黄芪多糖对星形胶质细胞培养液中自由基系统损伤保护作用的时间依赖性

目的:观察具有抗炎、调节免疫、延缓神经元变性等药理作用的黄芪多糖对胶质细胞培养液中谷胱甘肽和丙二醛含量及谷胱甘肽过氧化物酶的活性、超氧化物歧化酶活力的影响,探讨黄芪多糖对左旋多巴致胶质细胞培养液中自由基系统动态平衡损害的保护作用,分析该种作用与时间的关系。方法:实验于2003-12/2004-9在泰山医学院基础研究所完成。①选用出生2d的SD大鼠10只,雌雄不拘。②按照McCarthy和deVelli的方法进行星形胶质细胞的原代培养,胶质细胞培养液建立左旋多巴损伤模型,实验分为3组(每6孔细胞液一组):正常对照组(正常细胞培养,加入等数量的培养基,不加任何药物),左旋多巴组(加入100μmol/L左旋多巴),黄芪多糖 左旋多巴[加入黄芪多糖(由合肥恒星药物研究所提供)20mg/L和左旋多巴100μmol/L]。分别在培养4,24,48和72h后取处理后的含胶质细胞培养液。③采用比色定量法测谷胱甘肽含量,比色法测谷胱甘肽过氧化物酶活性,黄嘌呤氧化酶法测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量。④计量资料差异比较采用方差分析。结果:①谷胱甘肽含量及谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活力:培养4h后各组差异不明显。培养24,48和72h后,左旋多巴组明显低于空白对照组(P<0.05～0.01);黄芪多糖 左旋多巴组低于空白对照组,但差异不明显(P>0.05),明显高于左旋多巴组(P<0.05)。②丙二醛含量:培养4h后各组差异不明显。培养24,48和72h后,左旋多巴组明显高于空白对照组(P<0.05～0.01);黄芪多糖 左旋多巴组高于空白对照组,但差异不明显(P>0.05),明显低于左旋多巴组(P<0.05)。结论:左旋多巴自身氧化产生大量的自由基,促进帕金森病发展,黄芪多糖可降低左旋多巴对神经元的毒性作用,作用有时间依赖性。     

黄芪对大鼠实验性脊髓损伤的神经保护作用

目的：观察黄芪对脊髓损伤后脂质过氧化的抑制作用，探讨黄芪对大鼠脊髓损伤的影响。方法：实验于2004—03／2004—05在吉林大学第二医院中心实验室完成。采用改良Allen’s法制作脊髓损伤模型，40只SD大鼠随机分为两组：对照组（n=20）为单纯脊髓损伤，术后腹腔注入适量生理盐水；实验组（n=20）为脊髓损伤加黄芪注射液（成都地奥九鸿制药厂产品，黄芪含量为2g／mL）腹腔注射，注射后4h、8h、24h每组随机取3只动物切取损伤区1cm脊髓节段，分别采用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸化学发光法测定线粒体超氧化物歧化酶活性和丙二醛浓度；于损伤后4周，将动物麻醉后处死，以40g／L多聚甲醛行心室-主动脉灌注，取脊髓损伤区7μm标本，光镜观察损伤脊髓的组织病理学改变；同时进行神经功能评分（神经功能恢复率=评分／正常分&;#215;100％）和斜板实验评估用药后黄芪对运动功能的影响。结果：40只SD大鼠，均进入结果分析。①对照组大鼠脊髓内丙二醛的浓度不断升高，超氧化物歧化酶活性急剧下降．实验组腹腔注射黄苠注射液后脊髓内丙二醛浓度降低，超氧化物歧化酶活性升高。实验组与对照组之间在伤后各时相点（4，8，24h）的丙二醛浓度和超氧化物歧化酶活性均存在显著性差异（t=6．256，8．212，9．254；3．215，8．721，10．324；P〈0．01）。②脊髓损伤后两组大鼠神经功能恢复率逐渐升高，到3周末实验组和对照组之间神经功能恢复率具有显著性差异[（42．2&;#177;18．5）％，（18．5&;#177;6．3）％，拉12．243，P〈0．051。③脊髓损伤3周后，实验组同对照组之间的斜板试验结果差异存在显著性f（58．6&;#177;5．2）&;#176;，（50，5&;#177;6．8）&;#176;，≠=5．872，P〈0．051。④实验组和对照组损伤脊髓的组织病理切片均可见神经细胞坏死，炎性细胞浸润，微小空腔形成。但实验组较对照组的水肿减轻，坏死区范围减小。结论：黄芪可以抑制脊髓损伤后的脂质过氧化反应，减轻脊髓继发性损害，促进脊髓损伤后的神经功能恢复，从而发挥神经保护作用。     

黄芪多糖对动脉粥样硬化内皮细胞的保护作用

背景：内皮细胞发生结构损伤和功能障碍的主要特征为内皮细胞活性降低或释放的一氧化氮减少，内皮缩血管肽产生增加。目的：探讨黄芪多糖抗动脉粥样硬化内皮细胞损伤的作用，并以卡托普利做标准对照。设计：随机对照观察。单位：湖北中医学院生理教研室．武汉大学医学院病理生理教研室，广东省荷塘医院外科，武汉大学人民医院内分泌科。材料：实验于2001-07／2002-11在湖北中医学院机能实验室和武汉大学医学院病理生理教研室完成。选择由武汉大学医学院实验动物中心提供的健康国产雄性家兔40只，体质量2．4～3．0kg，随机分为空白组、模型对照组、黄芪多糖组、卡托普利组(标准对照)，10只／组。黄芪多糖从山西产黄芪根中提取，制成注射用粉剂，用前以生理盐水新鲜配制。方法：空白组给予正常颗料饲料，其余3组从实验第1天起给予高脂饲料(80％基础饲料中加入15％蛋黄粉、0．5％胆固醇和5％猪油)，牛血清1mL／kg从耳缘静脉注射1次，用高脂饲料加免疫损伤建立兔动脉粥样硬化内皮细胞损伤模型。黄芪多糖组每天腹腔注射黄芪多糖500mg／kg；卡托普利组给予5mg／kg卡托普利，相当于临床剂量的5倍；空白组、模型对照组给予等体积的生理盐水4mL／kg，共给药50d。末次给药后24h，从上腔静脉取血后处死动物，腹主动脉形态学变化光镜下观察，并测定家兔血清中总胆固醇、三酰甘油、一氧化氮、内皮缩血管肽、超氧化物歧化酶、丙二醛、总抗氧化活力的变化。主要观察指标：①腹主动脉形态学变化。②血清中各项相关指标变化检测。结果：40只家兔全部纳入实验。①与模型对照组比较，黄芪多糖组和卡托普利组血清中总胆固醇、三酰甘油含量明显降低[(9．33&;#177;1．13)．(6．60&;#177;0．61)，(7．09&;#177;0．74)mmol／L．P&;lt;0．05；(3．05&;#177;0．44)．(1．26&;#177;0．16)．(2．17&;#177;0．46)mmol／L，P&;lt;0．01，P&;lt;0．05]；且丙二醛和内皮缩血管肽含量也明显降低[(9．98&;#177;1．11)，(7．10&;#177;0．68)，(9．46&;#177;1．27)μmol／L，P&;lt;0．01；(741．90&;#177;34．98)，(632．62&;#177;26．95)，(600．74&;#177;32．59)ng／L，P&;lt;0．01]。②与模型对照组比较，黄芪多糖组和卡托普利组血清中一氧化氮、超氧化物歧化酶含量显著提高[(11．04&;#177;1．68)，(19．96&;#177;6．05)，(18．35&;#177;3．52)μmol/L，P&;lt;0.01，P&;lt;0.05；(159.32&;#177;5．26)，(207．54&;#177;16.98)，(197．59&;#177;28.41)NU／mL，P&;lt;0．0l，P&;lt;0．05]；同时总抗氧化活力升高[(23．8&;#177;3．5)，(34．7&;#177;5．6)，(30．7&;#177;6．8)％，P&;lt;0．01，P&;lt;0．05]。③黄芪多糖组无论是血清中总胆固醇、三酰甘油及丙二醛含量的降低或一氧化氮、超氧化物歧化酶及总抗氧化活力的升高均优于卡托普利组(P&;lt;0．01)。④腹主动脉形态学变化观察结果，可见空白组腹主动脉内膜表面光滑，内皮细胞连续，细胞间隙较小，内皮细胞无水肿，形态正常；模型对照组腹主动脉内膜增厚、隆起，血管内皮细胞可见部分脱落．细胞间隙增宽．内皮细胞有水肿。中膜层明显增厚，平滑肌细胞增生明显，且迁入内皮下，可见泡沫细胞；黄芪多糖组腹主动脉内膜表面基本光滑，细胞连接较紧密，平滑肌细胞增生不活跃，泡沫细胞少见；卡托普利组腹主动脉内膜表面基本光滑，内皮细胞无明显脱落．无平滑肌细胞迁入，平滑肌细胞形态基本正常，排列规则。结论：黄芪多糖可明显降低血清中总胆固醇、三酰甘油、丙二醛和内皮缩血管肽的含量，从而减轻内皮缩血管肽对血管的损伤作用；同时升高一氧化氮、超氧化物歧化酶及总抗氧化活力，应用黄芪多糖家兔光镜下可见腹主动脉内膜表面基本光滑．内皮细胞形态基本完好．提示其具有较好的对抗氧化损伤和保护血管内皮细胞的功能。     

黄芪对大鼠实验性脊髓损伤的神经保护作用

目的:观察黄芪对脊髓损伤后脂质过氧化的抑制作用,探讨黄芪对大鼠脊髓损伤的影响。方法:实验于2004-03/2004-05在吉林大学第二医院中心实验室完成。采用改良Allen’s法制作脊髓损伤模型,40只SD大鼠随机分为两组:对照组(n=20)为单纯脊髓损伤,术后腹腔注入适量生理盐水;实验组(n=20)为脊髓损伤加黄芪注射液(成都地奥九鸿制药厂产品,黄芪含量为2g/mL)腹腔注射,注射后4h、8h、24h每组随机取3只动物切取损伤区1cm脊髓节段,分别采用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸化学发光法测定线粒体超氧化物歧化酶活性和丙二醛浓度;于损伤后4周,将动物麻醉后处死,以40g/L多聚甲醛行心室-主动脉灌注,取脊髓损伤区7μm标本,光镜观察损伤脊髓的组织病理学改变;同时进行神经功能评分(神经功能恢复率=评分/正常分×100%)和斜板实验评估用药后黄芪对运动功能的影响。结果:40只SD大鼠,均进入结果分析。①对照组大鼠脊髓内丙二醛的浓度不断升高,超氧化物歧化酶活性急剧下降,实验组腹腔注射黄芪注射液后脊髓内丙二醛浓度降低,超氧化物歧化酶活性升高。实验组与对照组之间在伤后各时相点(4,8,24h)的丙二醛浓度和超氧化物歧化酶活性均存在显著性差异(t=6.256,8.212,9.254;3.215,8.721,10.324;P<0.01)。②脊髓损伤后两组大鼠神经功能恢复率逐渐升高,到3周末实验组和对照组之间神经功能恢复率具有显著性差异犤(42.2±18.5)%,(18.5±6.3)%,t=12.243,P<0.05犦。③脊髓损伤3周后,实验组同对照组之间的斜板试验结果差异存在显著性犤(58.6±5.2)°,(50.5±6.8)°,t=5.872,P<0.05犦。④实验组和对照组损伤脊髓的组织病理切片均可见神经细胞坏死,炎性细胞浸润,微小空腔形成。但实验组较对照组的水肿减轻,坏死区范围减小。结论:黄芪可以抑制脊髓损伤后的脂质过氧化反应,减轻脊髓继发性损害,促进脊髓损伤后的神经功能恢复,从而发挥神经保护作用。     

银杏叶制剂对正常脑温脑缺血大鼠的脑保护作用

背景：在银杏叶提取物治疗脑缺血的实验研究中，由于使用全身麻醉药物，有可能诱导脑温改变，影响实验结果准确性。目的：研究常温状态下，国产银杏叶提取物对脑缺血再灌注组织抗氧化酶、脂质过氧化物及脑缺血组织含水量的影响。设计：随机对照的实验研究。地点和材料：实验在华中科技大学同济医学院完成。取24只Wistar大鼠，体质量为250～300g，将实验大鼠随机分为假手术组(n=8)、脑缺血对照组(n=8)、脑缺血银杏叶提取物治疗组(n=8)，对照组及治疗组参考Nagasawa方法，制备正常脑温大鼠左侧大脑中动脉缺血2h再灌注2h动物模型，进行对照研究。干预：实验大鼠的脑温用颞肌温度反映，将测温探头包埋人大鼠左侧颞肌深部贴近骨外膜，用半导体氧化物温度传感器连续监测。用60w白炽灯头部加温和自动双控颅脑降温仪调节脑温，使脑温维持在常温(36．5～37℃)水平。按设计方案制备正常脑温大鼠脑缺血再灌注损伤模型，脑缺血银杏叶提取物治疗组大鼠在手术前12，8，4h和脑缺血及再灌注即刻，分别腹腔内注射银杏叶提取物注射液，每次3mL，共5次。脑缺血对照组及假手术组大鼠腹腔内注射相同次数和剂量的生理盐水。主要观察指标：脑缺血组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、还原型谷胱甘肽、丙二醛含量及脑缺血组织含水量。结果：脑缺血对照组超氧化物歧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶，还原型谷胱甘肽水平分别为(73．35&;#177;12.86)NU／mg，(167．37&;#177;54．34)μkat／g，(196．84&;#177;22．75)μg／g，明显低于假手术组的(96．02&;#177;16.83)NU／mg，(338．57&;#177;84．02)μkat／g，(337．51&;#177;34．89)μg／g(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)；脑缺血银杏叶提取物治疗组超氧化物歧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶，还原型谷胱甘肽水平分别为(87．24&;#177;15．03)NU／mg，(316．56&;#177;93．52)μkat／g，(263．16&;#177;28．54)μg／g，明显高于脑缺血对照组(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)。脑缺血对照组丙二醛水平为(308．34&;#177;26．81)nmol／g，明显高于假手术组的(101．46&;#177;10．97)nmol／g(P&;lt;0．01)；脑缺血银杏叶提取物治疗组丙二醛水平为(125．86&;#177;13．90)nmol／g，明显低于脑缺血对照组(P&;lt;0．01)。脑缺血对照组脑缺血组织含水量为(80．45&;#177;0．44)％，明显高于假手术组的(78．20&;#177;0．25)％(P&;lt;0．01)；脑缺血银杏叶提取物治疗组脑缺血组织含水量为(79．63&;#177;0．46)％，明显低于脑缺血对照组(P&;lt;0．05)。结论：正常脑温状态下，国产银杏叶提取物能抑制脑缺血时自由基的过多产生和脂质过氧化反应，减轻脑水肿和血脑屏障破坏，保护脑缺血组织。     

清宫长春丹胶囊对小鼠运动性过氧化损伤的保护作用

目的：观察清官长春丹胶囊(长春丹)对小鼠运动性过氧化损伤的保护作用及其机制。方法：昆明种小鼠72只(雌性)，随机分为正常对照组、运动过氧化损伤模型组、长春丹0．25，0．50和1．00g／kg剂量组，维生素E30mg／kg组。每组12只，连续给药14d，测定负重游泳40min后各组小鼠血清、心、脑、肝中丙二醛含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)的活性。结果：①长春丹中高剂量组小鼠血清和心、肝组织中丙二醛的含量明显降低：中剂量组分别为(6．76&;#177;1．71)，(47．1&;#177;11．1)和(54．3&;#177;7.9)μmol／L高剂量组分别为(6.45&;#177;1．82)，(43．5&;#177;14．5)和(52．1&;#177;9.5)μmol／L，均明显低于损伤模型组[(9.71&;#177;3.11)，(57．4&;#177;13．6)和(62.8&;#177;12．3)μmol／L]，差异均有显著性(P&;lt;0．05)。②小鼠血清和心、肝组织中SOD的活性：长春丹中剂量组分别为(4.78&;#177;0．44)，(1．70&;#177;0．35)和(22.48&;#177;3．14)nkat／L；高剂量组分别为(4.44&;#177;0．52)，(1．84&;#177;0．36)和(23．12&;#177;4．04)nkat／L，均明显高于模型组(2．97&;#177;0．52)，(1.32&;#177;0．30)和(18．78&;#177;2．78)nkat／L，差异有显著性(P&;lt;0．05)。③小鼠血清和心、肝组织中GSH-Px的活性：长春丹中剂量组分别为(0．58&;#177;0．14)，(0．78&;#177;0．21)和(2．47&;#177;0．51)nkat／L；高剂量组分别为(0．58&;#177;0．22)，(0．86&;#177;0．32)和(2．823&;#177;0.44)nkat／L，均明显高于模型组[(0．45&;#177;0．19)，(0．61&;#177;0．19)和(2．33&;#177;0．38)nkat／L]，差异有显著性(P&;lt;0.05)。长春丹对脑组织中丙二醛含量、SOD和GSH-Px的活性均无明显影响。结论：长春丹对运动性过氧化损伤有较好的保护作用。     

黄芪多糖对动脉粥样硬化内皮细胞的保护作用

背景内皮细胞发生结构损伤和功能障碍的主要特征为内皮细胞活性降低或释放的一氧化氮减少,内皮缩血管肽产生增加.目的探讨黄芪多糖抗动脉粥样硬化内皮细胞损伤的作用,并以卡托普利做标准对照.设计随机对照观察.单位湖北中医学院生理教研室,武汉大学医学院病理生理教研室,广东省荷塘医院外科,武汉大学人民医院内分泌科.材料实验于2001-07/2002-11在湖北中医学院机能实验室和武汉大学医学院病理生理教研室完成.选择由武汉大学医学院实验动物中心提供的健康国产雄性家兔40只,体质量2.4～3.0 kg,随机分为空白组、模型对照组、黄芪多糖组、卡托普利组(标准对照),10只/组.黄芪多糖从山西产黄芪根中提取,制成注射用粉剂,用前以生理盐水新鲜配制.方法空白组给予正常颗料饲料,其余3组从实验第1天起给予高脂饲料(80%基础饲料中加入15%蛋黄粉、0.5%胆固醇和5%猪油),牛血清1 mL/kg从耳缘静脉注射1次,用高脂饲料加免疫损伤建立兔动脉粥样硬化内皮细胞损伤模型.黄芪多糖组每天腹腔注射黄芪多糖500 mg/kg;卡托普利组给予5m/kg卡托普利,相当于临床剂量的5倍;空白组、模型对照组给予等体积的生理盐水4 mL/kg,共给药50 d.末次给药后24 h,从上腔静脉取血后处死动物,腹主动脉形态学变化光镜下观察,并测定家兔血清中总胆固醇、三酰甘油、一氧化氮、内皮缩血管肽、超氧化物歧化酶、丙二醛、总抗氧化活力的变化.主要观察指标①腹主动脉形态学变化.②血清中各项相关指标变化检测.结果40只家兔全部纳入实验.①与模型对照组比较,黄芪多糖组和卡托普利组血清中总胆固醇、三酰甘油含量明显降低[(9.33±1.13),(6.60±0.61),(7.09±0.74)mmol/L,P＜0.05;(3.05±0.44),(1.26±0.16),(2.17±0.46)mmol/L,P＜0.01,P＜0.05];且丙二醛和内皮缩血管肽含量也明显降低[(9.98±1.11),(7.10±0.68),(9.46±1.27)μmol/L,P＜0.01;(741.90±34.98),(632.62±26.95),(600.74±32.59)ng/L,P＜0.01].②与模型对照组比较,黄芪多糖组和卡托普利组血清中一氧化氮、超氧化物歧化酶含量显著提高[(11.04±1.68),(19.96±6.05),(18.35±3.52)μmol/L,P＜0.01,P＜0.05;(159.32±5.26),(207.54±16.98),(197.59±28.41)NU/mL,P＜0.01,P＜0.05];同时总抗氧化活力升高[(23.8±3.5),(34.7±5.6),(30.7±6.8)%,P＜0.01,P＜0.05].③黄芪多糖组无论是血清中总胆固醇、三酰甘油及丙二醛含量的降低或一氧化氮、超氧化物歧化酶及总抗氧化活力的升高均优于卡托普利组(P＜0.01).④腹主动脉形态学变化观察结果,可见空白组腹主动脉内膜表面光滑,内皮细胞连续,细胞间隙较小,内皮细胞无水肿,形态正常;模型对照组腹主动脉内膜增厚、隆起,血管内皮细胞可见部分脱落,细胞间隙增宽,内皮细胞有水肿.中膜层明显增厚,平滑肌细胞增生明显,且迁入内皮下,可见泡沫细胞;黄芪多糖组腹主动脉内膜表面基本光滑,细胞连接较紧密,平滑肌细胞增生不活跃,泡沫细胞少见;卡托普利组腹主动脉内膜表面基本光滑,内皮细胞无明显脱落,无平滑肌细胞迁入,平滑肌细胞形态基本正常,排列规则.结论黄芪多糖可明显降低血清中总胆固醇、三酰甘油、丙二醛和内皮缩血管肽的含量,从而减轻内皮缩血管肽对血管的损伤作用;同时升高一氧化氮、超氧化物歧化酶及总抗氧化活力,应用黄芪多糖家兔光镜下可见腹主动脉内膜表面基本光滑,内皮细胞形态基本完好,提示其具有较好的对抗氧化损伤和保护血管内皮细胞的功能.     

黄芪多糖对糖尿病大鼠肾小管的保护作用

目的:研究黄芪多糖(APS)对实验性糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用及机制.方法:选取30只链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠,随机分为DM组、APS低剂量组和APS高剂量组各10只,另选择10只大鼠作为正常组.每组分别给药,每天用药1次,连续用药42d.采用简易代谢笼法测各组大鼠24h尿量变化,透射电镜观察肾远端小管和集合管主细胞超微结构的变化.结果:DM组、APS低剂量组、APS高剂量组大鼠尿量均明显高于正常组(P<0.05),APS低剂量组、APS高剂量组大鼠尿量明显高于DM组(P<0.05).电镜显示,DM组大鼠肾远端小管和集合管主细胞的超微结构与正常对照组比较呈现明显退行性改变,而长期应用APS则可显著改善其超微结构的病变.结论:长期应用APS对DM大鼠肾小管的损伤具有良好保护作用,可明显增加DM大鼠的尿量.     

黄芪多糖对拟缺血损伤内皮祖细胞保护作用的实验研究

目的通过动物实验,评价黄芪多糖对拟缺血内皮祖细胞的保护作用。方法采用凝血酶损伤内皮祖细胞复制大鼠部分缺血损伤模型,不同浓度黄芪多糖预干预内皮祖细胞24h、凝血酶损伤8h后,用四甲基偶氮唑盐染色法检测细胞活性,蛋白印迹法和聚合酶链反应检测内皮祖细胞在蛋白及基因水平表达的变化。结果凝血酶损伤后,与正常对照组相比,凝血酶损伤组细胞活性明显下降,Ang-1及其受体表达下降（P〈0.05）;与凝血酶损伤组比较,黄芪多糖各组细胞活性上升, Ang-1及其受体表达上调（P〈0.01）;黄芪多糖各剂量组间呈剂量依赖。结论凝血酶可诱导内皮祖细胞损伤,黄芪多糖可抑制凝血酶所致体外培养的EPCs的损伤,对内皮祖细胞有保护作用,其机制与增加Ang-1及其受体表达有关,为缺血性疾病提供了新的治疗思路。     

银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注后自由基损伤的保护作用

目的 :研究银杏叶提取物 (GBE)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后SOD、MDA及NO含量的影响 ,探讨GBE的脑保护作用的机制。方法 :4 0只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组 (A)、缺血组 (B)、小剂量GBE组 (C)、大剂量GBE组 (D)。制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。C、D组于术前 30min及术后 1h分别给予银杏叶提取物2 0mg/Kg、4 0mg/Kg腹腔内注射。应用TTC染色观察梗死体积、检测脑缺血组织SOD活性、MDA和NO含量。结果 :①SOD活性C、D组明显高于B组 (P <0 .0 1) ,D组高于C组 (P <0 .0 5 )。②MDA和NO含量C、D组明显低于B组(P <0 .0 1) ,D组低于C组 (P <0 .0 5 )。③梗死体积C、D组明显小于B组 (P <0 .0 1) ,D组小于C组 (P <0 .0 5 )。结论 :银杏叶提取物可减少脑缺血再灌注后自由基生成及梗死体积 ,疗效与剂量有关。     

黄芪多糖对毒胡萝卜素诱导大鼠心肌细胞损伤的影响

目的探讨黄芪多糖对毒胡萝卜素诱导大鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法将原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为:对照组、毒胡萝卜素组、毒胡萝卜素加黄芪多糖组。应用0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L毒胡萝卜素分别处理24 h、48 h、72 h;另用黄芪多糖10μg/ml、50μg/ml处理,MTT法观察存活率,LDH法观察心肌细胞损伤程度。结果 1应用0.01μmol/L毒胡萝卜素处理细胞24 h时,与对照组相比,存活率、LDH值变化不明显,无统计学差异(P0.05)。当毒胡萝卜素为0.1μmol/L,与对照组相比,处理48 h心肌细胞存活率有显著降低,心肌细胞损伤率有显著升高,差异具有统计学意义(P0.05);毒胡萝卜素处理72 h效果较明显(P0.05);当毒胡萝卜素浓度为1μmol/L,处理24 h时细胞存活率即有明显降低,细胞损伤率即有明显升高,差异具有统计学意义(P0.05)。2与毒胡萝卜素组相比,10μg/ml黄芪多糖对毒胡萝卜素诱导的心肌细胞损伤仅有轻微的保护作用,差异无统计学意义(P0.05);而给予较大剂量的黄芪多糖50μg/ml可以显著改善心肌细胞存活率,减少LDH生成(P0.05)。结论毒胡萝卜素诱导了心肌细胞损伤;而黄芪多糖可以显著抑制毒胡萝卜素诱导的心肌细胞损伤,并且呈现实验剂量范围内的浓度依赖性,其可能为黄芪多糖治疗心血管疾病提供新靶点。     

Protection against stress-induced acute gastric mucosal injury by free radical scavengers

This study investigated whether the free radical scavengers allopurinol (50 mg p.o. q.i.d.) and dimethyl sulphoxide (DMSO, 500 mg p.o. q.i.d.) influence the incidence of stress-induced acute gastric mucosal injury in patients with pelvic fractures and hypovolaemic shock. In 177 fully evaluable patients (controln=58, allopurinoln=62, DMSOn=57), endoscopically proven stress-induced injury evolved in a significantly (p<0.01) larger number of controls relative to either group on active therapy. During the first 3 days after hospitalization, 13 controls (22%) developed the injury whereas only 2 patients in each of the allopurinol (3%) and DMSO (4%) groups had this injury. Of these cases, 8 controls (14%) and one patient in the allopurinol group (2%) deteriorated and underwent emergency surgery, however 3 of the controls (5%) died in the immediate post-operative period. The results suggest that oxygen-derived free radicals are directly implicated in stress-induced acute gastric mucosal injury and that removing them protects against this injury and its complications.     

Iron-mediated free radical injury in ethanol-exposed mouse neural crest cells

Previous studies using cell and whole embryo cultures have shown that free radicals play an important role in the ethanol-induced death of mouse neural crest cells (NCCs; a significant cell type with respect to the genesis of alcohol-related birth defects). This investigation was spurred by reports of increased iron in ethanol-exposed fetuses and the knowledge that iron can initiate the production of reactive oxygen species. Initially, the ameliorative potential of two iron chelators, deferoxamine and phenanthroline, relative to ethanol-induced cell death was examined. Cotreatment of cultured NCCs with 100 mM ethanol and either 1 or 10 microM deferoxamine or 10, 50, or 250 microM phenanthroline significantly increased the percentage of viable cells as compared with exposure to 100 mM ethanol alone. These data indicate that iron is involved in the ethanol-induced cytotoxicity. To support this premise, the direct toxicity of iron to NCCs was also examined. As expected, loading the cells with Fe(II)/Fe(III) using 8-hydroxyquinoline as a carrier had an adverse effect on their viability as did treatment with a neurotoxin, 6-hydroxydopamine, that releases iron from ferritin storage. Cotreatment with an antioxidant, N-acetylcysteine, significantly diminished the toxicity of ethanol alone, that resulting from iron loading, as well as from the combination of ethanol exposure and iron loading. These results confirm the role of free radical-mediated damage in ethanol-induced cytotoxicity and highlight the potential role of iron relative to the genesis of alcohol-related birth defects.     

无血清培养体系原代培养脐带间充质干细胞

背景：以含血清培养基培养的脐带间充质干细胞,存在着进一步应用的障碍。目的：建立无血清培养体系原代培养脐带间充质干细胞。方法：取脐带华通氏胶(Wharton’s Jel y),采用机械法将组织胶切碎,1-3 mm3大小,分别培养到含胎牛血清完全培养液中以及无血清培养液中。培养第11,14,17天收获细胞并进行相关检测。在符合2006年制定的干细胞最低评估标准的基础上,以集落形成单元指标评估何种培养体系能获得较多高质量的原代细胞。结果与结论：无血清培养体系相对于经典的含血清的培养体系而言,细胞生长速度更快。另外,培养第11天,集落形成实验表明无血清培养体系下能获得更多的集落。因此,无血清培养体系可以保持间充质干细胞的特性,为替代含血清培养体系进行脐带间充质干细胞原代培养提供了可能。     

葛根素对胰岛素抵抗-高血压大鼠自由基损伤的拮抗作用

目的:观察葛根素对胰岛素抵抗-高血压大鼠自由基损伤的作用。方法:①实验于2003-12/2004-03在广州市中医中药研究所药理教研室完成。选用出生6～8d的健康SD大鼠71只,雌雄不拘。②随机抽出20只为正常对照组,饮用蒸馏水和喂饲普通饲料;其余大鼠给予饮用50g/L蔗糖水和20g/L盐水及喂饲高脂高盐高糖饲料造成胰岛素抵抗-高血压病理模型。造模8周后,挑选血压和糖耐量异常的胰岛素抵抗-高血压造模成功大鼠51只,随机分为5组:模型组(n=11)、卡托普利组(n=10)、葛根素高剂量组(n=10)、葛根素中剂量组(n=10)、葛根素低剂量组(n=10)。各组均照上述方法继续造模4周。同时,正常对照组和模型组:肌肉注射500g/L丙二醇,0.8mL/kg,1次/d,共4周;卡托普利组:肌肉注射卡托普利注射液7mg/kg,1次/d,共4周;葛根素高、中、低剂量组:按华兴帮《大鼠穴位图谱的研制》及《实验动物与动物实验》中的取穴方法,选取大鼠双侧足三里(后三里)、脾俞、肾俞,按80,40,20mg/kg给予葛根素进行穴位注射,每天1组穴位,交替使用,1次/d,共4周。③分别给药4周后,用大鼠血压仪测定大鼠尾动脉收缩压;用ONETOUCHⅡ血糖仪测定大鼠血糖;采用生化分析仪测定血清一氧化氮水平及一氧化氮合酶、丙二醛、超氧化歧化酶活性和空腹血糖水平;用酶联免疫分析仪测定血浆胰岛素含量,计算胰岛素敏感指数[1/(空腹血糖×空腹胰岛素)]。④计量资料差异比较采用组间t检验(方差不齐,用t’检验)。结果:SD大鼠71只均进入结果分析。①卡托普利组、葛根素高、中剂量组给药4周后血压明显低于模型组(P<0.01)。卡托普利组和葛根素高、中剂量组血浆胰岛素水平明显低于模型组,胰岛素敏感指数明显高于模型组(P<0.05～0.01);而葛根素低剂量组上述指标与模型组比较,差异不明显(P>0.05)。②模型组血清一氧化氮和丙二醛水平,一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶活力明显高于正常对照组(P<0.01);超氧化物歧化酶活力明显低于正常对照组(P<0.01)。卡托普利和葛根素高剂量组血清超氧化物歧化酶活力明显高于模型组(P<0.05,0.01);卡托普利组和葛根素高、中剂量组血清丙二醛水平均明显低于模型组(P<0.05～0.01);葛根素低剂量组上述指标与模型组比较,差异不明显(P>0.05)。卡托普利组,葛根素高、中剂量组血清一氧化氮水平和一氧化氮合酶及诱导型一氧化氮合酶活力均明显低于模型组(P<0.05～0.01);葛根素低剂量组血清诱导型一氧化氮合酶水平也明显低于模型组(P<0.01),但一氧化氮水平及诱导型一氧化氮合酶活力与模型组相近(P>0.05)。结论:葛根素能增强胰岛素抵抗-高血压大鼠的抗氧化能力,减轻自由基损伤,降血压,改善胰岛素抵抗,增强胰岛素敏感性。     

葛根素对胰岛素抵抗-高血压大鼠自由基损伤的拮抗作用

目的：观察葛根素对胰岛素抵抗一高血压大鼠自由基损伤的作用。 方法：①实验于2003—12／2004—03在广州市中医中药研究所药理教研室完成。选用出生6～8d的健康SD大鼠71只，雌雄不拘。②随机抽出20只为正常对照组，饮用蒸馏水和喂饲普通饲料；其余大鼠给予饮用50s／L蔗糖水和20s／L盐水及喂饲高脂高盐高糖饲料造成胰岛素抵抗一高血压病理模型。造模8周后，挑选血压和糖耐量异常的胰岛素抵抗一高血压造模成功大鼠51只，随机分为5组：模型组（n=11）、卡托普利组（n=10）、葛根素高剂量组（n=10）、葛根素中剂量组（n=10）、葛根素低剂量组（n=10）。各组均照上述方法继续造模4周。同时，正常对照组和模型组：肌肉注射500s／L丙二醇，0．8mL／kg，1次／d，共4周；卡托普利组：肌肉注射卡托普利注射液7mg／ks，1次／d，共4周；葛根素高、中、低剂量组：按华兴帮《大鼠穴位图谱的研制》及《实验动物与动物实验》中的取穴方法，选取大鼠双侧足三里（后三里）、脾俞、肾俞，按80，40，20mg／ks给予葛根素进行穴位注射，每天l组穴位，交替使用，1次／d，共4周。③分别给药4周后，用大鼠血压仪测定大鼠尾动脉收缩压；用ONETOUCH Ⅱ血糖仪测定大鼠血糖；采用生化分析仪测定血清一氧化氮水平及一氧化氮合酶、丙二醛、超氧化歧化酶活性和空腹血糖水平；用酶联免疫分析仪测定血浆胰岛素含量，计算胰岛素敏感指数[1／（空腹血糖&;#215;空腹胰岛素）1。④计量资料差异比较采用组间t检验（方差不齐，用t’检验）。 结果：SD大鼠71只均进入结果分析。①卡托普利组、葛根素高、中剂量组给药4周后血压明显低于模型组（P〈0．01）。卡托普利组和葛根素高、中剂量组血浆胰岛素水平明显低于模型组，胰岛素敏感指数明显高于模型组（P〈0．05～0．01）；而葛根素低剂量组上述指标与模型组比较，差异不明显（P〉0．05）。②模型组血清一氧化氮和丙二醛水平，一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶活力明显高于正常对照组（P〈0．01）；超氧化物歧化酶活力明显低于正常对照组（P〈0．01）。卡托普利和葛根素高剂量组血清超氧化物歧化酶活力明显高于模型组（P〈0．05，0．01）；卡托普利组和葛根素高、中剂量组血清丙二醛水平均明显低于模型组（P〈0．05～0．01）；葛根素低剂量组上述指标与模型组比较，差异不明显（P〉0．05）。卡托普利组，葛根素高、中剂量组血清一氧化氮水平和一氧化氮合酶及诱导型一氧化氮合酶活力均明显低于模型组（P〈0．054）．01）；葛根素低剂量组血清诱导型一氧化氮合酶水平也明显低于模型组（P〈0．01），但一氧化氮水平及诱导型一氧化氮合酶活力与模型组相近（P〉0．05）。 结论：葛根素能增强胰岛素抵抗-高血压大鼠的抗氧化能力，减轻自由基损伤，降血压，改善胰岛素抵抗，增强胰岛素敏感性。     

不同压力高压氧预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注自由基损伤的保护作用

目的:观察不同压力高压氧预处理(HBO-PC)对大鼠脑缺血-再灌注缺血半暗带氧化应激平衡的调节及对自由基损伤的脑保护作用,选择恰当的预处理压力窗。方法:将46只SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=6);左侧大脑中动脉闭塞(MCAO)组(n=8);HBO-PC+MCAO组(n=32)。HBO-PC+MCAO组按不同的HBO-PC压力分为1.5ATA(0.15MPa)组、2.0ATA(0.20MPa)组、2.5ATA(0.25MPa)组和3.0ATA(0.30MPa)组4个亚组,每组8只。按不同治疗压力,每次吸氧1h、隔日1次,共5次,10d完成。最后一次HBO-PC后24h根据Zea-Longa线栓法制作MCAO再灌注损伤模型,缺血2h再灌注24h后检测缺血半暗带神经元凋亡水平、丙二醛(MDA)含量、同时检测总超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-px)的抗氧化酶活力。假手术组和对照组不进行HBO/常压氧治疗,10天后处理同实验组。结果:实验组中各亚组缺血半暗带凋亡细胞数和MDA含量均不同程度下降,总SOD和CAT活动水平均不同程度的增高,与MCAO组比较差异有显著性意义(P<0.05);各预处理亚组GSH-px表达无明显变化,与MCAO组比较差异无显著性意义(P>0.05)。预处理组内比较,上述指标(除GSH-px)在2.0ATA和2.5ATA组间,1.5ATA和3.0ATA组间差异均无显著性意义(P>0.05);但是,2.0ATA和2.5ATA组比较1.5ATA和3.0ATA组差异有显著性意义(P<0.05)。结论:HBO-PC可能通过上调抗氧化酶活性减轻局灶性脑缺血-再灌注缺血半暗带的自由基损伤和神经元凋亡,1.5ATA-3.0ATA间为HBO-PC的安全有效压力,发现2.0ATA和2.5ATA压力下HBO-PC抗自由基损伤能力优于1.5ATA和3.0ATA。