不同途径接触镉的大鼠全胚胎培养

应用大鼠全胚胎培养方法,检测了氯化镉的发育毒性,并对培养的大鼠胚胎染毒途径进行了探讨。培养的大鼠胚胎以三种方式接触镉:(1)直接将镉加到培养基中,培养9.5天大鼠胚胎。(2)孕鼠于妊娠第8.5天经皮下分别注入2mg/kg及8mg/kg氯化镉(按(?)计算),于妊娠9.5天取染毒鼠胚胎于培养基中培养48小时。(3)取染毒大鼠血清,培养9.5天大鼠胚胎。结果表明。这三种途径染毒,均观察到异常胚胎增多,表明氯化镉有致畸作用,与致畸实验结果一致。应用全胚胎培养方法筛查致畸原,经母体宫内染毒,取胚胎体外培养,是较好的方法。     

注射用环磷酰胺对大鼠致畸敏感期毒性研究

目的 观察环磷酰胺1次染毒或连续染毒对大鼠致畸敏感期的毒性反应.方法 选用SD大鼠,设对照组(生理氯化钠)、7.0、15.0 mg/kg染毒组,每组6只孕鼠.15.0 mg/kg组于孕第12天1次皮下注射染毒;7 mg/kg组于孕第11～13天连续皮下注射染毒3次.观察孕鼠体质量及一般健康状况,于妊娠第20天解剖并记录子宫连仔鼠质量、胎盘质量、仔鼠体质量、黄体数、死仔和活仔鼠数、仔鼠身长和尾长;检查仔鼠外观、骨骼和内脏.结果 ①2个染毒组的孕鼠染毒后均很快出现毒性反应,精神状态明显变差、活动减少、体质量减轻;②7.0和15.0 mg/kg染毒组死仔率分别为60.29%和18.37%,明显高于对照组的1.69%(P＜0.05);子宫连仔质量、胎盘质量、鼠仔体质量、身长、尾长均明显低于对照组(P＜0.05);③染毒组存活仔鼠普遍发生脑膜膨出,骨骼骨化不全,15.0 mg/kg组仔鼠大多数出现并趾、少趾、足外翻、短肋、缺肋等异常.结论 大鼠致畸敏感期1次(15.0 mg/kg)或连续3次(7.0 mg/kg)皮下注射环磷酰胺,均可导致明显的胚胎毒性反应,毒性反应的严重程度与染毒时间和剂量密切相关.     

氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大鼠生殖发育的影响

[目的]探讨妊娠期氯氰菊酯和甲基对硫磷混配染毒,对母鼠的生殖毒性和对子代大鼠生殖和发育的影响。[方法]Wistar孕鼠112只随机均分为4组,于孕1～15天连续经口灌胃染毒不同剂量农药(两种农药以相当于0、1/300、1/95、1/30LD50的剂量等毒混配),对照组采用溶剂灌胃。56只孕鼠(每组14只)妊娠19天时处死,测定胚胎毒性;另56只孕鼠自然分娩,记录空孕率、每窝活产数、妊娠天数、平均产仔数和性别比;测量其371只仔鼠的体重增长和生长发育情况;10周龄时随机抽取雌鼠32只(每组8只)、雄鼠40只(每组10只)处死,称量生殖腺重量,计数睾丸每日生精量和附睾精子数。[结果]孕鼠胚胎毒性指标中仅高剂量组活胎比低于中剂量组和对照组(P<0.05);各剂量组分娩孕鼠的空孕率、妊娠天数、产仔数、平均活产数、仔鼠性别比与对照组相比无差异(P>0.05)。各剂量组仔鼠体重增长与对照组一致(P>0.05);高剂量组仔鼠出生第一天尾长比对照组长(P>0.05);雌性仔鼠的卵巢脏器系数与混配农药剂量之间存在剂量-效应关系(rs=0.3144,P=0.0172);各剂量组雄鼠睾丸每日精子生成量和附睾精子数与对照组相比无差异(P>0.05)。[结论]妊娠期甲基对硫磷和氯氰菊酯混配染毒,对母鼠有一定的胚胎毒性,并对仔鼠生长发育有轻微的影响。     

甲醛对小鼠胚胎的发育毒性

目的 探讨甲醛对小鼠胚胎的体内发育毒性. 方法随机选择健康性成熟的昆明种小鼠,雌雄介笼产生孕鼠,孕鼠被随机分成5组,每组8只,分别在小鼠妊娠第6～15 d用5、10、20 mg/kg.d的甲醛进行灌胃染毒,每天一次,同时设生理盐水对照和环磷酰胺阳性对照.观察孕鼠的体重增长情况;于妊娠第18 d处死孕鼠取出胚胎,观察胚胎的生长发育状况、死胎和吸收胎鼠数及畸形发生情况. 结果与生理盐水组比较,中、高剂量甲醛染毒可降低孕鼠体重的增长率(P<0.05),高剂量甲醛染毒孕鼠能使胚胎吸收和死亡发生率增加(P<0.05),并可抑制胎盘和胎仔生长发育,中、高剂量甲醛染毒导致胎鼠畸形发生率增加(P<0.05),但对孕鼠和胎仔的毒作用影响均弱于环磷酰胺的毒性作用(P<0.05). 结论甲醛在体内对小鼠胚胎具有发育毒作用和致畸形作用.     

溴氰菊酯对染毒孕鼠仔鼠生长发育的影响及中药干预作用

目的:观察溴氰菊酯(DM)雌性大鼠孕期染毒对子代生长发育的影响及补肾健脾复方助孕3号对DM发育毒性的干预作用。方法:将妊娠大鼠分为对照组及3个染毒组,染毒组自妊娠第1~15天经口灌服1/20LD50DM(6.93 mg/kg),另灌服生理盐水、成人等效剂量中药液及牛磺酸溶液(0.2 g/kg)。待孕鼠分娩后观察仔鼠不同时点的体格发育及生长发育情况。结果:DM染毒各组仔鼠在不同时点的体重、身长均显著低于对照组,出毛、张耳、雄性仔鼠睾丸下降时间等生长发育指标也与对照组有显著差异。但各组性别比无显著性差异。结论:溴氰菊酯具有发育毒性,可通过胚胎胎盘转运,对子代的生理发育产生不良影响,但不影响子代性别;等效剂量的中药和牛磺酸不能有效干预溴氰菊酯的发育毒性。     

吡氟酰草胺对大鼠致畸毒性研究

选用8周龄的Wistar大鼠交配受孕,每组18~20只孕鼠。于妊娠第6~15天,染毒组以吡氟酰草胺灌胃染毒,剂量分别为100、300和1 000 mg/kg;阴性对照组用等量玉米油灌胃;阳性对照组于妊娠第12天腹腔注射环磷酰胺8 mg/kg。妊娠第20天处死孕鼠,记录黄体数、死胎数、活胎数、活胎重量等,并检查胎鼠外观、内脏、骨骼的畸形、变异及功能状况。结果表明,在试验剂量下吡氟酰草胺未对胚胎形成、胎鼠生长以及外观、内脏和骨骼造成影响。吡氟酰草胺对大鼠母体无明显毒性作用剂量为1 000 mg/(kg·d),且该剂量对子代亦不具有胚胎毒性和致畸作用。     

ZNC-1大鼠生殖毒性试验

目的了解新药ZNC-1对大鼠生殖毒性的影响。方法按常规致畸试验方法,获取74只孕大鼠,分为5组:3个ZNC-1染毒组与阴性对照组,每组15只;阳性对照组,每组14只。在大鼠胚胎器官形成期6～15d,孕鼠连续经口给予ZNC-1,ZNC-1剂量为3000、1500、1000mg/kg。观察受试药物有无致畸作用。结果①ZNC-13000mg/kg剂量组孕鼠体重增长〔(140.73±37.24)g〕明显低于阴性对照组;②ZNC-13000mg/kg剂量组胎鼠身长〔(3.60±0.33)cm〕明显短于阴性对照组〔(3.88±0.19)cm〕;其他剂量组胎鼠的体重、身长、尾长与阴性对照组相比无明显差异。③ZNC-1各剂量对胎鼠骨骼内脏发育无影响,亦无明显外观畸形。结论在本试验条件下,ZNC-1在3000mg/kg剂量可引起母体毒性反应和胚胎毒性,但未见致畸作用;ZNC-11500mg/kg无胚胎毒性和致畸作用。     

3,4二呋咱基氧化呋咱对大鼠致畸性研究

目的 对新型高能量化合物3,4二呋咱基氧化呋咱(DNTF)的致畸性进行研究,为研究DNTF对人体健康影响和制订职业接触限值提供依据.方法 采用大鼠标准致畸试验,将受孕SD大鼠随机分为3个染毒组(剂量分别为5.0、15.8、50.0 mg/kg)、阴性对照组(植物油)和阳性对照组(环磷酰胺10.0 mg/kg),每组10～15只,对孕鼠于孕期7～12d每天灌胃染毒1次,共6d,妊娠第20天处死,检查孕鼠妊娠与胎鼠畸形情况.结果 与阴性对照组比较,3个染毒组的孕鼠体重、胎重、胎鼠生长发育、胎鼠畸形率、胎鼠骨骼和内脏畸形率的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 DNTF在5.0～50.0 mg/kg 染毒剂量范围内对大鼠无明显的母体毒性、胚胎毒性和致畸性.     

室内主要挥发性有机物对离体培养胚胎发育的影响

目的探讨室内主要挥发性有机物对大鼠胚胎发育的影响。方法采用植入后全胚胎培养模型,将9.5dSD大鼠胚胎与吸入染毒的大鼠即刻离心血清共培养48h,观察空气染毒大鼠血清对离体培养胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果大鼠在模拟小室中染毒10d,染毒浓度约为现场检测最高值的2、4、8、16倍。在16倍剂量组,胚胎的平均头长为2.07mm、干重为0.53mg、发育评分为26.1,均显著低于空白对照组(P<0.05),并出现畸形胚胎。结论高浓度挥发性有机物对大鼠胚胎具有胚胎毒性和致畸性。     

海南树仔菜的大鼠胚胎毒性及致畸性研究

[目的]了解海南树仔菜对大鼠胚胎毒性及致畸性。[方法]将孕鼠随机分成4组(阴性对照组、树仔菜干粉低、中、高剂量组),每组12只。于受孕的d7～16,各组分别灌胃给予树仔菜干粉0,250,500,1000mg/kg,于受孕的d0、7、12、16、20称体重。d20断头处死孕鼠,检查胎鼠的死亡情况、外观、体重、体长、尾长。1/2胎鼠制作内脏标本,其余制作骨骼标本。[结果]各剂量组孕鼠体重、胚胎形成与发育、各项畸形指标与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]海南树仔菜无母体毒性、胚胎毒性及致畸性。     

应用全胚胎培养方法检测铅的胚胎毒性

全胚胎培养方法是八十年代才应用的一种新的体外实验方法,具有省时、省力、省钱的优点。本研究探讨垒胚胎培养方法可否用于检测铅的胚胎毒性。实验结果表明,在培养基中加铅(铅含量为30.68,62.88,88.64μg/ml)对胚胎体外染毒及给孕鼠腹腔注射醋酸铅溶液(含铅31.81mg/kg)染毒。铅均可影响胚胎卵黄囊发育,并导致胚胎生长发育迟缓及出现畸形,且有剂量反应关系。与整体动物实验相同,全胚胎培养方法可以用于检测铅的胚胎毒性。     

Al(NO_3)_3对大鼠胚胎的发育毒性研究

应用体外全胚胎培养方法 ,以Al(NO3) 3为受试物 ,培养基中Al3+ 浓度为 0 6～ 9 0 μg ml,直接染毒旋转培养的大鼠胚胎 48h ,观察Al(NO3) 3对大鼠胚胎生长发育和形态分化的影响 ,以探讨铝的胚胎发育毒性及其机理。结果发现 ,随着铝剂量增加 ,胚胎生长发育和器官分化的各项指标均呈现下降趋势 ,有一定的剂量 效应关系。其中 ,胚胎卵黄囊、神经管及心脏分化发育等对铝的作用较为敏感 ,相关指标在Al3+ 浓度为1 2 μg ml时比对照组显著降低 (P <0 0 5 )。≥ 3 0 μg ml时 ,除下颌外各项指标均明显降低 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,同时胚胎畸形发生率明显升高 ,畸形以神经管闭合不全、体屈异常多见。表明Al(NO3) 3可导致胚胎发育迟缓和神经系统等器官发育畸形。     

不同时期染毒二硫化碳对雌性小鼠孕中期胚胎发育的影响

目的　探索二硫化碳(CS2)致胚胎毒作用的敏感位点。方法　健康昆明种小鼠,于卵泡期、胚胎植入期、植入后期分别腹腔注射CS2 631.4 mg/kg,1次/d,连续3 d。小鼠怀孕(查到阴栓)14 d进行各项检查。结果　(1)卵泡期染CS2,小鼠胚胎窝重为(1.23±0.36)g,较对照组[(2.08±0.48)g]减少了41%,差异有统计学意义(P=0.000);植入期染CS2,小鼠胚胎窝重(1.27±0.97)g、胚胎均重(0.12±0.09)g,分别较对照组[(2.08±0.48)、(0.19±0.06)g]减少了39%和37%,差异有统计学意义(P=0.068、(P=0.045);(2)卵泡期和植入期染CS2,小鼠子宫和胎盘窝量比对照组明显减轻,差异有统计学意义(子宫:卵泡期P=0.014、植入期P=0.010,胎盘:卵泡期P=0.004、植入期P=0.003);(3)胚胎植入后染CS2,以上各观察指标未见明显异常。结论　CS2 可通过作用于卵泡影响小鼠胚胎发育;单纯植入期染毒CS2 也可对小鼠产生胚胎毒性。     

Al（NO3）3对大鼠胚胎的发育毒性研究

应用体外全胚胎培养方法,以Al(NO3)3为受试物,培养基中Al3+浓度为0.6～9.0μg/ml,直接染毒旋转培养的大鼠胚胎48h,观察Al(NO3)3对大鼠胚胎生长发育和形态分化的影响,以探讨铝的胚胎发育毒性及其机理。结果发现,随着铝剂量增加,胚胎生长发育和器官分化的各项指标均呈现下降趋势,有一定的剂量-效应关系。其中,胚胎卵黄囊、神经管及心脏分化发育等对铝的作用较为敏感,相关指标在Al3+浓度为1.2μg/ml时比对照组显著降低(P<0.05)。≥3.0μg/ml时,除下颌外各项指标均明显降低(P<0.05或P<0.01),同时胚胎畸形发生率明显升高,畸形以神经管闭合不全、体屈异常多见。表明Al(NO3)3可导致胚胎发育迟缓和神经系统等器官发育畸形。     

人参皂甙Rb1和Rg1对体外培养大鼠胚胎生长发育的影响

目的探讨人参皂甙Rb1和Rg1对体外培养大鼠胚胎的发育毒性。方法采用植入后全胚胎培养模型,将9.5d龄的SD大鼠胚胎在含有不同浓度人参皂甙Rb1和Rg1的大鼠即刻离心血清中旋转培养48h(Rb1终浓度分别为0、5、15、30、40、50mg/L;Rg1终浓度分别为0、10、30、50mg/L),观察人参皂甙Rb1和Rg1对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果随着人参皂甙Rb1和Rg1浓度的增加,胚胎生长发育指标得分和胚胎总形态学得分均降低,人参皂甙Rb1浓度≥30mg/L时,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05),胚胎体位、心脏和视觉系统得分亦显著减低;当浓度达到50mg/L时,前后肢芽开始受到影响;Rg1浓度≥10mg/L时,胚胎生长发育指标得分与对照组相比,差异有显著性(P<0.05);当浓度≥30mg/L时,前后肢芽得分显著降低(P<0.05);浓度达到50mg/L时,体位、心脏和体节受到影响。结论人参皂甙Rb1和Rg1在较高浓度时对体外培养的大鼠胚胎有一定的毒性作用。     

二硫化碳对男工生殖结局影响的研究

对四个不同地区的CS_2作业男工的生殖结局调查结果表明,其子代的出生缺陷发生率和妻子的自然流产发生率均显著高于对照组。其发生率的高低与接触CS_2浓度的高低有一定的剂量反应关系。表明接触一定浓度的CS_2能使男工发生生殖损伤,因此积极改善劳动条件,降低车间空气中的CS_2浓度,不仅对保护工人健康,而且对保护其子代的正常发育成长有重要意义。     

1H NMR based metabolic profiling of day 2 spent embryo media correlates with implantation potential

Abstract

Morphological assessment is currently the primary technique for selection of viable embryos for uterine transfer during assisted reproductive techniques, however this method has limited predictive power. The objective of this study was to employ NMR based metabolic profiling analysis of spent embryo culture media to identify novel biomarkers of embryo viability and provide insight into the metabolism of a viable embryo. A total of 37 patients undergoing IVF/ICSI treatment were recruited and 58 media samples were collected from embryos that were transferred back to the uterus. ¹H NMR spectra were acquired and analyzed resulting in the quantification of 12 metabolites in the media samples. Analysis of metabolite ratios revealed significant differences between those patients with positive (n?=?27) and negative (n?=?31) urinary βhCG results. Some of the most biologically relevant differences include a 17% increase in the formate to glycine ratio and a 22% decrease in the citrate to alanine ratio in the spent embryo media from the positive pregnancy group. Overall, the results indicate that metabolic profiling may provide a means of identifying biomarkers that aid selection of viable embryos.     

叶酸拮抗乙酰水杨酸致大鼠卵黄囊毒性作用的研究

以全胚胎培养模型结合免疫组化和电镜技术等探讨了乙酰水杨酸和叶酸对大鼠卵黄囊及胚胎的影响。结果表明：培养基含乙酰水杨酸３００μｇ／ｍｌ组的卵黄囊直径和胚胎体长均显著低于阴性对照组,胚胎畸形率明显增高。组织学检查发现卵黄囊厚度变薄。间质层血岛、微血管数量明显减少,血管壁细胞不连续,血管发育不良。卵黄囊内皮层细胞顶端微绒毛少见。内皮层细胞的溶酶体、内质网及核蛋白体等结构和数量均有明显改变。而６０ｍｇ／ｋｇ叶酸灌胃鼠血清与乙酰水杨酸联合应用后,则卵黄囊的上述毒性作用明显减轻或消失,提示叶酸能明显拮抗乙酰水杨酸致大鼠卵黄囊的毒性作用。