不同种类血清对新生大鼠大脑皮层神经细胞培养的影响

目的 探讨不同动物血清和人ＡＢ型血清对新生大鼠大脑皮层神经细胞培养的影响。方法Ｏｌｙｍｐｕｓ相差显微镜观察加入高糖ＤＭＥＭ的不同动物和人ＡＢ型血清对新生大鼠大脑皮层神经细胞的生长发育、增殖分化、迁移、形态学及存活细胞等的变化。结果 马血清和人ＡＢ型血清组的神经细胞、胶质细胞和成纤维细胞生长旺盛，神经细胞存活数明显高于其它血清组（Ｐ＜０．０５）。结论 人ＡＢ型血清和马血清有利于新生大鼠大脑皮层神经细胞的生长发育。     

水蛭提取物对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的影响

目的 研究水蛭提取物对体外缺氧性新生大鼠大脑皮层神经细胞凋亡的作用.方法 采用NSE染色法,观察体外培养大脑皮层神经细胞的含量,TUNEL法检测神经细胞的凋亡率,Hochest 33342荧光染色法观察其对缺氧性神经细胞凋亡的保护作用,Bcl-2及Bax凋亡蛋白染色法对抗凋亡的可能机理进行研究.结果 新生大鼠大脑皮层神经细胞原代培养NSE染色的结果 显示其神经细胞含量为93.28%±1.18%;水蛭提取物给药组神经细胞凋亡率明显低于凋亡模型组;荧光染色除水蛭提取物组250 μg·ml<'-1>组外,各组神经细胞凋亡率明显降低;药物干预组表达Bcl-2的神经细胞较凋亡诱导模型组显著(P<0.01);水蛭提取物组中表达Bax的神经细胞较凋亡模型组略少,其1、2 mg·ml<'-1>组与模型组有显著性差异.结论 水蛭提取物具有明显的抗脑神经细胞凋亡的作用,抗凋亡机理与其对Bcl-2及Bax蛋白的调控有关.     

大鼠海马神经细胞原代培养技术的优化

目的：建立海马神经细胞原代培养技术。方法：取新生1～3d的Wistar大鼠,开颅,迅速分离出海马组织在Hanks中剪碎,加入0．125％胰蛋白酶2mL消化,胎牛血清终止消化,细胞计数后种植于多聚赖氨酸包被的6孔培养板中。结果：神经细胞存活率高,纯度达90％以上,神经细胞生长良好。结论：用此方法能成功获取大鼠海马神经细胞。     

新生大鼠大脑皮层神经细胞培养及影响因素

神经细胞是近代神经学科中研究重点之一，在体外特定环境中，通过培养可以连续地直接观察神经细胞或神经胶质细胞的形态、生长、分化、迁移、突触形成、理化改变以及对环境的反应。本文结合新生大鼠大脑皮层神经细胞的培养，对影响神经细胞培养的诸因素及其作用做了初步探讨。     

抗抑郁药对新生大鼠海马细胞的保护作用

目的：研究不同种类的抗抑郁药对谷氨酸和过氧化氢所致新生大鼠海马细胞损伤的保护作用。方法：建立Glu对新生大鼠海马神经细胞的急、慢性损伤模型及H2O2对大鼠海马神经细胞的急性损伤模型。观察文拉法辛、度洛西汀、氟西汀、地西帕明和DOV对海马神经细胞是否有保护作用，并采用流式细胞仪测定细胞内钙浓度，初步探讨急性Glu损伤及各类抗抑郁药物的神经保护作用和细胞内钙超载的相关性。     

BONF对大鼠脑神经细胞损伤的保护作用

目的：建立体外培养大鼠脑神经细胞损伤模型,测定损伤前后不同时间LDH的水平,研究DBNF对脑皮质神经元的保护作用机制。方法：原代培养新生Witer大鼠的脑皮质神经细胞,建立体外脑神经损伤模型,通过测定神经细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化观察模型对神经细胞的损伤作用。结果：损伤组与对照组神经细胞损伤后LDH值比较差异有显著性(P＜0．05)证明损伤模型确实有效;本实验表明治疗组神经元LDH水平与损伤组比较有差异(P＜0．05),证明BDNF能够起神经元保护作用。结论：本实验表明BDNF对神经元起保护作用。     

铅对大鼠海马神经细胞Ca^2浓度,Ca^2＋—ATP酶,Na^＋—ATP酶活性？…

已知脑海马区是学习和记忆的重要脑区,尤其LTP被认为是学习和记忆的功能单位.许多实验证明体外急性染铅时,神经细胞LTP过程中Ca2+浓度明显升高,Ca2+-ATP酶活性降低[1].在慢性染铅动物体内,铅对上述指标的影响还没有报道,本研究用慢性染铅Wistar大鼠为动物模型,予观察铅对脑海马神经细胞Ca2+,Ca2+-ATP酶,Na+-ATP酶活性及LTP的影响.     

银杏叶提取物对神经细胞凋亡的保护作用

目的 研究银杏叶提取物（GbE)对神经细胞凋亡的影响。方法 对原代培养的大鼠脑皮质细胞进行细胞活力观察,并LDH释放量及琼脂糖凝胶电泳DNA结果。结果 GbE能够增强神经细胞活力,减少LDH释放,减轻细胞核形态的改变及DNA的断裂。结论 GbE对神经细胞凋亡有抑制作用 。     

丹参酮对原代大鼠神经细胞缺血性损伤的保护作用

目的探讨丹参酮对大鼠神经细胞脑缺血样损伤模型的保护作用及其机制。方法采用组织培养法,以原代大鼠大脑皮层神经细胞为材料,制备缺糖损伤、缺氧损伤、自由基损伤、咖啡因损伤、一氧化氮损伤及ＮＭＤＡ毒性损伤模型,细胞形态学观察神经细胞损伤变化,结晶紫活细胞染色后测定ＯＤ值。结果形态学检查发现丹参酮对６种脑缺血样损伤模型中的大鼠神经细胞具有明显保护作用,结晶紫染色也提示丹参酮可显著提高损伤模型中神经细胞的存活数,同等剂量条件下,丹参酮对自由基损伤、咖啡因损伤及ＮＭＤＡ毒性损伤的保护作用优于其余各组。结论丹参酮对上述６种大鼠神经细胞缺血损伤均有保护作用。     

纳洛酮对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的：研究纳洛酮在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的保护机制。方法：腔内线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。16只雄性Wistar大鼠随机分为缺血组及纳洛酮治疗组，采用TUNEL法检测各组大鼠脑组织于缺血再灌注各2．5h后神经细胞凋亡情况。结果：大鼠脑缺血再灌注2．5h后凋亡的神经细胞主要分布在梗死灶边缘，纳洛酮治疗组细胞凋亡数量低于缺血组(P＜0．05)。结论：纳洛酮具有减少大鼠脑组织缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的作用。纳洛酮具有抗脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

丁基苯酞对低糖低氧诱导的大鼠皮层神经细胞损伤的保护作用

为进一步探讨丁基苯肽对神经的保护作用,用原代培养大鼠皮层神经细胞的方法,以LDH和细胞形态等指标,观察了l-丁基苯酞(l-NBP)和d-丁基苯酞(d-NBP)对低糖低氧诱导的大鼠皮层神经细胞损伤的保护作用。结果表明:l-NBP和d-NBP能剂量依赖性地抑制低糖低氧诱导的大鼠皮层神经细胞内LDH的释放,降低细胞死亡率,并能改善受损细胞的形态;此外还能明显减轻低糖低氧诱导的神经细胞内粗面内质网脱颗粒及多聚核糖体解聚。提示:NBP对低糖低氧诱导的大鼠皮层神经细胞损伤有明显保护作用。     

米帕明对大鼠皮层神经细胞缺血性损伤的保护作用

目的 :研究米帕明 (Imi)对培养大鼠神经细胞缺血和谷氨酸 (Glu)损伤的保护作用。方法 :分离培养 15～ 18d胎龄的大鼠神经细胞 ,用连二亚硫酸钠消除培养基中的氧 ,合并培养基缺糖模拟细胞缺血性损伤 ;加入Glu模拟兴奋毒性损伤 ,测定乳酸脱氢酶、一氧化氮、丙二醛和超氧化物歧化酶的含量变化 ,观察缺血和Glu对神经细胞的损伤及Imi的保护作用。结果 :缺血及Glu引起神经细胞明显损伤性变化 ,死亡率升高 ,培养上清液中乳酸脱氢酶、一氧化氮含量升高 ,细胞匀浆中丙二醛生成增加 ,超氧化物歧化酶含量明显减少。Imi 10 - 8～ 10 - 6mol·L- 1能不同程度地减轻上述损伤性变化。结论 :Imi对神经细胞缺血性损伤有保护作用 ,机制可能与抗脂质过氧化及钙拮抗作用有关。     

神经细胞培养的几个问题

本文对神经细胞培养的有关问题进行了探讨,认为新生大白鼠小脑皮层是神经细胞培养较理想的细胞来源,神经细胞与神经纤维聚集与溶解状态的神经细胞粘附因子有关,抑制DNA合成的药物在培养的第10天加入较为适宜;同时分析了神经细胞分离过程中突起消失的原因,应用鼠血清的优点;对神经细胞的接种量,去除非神经细胞的方法等也进行了讨论。     

低分子肝素对原代培养神经细胞缺血性损伤的保护作用

目的观察低分子肝素(LMWH)对原代培养低糖和谷氨酸损伤大鼠大脑皮层神经细胞的作用。方法将血清药理学方法与神经细胞体外培养技术结合在一起,制备低糖和谷氨酸损伤模型,以细胞形态学、培养液吸光度(A)值以及乳酸脱氢酶(LDH)活性作为观察指标,研究LMWH所产生的保护作用。结果LMWH可改善损伤神经细胞的形态、升高培养液A值、降低培养液中LDH活性。结论LMWH可提高低糖和谷氨酸损伤状态下神经细胞的活性,对损伤神经细胞有保护作用。     

大豆磷脂对体外培养乳鼠神经细胞损伤保护作用的研究

目的:观察大豆磷脂脂质体(SPL)对谷氨酸所致培养乳鼠神经细胞损伤的保护作用。方法:取新生大鼠(0~1d)大脑皮层神经细胞进行原代培养,8~10d后加入谷氨酸(Glu),造成神经细胞的损伤,SPL保护组在Glu损伤处理的同时加入不同浓度的大豆磷脂脂质体,测定乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量,观察谷氨酸对神经细胞的兴奋毒性及大豆磷脂脂质体的保护作用。结果:加入谷氨酸后,神经细胞出现明显损伤性变化,培养上清液中LDH含量增加,细胞匀浆中MDA生成增加,SOD含量明显减少。大豆磷脂脂质体在0.2mg/ml~1.6mg/ml浓度时能显著减轻上述损伤性变化。结论:大豆磷脂脂质体对谷氨酸所致培养乳鼠神经细胞兴奋毒性损伤具有显著的保护作用,其机制可能与大豆磷脂脂质体抗脂质过氧化作用有关。     

川芎嗪对青霉素致痫大鼠神经细胞的影响

为研究川芎嗪 ( TMP)对青霉素致痫大鼠大脑皮层神经细胞结构的变化 ,使用青霉素致痫大鼠模型 ,采用 BL-4 10生物机能实验系统记录双侧大脑皮层痫样放电 ,待癫痫样放电稳定后 ,腹腔注射不同剂量的 TMP,待其抑制作用最明显时 ,取大脑切片 ,观察大脑皮层神经细胞的结构变化。结果显示 ,TMP对青霉素致痫大鼠大脑皮层神经细胞的形态结构有明显的恢复作用     

亚硒酸钠诱发大鼠胚胎中脑神经细胞凋亡的观察

目的：研究亚硒酸钠对大鼠胚胎中脑神经细胞凋亡的影响。并探讨其中可能的机制。方法：采用原代培养的大鼠胚胎中脑神经细胞，加入不同浓度的亚硒酸钠（1、5、10、20μmol/L)，观察亚硒酸钠对神经细胞凋亡的影响，用透射电镜观察神经细胞超微结构的变化，流式细胞仪分析法检测DNA含量及凋亡细胞百分率。结果高浓度的亚硒酸钠（≥10μmol/L）会导致神经细胞凋亡，并呈剂量依赖性，10μmol/L的亚硒酸钠作用的神经细胞导现出典型的凋亡形态学改变，且凋亡细胞百分率达13．4％。结论：高浓度的硒可通过激发生氧自由基和调节有关调节基因（P53）的活性等多种途径诱发神经细胞凋亡。     

脱氢表雄酮硫酸酯对体外大鼠脑皮层神经细胞拟老化反应的影响

用原代培养Wistar大鼠胎鼠脑皮层神经细胞,从形态学和生化学方面研究自由基、无血清培养对神经元的损伤以及脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)的保护作用。结果显示,神经细胞与自由基作用及在无血清培养条件下,细胞生存率明显下降,培养液的上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性显著提高,丙二醛(MDA)含量明显增加,超氧物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著下降。相差显微镜下观察,神经细胞突起回缩,颗粒增加,折光性下降。DHEAS剂量依赖地提高神经细胞损伤后细胞生存率,降低LDH的释放及MDA的生成,并显著提高抗氧化酶活性。结果提示,DHEAS可能通过抑制脂质过氧化物生成及提高抗氧化酶活性来保护拟衰老反应中的大脑皮层神经细胞。     

赤芍总甙对原代培养大鼠神经细胞损伤模型的保护作用

目的 探讨赤芍总甙对大鼠神经细胞脑缺血样损伤模型的保护作用及其机制。方法 采用组织培养法,以原代大鼠大脑皮层神经细胞为材料,制备缺糖损伤、缺氧损伤、自由基损伤、咖啡因损伤、一氧化氮损伤及NMDA毒性损伤模型。结果 形态学检查发现赤芍总甙（total paeony glycoside,TPG)对6种脑缺血样损伤模型中的大鼠神经细胞具有明显保护作用,结晶紫染色也提示TPG可显提高损伤模型中神经细胞的存活数。结论 TPG对上述6种大鼠神经细胞缺血损伤均有显的保护作用。     

葛根素对谷氨酸所致大鼠原代神经细胞损伤的保护作用

目的从膜脂流动性等观察葛根素对谷氨酸所致大鼠原代神经细胞损伤的保护作用。方法建立大鼠原代神经细胞谷氨酸损伤模型,以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为探针,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P)值和微粘度(η),研究细胞膜脂流动性的改变;MTT(四甲基偶氮唑盐)法、培养介质乳酸脱氢酶(LDH)活力测定观察葛根素的保护作用。结果葛根素组荧光偏振度和微粘度低于谷氨酸损伤组,与尼莫地平作用相当,且呈现剂量依赖关系。葛根素组原代神经细胞LDH的释放减少,吸光度增加,但葛根素对正常细胞增殖无影响。结论葛根素对谷氨酸所致的大鼠原代神经细胞损伤具有保护作用,其保护作用可能与葛根素改善神经细胞膜脂流动性有关。