PAS—M／PASM—M显示肾小球基膜,红细胞和细胞核的复合染色方法

多年来为了进一步提高肾小球的组化染色效果,我们进行了反复实验,根据染色机理和目的,重新组合PAS-M和PASM-M的二种染色方法,能够较好的显示肾小球毛细血管基膜、红细胞和细胞核的分布及病变程度,对于肾组织的疾病诊断和研究预后效果,具有一定的实用意义.1 材料和方法1.1 PAS—M法的试剂配制和染色方法 (1)试剂配制 ①Periodic acid (过碘酸)氧化液,过碘酸0.5g,蒸馏水98ml.②Martius yellow(马休黄)对比染色液:马休黄 0.5g,无水酒精 98ml,磷钨酸0.2g.③Schiff’s染色液:碱性复红2g,1M盐酸40ml,重亚硫酸钠4g,重蒸馏水400ml.先将蒸馏水煮沸,小火焰后加入碱性复红,再煮沸1分钟,冷却到50℃时加入盐酸,待35℃时加入重亚硫酸钠.将试剂盛棕色瓶中,冷却后入冰箱内备用.(2)染色方法 ①组织切片脱蜡至水.②过碘     

疏松结缔组织铺片染色法的经验

疏松结缔组织在人体分布广泛 ,它的主要成分有三种纤维及多种细胞。我们对以往传统的方法进行改良 ,使一张铺片呈现蓝、紫、红三种颜色 ,能较好地观察两种纤维 ,两种细胞。我们选用健康成年兔子进行静脉注射 ,可以制取大批教学片 ,染色方法简便 ,效果令人满意。1　材料与方法动物与试剂 :动物选用健康雄性兔子一只 (2公斤重 )。试剂 :①注射液　 1%台盼蓝生理盐水溶液　②固定液　10 %福尔马林　③染液及分色液　Ｖｅｒｈｏｅｆｆ铁苏木精液 [苏木精 1克 ,无水酒精 2 0毫升 ,苏木精溶解后 ,再加入下液 :10 %三氯化铁水溶液 8毫升 ,Ｌｕｇｏ…     

利用醛复红染色法制作家兔皮下疏松结缔组织铺片标本

目的 探讨适用于家兔皮下疏松结缔组织铺片标本的制片方法。方法 家兔3只,分别经腹腔注射10g/L锥虫蓝生理盐水溶液10～12ml。每天1次,连续注射3d后,于第4天取皮下疏松结缔组织进行铺片。待铺片晾干后,用福尔马林-酒精固定液固定约6h。然后,分别入醛复红、核固红和伊红染色液进行染色。每步之间用自来水冲洗。最后,常规脱水、透明、封片。 结果 巨噬细胞呈不规则形,分布在纤维中间,胞质中可见粗大的锥虫蓝颗粒。细胞核呈红色。醛复红染色30～40min时,弹性纤维呈紫色或蓝紫色,胶原纤维呈浅红色。结论 该法操作步骤简单,结果稳定可靠,是制作家兔皮下疏松结缔组织铺片标本适宜的方法。     

改良神经髓鞘的依来铬氰R染色法

为研究周围神经髓鞘被覆状态 ,我们经常要进行髓鞘染色 ,在实践中 ,我们摸索了一种便捷、有效、经济的染色方法 ,介绍如下。一、材料和方法1.取材、固定、切片 :取大鼠正常坐骨神经组织 ,4%甲醛生理盐水固定。石蜡切片 6～ 10 μｍ厚 ,6 0℃左右烘箱烘 3～4ｄ。2 .试剂配制 :(1)依来铬氰Ｒ液 :依来铬氰Ｒ 0 .2ｇ ,蒸馏水 96ｍｌ,10 %铁明矾液 4ｍｌ,浓硫酸 0 .5ｍｌ。 (2 )苦味酸丽春红Ｓ液 :1%丽春红Ｓ水溶液 10ｍｌ,苦味酸饱和水溶液 86ｍｌ,1%醋酸水 4ｍｌ。3.染色程序 :(1)石蜡切片 ,常规脱蜡水洗 ,吸干或烘干切片。 (2 )依来铬氰Ｒ液染…     

醇溶性和水溶性伊红在活检小组织标本预染上的应用比较

正近年各种内镜及细针穿刺活检小组织标本越来越多,由于取材的局限性,取材组织数量少、体积小,给技术员在制片过程中带来困难。目前国内外对于小标本的预处理方法不尽相同,有酸化的伊红液[1]、未酸化的伊红液、伊红-固定液[2]等预染法,均采用水溶性伊红配成的各种预染液。由于试剂配置方法、剂量等均无统一标准,采用常规的伊红滴染法效果不佳。为了增加组织的肉眼识别度,提高包埋、切片的速度和质量,     

一种骨磨片标本制作法—复红酒精浸染油磨法

对骨磨片的浸染,White用复红稀火棉胶液浸染骨磨片;Matschinsky用硝酸银液浸染骨磨片;Cowdry用酸性复红水溶液浸染;还有用大理紫酒精溶液漫染骨磨片的方法。 (我们曾用美兰、伊红液浸染骨磨片。)孟瑞朝也推荐复红稀火棉胶液和硝酸银液浸染骨磨片。上述诸法,各有其优点,特别是大理紫法。但也各有其不足之处,如硝酸银法的封片快而容易,但由于标本制作过程处理不当,或经过使用和光线照射之后,标本的黑色有普遍加深的现象。复红稀火棉胶法,则由于浸液中有火棉胶,浸透力弱,浸染的时间较     

Ziehl-Neelsen改良染色法在痰涂片中的应用

针对结核杆菌菌体含有蜡质的特点和传统Ziehl Neelsen抗酸染色法存在的不足 ,笔者在以前工作的基础上对染色液的配方进行改良〔1,2〕,并结合微波辐射技术建立了一种快速、敏感、简便的痰涂片抗酸染色法。1　材料与方法1.1　材料　 5 3例结核杆菌痰培养阳性的痰液 ,每例涂片 2张 ,95 %乙醇固定 15～ 30min ,分别用Ziehl Neelsen改良染色法和传统的抗酸染色法染色 ,同时设阳性对照、阴性对照。1.2　染液配制　 (1)改良的Ziehl Neelsen染色液 :碱性复红无水乙醇饱和液 (相当 6 %浓度 ) 10ml,活性剂 5ml,蒸馏水85ml,先将碱性复红溶于无水乙醇…     

改良的Cajal—Faworsky组织块神经浸染法在神经病理切片染色中的应用

改良的Cajal-Fanwersky组织块浸染法(简称C-F法),系作者在神经病理科研过程中,经过多种方法的对比,并进行适当改进而成。此法染色性能稳定,效果较好,尤其在观察连续切片时更为适用。一、材料与方法: (一)试剂配制: 1.冰醋酸酒精固定液: 80%乙醇98ml 冰醋酸2ml 2.氨酒精溶液: 95%乙醇100ml 1～2滴浓氨水3.还原液: 焦性没食子酸2g 中性Formalin 10ml 蒸馏水90ml     

显示肝、肾上腺脂类油红O方法探讨

油红 O为脂溶性 ,它是目前被认为最优良的脂肪染色染料 ,在脂肪内能高度溶解 ,从而染色 ,能保存组织中的脂肪滴。配制染料的溶剂是染色成败的关键 ,在此介绍一种油红 O染色的改进。油红 O原配方是由异丙醇 ,我们改用酒精配制效果同样满意。1取材 :小狗肝脏、肾上腺固定于 1 0 %中性甲醛溶液内 1～ 2 d。 2蒸馏水洗冰冻切片 1 0～ 2 0 μm入蒸馏水。 3用 70～ 80 %异丙醇或酒精稍洗或用蒸馏水稍洗。 4入油红 O染色 1 5～ 2 5 min。油红 O配方 :油红 O1 g,异丙醇 1 0 0 ml或 70 %酒精 1 0 0 ml,将油红 O放入烧瓶于水浴中加温溶解或放入温箱…     

制作疏松结缔组织教学铺片的探索

关于疏松结缔组织铺片的染色技术 ,近年来不少改进 ,能同时显示三种细胞两种纤维的方法也有几种 ,但是仍有不令人满意之处 ,比如巨噬细胞吞噬颗粒太少 ,显示不清楚 ,我们推测与甲醛液固定后水洗使其溶解有关 ,也可能与台盘蓝浓度有关。所以我们经过多次实验 ,作了如下探索和改进 :1将来复红染色法中的 1 %台盘蓝注射液改为 1 .5 % ;2采用了 1 0 %、2 0 %两种不同浓度甲醛固定液固定和 95 %酒精固定进行比较。结果 2 0 %甲醛效果较佳。具体操作如下 :材料和方法 :取 2 5 0 g重大鼠 ,腹腔注射台盘蓝 ,每天 1针 ,共注射 5针 ,第五针注射后两小…     

H-E染色切片灰染修复方法的比较

<正>组织切片在常规H-E染色中,有时会出现染色模糊不清(灰染)的现象,这给切片的判读造成困难。这一问题的形成原因及补救方法,有过文献报道但效果各异~([1-3])。本研究采用几种不同的方法对灰染的组织切片进行补救并比较了各自的效果,现介绍如下。1材料和方法1.1材料和试剂收集本系病理外检灰染的组织蜡块和切片10例。10%中性甲醛、Gill苏木精染液、0.5%伊红液由福建医科大学病理学系配制~([4]),柠檬酸修复粉剂、EDTA抗原修复液均购自福州迈新     

PAS染色试剂的保存方法

PAS染色试剂容易变质,需要经常重新配制,既浪费试剂,又增加工作量。笔者介绍一种冷冻保存的方法,试剂可以长期保存。　　PAS染色试剂配制后分装在带瓶盖的塑料滴瓶中,如配制2 0 0ml试剂,则分装为2 0瓶,置冰箱的冷冻室里保存。临用取出1瓶融化混均,使用后置4℃保存。　　通过对比染色发现,冷冻保存1年的PAS染色试剂的染色结果与新鲜配制的染色结果一致。　　PAS染色试剂配制过程中,0 5 %高碘酸水溶液要求新鲜配制〔1〕;Schiff试剂不容易配制,且容易变质。通过我们的实践证明,这两种试剂在冷冻状态下可以长期保存,在4℃下可以保存3个月…     

Mallory三色法在小肠染色上的应用

本法主要是显示肌纤维、血细胞、结缔组织纤维和神经纤维等结构。原来我们将此法用在垂体染色上 ,现在我们用来染小肠、皮肤及含有结缔组织的器官等 ,可供教学及科研定性、定量分析 ,效果好 ,较传统的 H.E染色可更清晰地分辨各种结构。1 .组织固定 :取一小段用 Bouin氏液固定 2 4hr,常规包埋、切片、脱蜡。 2 .染色液的配制 :磷钨酸 5 g,橘红 G lg,苯胺蓝 0 .5 g,酸性复红 1 .5 g,蒸馏水 1 0 0 ml。先使磷钨酸溶于水内 ,逐次将染料加入 (要在前一染料完全溶解后 ,再加次一染料 )将三种染料混在一起用。 3.染色方法如下 :( 1 )常规方法脱蜡…     

结缔组织撕片银染法——示成纤维细胞、肥大细胞的形态

笔者自80年起曾用小白鼠经台盼兰活体注射,碘苏木素中性红染色法染结缔组织撕片,以显示成纤维细胞、巨噬细胞、肥大细胞,胶原纤维及弹性纤维。但此法显示成纤维细胞形态大多数是显示其核,用于教学不够理想,现采用结缔组织撕片银染法染色,使成纤维细胞和肥大细胞形态均非常清晰,并易与巨噬细胞相区别。方法与步骤:1.取材取幼年健康小白鼠一只,从尾静脉注射用生理盐水配制的0.5%台盼兰溶液0.5 ml,隔天再注射一次,次日,用乙醚麻醉,取腹部皮下结缔组织一小块,取时应尽量少损伤血管,以免血液粘在皮下组织上。在载玻片上制成铺     

显示尼氏体方法的尝试

选用Bouin固定液固定新鲜脊髓,石蜡包埋切片,采用普通的苏木素一伊红染色,清晰地显示了神经细胞胞浆内的嗜碱性物质一尼氏体,而且较特染简单、经济、不易退色.1材料与方法取狗新鲜脊髓颈膨大固定于Bouin液24小时.(1)苦味酸75份(饱和),甲醛25份,冰醋酸5份(用前临时配制);(2)常规脱水包埋;(3)石蜡切片5μm; (4)HE染色;(5)中性树胶封片.2结果尼氏体呈兰色粒状和块状,清晰可见,背景呈浅红色(附图).     

OR-VB显示脂质和弹力纤维的组合染色法及其应用

在实验动物脂质代谢模型的建立中 ,分别对组织的脂质代谢和纤维进行染色与组合对照染色。本实验选用改进的ＯｉｌｒｅｄＯ乙醇饱和液 ,能较好的显示脂质成分 ,Ｖｉｃｔｏｒｉａｂｌｕｅ改造染色液 ,能显示冰冻切片组织中的弹力纤维。经过二种试剂组合染色后 ,能够同时显示血管组织内的脂质和管壁弹力纤维成分 ,色彩鲜艳 ,是较为理想的组合染色方法。1　材料和方法1 1　材料选用　材料来源于本学校实验动物中心的兔脂质代谢模型组织 ,经过 1 5 %中性甲醛固定液 ,能够使组织得到充分的固定[1] ,再进行冰冻切片和染色。1 2　试剂配制　 (1 )…     

疏松结缔组织铺片三种染色方法的比较

<正>疏松结缔组织的标本,大多采用活体注射,取皮下组织或肠系膜铺片制成.用醛品红染弹性纤维和肥大细胞呈紫色,用伊红染胶原纤维呈红色.但是,这样往往会把背景也染上红色,使胶原纤维显示不清,为探讨一种使胶原纤维与弹性纤维、肥大细胞、巨噬细胞同在一张标本上都能明显的显示出来,又能大批制片的简便方法,我们进行了多次实验,采用三种染色方法进行比较,获得了较好的效果.1 材料和方法     

一种显示网状纤维的方法

网状纤维是一种嗜银纤维 ,如用一般的银浸染 ,纤维难于分辨 ,而采用碳酸铵银法染色网状纤维的结构则显示得异常清晰。因而 ,碳酸铵银法是一种较理想的显示网状纤维的方法 ,现将该方法介绍如下 :1 .用岑克液或 1 0 %福尔马林固定脾、肝标本。 2 .切片脱蜡后蒸馏水洗数次。 3.将切片放入 0 .3%高锰酸钾内 5 min。 4.切片经水洗后入 5 %草酸漂白 ,至切片上的组织呈现为白色为止。 5 .蒸馏水洗数次后 ,置切片于碳酸铵银内 ( 5 0℃ ) 30 min。铵银液配方 :1 0 %硝酸银 1 0 ml,磷酸钾饱和液 1 0 ml,上述二液混合后产生沉淀 ,倾去上层液体 ,将沉淀…     

介绍一种骨髓组织脱钙新方法

骨髓组织活检标本来之不易 ,在制片过程中若处理不当 ,会给诊断造成极大的困难。如何既快又好地制作高质量的骨髓病理组织切片对正确诊断尤为重要。笔者通过 2年的反复实践 ,摸索出一种骨髓组织脱钙后的常规制片方法(简称“新法”) ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本　中南大学湘雅医院骨髓穿刺的活检组织 4 0例。1.2　试剂　脱钙液 :2 %硝酸 ,即浓硝酸 2ml加 98ml自来水 ;固定液 :10 %福尔马林液 ;染色液 :Gill苏木精 ,沉淀酸化伊红Y乙醇液。1.3　方法　穿刺活检组织入 10 %福尔马林液中固定 30min ;入 2 %硝酸脱钙液 ,室温下脱钙。在…     

神经纤维快速染色改良法

神经纤维的染色方法很多 ,技术操作也比较复杂 ,特别是镀银法 ,若操作不当 ,不易成功。本染色法是在镀银法原理的基础上 ,加以改进而建立的神经纤维快速染色法。此方法快捷简便易行可靠 ,光镜下的神经纤维分布和形态改变清晰可见。本染色法目前尚无文献报导。1 .材料和方法　 1 .1　材料 :大白鼠周围神经、腓神经。主要试剂 :硝酸银。由北京化工厂提供。1 .2　方法 :1 )所需试剂 1 0 .5 %酸性高锰酸钾水溶液 5 0 ml,0 .5 %硫酸水溶液5 0 ml,临用前等量混合。 2 2 .5 %铁明矾水溶液 :硫酸铁胺 2 .5 g,蒸馏水 1 0 0 ml。 3胺银溶液 :以四张组…