抗单纯疱疹病毒CHA9-3D8单链抗体三维结构的计算机模建和分析

将１株分别来自单纯疱疹病毒ＭｃＡｂ（重链）和出血热病毒ＭｃＡｂ（轻链）的杂化单链抗体基因序列，在ＳＧＩ图形工作站上，利用同源蛋白结构预测的方法，建立起了其三维结构模型，以寻找轻、重链空间结构的相互关系，观察抗体的结构及表面静电性和疏水性的变化。结果表明，杂化链抗体的轻、重链位置得当，轻链参与组成了“疏水口袋”的形成，并有约五分之二的“袋口”部分由其围成，Ｌｉｎｋｅｒ链位置贴切，游离于轻、重链之外。轻、重链的３个超变区围绕于疏水口袋附近。这一研究为进一步分析轻、重链在抗体功能中的作用，以及改造抗体并提高抗体活性等方面提供了一种途径。     

抗人ClqMcAb轻、重链可变区基因的克隆、序列分析及轻链可变区基因的表达（摘要）

抗人ＣｌｑＭｃＡｂ轻、重链可变区基因的克隆、序列分析及轻链可变区基因的表达（摘要）陈克敏，朱锡华应用ＰＣＲ技术，从一株抗人ＣｌｑＭｃＡｂ杂交瘤细胞基因组ＤＮＡ及反转录合成ｃＤＮＡ中，扩增、克隆分别获得抗人Ｃｌｑ轻、重链可变区基因，序列分析表明：抗人Ｃ...     

抗人M和N型GPA特异性单克隆抗体的制备和鉴定

目的：为了建立“血型糖蛋白Ａ（Ｇｌｙｃｏｐｈｏｒｉｎ Ａ,ＧＰＡ）突变分析”技术。方法：采用杂交瘤技术制备单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,结果：获得３株分泌抗ＧＰＡ特异性ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系,这３株ＭｃＡｂ均属于ＩｇＧ２ａ亚类,Ｋａｐｐａ型轻链,其中２株特异笥抗Ｍ型ＧＰＡ,另外１株特异性抗Ｎ型ＧＰＡ。３株ＭｃＡｂ所针对的抗原决定簇位于ＧＰＡ多钛链Ｎ末端第１－３９位氨基酸之内,抗体与其结合依赖糖链的完整性     

亲和层析法纯化肾综合征出血热病毒大鼠单克隆抗体

应用小鼠抗大鼠Ｋａｐｐａ轻链单克隆抗体亲和层析系统，对抗肾综合征出血热病毒大鼠ＭｃＡｂ进行了纯化研究，使用该系统具有ＭｃＡｂ回收率好，纯度高，能较好地保持ＭｃＡｂ免疫学活性，操作，快速，可一步除去腹水中宿主杂蛋白，并能适应不同类别ＭｃＡｂ纯化的特点，此外还对自制盐析纯大鼠Ｋａｐｐａ轻链ＭｃＡｂ柱与进口亲和纯大鼠Ｋａｐｐａ轻链ＭｃＡｂ柱进行了比较和探讨。     

抗角蛋白mAb AK37轻重链可变区基因的克隆及序列分析

一些表皮过度增殖性皮肤病（银屑病和基底细胞癌等）［１ ,２］ ,常发生角蛋白组分的异常变化。本室以往的研究表明 ,抗角蛋白自身抗体 (ＡＫａｕｔｏＡｂ)及抗角蛋白的单克隆抗体 (ｍＡｂ)对这些疾病具有良好的疗效。但由于鼠源性ｍＡｂ用于人体时能诱导人体产生抗鼠抗体（ＨＡＭＡ）［８］,且易引起过敏反应 ,因而限制了其临床应用 ,有必要对其进行人源化改造。为此 ,我们采用反转录ＰＣＲ(ＲＴ ＰＣＲ)方法 ,从分泌抗角蛋白ｍＡｂ的鼠源性杂交瘤细胞中 ,克隆了该ｍＡｂ的轻、重链可变区基因 ,并做了序列分析 ,为进一步研制基因工程抗体奠…     

抗人Ig轻链系列单抗的研制：Ⅲ抗人Ig游离λ型轻链共同抗原决定…

用多例提纯的ＢＪ－λ混合免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Ｓｐ２／０融合，获得３株稳定分泌抗人Ｉｇ游离λ链ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株（ＡＨλＤ８、ＡＨλ１Ｃ１和ＡＨλ２Ｃｌ）。它们分泌的ＭｃＡｂ均能与我室所有１７例ＢＪ－λ起强反应，但不与结合的λ型轻链及Ｋ型轻链反应，表明这３株ＭｃＡｂ可能是抗人Ｉｇ游离λ链共同抗原决定簇的。３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。添加ＥＬＩＳＡ表明它们识别相同的表位。     

PATHOGENICITY AND SEQUENCE ANALYSIS OF A MOUSE MONOCLONAL ANTIBODY AGAINST HUMAN ACETYLCHOLINE RECEPTOR IN MYASTHENIA GRAVIS

通过对乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）自身抗体分子结构以及与致病性关系的研究探讨重症肌无力（ＭＧ）及其动物模型——实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）的发病机理。ＡＣｈＲ抗体被动转移至大鼠后诱导出明显的ＥＡＭＧ。全身肌肉ＡＣｈＲ损失率和体重减轻率达４７．２±１５．３％和１３．４±２．２％。这株ＡＣｈＲ抗体的重链可变区基因由小鼠Ｑ５２胚系基因编码，其同源性为９４．８％，将这株抗体的重链和轻链可变区、尤其是互补决定区（ＣＤＲ）的核苷酸和氨基酸序列与其他致病性ＡＣｈＲ抗体比较发现，能诱导ＭＧ和ＥＡＭＧ的致病性ＡＣｈＲ抗体的结构并不是完全一致的。     

抗人Ig轻链系列单抗的研制Ⅲ抗人Ig游离λ型轻链共同抗原决定簇单克隆抗体的制备和初步鉴定

用多例提纯的ＢＪ－λ混合免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Ｓｐ２／０融合，获得３株稳定分泌抗人屹游离λ链ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株（ＡＨλＤ８、ＡＨλ１Ｃ１和ＡＨλ２Ｃ１）．它们分泌的ＭｃＡｂ均能与我室所有１７例ＢＪ－λ起强反应，但不与结合的λ型轻链及Ｋ型轻链反应，表明这３株ＭｃＡｂ可能是抗人Ｉｇ游离λ链共同抗原决定簇的．３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。添加ＥＬＩＳＡ表明它们识别相同的表位。用于检测正常人血清和尿中的游离λ链及多发性骨髓瘤患者的ＢＪ－λ均具有很好的特异性和敏感性．本文还讨论了有关的免疫问题．     

小鼠BMP—McAb可变区基因的体外扩增,克隆与序列分析

从体外培养的ＢＭＰＭｃＡｂ杂交瘤中提取细胞总ＲＮＡ，反转录成ｃＤＮＡ。以ｃＤＮＡ为模板，利用两对根据免疫球蛋白重链与轻链可变区５′端序列和Ｊ区序列设计合成的引物，通过ＰＣＲ方法，扩增出抗体重链、轻链可变区基因片段（ＶＨ，ＶＬ）。将扩增产物分别克隆入ｐＵＣ１８，ｐＵＣ１９质粒，筛选出阳性克隆，利用双脱氧链终止法进行序列测定，经计算机分析，ＶＨ基因全长为３４５ｂｐ，编码１１５个氨基酸；ＶＬ基因全长为３１５ｂｐ，编码１０５个氨基酸。     

抗HSVgc单克隆抗体V_2基因的扩增、克隆及序列测定

本文从分泌具有高中和活性和高保护作用的抗ＨＳＶ－１／ＨＳＶ－２型共同性糖蛋白Ｃ的鼠源性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞１Ａ１２中提取胞浆总ＲＮＡ，以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１５为引物逆转录合成ｃＤＮＡ，用一对鼠抗体Ｋ链通用引物进行ＰＣＲ，扩增出１Ａ１２ＶＬ基因，并克隆入ｐＵＣ１８质粒中。序列分析结果表明，１Ａ１２ＶＬ基因由３３０ｂｐ组成，编码１１０个氨基酸，隶属小鼠轻链ｋ链４组。     

MOLECULAR COLNING AND SEQUENCE ANALYSIS OF THE IMMUNOGLOBULIN LIGHT

获得抗体的可变区基因是由鼠源性ＭｃＡｂ制备重组抗体的前提，本实验合成 与轻链可变区ＦＲ１和ＦＲ４互补的通用引物，由分泌抗人Ｃ１－ＩＮＨＭｃＡｂ的杂交瘤Ｆ７细胞株提取总ＲＮＡ，经ＲＴ－ＯＰＣＲ扩增出Ｆ７ＶＬ的ｃＤＮＡ片段，并将其克隆入ｐＵＣ１８／１９测序载体，     

MCAb、PcAb不同标记ELISA技术对HBeAg／抗－HBe检测的评估

用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和多克隆抗体（ＰｃＡｂ）进行辣根过氧化物酶标记或生物素标记作酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），检测乙型肝炎病毒ＨＢｅＡｇ／抗－ＨＢｅ标志物。结果显示，ＭｃＡｂ的灵敏性高于ＰｃＡｂ，且标记用的抗体量较少，一孔一期法同时测ＨＢｅＡｇ／抗－ＨＢｅ只能使用ＭｃＡｂ。利用生物素与亲和素系统与ＭｃＡｂ建立的Ｍｃ－ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ技术，其灵敏性与放射免疫法（ＲＩＡ）相同，特异性好，稳定性优于ＲＩＡ。生物素标记抗体至少１年保持效价不变，是一种新的较理想的检测ｅ系统的方法之一。     

人肺癌单克隆抗体3D3重链可变区cDNA克隆及序列测定

人肺癌单克隆抗体３Ｄ３重链可变区ｃＤＮＡ克隆及序列测定史依仁颜江华郭先健白雪峰单克隆抗体（ＭｃＡｂ）在科研及影像诊断等领域应用十分广泛，鼠源性单克隆抗体，对人是异种抗原，使其在人类疾病治疗方面的应用受到限制。利用基因重组技术，可构建各种重组抗体基因，...     

抗转铁蛋白受体单抗可变区基因克隆和序列分析

目的：制备基因工程抗体，减少或消除鼠源性单克隆抗体（ｍＡｂ）在人体内的免疫原性，保留其对人体抗原配体的高度特异性，发展临床导向诊断和治疗，方法：从体外发泌抗转铁蛋白受体ｍＡｂ杂交瘤细胞系７５７９中，对其ｍＡｂ可变区基因进行克隆和序列分析，利用录ＰＣＲ技术扩增轻，重链可变区基因，再分别与ｐＧＥＭ－Ｔ载体连接，并克隆了ＪＭ１０９受体菌之中，利用荧光染色体链终止法测定其序列，采用ＤＮＡＳＩＳ７分析软件和     

间接混合夹心酶免疫试验方法测定风疹病毒抗体心

利用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）特异性强、纯度高、均一性好的特点，将风疹病毒ＭｃＡｂ（Ｒ－ＭｃＡｂ）预先包被在酶标板上，再按间接酶免疫试验程序检测风疹病毒ＩｇＧ（Ｒ－ＩｇＧ）抗体。称此方法为间接混合夹心酶免疫试验（Ｉｎｄｉｒｅｃｔｍｉｘｅｎｚｙｍｅｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓａｙ，ＩＭＥＩＡ），用该法测定不同人群标本２５７份，与常规血凝抑制试验（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，ＨＩＡ）比较，阳性符合率为１００％。     

分泌抗人IL—3,IL—5和GM—CSF受体β链人工合成多肽McAb杂交…

制备抗人ＩＬ－３，ＩＬ－５和ＧＭ－ＣＳＦ受体β链人工合成多肽ＤＩ，Ｄ２，Ｄ３和Ｄ４共３９株ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系，并对其分泌ＭｃＡｂ的类与亚类，效价性和上滑的阻断活性进行了初步分析，ＭｃＡｂ上清阻断活性效果提示，至少部分ＭｃＡｂ可与天然的受体β链发生免疫反应，并可能有阻断ＧＭ－ＣＳＦ与β链结合作用，此外，还应用人工合成多肽片段，确定了２３株抗Ｄ１ＭｃＡｂ的大致识别表位，这些ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系的获得     

分泌抗人IL－3、IL－5和GM－CSF受体β链人工合成多肽McAb杂交瘤细胞系的建立

制备抗人ＩＬ－３、ＩＬ－５和ＧＭ－ＣＳＦ受体β链人工合成多肽Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３和Ｄ４共３９株ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系，并对其分泌ＭｃＡｂ的类与亚类、效价、特异性和上清的阻断活性进行了初步分析。ＭｃＡｂ上清阻断活性结果提示，至少部分ＭｃＡｂ可与天然的受体β链发生免疫反应，并可能有阻断ＧＭ－ＣＳＦ与β链结合作用。此外，还应用人工合成多肽片段，确定了２３株抗Ｄ１ＭｃＡｂ的大致识别表位。这些ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系的获得为进一步研究受体β链的表达与调控、β链的结构与功能以及对于诊断和研究髓样白血病细胞的病理等均有十分重要的意义。     

抗血型糖蛋白A非凝集型单克隆抗体的制备和鉴定

抗红细胞非凝集型抗体是建立“全血免疫分析系统”的必要条件。为此，我们采用小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０和纯化人红细胞膜血型糖蛋白Ａ（ＧＰＡ）免疫的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠的脾细胞融合，获得了一株分泌抗ＧＰＡ非凝集型单克隆抗体的杂交瘤细胞系－３Ｃ５。３Ｃ５分泌的ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１亚类，ｋａｐｐａ型轻链，能够识别和结合红细胞膜的血型糖蛋白Ａ和血型糖蛋白Ｂ（ＧＰＢ），说明其识别的是ＧＰＡ和ＧＰＢ分子所共有的抗原决定族     

抗口腔支原体、精氨酸支原体单克隆抗体的制备及其应用方法的初步研究

用口腔支原体、精氨酸支原体抗原免疫ＢＡＬＧ／ｃ小鼠，取其脾细胞，与小鼠骨髓瘤细胞（Ｓｐ２／０）融合，获得了７株稳定分泌抗口腔支原体单克隆抗体（ＭｃＡｂ），２株分泌抗精氨酸支原体ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。间接ＥＬＩＳＡ测定其抗体效价可达１：１０３～１：１０７；９株ＭｃＡｂ中１株为ＩｇＧ２ａ，其余均为ＩｇＧ１。初步建立了ＥＬＩＳＡ检测支原体的方法。     

抗D型葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的研制及其初步应用

应用小鼠杂交瘤技术获得了５株分泌抗Ｄ型葡萄球菌肠毒素（ＳＥＤ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞（ＤＣ３、ＤＣ４、ＤＢ１１、４Ｄ３和４Ｄ５）。其中４Ｄ３为ＩｇＭ（λ），其余为ＩｇＧ１（ｋ）。这组ＭｃＡｂ除ＤＣ３外，其它４株ＭｃＡｂ识别的抗原构象表位相同，其相亲和力依次为４Ｄ５〉ＤＣ３〉ＤＣ４〉４Ｄ３〉ＤＢ１１。利用抗ＳＥＤ多克隆抗体ＨＲＰ标记的ＤＣ３和４Ｄ３（针对不同表位）混合ＭｃＡｂ建立了夹心ＥＬＩＳＡ法，并