人肝细胞癌及癌周肝组织酶组织化学研究——Ⅰ.γ-GT酶、G-6-P酶和ATP酶的变化

本文用γ-GT酶、G-6-P酶和ATP酶的组织化学反应研究了10例手术切除的肝细胞癌及其周围肝组织的变化。结果表明癌组织与癌周肝组织具有显著酶的差异性。肝癌γ-GT酶的活性,2例显著增强,5例轻度增强,3例无酶的活性。这种变化与癌细胞的分化程度无明显关系,因而γ-GT酶不能作为肝细胞癌可靠的阳性酶标记。其癌周肝组织γ-GT酶的活性皆有明显增强。G-6-P酶的活性在癌组织中皆显著降低至消失,而周围肝细胞的活性较强,着色甚深,形成鲜明对照,这一酶的组化反应可作为鉴别肝细胞癌与非癌肝组织的参考。ATP酶的活性在肝癌组织中减弱至消失,在周围肝组织中存在轻度活性,但二者对比不鲜明。     

原发性肝细胞癌铁蛋白免疫组织化学反应

采用过氧化物酶——抗过氧化物酶方法(PAP法),在40例肝细胞癌组织中21例(52.5％)及癌周36例(90％)肝组织中证实了铁蛋白的存在,癌周阳性率明显高于癌组织,两者比较差别有非常显著性意义(P<0.01)。结果表明,原发性肝细胞癌病人血清铁蛋白升高,可能是癌组织本身产生并分泌至血循环所致。铁蛋白可能是原发性肝细胞癌的一种标志,但不具特异性。在讨论中结合文献强调了酸性同功铁蛋白对原发性肝细胞癌的诊断价值。     

亚硒酸钠对荷Lewis肺癌小鼠癌组织和肝组织溶酶体的作用研究

用差速离心方法分离提取荷Lewis肺癌小鼠癌组织和肝组织富含溶酶体部分,并以溶酶体标志酶酸性磷酸酶(ACP)的游离酶和总酶活性比值作为观察溶酶体膜稳定性变化的指标,观察了亚硒酸钠对两种组织ACP酶活性和膜稳定性的影响。发现硒对癌组织和肝组织ACP活性的异常升高有抑制作用、稳定溶酶体膜,在癌瘤增殖前期作用明显(P<0.05)。提示这种拮抗效应与硒直接和间接的抗脂质过氧化有关。     

原发性肝细胞癌3′,5′-cPDE的组织化学研究

采用组织化学方法,对23例人的原发性肝细胞癌,7例正常肝组织及4例肝硬化,进行了3′,5′-环-磷酸腺苷磷酸二酯酶(cAMP-PDE)和3′,5′-环-磷酸鸟苷磷酸二酯酶(cGMP-PDE)的组织化学研究。结果表明:在正常肝组织内cAMP-PDE的阳性率为42.9%,cGMP.PDE阳性率为71.4%,两组间差异显著。同时还进行了cPDE与碱性磷酸酶(ALP),5′-核苷酸酶(5′-AT)、琥珀酸脱氲酶(SDH)三组酶的对比组化研究,这三组酶与cPDE之间没有明显的相关性,后者从特异性和敏感性方面均优于前者。     

山豆根碱治疗大白鼠肾性高血压对心、肝、肾影响的组织化学观察

以组织化学和组织学方法观察山豆根碱在治疗肾性高血压过程中对心、肝、肾功能的影响。结果山豆根碱组心、肝、肾酶活性、PAS反应和组织学均无明显变化,肝糖原轻度减少,三磷酸腺苷酶、琥珀酸脱氢酶活性轻度降低,碱性磷酸酶活性轻度升高,酸性磷酸酶接近正常,肝细胞轻度变性。提示山豆根碱对肝细胞功能有轻度抑制作用。     

卵巢摘除对兔体内3种血清磷酸酶活性的影响

为探讨绝经后妇女骨质疏松症与骨代谢有关酶活性变化的关系，测定了１２只７月龄新西兰兔双侧卵巢摘除前与摘除后８个月的血清碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和骨特异性碱性磷酸酶的活性。结果：术前这３种酶的活性分别为２０．０６±８．２０、１９．０６±５．４６和１４．０４±１．６７Ｕ／Ｌ；术后８个月，分别为１４．６０±４．６４、１１．０４±４．１０和４．４４±２．１０Ｕ／Ｌ，均非常显著地低于术前（Ｐ＜０．００１）。骨特异性碱性磷酸酶的下降幅度比碱性磷酸酶大，说明以它作为骨代谢指标比碱性磷酸酶更灵敏。骨特异性碱性磷酸酶术后下降幅度也大于酸性磷酸酶。提示：这些酶的活性变化可能是绝经后妇女骨质疏松症的部分生化基础。     

热休克对大鼠体内肝细胞ACP和AKP活性的影响

观察了热休克反应大鼠其肝细胞酸性磷酸酶（ Ａ Ｃ Ｐ）和碱性磷酸酶（ Ａ Ｋ Ｐ）的活性变化。组织化学方法显示 Ａ Ｃ Ｐ和 Ａ Ｋ Ｐ活性的最适酶—底物作用时间分别为４０ｍ ｉｎ 和２．５ｈ；以不同温度（４２、４４ 和４６℃）处理大鼠 ３０ｍ ｉｎ，室温恢复（２５℃）２４ｈ 时，４２℃处理组的肝细胞 Ａ Ｃ Ｐ和 Ａ Ｋ Ｐ活性最强；４６℃热休克 ３０ｍ ｉｎ 后，室温恢复１～１２０ｈ，在恢复至４８ｈ时， Ａ Ｃ Ｐ和 Ａ Ｋ Ｐ活性最强     

慢性氟中毒大鼠肝、肾酸性磷酸酶活性的显微分光光度计测量研究

本文报道应用 Univar 显微分光光度计对长期饲以50ppm 含氟水造成慢性氟中毒大鼠的肝、肾组织中的酸性磷酸酶活性进行测量研究,发现氟中毒大鼠肝、肾酸性磷酸酶的活性均较对照组明显降低,同时光镜下出现肝细胞坏死、肾曲管上皮局灶性坏死及基底膜崩解等病理形态变化。     

热休克对小鼠心,肝,肾磷酸酶活性的影响

以酶组织化学方法研究了不同发育时期小鼠心、肝、肾组织中碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性在热休克（４４℃，３０ｍｉｎ）后４、８、１２、２４、３６ｈ的变化。结果表明：①热休克对不同发育时期小鼠的影响有差异，对出生后小鼠的影响较大；②热休克可诱导小鼠心肌细胞表达ＡＫＰ；且使ＡＣＰ活性增强；③热休克诱导小鼠肝、肾组织中ＡＫＰ、ＡＣＰ活性显著升高。提示：热休克反应中ＡＫＰ、ＡＣＰ活性的增强有利于细胞正常生理功能的维持。     

上皮性钙粘蛋白与肝细胞癌侵袭、转移的关系研究

目的探讨上皮性钙粘蛋白(E-Cadherin)在人肝细胞癌(HCC)中的表达及其与肝癌侵袭、转移性的关系。方法选择56例有完整随访资料的原发性肝细胞癌及相应癌旁组织标本、20例正常肝组织标本,用 RT-PCR 方法检测 E-Cad-herin mRNA 的表达;用免疫组织化学方法检测 E-Cadherin 的表达。结果 1.E-Cadherin 在肝细胞癌组织中的表达低于癌旁组织和正常组织,差异有显著性意义(P<0.05);癌旁组织和正常组织中 E-Cadherin 的表达无显著性差异(P>0.05);2.E-Cadherin 在肝癌组织中的表达与术后复发时间呈正相关(P<0.05;R~2=0.786),与病理分期呈负相关(P<0.05;R~2=0.678);3.癌组织中 E-Cadherin 表达与肝外转移呈负相关(P<0.05;R~2=0.704);4.癌旁组织中 E-Cadherin 表达与术后复发时间呈正相关(P<0.05;R~2=0.742)。结论 E-Cadherin 与肿瘤的分化程度,侵袭转移能力,复发倾向相关,在临床中有望作为肿瘤分化、复发、转移的评估指标之一。     

细脚拟青霉对小鼠血清及肝,脾,肾组织酸性磷酸酶活力的影响

本文观察了细脚拟青霉菌丝体水煎剂对正常及环磷酰胺所致免疫抑制小鼠血清及肝、脾、肾组织中酸性磷酸酶活力的影响作用。结果表明：细脚拟青霉水煎剂给小鼠灌胃２１天后，小鼠血清中酸性磷酸酶活力无显著改变，正常小鼠脾组织酸性磷酸酶活力显著提高，对环磷酰胺所致小鼠肝、脾、肾组织酸性磷酸酶活力下降具有非常显著的抑制作用。提示：细脚拟青霉对免疫抑制小鼠脏器组织内的酸性磷酸酶活力具有调节作用。     

二甲亚砜诱导人胃腺癌MGC803细胞分化后其碱性磷酸酶表达

目的：研究二甲亚砜诱导人胃腺癌ＭＧＣ８０３细胞分化及其ＡＫＰａｓｅ表达。方法：分别提取诱导前后胃腺癌ＭＧＣ８０３细胞、胎盘、Ｈ４移植瘤碱性磷酸酶,并通过神经氨酸酶处理后聚丙烯酰胺凝胶电泳分析及敏感实验（苯丙氨酸、温度、咪唑对ＡＫＰａｓｅ活性影响）作ＡＫＰａｓｅ特性检测。ＭＴＴ法,酶荧光染色法研究胃腺癌ＭＧＣ８０３细胞经诱导后细胞生长及ＡＫＰａｓｅ表达,结果：诱导前后胃腺癌ＭＧＣ８０３细胞均表达两型     

p~(16)蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

应用免疫组织化学方法检测了42例原发性肝细胞癌（HCC）和癌旁肝细胞中p16的表达。结果显示,所有癌旁肝细胞p16表达均为阳性,18例癌细胞内p16蛋白阳性,阳性率为42．86％。p16蛋白弥漫性分布在肝细胞浆内,少数细胞核内也可见阳性显色。同一标本中癌旁细胞p16蛋白表达阳性,癌细胞内则可为阴性,表明用免疫组织化学方法在正常细胞中可检测到p16蛋白,而某些癌细胞可因p16缺失或突变等不能表达。p16表达还与HCC的组织学分级有关,分化程度高的HCCp16的表达率为66．67％（12／18）,明显高于低分化HCC组（0／4）,提示p16失活可能发生在HCC早期。     

SUMO-1基因在肝癌中的表达及意义

目的 研究肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达及意义.方法 采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达.结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在肝癌传代细胞SMMC-7721、Hep3B、HepG2及肝癌标本中均明显高表达,而癌旁肝组织中SUMO-1基因明显低表达,肝癌组织和癌旁肝组织中SUMO-1表达差异有统计学意义(P<0.001).结论 SUMO-1基因在肝癌中高表达,SUMO-1可能为肝癌诊断和治疗中的一个靶点.     

CerbB—2蛋白在肝细胞肝癌及癌周肝硬变组织中的表达

对４８例人肝细胞肝癌，肝硬变及２０例正常肝组织的标本作了免疫组化ＡＢＣ法染色，观察了ＣｅｒｂＢ－２蛋白的表达情况。发现ＣｅｒｂＢ－２蛋白在正常肝组织，仅少数标本中见到微弱表达，而在肝细胞肝癌及其癌周肝硬变组织中均检测到ＣｅｒｂＢ－２蛋白表达。阳性产物主要定位于于肿瘤细胞及再生结节中的肝细胞膜和胞浆。     

联合检测血清酯酶和乳酸脱氢酶同功酶对原发性肝癌诊断价值的初步探讨

目的:研究使用同功酶临床诊断试剂盒(醋酸纤维素薄膜电泳法)联合检测血清酯酶(Es)同功酶和乳酸脱氢酶(LDH)同功酶对肝硬化和肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法:采用Es试剂盒和LDH试剂盒检测血清,原发性肝癌病人18例,失代偿期肝硬化病人40例,正常人40例。结果:HCC及肝硬化病人Es2带活性减弱甚至大多数消失,与正常对照相比差异有极显著性(P<0.01),而HCC病人LDH5带活性明显增强,与肝硬化及正常相比差异有显著性(P<0.05)。结论:检测血清Es对肝硬化和HCC的诊断有高度敏感性,结合检测血清LDH对肝硬化并发HCC的诊断具有重要的临床价值。     

乳腺良,恶性病变酶活性的超微结构研究

应用超微结构酶组织化学技术对乳腺良、恶性病变中３种细胞器标志酶进行定位观察。结果表明：乳腺癌组织内葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）活性显著高于正常乳腺组织和良性病变，而碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性则降低；乳腺癌间质中ＡＬＰａｓｅ活性明显增强；电镜显示：Ｇ－６－Ｐａｓｅ分布于癌细胞的内质网和核膜上，ＡＣＰａｓｅ恒定的出现于细胞核内的异染色质和核仁丝上，ＡＬＰａｓｅ分布于正常乳腺组织的肌上皮和腺上皮细胞的胞膜上。本文对上述酶活性变化的临床生物学意义进行了讨论。     

MTLC基因在肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达

目的 研究MTLC基因在肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达.方法 利用RT-PCR检测28例肝细胞癌及其相对应的癌旁肝组织中MTLC mRNA的表达.结果 28例肝细胞癌组织中,24例MTLC mRNA表达下调,其下调与肝细胞癌的分化程度无关.结论 本结果提示MTLC基因在肝细胞癌组织中表达下调,进一步说明MTLC表达降低可能与肿瘤发生发展关系密切.     

Survivin和Caspase-3在肝细胞癌中表达的相关性及其生物学意义

目的研究Survivin和Caspase-3在肝细胞癌中表达的相关性及其生物学意义。方法利用组织芯片和免疫组织化学技术检测70例肝细胞癌及其癌旁肝组织、15例肝硬化及10例正常肝组织中Survivin和Caspase-3蛋白的表达。结果在HCC中Survivin蛋白的阳性率和阳性强度明显高于癌旁肝组织、肝硬化和正常肝组织（P〈0．01）；Survivin蛋白的表达强度与HCC的分化程度及肿瘤的大小明显相关（P〈0．01），分化愈差和肿瘤愈大，Survivin蛋白的表达愈强。Caspase-3蛋白在HCC中的表达率和表达强度明显低于癌旁肝组织、肝硬化和正常肝组织（P〈0．01），HCC分化愈差和肿瘤愈大，Caspase-3蛋白表达愈弱（P〈0．01）。统计学分析显示在Hcc、癌旁肝组织及肝硬化组织中survivin和caspase-3蛋白的表达强度呈明显负相关（P〈0．01）。结论在HCC的发生和发展过程中存在survivin蛋白表达水平的改变；Survivin蛋白可能通过抑制caspase-3蛋白的活性抑制细胞凋亡和促进细胞增殖．加速细胞的恶性转化和Hcc的发生。     

人肝细胞癌和癌旁组织中雄激素受体的定量检测

①目的了解肝癌病人癌与癌旁组织中雄激素受体（ＡＲ）的改变。②方法用葡聚糖包裹活性炭饱和吸附法（ＤＣＣ法）检测２１例肝细胞癌（ＨＣＣ）癌组织和癌旁组织中ＡＲ，并与７例男性肝硬变病人肝组织中的ＡＲ进行了比较。③结果癌组织中ＡＲ的含量显著高于癌旁组织（ｔ＝２．７９３，Ｐ＜０．０１）及硬变肝组织（ｔ＝２．３２３，Ｐ＜０．０５）。④结论ＡＲ的增加与肝细胞的恶变有关，从而为ＨＣＣ的内分泌治疗提供分子生物学依据。