rHuIFN—γ对裸鼠异种植物人结肠癌导向治疗的促？…

本文应用＾１３１Ｉ标记的抗人结肠癌单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｓｃ３Ａ及其Ｆ（ａｂ′）２作为导向治疗剂，加ｒＨｕＩＦＮ－γ治疗荷人结肠癌裸鼠获得明显的抑瘤效果。结果表明，ｒＨｕＩＦＮ－γ＋＾１３１Ｉ－Ｓｃ３Ａ ｍＡｂ或＾１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２的抑瘤作用分别为８４．５％和９１．９％，明显优于ＰＢＳ＋＾１３１Ｉ－Ｓｃ３Ａ ｍＡｂ或＾１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２治疗组（分别为６９．６％或６０．５％）；Ｆ（ａｂ′）     

rHuIFN-γ对裸鼠异种移植物人结肠癌导向治疗的促进作用

本文应用１３１Ｉ标记的抗人结肠癌单克隆抗体（ｍＡｂ）Ｓｃ３Ａ及其Ｆ（ａｂ′）２作为导向治疗剂，加ｒＨｕＩＦＮ－γ治疗荷人结肠癌裸鼠获得明显的抑瘤效果。结果表明，ｒＨｕＩＦＮ－γ＋１３１Ｉ－Ｓｃ３ＡｍＡｂ或１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２的抑瘤作用分别为８４．５％和９１．９％，明显优于ＰＢＳ＋１３１Ｉ－Ｓｃ３ＡｍＡｂ或１３１Ｉ－Ｆ（ａｂ′）２治疗组（分别为６９．６％或６０．５％）；Ｆ（ａｂ′）２组优于完整的ｍＡｂ组，提示ＩＦＮ－γ具有良好的导向辅佐作用。上述结果可为临床应用提供重要的实验依据。     

肝癌单克隆抗体HAb18及其F（ab′）2,Fab片段在小鼠体内…

作者对＾１３１Ｉ标记的抗人肝细胞癌单克隆抗体ＨＡｂ１８及Ｆ（ａｂ′）２，Ｆａｂ片段在小鼠体内的药代动力学进行研究，结果表明：（１）３种标记的药代动力学模式有很大差异，完整抗体ＨＡｂ１８的清除过程符合开放一室模型，清除速率与注射剂量有关。按照剂量从高至低，其Ｔ１／２（整体排泄）分别为４８．０８ｈ，４２．６５ｈ，４０．５４ｈ，Ｔ１／２（血液清除）依次为６１．４２ｈ，４８．０７ｈ，４１．０３ｈ。（２）抗     

^131I—抗AFP McAb—MMC“双弹头”导向药物对荷瘤裸鼠的放…

应用双弹头免疫导向治疗药物＾１３１Ｉ－抗ＡＦＰ ＭｃＡｂ ＭＭＣ进行荷人原发性肝癌裸鼠的体内放射免疫显像及放射免疫治疗研究。药物经腹腔给予后，第３ｄ即选择性的定位于肿瘤；第１３ｄ抑瘤率高达８１．５％，远高于单纯＾１３１Ｉ－抗ＡＦＰ ＭｃＡｂ组和ＭＭＣ组，提示该药物对人原发性肝癌细胞的亲和力好、杀伤力强，为其进入临床治疗提供了依据。     

抗rhTNF-α单克隆抗体F(ab′)_2片段的制备

采用胃酶消化抗ｒｈＴＮＦ－αＭｃＡｂ制备了其Ｆ（ａｂ′）２片段。对胃酶消化的时间，酶／抗体的比例及片段回收率等条件做了比较。结果显示，胃酶在ｐＨ４．２于３７℃消化１８ｈ，可制备出完整的Ｆ（ａｂ′）２片段；非还原型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ发现，有９０％以上的ＩｇＧ被降解为Ｆ（ａｂ′）２片段；Ｓ－２００层析柱纯化Ｆ（ａｂ′）２片段的回收率达４５％；双抗体夹心竞争抑制ＥＬＩＳＡ法测定Ｆ（ａｂ′）２片段的竞争抑制效价为２．６×１０７。中和Ｌ９２９细胞毒活性试验的结果表明，１４８ｎｇ的Ｆ（ａｂ′）２片段可中和１个单位ｒｈＴＮＦ－α的细胞毒作用。     

手持式γ探测仪对荷人结肠癌裸鼠放射免疫定位研究

本文以手持式γ探测仪对荷人结肠癌细胞系Ｌｓ１７４Ｔ裸鼠进行体表放射免疫探测，为临床应用放射免疫引导外科手术（ＲＩＧＳ）提供了依据。以人结肠癌细胞系Ｌｓ１７４Ｔ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备ＭｃＡｂＣＬ－３，胃蛋白酶消化法制备ＣＬ－３Ｆ（ａｈ′）２片段，Ｉｏｄｏｓｅｎ法以１２５Ｉ标记ＣＬ－３及其Ｆ（ａｂ′）２。两组荷瘤裸鼠注射标记物后分别于２４、４８、７２、９６、１２０、１４４和１６８ｈ以手持式γ探测仪（ＨＨＧＤ－Ｉ型）进行体表探测，测定Ｔ／Ｎ比值。１２５ＩＣＬ－３组Ｔ／Ｎ比值在１．２２～３．７９之间，第１６８小时最高；１２５ＩＣＬ－３Ｆ（ａｂ′）２组Ｔ／Ｎ比值在２．０～４．５之间，第７２～１４４小时最高。结果表明，荷瘤裸鼠腹注腔射１２５ＩＣＬ－３及１２５ＩＣＬ－３Ｆ（ａｂ′）２后标记物能特异性地浓集于肿瘤组织，以手持式γ探测仪进行体表探测Ｔ／Ｎ比值有明显意义，能明确定位肿瘤。Ｆ（ａｂ′）２用于ＲＩＧＳ裸鼠实验效果优于完整抗体。     

^131I标记肝癌单克隆抗体HAb18F（ab‘）2的NBS法研究

本方研究了以溴代琥珀酰亚胺为氧化剂的＾１３１Ｉ标记肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ‘）２的方法，探讨了反应体系中ＮＢＳ的用量，Ｆ（ａｂ’）２的用量及Ｎａ＾１３１Ｉ活度三个因素对标记率的影响，并从反应机理上予以解释。     

手持式r探测仪对荷人结肠癌裸鼠放射免疫定位研究

本文以手持式ｒ探测仪对荷人结肠癌细胞系Ｌｓ１７４Ｔ裸鼠进行体表放射免疫探测，为临床应用放射免疫引导外科手术（ＲＩＧＳ）提供了依据。以人结肠癌细胞系Ｌｓ１７４免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠制备ＭｃＡｂ ＣＬ－３，胃蛋白酶消化法制备ＣＬ－３Ｆ（ａｂ＇）２片段，Ｉｏｄｏｇｅｎ法以＾１２５Ｉ标记ＣＬ－３及其Ｆ（ａｂ＇）２。两组荷瘤裸鼠注射标记物后分别于２４、４８．７２、９６、１２０、１４４和１６８ｈ以手持式ｒ探测仪     

单克隆抗体放射免疫显像和治疗副反应初探

报告了应用本科研制的＾１３１Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ对肝癌ＲＩＩ ３３例和ＲＩＴ ２４例，给予的＾１３１Ｉ－ＡＦＰ ＭｃＡｂ量分别为ＲＩＩ：７４－１８５ＭＰｑ／ＩｇＧ０．１－１ｍｇ；ＲＩＴ：７４０－２９６０ＭＢｑ／ＩｇＧ０．５－５ｍｇ，治疗前后检测肝、肾功能，白细胞计数，临床观察给药后有无反应。分析结果３３例ＲＩＩ病人，给药后未见不良反应。２４例ＲＩＴ病人，治疗前后白细胞及肝、肾功能未见显著变化，３例     

肝癌单克隆抗体HAb18及其F（ab′）_2、Fab片段在小鼠体内的药代动力学研究

作者对１３１Ｉ标记的抗人肝细胞癌单克隆抗体ＨＡｂ１８及Ｆ（ａｂ′）２、Ｆａｂ片段在小鼠体内的药代动力学进行研究。结果表明：（１）３种标记物的药代动力学模式有很大差异，完整抗体ＨＡｂ１８的清除过程符合开放一空模型，清除速率与注射剂量有关。按照剂量从高至低，其Ｔ１／２（整体排泄）分别为４８．０８ｈ、４２．６５ｈ、４０．５４ｈ；Ｔ１／２（血液清除）依次为６１．４２ｈ、４８．０７ｈ、４１．０３ｈ。（２）抗体片段的清除速率明显快于完整抗体，清除过程呈双相下降，符合二室模型。Ｆ（ａｂ′）。整体排泄的Ｔ１／２ａ为５．２９ｈ，Ｔ１／２β为３９．３７ｈ；血液清除的Ｔ１／２ａ为４．２０ｈ，Ｔ１／２β为３４．６１ｈ。Ｆａｂ片段整体排泄的Ｔ１／２ａ为３．５１ｈ，Ｔ１／２β为２０．２２ｈ；血液清除的Ｔ１／２ａ为１．３９ｈ，Ｔ１／２β为２４．３９ｈ。提示：完整抗体适用于肿瘤导向治疗，显像诊断则以抗体片段为佳。     

~（131）I－抗AFPMcAb－MMC“双弹头”导向药物对荷瘤裸鼠的放射免疫显像和治疗

应用双弹头免疫导向治疗药物１３１Ｉ－抗ＡＦＰＭｃＡｂＭＭＣ进行荷人原发性肝癌棵鼠的体内放射免疫显像（ＲＩＩ）及放射免疫治疗（ＲＩＴ）研究。药物经腹腔给予后，第３ｄ即能选择性的定位于肿瘤；第１３ｄ抑瘤率高达８１．５％，远高于单纯１３１Ｉ－抗ＡＦＰＭｃＡｂ组和ＭＭＣ组（分别为２９．６％和１１．１％），提示该药物对人原发性肝癌细胞的亲和力好、杀伤力强，为其进入临床治疗提供了依据。     

FPLC纯化单克隆抗体（Fab＇）_2片段

作者采用ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换色谱柱，在Ｗａｔｅｒｓ６５０Ｅ快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立了抗肝癌单克隆抗体（ＨＡｂ１８）Ｆ（ａｂ＇）２片段的快速纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ用胃蛋白酶消化１８ｈ后，上阴离子交换色谱柱纯化，用ｐＨ７．５１０ｍｍｏｌ／ＬＰＢ洗脱，即得到纯化的Ｆ（ａｂ＇）２．一次纯化周期仅需２５ｍｉｎ，一次上样量１２０～１６０ｎｇ蛋白，Ｆ（ａｂ＇）２得率为３４％，回收率为５１％。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定纯度大于９５％，免疫荧光法测定活性为１：４０００．该法操作简单、快速、实用性强，不需要高档次的色谱仪，只要有一台核酸／蛋白检测仪便可进行纯化，是实验室纯化Ｆ（ａｂ＇）２的理想方法．     

^131I标记抗人结肠癌单克隆抗体MC3在荷瘤裸鼠体内分布及…

抗人结肠癌单克隆抗体ＭＣ３用＾１３１Ｉ标记后在裸鼠人肠癌模型上进行肿瘤定位和放射免疫显像研究。结果显示：体外标记抗体特异性结合率为３７．５％，裸鼠体内在４８～１２０ｈ的ＥＣＴ照相可见在肿瘤部位均有放射性的特异性浓聚，其摄取量随时间延长逐渐增加，肿瘤显影清晰，显像的合适时间为９６～１２０ｈ。而给予非特异性的＾１３１Ｉ－ＮＭＩｇＧ后，肿瘤部位未见放射性浓聚，而呈全身均匀性分布。１２０ｈ肿瘤组织与肝脏及     

分泌抗CRF单克隆抗体杂交瘤的建立及初步鉴定

采用淋巴细胞杂交瘤技术，获得了５株稳定分泌抗促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）的ＭｃＡｂ杂交瘤细胞株。５株单克隆抗体均为ＩｇＧ２，且均识别ＣＲＦ羧基端。ＥＬＩＳＡ交叉试验结果表明，该ＭｃＡｂ不与ＡＣＴＨ、ＦＳＨ、ＮＰＹ、ＬＨ反应。５株杂支瘤腹水效价在１０－４～１０－５，亲和常数在５×１０７ｍｏｌ／Ｌ－１～１×１０９ｍｏｌ／Ｌ－１。     

重组人红细胞生成素单克隆抗体的制备

本文应用常规淋巴细胞杂交瘤技术制备了４株能稳定分泌抗人重组红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系ＢⅡ１Ｂ５、ＤⅡ６Ｂ９、ＭⅡ１Ｈ４和ＧＩ３Ｅ７。用鼠单克隆抗体分型试剂盒鉴定，其分泌的ＭｃＡｂ的类分别是ＩｇＭ、ＩｇＭ、ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ。间接ＥＬＩＳＡ法测定细胞上清的效价为１×１０－２～１．２５×１０－４，腹水效价为１×１０－２～１×１０－８。培养上清经ＥＬＩＳＡ鉴定，与ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－α等细胞因子均无交叉反应，只与ｒＨｕＥＰＯ特异性结合。     

抗JEV McAb及其F（ab′）2对感染小鼠保护活性的比较

抗ＪＥＶＭｃＡｂ及其Ｆ（ａｂ′）２对感染小鼠保护活性的比较张聚良严鹏飞杨波黄庆生＊马文煜＊刘利兵＊（第四军医大学９３年级学员＊微生物学教研室，西安７１００３２）两株鼠源性抗乙脑病毒（ＪＥＶ）ＭｃＡｂ的临床初步应用已显示出较好的治疗效果。但由于完整的鼠...     

分泌抗rHuIL－6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡｂ效价为１０（－６）～１０（－８）。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＬ－６，敏感性为１００ｐｇ／ｍｌ。初步应用表明可用于临床标本的检测。     

单克隆抗体间接荧光法分型检测单纯疱疹病毒的实验研究

本文选择３株抗单纯疱疹病毒型共同性和型特异性单克隆抗体，建立了分型检测单纯疱疹病毒的单克隆抗体间接荧光法（ＭｃＡｂ－１ＦＡ）．特异性试验和重复性试验证实，ＭｃＡｂ－ＩＦＡ特异性强、重复性好．用此法检测了不同部位来源的５１份临床分离株，分型检测结果与ＥＬＩＳＡ法检测结果一致．提示ＭｃＡｂ－ＩＦＡ有可能成为实验室分型检测单纯疱疹病毒可靠的方法．     

分泌抗人IL—3,IL—5和GM—CSF受体β链人工合成多肽McAb杂交…

制备抗人ＩＬ－３，ＩＬ－５和ＧＭ－ＣＳＦ受体β链人工合成多肽ＤＩ，Ｄ２，Ｄ３和Ｄ４共３９株ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系，并对其分泌ＭｃＡｂ的类与亚类，效价性和上滑的阻断活性进行了初步分析，ＭｃＡｂ上清阻断活性效果提示，至少部分ＭｃＡｂ可与天然的受体β链发生免疫反应，并可能有阻断ＧＭ－ＣＳＦ与β链结合作用，此外，还应用人工合成多肽片段，确定了２３株抗Ｄ１ＭｃＡｂ的大致识别表位，这些ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系的获得     

瘤体内注射IL—2基因后肿瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞的功能分析

将脂质体包裹的ＩＬ－２基因直接注射至Ｂ１６Ｆ１０黑色素瘤瘤体内，研究肿瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）的功能变化。１０ｄ后，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定显示瘤体内注射ＩＬ－２基因后肿瘤细胞及ＴＩＬ中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达阳性；经Ｇ４１８筛选后的肿瘤细胞培养上清中可检测出ＩＬ－２；肿瘤细胞表面表达了较高水平的ＭＨＣＩ类抗原（Ｈ２Ｋ＾ｂＤ＾ｂ）；ＴＩＬ表面粘附分子ＬＡＦ－１表达也明显高于对照组，其