基质金属蛋白酶-8在人和大鼠牙胚发育钟状期的表达

目的　研究基质金属蛋白酶-8(MMP-8)在牙胚发育牙本质形成过程中的表达。方法　免疫组织化学方法检测MMP-8在人牙胚发育钟状期的表达;原位杂交方法检测MMP-8 mRNA在大鼠牙胚发育钟状期的表达。结果　 MMP-8在人牙胚钟状晚期硬组织形成期成牙本质细胞和牙本质基质阳性表达,近髓腔处,牙本质染色更深;MMP-8 mRNA在大鼠牙胚发育钟状早期个别分化的成牙本质细胞表达阳性,钟状晚期,即硬组织形成期,MMP-8mRNA在成牙本质细胞表达强阳性。结论　MMP-8可能参与了人和大鼠牙胚发育过程牙本质基质改建。     

Notch 1信号蛋白在大鼠牙胚发育中的免疫组化表达研究

目的通过检测大鼠牙胚发育不同阶段Notch1信号的表达情况，探讨其在牙齿发育过程中的作用。方法采用免疫组织化学染色技术观测大鼠孕期12、14、16、17、18、19d和出生后1、3、5、7、9d牙胚中Notch1的表达。结果Notch1的表达始于钟状中期。在钟状中晚期，Notch1的表达在牙乳头间充质、成牙本质细胞层呈弱阳性。在内釉细胞层呈阳性。牙体组织形成开始，Notch1则在成釉细胞的中间层有反复表达，在成牙本质细胞层中有一过性表达。牙齿萌出后，该信号在成牙本质细胞和成釉细胞表达均为阴性。结论Notch1在牙胚发育过程中与成釉细胞分化有关，它可能在牙齿发育早期基质触发前成釉细胞向成釉细胞分化中起重要作用。     

巢蛋白在人牙齿发育过程中表达的免疫组化研究

目的:探讨巢蛋白(Nestin)在人牙齿发育过程中的表达模式和作用.方法:制备人牙齿发育各阶段以及人成牙本质细胞标本,采用SP法进行巢蛋白的免疫组织化学染色.结果:巢蛋白主要表达于功能性成牙本质细胞和成釉器.结论:巢蛋白参与人牙齿发育过程,特别是成牙本质细胞分化和基质分泌,可以作为功能性成牙本质细胞的标志物.     

细胞外基质磷酸糖蛋白在小鼠牙齿发育过程中的表达

目的:观察细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)在小鼠牙齿发育过程中牙胚和牙周组织中的表达变化,初步探讨MEPE在小鼠牙齿发育过程中可能发生的作用.方法:免疫组织化学染色法观察MEPE在小鼠牙齿发育过程中牙胚和牙周组织的表达变化.结果:牙胚发育早期,MEPE在成釉细胞、成牙本质细胞和牙髓组织中均有表达.随着牙胚的发育,MEPE在上述细胞中的表达逐步减弱,在牙周膜中逐渐表达.在前期牙本质中表达.牙胚发育完成后,MEPE在牙周膜,特别是成熟牙槽骨骨陷窝中的骨细胞中呈现高表达.结论:细胞外基质磷酸糖蛋白可能在牙齿硬组织形成、牙周膜的形成和稳定等方面发挥重要作用.     

牙本质涎蛋白在牙齿发育、牙本质疾病中的表达和作用

牙本质基质是由胶原和非胶原蛋白组成,其中非胶原蛋白又包含了一组牙本质特异性蛋白,它们在牙胚发育,矿化过程中起重要作用.该文就牙本质特异性蛋白中的牙本质涎蛋白在牙齿发育和牙本质疾病中的表达和作用作一综述.     

牙本质涎磷蛋白在小鼠牙齿发育中的表达

目的：通过检测牙胚发育不同阶段牙本质涎磷蛋白（ｄｅｎｔｉｎ ｓｉａｌｏｐｈｏｐｒｏｔｉｅｎ,ＤＳＰＰ）的表达情况,探讨其在牙齿发育过程中的作用。方法：采用免疫组织化学染色技术,上鼠牙齿发育各阶段标本中ＤＳＰＰ的表达。结果：ＤＳＰＰ的蛋白表达始于钟状中期,在内釉细胞和正在极化的成牙本质细胞中表达,牙体组织形成开始,则转至成牙本质细胞下至牙冠硬组织完全形成。此阶段在成釉细胞有反复表达。牙齿萌发时,该蛋     

牙本质基质蛋白1在人牙胚发育过程中的表达和意义

目的：观察牙本质基质蛋白1(dental matrix protein，DMP1)在人牙胚发育过程中的表达和分布变化，探讨DMP1在人牙齿发育过程中的作用。方法：制备人牙胚发育各期组织标本，采用免疫组织化学方法观察DMP1在人牙胚不同阶段的表达情况。结果：DMP1主要表达于钟状晚期分泌型成牙本质细胞，在前成牙本质细胞、前成釉细胞和牙乳头细胞中表达弱阳性，在成釉细胞中有一过性表达，即在釉基质开始形成但没有形成硬组织时的分泌型成釉细胞中有表达，但在随后的分泌型成釉细胞中表达渐弱至阴性。结论：观察到DMP1在人牙胚发育不同时期的表达和表达变化，提示其可能参与成牙本质细胞和成釉细胞的分化及牙本质形成过程。     

牙本质磷蛋白在人牙胚发育中的原位杂交研究

目的：观察牙本质磷蛋白（DPP）基因在人牙胚组织发育过程中的表达，探讨其在牙齿发育中的作用。方法：采用原位杂交的方法，检测帽状期、钟状期牙胚组织DPPmRNA的表达。结果：人牙胚帽状期、钟状早期均未检测到DPPmRNA的表达，在钟状晚期前期牙本质形成时成牙本质细胞、前成釉细胞中呈阳性表达。结论：牙本质磷蛋白基因的转录具有明显的的时空特异性，它可能在牙体硬组织的形成中起重要的作用。     

牙本质牙髓复合体的形成研究(一)牙本质牙髓复合体的新概念及其在牙齿发育中的形成研究

牙本质及牙本质牙髓复合体的形成研究一直是口腔医学研究的重大课题。近年来,生命前沿科学领域的飞速发展和重大进展,也掀起了牙本质牙髓形成研究的热潮。本文阐述了对牙本质牙髓复合体概念的新认识,系统回顾了牙齿发育过程中、牙齿发育完成后,牙本质牙髓复合体体内形成研究、体外形成研究的新进展,及这些研究对临床治疗的指导意义和应对策略,分析了面临的挑战。这对我们把握该领域的研究现状和进一步深入研究奠定了必要的基础。     

成釉蛋白在小鼠牙胚发育不同时期的免疫组化定位

目的：观察成釉蛋白（ameloblastin,AMBN)在小鼠牙胚发育不同时期的表达和分布情况。方法：采用免疫组化的方法观察AMBN在小鼠牙胚不同时期的表达和定位。结果：蕾状期、帽状期和钟状早期牙胚中未见AMBN的表达；出生后1d钟状期，在成釉细胞和釉基质中呈强阳性表达，成牙本质细胞和牙本质基质中呈弱阳性表达；出生后3d，在成釉细胞胞浆中呈弱阳性表达，在成牙本质细胞中表达阳性，着色较成釉细胞深；出生后7d，AMBN在成釉细胞托姆氏突呈弱阳性表达，其余部位呈阴性表达。在牙胚发育的各个时期，AMBN在外釉细胞、星网层细胞、牙乳头细胞均呈阴性表达。结论：AMBN参与釉基质的形成，可能与牙胚发育中基质形成的信息传递有关。     

成牙本质细胞表达相关蛋白作用的研究进展

成牙本质细胞分泌的蛋白质、基质、生长因子等在牙齿发育和牙髓损伤修复中都起着重要的调节作用。牙本质基质蛋白(DMP1)、牙本质涎蛋白(DSP)、牙本质磷蛋白(DPP)、巢蛋白、clock蛋白、骨黏附蛋白聚糖(OSAD)等在牙本质形成、矿化及牙本质修复等过程中发挥着各自的作用。此外,其中某些蛋白对常染色体隐性低血磷性佝偻病、非矿化组织疾病发病机制的研究具有重要意义。本文就成牙本质细胞表达相关蛋白在牙发育及损伤修复中的作用机制做一综述。     

增龄性因素对正畸牙齿移动影响的实验研究

目的:探索增龄性因素对正畸牙移动过程中牙周组织内HIF-1α及VEGF的影响。方法:建立不同年龄组的正畸牙齿移动动物模型,加力1 d、3 d、7 d、14 d及28 d,用免疫组化法检测牙周组织中HIF-1α及VEGF的表达情况。结果:青少年组大鼠实验侧压力区HIF-1α表达在加力1 d、3 d时明显高于成年组大鼠;VEGF表达量在加力1 d、3 d、7 d、14 d时明显高于成年组大鼠。结论:增龄性因素可使牙周组织对矫治力的反应速率降低,缺氧调控速率减慢,最终使牙槽骨改建减慢,牙移动速率降低。VEGF参与了正畸牙移动中组织改建过程,但成年组大鼠正畸牙齿移动过程中VEGF表达量增加缓慢,使牙槽骨改建速度降低,造成牙齿移动速度减慢。     

大鼠正畸牙齿移动过程中Wnt3a和DKK1的表达

目的:观察Wnt3a和DKK1在大鼠正畸牙移动时牙周组织中的表达变化。方法:将30只健康雄性SD大鼠随机分为6组,即正畸加力1,3,5,7,10,14 d组。使用镍钛拉簧施加50 g力近中移动左侧上颌第一磨牙,以右侧上颌第一磨牙不加力为自身对照。通过免疫组化方法检测牙周组织中Wnt3a和DKK1蛋白的表达。结果:Wnt3a和DKK1在加力组和未加力组的牙周膜中都有表达。在张力区,Wnt3a和DKK1都先增加后减少,分别在第5天和第10天达到高峰;在压力区,Wnt3a先减少后增加,DKK1先增加后减少,分别在第5天和第10天达峰值。结论:Wnt3a和DKK1参与牙周组织的改建,提示Wnt信号通路可能是正畸牙周改建的调控途径之一。[关键词] Wnt3a DKK1 正畸牙齿移动 牙周组织改建     

尼古丁对人牙周膜成纤维细胞中Fas/Apo-1（CD95）表达的影响

目的：研究尼古丁（nicotine）对体外培养的人牙周膜成纤维细胞（periodontal ligament fibroblasts,PDLFs）中Fas/Apo-1（CD95）表达的影响。方法：采用组织块培养法培养原代人牙周膜成纤维细胞并传代取处于对数生长期的第6代细胞用于实验,采用浓度为2mg/L的尼古丁处理第6代牙周膜成纤维细胞72h,通过免疫组织化学染色法检测尼古丁对人牙周膜成纤维细胞中Fas表达的情况。结果：证实尼古丁作用于人牙周膜成纤维细胞后,胞膜中Fas/Apo-1（CD95）抗原呈阳性表达。结论：提示尼古丁可通过Fas系统这一途径导致人牙周膜成纤维细胞的凋亡,从而加重牙周组织破坏的程度和影响牙周组织的再生。     

正畸牙移动过程中Cbfa1/Osf2在牙周组织中的表达

目的：了解Cbfa1/ Osf2在牙周组织中的表达及变化,探讨其在牙周组织改建中的作用,为进一步深入研究正畸牙移动的机制奠定基础.方法：建立大鼠正畸牙移动的动物模型,并采用免疫组织化学的方法检测Cbfa1/Osf2在此过程中的表达.结果：Cbfa1/ Osf2在加力组牙周组织中的表达明显强于对照组,且张力侧表达强于压力侧;其中成骨细胞、成纤维细胞及破骨细胞均为强表达.结论：Cbfa1/Osf2参与了牙移动过程中牙周组织的改建,可能在牙周膜细胞向成骨细胞转化及新骨形成中起到了重要的作用.     

牙周炎大鼠正畸牙移动张力侧牙周组织转化生长因子β1表达研究冰

目的研究炎性牙周条件下牙移动及牙周改建中转化生长因子β1（transforming growth factor—β1,TGF-β1）的表达。方法90只雄性SD大鼠随机分为为正常牙移动组、牙周炎牙移动组,通过对大鼠上颌第一磨牙的近中移动,在预定的0、0．5、1、2、3、5、7、14、21d时间点处死动物,运用免疫组织化学,检测牙移动张力侧TGF—β1蛋白表达强度及时间分布特点。结果正常牙移动组中,TGF-β1在牙周膜的成纤维细胞、成骨细胞和骨髓组织呈弱阳性表达,牙移动1d后,张力侧牙周膜区免疫染色的阳性反应明显增强,2d后达到高峰;牙周炎牙移动组,TGF-β1在破骨细胞、牙周膜成纤维细胞呈阳性表达,牙移动0．5d后,张力侧牙周膜区免疫染色的阳性反应明显增强,以后逐渐下降。结论牙周炎症影响正畸力效应下的牙周组织改建。     

正畸移动大鼠牙过程牙周组织中PLAP-1、BMP-2的表达及意义

目的:研究正畸移动大鼠上后牙过程中,PLAP-1、BMP-2在牙周膜的分布和表达。方法:选择雄性SD大鼠36只,按1d、3d、5d、7d、14d、21 d分为6组,均用50 g移动左上第一磨牙,右上第一磨牙为对照。在相应时期处死大鼠后测量牙移动距离,采用HE染色及免疫组织化学SP法,检测不同时期牙周组织的形态变化; PLAP-1、BMP-2在牙周膜组织中的表达及研究两者可能存在的关系。结果:不同时期牙移动的距离不同,差别显著有统计学意义(P<0.05)。 HE染色显示对照组牙周组织变化不明显;实验组张力区有成骨细胞生成,压力区破骨细胞生成,随着时间的延长最后两区形态都基本趋一致。免疫组化法示PLAP-1在牙周膜的表达总是张力区高于压力区,在第3天张力区表达最强,除21 d外,其余各组间差异显著有统计学意义(P<0.05)。BMP-2在第5天张力侧表达最强,在3 d、5 d、7 d的表达差异显著有统计学意义(P<0.05)。结论:PLAP-1,BMP-2在正畸力作用下参与牙周膜组织改建的表达最高值时期不同。     

Notch 1信号蛋白在早期牙髓损伤修复中表达的免疫组化研究

目的 :通过建立大鼠牙髓损伤动物模型 ,观察Notch1信号蛋白在牙髓损伤修复过程中的表达。方法 :在大鼠第一磨牙牙合面开髓 ,分别对损伤后 2h、12h、2 4h、3d、7d及正常大鼠牙髓标本进行HE染色、免疫组化染色 ,检测各组标本中Notch1信号的表达。结果 :Notch1信号蛋白在正常成年大鼠牙髓组织中无表达 ,在牙髓损伤后表达上调。牙髓损伤 12h ,Notch1在成牙本质细胞层、部分牙髓细胞间质中呈弱阳性表达。损伤后 1～ 3d ,Notch1在成牙本质细胞层、部分牙髓细胞间质及接近损伤部位的牙髓细胞中呈阳性着色。损伤后 7d ,Notch1的表达位于成牙本质细胞层和穿髓孔下方的细胞增殖层。结论 :Notch1信号蛋白在大鼠牙髓损伤后早期阶段表达逐渐上调 ,随后在成牙本质细胞区及富细胞区牙髓细胞中表达增强 ,并沉积于穿髓点附近的细胞增殖层。提示它可能在牙髓损伤的早期自身修复和牙本质矿化中起作用     

实时定量PCR检测Nel样Ⅰ型分子基因对大鼠骨髓基质细胞成骨相关基因表达的影响

目的：研究Nel—like 1型分子（Nell-1）基因对体外培养大鼠骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,bMSCs）成骨相关基因表达的影响。方法：取6周龄雄性Fischer 344大鼠胫骨和股骨骨髓体外培养。以腺病毒为载体。进行基因转染，绘制生长曲线并测定转染效率。以转染β-半乳糖苷酶（β—Galactosidase，LacZ）基因的bMSCs为对照组，转染Nell-1的bMSCs为试验组，用实时定量PCR（real—timePCR）测定成骨相关基因碱性磷酸酶基因（alkaline phosphatase，ALP）、骨涎蛋白（bone sialoprotein，BSP）、骨钙素（osteocalcin，OC）、骨桥蛋白（osteopontin，OP）和Sox9的表达。以2^-△△CT法计算基因表达的相对比值。结果：随着Nell-1基因转染滴度的增高。细胞增殖速度减慢。基因转染效率随滴度增加而增高。Nell-1基因转染大鼠bMSCs．早期下调、中期和晚期上调ALP的表达。晚期上调OC的表达,整个成骨周期中均上调OP和BSP的表达。结论：Nell-1基因可能通过影响各成骨相关基因的表达而促进大鼠bMSCs的成骨分化。