌梗死面积,免疫组化检测HMGB1蛋白表达。结果与模型组比较,丹参酮ⅡA低剂量组和丹参酮ⅡA高剂量组SOD活性升高,血清IL-1β表达减少,心肌组织HMGB1蛋白水平明显降低,其中丹参酮ⅡA高剂量组差异更显著(P 0.05或P 0.01)。结论丹参酮ⅡA预处理可通过减少HMGB1与增强SOD活性,降低心肌梗死面积,从而实现对心肌缺血再灌注损伤的保护。     

降脂分散片对大鼠高脂血症性脂肪肝的影响

[目的]观察降脂分散片对大鼠高脂血症性脂肪肝的影响。[方法]将60只wistar大鼠按称重顺序编原始号,查随机数字表随机分为空白对照组、模型对照组、降脂分散片组(低0.22g/kg、中0.66g/kg、高1.32g/kg剂量组),脂必妥阳性药物对照组。每组10只,雌雄各半,分笼饲养,每笼5只。空白对照组、模型对照组灌胃蒸馏水,给药组灌胃相应药物;空白对照组喂饲普通饲料,其余各组喂饲高脂饲料造大鼠脂肪肝模型,给药第8周检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及肝组织中的游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。[结果]降脂分散片呈剂量依赖性:显著降低脂肪肝模型大鼠血清TC、TG、ALT、AST以及肝脏FFA、MDA含量(P<0.01),显著提高脂肪肝模型大鼠肝脏SOD、GSH-Px的活性(P<0.01)。[结论]降脂分散片对大鼠高脂血症性脂肪肝影响呈量效关系,可抑制肝脏脂肪变,减轻肝内脂质代谢紊乱对肝细胞的损伤,提高肝组织抗氧化能力。     

丹参酮ⅡA对大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡的机制研究

目的探索丹参酮ⅡA对大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡的机制。方法选取32只SD大鼠,按随机数字表法分为假手术组、模型组、丹参酮ⅡA 20 mg组、丹参酮ⅡA 40 mg组,每组8只。丹参酮ⅡA 20 mg组、丹参酮ⅡA 40 mg组分别于术前7 d开始给予20 mg/(kg·d)、40 mg/(kg·d)的丹参酮ⅡA磺酸钠注射液腹腔注射。假手术组、缺血再灌注模型组均给予等量蒸馏水腹腔注射。采用结扎左前降支法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。各组于造模后3 h剪取心脏组织,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,Western bolt法检测pAkt表达,免疫组化法检测Mfn2表达。结果与假手术组相比较,模型组心肌细胞凋亡指数、Mfn2表达显著升高,p-Akt表达显著降低(P0.05);与模型组相比较,丹参酮ⅡA 20 mg组、丹参酮ⅡA 40 mg组心肌细胞凋亡指数、Mfn2表达显著降低,p-Akt表达显著升高(P0.05),并显示出明显剂量依赖性。结论丹参酮ⅡA可有效抑制心肌缺血再灌注损伤后的心肌细胞凋亡,抑制Mfn2表达是其可能的作用机制。     

化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏自噬小体形成信号通路相关基因的影响

目的探讨化瘀祛痰方治疗高脂血症的可能作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为空白对照组、高脂血症组、化瘀祛痰组,每组10只。采用高脂饲料喂饲法制备高脂血症模型后,化瘀祛痰组予化瘀祛痰方煎剂10 ml/(kg·d),空白对照组、高脂血症组给予等体积的磷酸盐缓冲生理盐水灌胃。30天后检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量,HE及油红O染色观察肝脏形态变化及肝脏脂质沉积,PCR array筛选大鼠肝脏自噬小体形成信号通路的相关差异基因,Realtime PCR检测泛素样结合通路Atg12-Atg5通路和LC3-PE通路上的相关基因mRNA的表达水平。结果高脂血症组大鼠肝细胞脂质沉积,胞浆内见脂肪空泡;化瘀祛痰组大鼠肝脏脂滴减少。与空白对照组比较,高脂血症组血清TC、LDL-C水平显著升高、HDL-C水平显著降低(P0.01);与高脂血症组比较,化瘀祛痰组血清TC、LDL-C、HDL-C水平均显著改善(P0.05或P0.01)。PCR array结果显示,在参与自噬小体形成的基因中三组比较发生差异性改变的基因有10个。与空白对照组比较,高脂血症组Atg16l1、Atg3、Atg4c、Atg5基因mRNA表达水平均显著下降(P0.05或P0.01);与高脂血症组比较,化瘀祛痰组Atg16l1、Atg3、Atg4c基因mRNA表达水平均显著上升(P0.05)。结论化瘀祛痰方可能通过调节高脂血症大鼠肝脏自噬小体形成信号通路相关基因Atg16l1、Atg3、Atg4c、Atg5 mRNA的表达,从而改善高脂血症大鼠肝脏脂质损伤。     

大黄素对大鼠血清肝功能、肝脏转运蛋白及代谢酶UGT1A1表达的影响

目的研究长期灌胃给予大黄素对大鼠血清肝功能、肝脏转运蛋白及代谢酶UGT1A1表达的影响,探讨大黄素肝毒性作用机制。方法将大鼠随机分为空白组、大黄素低剂量组(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量组(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))及高剂量组(80 mg·kg~(-1)·d~(-1)),灌胃30 d后,检测大鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)水平。采用实时荧光定量RT-PCR测定大鼠肝脏中转运蛋白P-gp、Mrp2、Mrp3、Oatp1、Oatp2、Bsep、Ntcp及代谢酶UGT1A1的mRNA表达,以Western blot方法测定大鼠肝脏中P-gp、Mrp3、Ntcp及UGT1A1的蛋白表达。结果中剂量组及高剂量组大鼠血清ALP、TBIL、DBIL、TBA明显升高(P0.05或P0.01),肝脏P-gp、Mrp3 mRNA及蛋白表达均显著上调(P0.01);而肝脏中Ntcp及UGT1A1 mRNA及蛋白表达显著下调(P0.05或P0.01)。结论长期给予较高剂量的大黄素有肝脏毒性的风险。大黄素致肝毒性可能与肝脏中P-gp、Mrp3表达的上调、Ntcp及UGT1A1表达的下调有关。     

一种新型小动物脾虚高脂血症模型的建立

目的探索脾虚高脂血症实验动物模型的构建方法。方法 60只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、高脂血症组、脾虚高脂血症组。空白对照组予普通颗粒饲料喂饲,高脂血症组予高脂饲料喂饲,脾虚高脂血症组采用饥饱失常加运动控制及结合高脂饲料喂饲造模。4周后采用一般体征评分标准对大鼠进行评价,间苯三酚法测定尿D-木糖排泄率,全自动生化分析仪检测血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血清淀粉酶(AMY)水平,HE染色观察肝脏形态变化,油红O染色观察肝脏脂质沉积,电镜观察大鼠肝脏超微结构变化。结果与空白对照组相比,高脂血症组及脾虚高脂血症组在一般状态、毛发体表、肛周和总分均得分较高(均P0.01);血清TC、LDL-C水平显著升高(均P0.01),HDL-C水平显著降低(P0.05);肝细胞形成大量脂质沉积,核周间隙增大,胞质内线粒体嵴减少,粗面内质网明显扩张。与高脂血症组相比,脾虚高脂血症大鼠在肛周和总分方面均明显升高(均P0.01);血清AMY和尿D-木糖排泄率显著降低(均P0.01)。结论饥饱失常加运动控制及结合高脂饲料喂饲造模,可以构建大鼠脾虚高脂血症动物模型。     

血人参乙酸乙酯部位对APAP诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究血人参乙酸乙酯部位对对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将雄性KM小鼠随机分为正常对照组、模型组、双环醇组、血人参乙酸乙酯部位低、高剂量组,每组10只,双环醇组连续灌胃给予双环醇(150 mg·kg~(-1))4天。血人参乙酸乙酯部位低、高剂量组分别皮下注射血人参乙酸乙酯(200mg·kg~(-1),400 mg·kg~(-1)),连续4天,末次给药8 h后,除正常对照组以外,其余各组均腹腔注射300 mg·kg~(-1)对乙酰氨基酚水溶液建立小鼠急性肝损伤模型,禁食,16 h后,断头取血并分离血清,解剖取肝脏。测定小鼠血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),观察肝组织病理学的变化情况,Realtime RT-PCR检测肝组织Cyp1a2,Cyp2e1和Cyp3a11以及Egr-1、TNF-α基因的表达水平。结果血人参乙酸乙酯部位低、高剂量组未对正常小鼠造成明显肝损伤且能降低APAP模型小鼠血清中ALT、AST含量并明显改善肝细胞坏死病变的程度,抑制肝组织Cyp1a2,Cyp2e1和Cyp3a11以及Egr-1、TNF-α基因的表达水平。结论血人参乙酸乙酯部位未见明显肝毒性且具有较好的肝脏保护效果,可能与其抑制Cyp1a2,Cyp2e1和Cyp3a11代谢酶表达,下调Egr-1和TNF-α基因表达有关。     

丹参酮ⅡA对放射性脑损伤小鼠的神经保护作用及机制研究

目的:探讨丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)对小鼠放射性脑损伤的神经保护作用及其可能机制。方法:小鼠144只分为空白对照组、单纯照射组和各用药组。比较各组小鼠Morris水迷宫实验结果、脑组织含水量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性水平、脑细胞凋亡率、脑脊液ATP含量以及脑组织P2X7受体表达水平。结果:单纯照射组小鼠平均潜伏期时间和寻找平台的路径总长均明显长于空白对照组,20mg/kg和40mg/kg丹参酮ⅡA组明显短于单纯照射组;单纯照射组脑含水量明显高于空白对照组,20mg/kg和40mg/kg丹参酮ⅡA组明显低于单纯照射组;单纯照射组海马组织中SOD活性和MDA含量分别较空白对照组显著降低和升高,而20mg/kg和40mg/kg丹参酮ⅡA组与单纯照射组相比SOD活性升高、MDA含量则降低;单纯照射组脑细胞凋亡率和明显高于空白对照组,20mg/kg和40mg/kg丹参酮ⅡA组明显低于单纯照射组;单纯照射组脑脊液ATP含量明显高于空白对照组,20mg/kg和40mg/kg丹参酮ⅡA组明显低于单纯照射组;单纯照射组小鼠脑组织P2X7受体蛋白的表达较空白对照组升高,而20mg/kg和40mg/kg丹参酮ⅡA组较单纯照射组表达下降。结论:丹参酮ⅡA可能通过抑制ATP介导的P2X7R活化炎症介质释放和自由基累积,进而减少细胞凋亡和脑水肿,起到保护放射性脑损伤所致的神经损害作用。     

冠心康对高脂血症大鼠肝脏胆固醇稳态分子表达的动态影响

目的观察冠心康对高脂血症大鼠肝脏胆固醇稳态分子表达的动态影响。方法 96只大鼠随机取24只作正常对照组,给予普通饲料;另72只给予高胆固醇饮食,并随机分为3组:模型组,辛伐他汀组,冠心康组。于第4、8、12周处死大鼠,采用生化法检测血脂水平,实时荧光定量PCR及Western blotting方法检测低密度脂蛋白受体(Ldlr)、1型清道夫受体(Srb1)、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(Hmgcr)、固醇调节元件结合蛋白2(Srebp2)基因及蛋白水平。结果与模型组比较,冠心康治疗4周、8周、12周后血清胆固醇及低密度脂蛋白有下降趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,冠心康可显著上调高脂血症大鼠肝脏Ldlr基因及蛋白表达水平(P0.05);并于治疗4~8周和8~12周后,显著上调高脂血症大鼠肝脏Srebp2基因及蛋白表达水平(P0.05),且随着时间延长表达逐渐上升。结论冠心康可动态调节高脂血症大鼠肝脏Ldlr基因及蛋白表达从而调节血脂水平,且可能通过调节Srebp2基因及蛋白水平,调节胆固醇稳态,调节血脂水平。