IL-1β与IL-10mRNA在牙龈组织中的表达

目的:检测IL-1β与IL-10mRNA在正常牙龈及牙周炎患者牙龈组织中的表达,探讨二者与炎症的关系及内源性抗炎因子IL-10对致炎因子IL-1β是否有拮抗作用。方法:采集14例成人牙周炎患者炎症区牙龈组织,6例正常牙龈组织,利用逆转录-聚合酶链反应检测其中IL-1β与IL-10mRNA的表达及其强弱程度。结果:成人牙周炎组牙龈组织IL-1βmRNA的阳性表达率为92.86%,IL-10mRNA阳性表达率为71.43%,二者与正常对照组相比均有显著性差异;两者之间无明显相关性;两者与临床指标间亦无明显相关性。结论:致炎性和抗炎性细胞因子均可在牙龈组织中表达;机体自身IL-10水平不足以完全拮抗IL-1β活性;IL-10对致炎性细胞因子IL-1β的调控作用有待进一步研究。     

IL-10mRNA及其蛋白在慢性牙周炎牙龈组织中的表达

目的检测IL-10 mRNA及其蛋白在慢性牙周炎牙龈组织中的表达及其组织细胞来源.方法随机选择12例慢性牙周炎翻瓣术患者作为牙周炎组,10例龈切术患者作为牙龈炎组,6例阻生牙拔除术患者作为健康对照组.分别采用原位杂交和免疫组化检测技术,检测各组牙龈标本中IL-10的表达.每组IL-10 mRNA及蛋白两种水平间的比较采用秩和检验;各组间数据的两两比较采用单因素方差分析.结果IL-10 mRNA及其蛋白在牙周局部牙龈组织均有表达,表达细胞类型有淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞及成纤维细胞等.IL-10在mRNA水平及蛋白水平表达无显著差异(P＞0.05)(牙龈炎组P＜0.05).牙周炎组IL-10表达强度显著高于健康对照组和牙龈炎组(P＜0.01),牙周炎组IL-10 mRNA表达强度显著高于健康对照组(P＜0.01),但与牙龈炎组比较差异无显著性(P＞0.05).结论IL-10在牙周组织中存在局部分泌机制.     

β-防御素基因在牙龈组织中的表达

目的:检测人β-防御素(HBD-1,-2,-3)基因在牙周炎病变和健康牙龈组织中的表达。方法:应用反转录多聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测健康牙龈(HC组,11例)、慢性牙周炎(CP组,12例)和侵袭性牙周炎(AgP组,9例)牙龈组织中HBD-1、HBD-2和HBD-3mRNA表达水平。结果:HBD-1,-2,-3在所有牙龈组织样本中均有mRNA表达;HBD-3mRNA在HC组、CP组、AgP组的表达水平分别为0.53±0.12,0.30±0.17和0.40±0.17,3组间差异有统计学意义(P<0.01),健康牙龈中HBD-3mRNA表达相对强度明显高于慢性牙周炎组;HBD-2和HBD-3基因的mRNA表达水平呈正相关(P<0.01,r=0.48)。结论:牙龈上皮表达的β-防御素(HBD-1,-2,-3),尤其是HBD-3在健康牙龈组织较高水平的mRNA表达,提示其在牙周宿主免疫防御反应中可能发挥重要作用。     

成人牙周炎不同临床状态牙龈组织中白细胞介素-10mRNA的表达

目的探讨白细胞介素-10（IL-10）mRNA在活动期和稳定期牙周炎牙龈组织中的表达状况。方法选择急性牙周脓肿患者12例、牙周炎基础治疗后稳定期患者12例及阻生第三磨牙拔除患者6例为研究对象,分别设为试验A组（活动期组）、试验B组（稳定期组）和对照组,采集牙龈组织样本,采用原位杂交技术检测3组样本中IL-10mRNA的表达,并进行半定量分析。结果IL-10 mRNA表达阳性的细胞类型主要有淋巴细胞、巨噬细胞及牙龈成纤维细胞。试验A组IL-10 mRNA的表达量最低,明显低于对照组和试验B组（P＜0.01）;试验B组IL-10 mRNA的表达量最高,高于对照组和试验A组（P＜0.01）。结论IL-10 mRNA表达量与牙周炎的临床状态密切相关。     

慢性牙周炎与健康牙龈组织中MMP-1的表达和意义

目的:通过检测基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在慢性牙周炎牙龈组织中的表达和分布特征,探讨MMP-1在慢性牙周炎发病中的作用和临床意义。方法:收集8例因非牙周疾病而需拔牙患者健康牙龈及24例慢性牙周炎患者牙龈组织,按健康对照、牙周袋深度≤4mm、4~6mm、>6mm分A、B、C、D四组,利用免疫组化方法检测其中MMP-1的表达。结果:正常牙龈组织上皮及固有层MMP-1弱表达,慢性牙周炎患者牙龈组织MMP-1表达明显增高,两者间有显著性差异(P<0.05)。并且MMP-1表达与牙周袋深度间显著正相关(r=0.623,P<0.01)。结论:MMP-1参与慢性牙周炎病变牙周组织的破坏过程,并且其表达随牙周袋深度加深有增加趋势。     

外源性IL-10对炎症牙龈组织中IL-6和ICAM-1表达的影响

目的:探讨外源性IL-10对炎症牙龈组织中IL-6和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:采用免疫组化技术检测牙周袋内用或不用IL-10时成人牙周炎患者牙龈组织中IL-6和ICAM-1的表达。结果:IL-6和ICAM-1 均可在炎症牙龈组织的多种细胞表达。IL-6主要表达于淋巴细胞、单核)巨噬细胞、成纤维细胞和内皮细胞。I- CAM-1主要表达于淋巴细胞、上皮细胞、单核)巨噬细胞、成纤维细胞和内皮细胞。使用Image-Proplus软件系统测得的IL-6和ICAM-1表达的IOD值在实验组和对照组间有显著性差异(P<0105)。结论:外源性IL-10对炎症牙龈组织中IL-6和ICAM-1的表达有下调作用。     

牙周炎患者牙龈组织中IL-21表达的研究

目的：研究不同类型牙周炎患者牙龈组织中IL-21基因的表达,探讨其在牙周炎发病中的作用。方法：选择慢性牙周炎患者12例,侵袭性牙周炎8例,健康对照组8例,采用实时定量PCR方法定量检测IL-21 mRNA在牙龈组织表达情况。结果：慢性牙周炎、侵袭性牙周炎、健康对照组牙龈组织中均有IL-21 mRNA的表达,慢性牙周炎组和侵袭性牙周炎组IL-21 mRNA相对表达量分别为0.000534±0.000504和0.00602±0.000137,显著高于健康对照组0.000161±0.000352,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性牙周炎和侵袭性牙周炎牙龈组织IL-21mRNA表达没有显著性差异（P>0.05）。结论：IL-21在慢性牙周炎发病机制中可能发挥重要作用。     

罗格列酮对牙周炎大鼠牙龈脂联素受体表达的影响

目的:探讨罗格列酮(ROS)对牙周炎大鼠牙龈脂联素受体1(AdipoRl) mRNA、脂联素受体2(AdipoR2) mRNA和TNF-α等炎症因子表达的影响及在牙周炎中对牙槽骨保护的潜能.方法:50只SD大鼠随机分为5组(n=10),大鼠不干预处理作为空白对照,40只大鼠用于制作牙周炎模型后分别用蒸馏水(牙周炎组)、1、3、10 mg/kg ROS(低、中、高剂量组)灌胃1次/d,持续4周.然后取样,RT-PCR测定牙龈组织AdipoR1和AdipoR2 mRNA表达水平,ELISA测牙龈组织TNF-α、MMP-9和血浆脂联素浓度,标准化的数码摄影测量釉牙骨质界到牙槽骨嵴顶(CEJ-A)距离.结果:牙周炎组和空白对照组相比,牙龈组织AdipoR1和AdipoR2的mRNA表达水平显著降低(P＜0.01),血浆脂联素水平无差异(P＞0.05),TNF-α和MMP-9浓度显著上升(P＜0.01).和牙周炎组相比,低、中、高剂量治疗组牙龈组织AdipoRl mRNA表达均升高(P＜0.05),TNF-α浓度显著降低(P＜0.01);中、高剂量治疗组牙龈组织AdipoR2 mRNA表达显著升高(P＜0.01),MMP-9浓度显著降低(P＜0.01),血浆脂联素浓度升高(P＜0.05),牙槽骨吸收量显著降低(P＜0.01).结论:ROS可能通过上调牙龈组织中AdipoR1和AdipoR2 mRNA表达水平,降低TNF-α、MMP-9浓度,缓解牙周组织炎症,降低牙槽骨吸收.     

牙周炎和健康人牙周组织中细胞焦亡水平的比较研究

目的:研究慢性牙周炎和健康人的牙周组织中细胞焦亡水平是否存在差异。方法:分别纳入全身健康、无牙周病史、牙列完整的患者9例作为健康对照组，慢性牙周炎III～IV期患者9例作为牙周炎组。收集患者的牙周组织，免疫组化染色对牙龈组织中消皮素D(GSDMD)、半胱天冬酶-1(caspase-1)、NLRP3炎症小体、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)的表达水平及分布进行定性分析；实时定量PCR检测牙龈组织和牙周膜组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β及IL-18 mRNA的表达差异。结果:免疫组化染色显示牙周炎组的牙龈组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β、IL-18的阳染色面积均大于健康组(P<0.05)。实时定量PCR检测显示，牙周炎组牙龈组织和牙周膜组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β、IL-18 mRNA的表达量明显高于健康组(P<0.05)。结论:慢性牙周炎牙周组织的细胞焦亡水平高于健康人，提示细胞焦亡可能参与了牙周炎的发生发展。     

白细胞介素-1β对遗传性牙龈纤维瘤和正常牙龈上皮细胞β-防御素的影响

目的:比较白细胞介素1β(IL-1β)刺激体外培养的正常牙龈、遗传性牙龈纤维瘤(HGF)上皮细胞β-防御素(HBD)表达的差异,探讨该差异与遗传性牙龈纤维瘤发病机制的可能相关性。方法:体外培养3例遗传性牙龈纤维瘤病人和6例正常人牙龈上皮细胞,经0,0.01,0.1,1,10,100 ng/mL的IL-1β分别刺激12、24、36、48 h,提取细胞总RNA,逆转录后,采用HBD-1、2、3特异性引物经PCR扩增,以β-肌动蛋白为内参,计算HBD-1、2、3与内参扩增产物相对值,对HBD-1、2、3进行半定量分析,采用SPSS软件单向方差统计分析法分析结果。结果:HBD-1 mRNA在正常牙龈和遗传性牙龈纤维瘤上皮细胞中呈固有表达,不受IL-1β刺激的影响。IL-1β可上调两种牙龈上皮细胞HBD-2、3的表达,在浓度为0.1～10 ng/mL时,作用时间大于12 h,受刺激组与未受刺激组差异有显著性(P<0.01)。相同浓度IL-1β作用不同时间时,正常牙龈上皮细胞中HBD-2、3的表达水平显著高于遗传性牙龈纤维瘤上皮细胞中表达水平(P<0.05,P<0.01)。且随作用时间延长差异更加显著。结论:遗传性牙龈纤维瘤病变组织和正常牙龈组织中β-防御素的表达有差异,这种差异可能与遗传性牙龈纤维瘤上皮细胞的分化及发病机制相关。     

慢性牙周炎患者牙龈组织中IL-6、IL-34和M-CSFR的表达及临床意义

目的: 比较慢性牙周炎患者牙龈组织和健康牙龈组织中IL-6、IL-34及M-CSFR的表达水平,探讨IL-34 在慢性牙周炎发病中的作用。方法: 收集8例诊断为轻度慢性牙周炎患牙的牙龈组织和8例诊断为重度慢性牙周炎患牙的牙龈组织作为病例组,8例冠延长手术切除的牙龈组织作为对照组,应用实时荧光定量PCR检测IL-6、IL-34及M-CSFR mRNA的表达;应用蛋白免疫印迹检测IL-6、IL-34及M-CSFR蛋白的表达。使用GraphPad Prism 6.0对结果进行统计学分析。结果: IL-6、IL-34、M-CSFR mRNA及蛋白在慢性牙周炎牙龈组织中的表达水平均显著高于正常牙龈组织中的表达（P<0.05）。结论: IL-6、IL-34及M-CSFR的表达可能与慢性牙周炎密切相关。     

牙髓卟啉单胞菌内毒素对成骨细胞表达IL-1βmRNA和IL-6 mRNA的影响

目的:研究牙髓卟啉单胞菌(P.e)内毒素(LPS)对成骨细胞表达炎症因子白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的影响,探讨P.e-LPS参与根尖周病变牙槽骨吸收的病理机制.方法:应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),检测在不同浓度P.e-LPS (0～50μg/mL)和不同作用时间(0～24h),P.e-LPS诱导成骨细胞表达IL-1βmRNA和IL-6 mRNA的水平.应用SPSS11.0软件包对结果进行单因素方差分析和Dunnett t检验.结果:当P.e-LPS浓度大于5μg/mL,作用1h后,与0μg/mL和0h组比较,IL-1βmRNA和IL-6 mRNA的表达水平均显著提高(P＜0.01),表明P.e-LPS诱导成骨细胞表达IL-1βmRNA和IL-6 mRNA具有剂量和时间依赖性.结论:P.e-LPS诱导成骨细胞表达IL-1βmRNA和IL-6 mRNA,是加速根尖病变的重要毒力因子.     

牙周治疗对血清IFN-γ及IL-4水平的影响

目的:探讨牙周基础治疗对牙周炎患者血清干扰素-γ(IFN-γ)及白细胞介素-4(IL-4)水平的影响。方法:检测慢性牙周炎患者牙周基础治疗前和治疗后4～6周内,牙龈探诊深度、出血指数;采用双抗体夹心ELISA法,通过绘制标准曲线求出标本中IFN-γ和IL-4的浓度,对检测结果进行t检验。结果:慢性牙周炎患者血清IFN-γ、IL-4显著高于对照组(P<0.01);慢性牙周炎患者经牙周基础治疗后,其探诊深度、出血指数、血清IFN-γ浓度均显著降低(P<0.01),血清IL-4浓度无显著变化(P>0.05)。结论:IFN-γ、IL-4与牙周组织炎症的发病有关,控制牙龈炎症可降低血清IFN-γ水平,但IL-4浓度不因牙龈炎症的控制而下降。     

血管内皮生长因子在正常与牙周炎牙龈组织中的表达差异研究

目的 检测血管内皮生长因子(VEGF)在正常与牙周炎的牙龈组织中的表达差异。方法 采用免疫组化PV两步法,检测VEGF在20例健康成人与20例慢性中重度牙周炎患者的牙龈组织中的表达差异。结果 健康组牙龈组织VEGF表达局限于上皮的颗粒层与部分棘层,其下方的结缔组织呈弱阳性表达,实验组牙龈组织上皮全层及结缔组织均呈强阳性表达,实验组VEGF表达高于健康组,两组之间的差异具有统计学意义(上皮区P<0.01,结缔组织区P<0.05)。结论 VEGF可能参与了牙周炎牙周袋壁龈组织的病理改变过程,在牙周炎发生发展及修复机制中可能具有重要意义。     

正畸移动后大鼠牙周炎牙整合素β1mRNA变化的实验研究

目的　研究正畸移动后大鼠牙周炎牙与正常牙整合素β1 mRNA表达的变化。方法　选用10周龄雄性成 年SD大鼠96只,随机分为正常牙组、牙周炎牙组,每组48只。分别在加力后0、1、2、3、5、7 d点处死动物,制备标 本,采用原位杂交检测牙周炎牙与正常牙正畸移动后β1 mRNA转录水平的变化。结果　正常牙组和牙周炎组加力 后各时间点的整合素β1 mRNA阳性强度均较加力前有明显增高(P<0·001);在加力各时间点,两组整合素β1 mRNA的表达强度均无显著性差异(P>0·05)。结论　在牙移动中,整合素β1 mRNA牙周组织破骨细胞上有强表 达,提示其与牙移动中牙周组织的稳定和改建有关。     

慢性牙周炎患者IL-17mRNA的表达及意义

目的：观察TL-17mRNA基因在慢性牙刷炎和健康牙龈组织中的表达水平变化,探讨TL-17在慢性牙周炎发生发展巾的作用。方法：选择慢性牙周炎患者23例,正常对照组15例,记录才周临床指标,采用Real—time PCR方法定量检测TL-17mRNA在牙龈组织中的表达。结果：慢性牙周炎组TL-17mRNA相对表达晕（0．00147＋0．00055）显著高于正常牙龈组（O．00047±0．00019）（P〈0．01）,并且慢性牙周炎组TL-17mRNA表达水平与牙龈指数（r=0．58,P〈0．01）、牙周袋探诊深度（r=0．57,P〈0．01）、附着丧失水平（r=0．49,P〈0．05）呈正相关。结论：Th17相关细胞凶子IL—17呵能住慢性牙周炎发病机制中发挥致炎作用。     

牙周炎不同阶段Th17/Treg细胞平衡变化初探

目的 建立实验性大鼠牙周炎模型,观察外周血及牙周组织Th17/Treg细胞平衡在牙周炎不同阶段的变化以及牙槽骨高度变化,为探寻用于研究牙周炎正畸牙齿移动的动物模型提供参考。方法 32只SD雄性大鼠随机分为3个实验组(牙周炎A组、牙周炎B组和牙周炎C组,每组8只)和1个对照组(8只)。实验组采用牙颈部丝线结扎并局部注射LPS的方法建立实验性牙周炎模型后,牙周炎A组处死,采用流式细胞仪检测外周血Th17细胞、Treg细胞比例变化。免疫组化检测牙周组织ROR-γt、Foxp3表达。实时定量PCR检测牙龈组织ROR-γt mRNA、Foxp3 mRNA的表达。牙周炎B组和C组去除局部刺激并行牙周洁治,分别于术后第7、14天进行牙周检查,并行上述流式细胞等检测。结果 牙周炎A、B及C组外周血Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg细胞比例及牙龈组织ROR-γt mRNA、Foxp3 mRNA的表达均较对照组明显升高( P <0.05)。牙周炎B组和C组Th17细胞、Th17/Treg细胞比例及牙龈组织ROR-γt mRNA的表达较牙周炎A组明显降低( P <0.05),但Treg细胞及Foxp3 mRNA表达较牙周炎A组明显升高( P <0.05)。牙周炎B组和C组相比,Th17细胞、Treg细胞及Th17/Treg细胞比例差异无统计学意义( P >0.05)。牙周炎A组、B组、C组牙槽嵴顶距釉牙骨质界距离均较对照组明显增加( P <0.05),但三组间差异无统计学意义( P >0.05)。结论 Th17、Treg细胞及Th17/Treg细胞平衡参与不同阶段牙周炎的免疫调控。局部炎症因素去除后,大鼠牙周炎病变稳定,可以尝试作为研究牙周炎正畸牙齿移动的动物模型。     

趋化因子受体CXCR7在牙周炎中的表达及其作用机制

目的:探讨CXCR7在牙周炎中的表达、分布及SDF-1/CXCR7生物学轴在牙周炎中的作用。方法:运用免疫组化的方法检测SDF-1、CXCR4、CXCR7在15例正常的牙龈组织和15例牙周炎组织中的表达,同时运用PCR方法检测15例正常的牙龈组织和15例牙周炎组织中的表达情况。结果:免疫组化和PCR的结果均显示SDF-1、CXCR4、CXCR7在牙周炎组织中表达增高,高于正常牙龈组织(P<0.05)。SDF-1与CXCR7呈正相关关系(γ=0.533,P=0.041)。CXCR4和CXCR7的表达呈正相关关系(γ=0.533,P=0.041)。结论:CXCR7在牙周炎微环境中的不同细胞群过表达,在牙周炎的病理过程中发挥作用,可能是治疗牙周炎的一个新的作用靶点。     

颊黏膜细胞IL-1β表达及IL-1β+3953基因多态性与慢性牙周炎的关系

目的:探讨颊黏膜细胞IL-1β表达和IL-1β 3953基因型与慢性牙周炎的关系。方法:采集36例不同程度牙周炎患者和36例牙周健康者的颊黏膜细胞和静脉血样本,同时记录牙周状态;对颊黏膜细胞IL-1β的表达进行免疫组化检测;静脉血提取DNA,用PCR-RFLP方法检测IL-1β 3953基因多型性;比较颊黏膜细胞IL-1β的表达差异及IL-1β 3953基因型分布差异,将牙周状态及IL-1β 3953基因型与颊黏膜细胞IL-1β表达进行多元线性回归分析。结果:IL-1β 3953等位基因II型在重症牙周炎患者中的携带率(12%)显著高于健康对照组(0%)(P<0.05),牙周炎患者颊黏膜细胞IL-1β表达程度亦显著高于牙周健康者(χ2=365.095,P<0.001);牙周附着丧失和牙周探诊深度与IL-1β表达呈正相关(CAL,P<0.05;PD,P<0.01),未发现菌斑指数、探诊出血指数及IL-1β 3953基因型与IL-1β表达的相关关系。结论:颊黏膜细胞IL-1β表达程度反映了牙周炎的严重程度,IL-1β 3953基因型没有使颊黏膜细胞IL-1β表达发生明显变化。     

实验性牙周炎中调节性T细胞的检测及免疫状态

目的：通过口腔涂抹牙周致病菌加腹腔注射抗原的方法建立一种模拟人类牙周病发病的动物模型,分析调节性T细胞在牙周炎小鼠中的表达情况。方法：采用实体显微镜评价牙周骨吸收的程度,HE染色法观察牙周组织病变的炎细胞浸润情况;FACS检测调节性T细胞在牙周炎慢性炎症期间的表达;实时定量PCR检测牙龈组织中TGF-β1、IL-10mRNA的表达。采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析。结果：第4周后,牙周炎组与正常对照组相比,釉牙骨质界至牙槽嵴顶的距离显著增加(P<0.05);牙周组织中大量的炎性细胞浸润,牙周袋加深;TGF-β1、IL-10mRNA的表达水平显著降低(P<0.01);脾脏中调节性T细胞的比率及数量显著少于正常对照组(P<0.05)。结论：牙周炎小鼠中调节性T细胞的数量及功能存在异常,可能与其分泌的免疫抑制性细胞因子表达降低有关。