捕食应激致大鼠海马NO释放增多及nNOS表达增强

目的：探讨一氧化氮（NO）在创伤后应激障碍（PTSD）样行为异常大鼠的变化规律，以进一步揭示PTSD的神经生物学机制。方法：在大鼠捕食应激PTSD动物模型基础上，动态检测了大鼠海马、额叶皮层组织匀浆NO、一氧化氮合酶（NOS）含量及神经元型NOS（nNOS)表达。结果：PTSD样行为异常大鼠海马NO含量于捕食应激后即刻明显升高，12h达高峰，24h时仍明显增多；海马nNOS表达亦同步增高，而额叶皮层则无明显改变。结论：严重心理生理应激所致海马nNOS持续性高表达与NO释放明显增多，在实验大鼠持续性PTSD样行为异常中可能有重要作用。     

惊厥阈下电刺激致大鼠海马NO含量及nNOS表达变化

目的　探讨海马一氧化氮 (NO)及NO合酶 (NOS)在惊厥阈下电刺激所致创伤后应激障碍 (PTSD)样行为异常中的可能意义。方法　在大鼠海马惊厥阈下电刺激PTSD动物模型基础上 ,动态检测了大鼠海马、额叶皮层组织匀浆NO、NOS含量及神经元型NOS(nNOS)表达。结果　惊厥阈下电刺激所致PTSD样行为异常大鼠海马NO于电刺激停止后 12h明显升高 [( 4 65± 1 2 2 ) μmol/gprotein ,P <0 0 1] ,2 4h达高峰 [( 6 44± 1 5 3 ) μmol/gprotein ,P <0 0 1] ,72h时仍明显增多[( 3 17± 0 91) μmol/gprotein ,P <0 0 5 ] ,海马nNOS表达亦同步增高 ,而海马NOS仅轻度短期增高 ,额叶皮层nNOS则无明显改变。结论　海马结构nNOS持续性高表达与NO含量明显增多 ,在惊厥阈下电刺激所致实验大鼠PTSD样行为异常中可能有重要意义     

创伤后应激障碍行为异常大鼠海马钙／钙调素依赖性蛋白激酶11α表达

目的：探讨创伤后应激障碍（PTSD）样精神与行为异常的神经生物学机制。方法：在大鼠海马惊厥阈下电刺激PTSD动物模型基础上，采用流式细胞仪、荧光标记术及Western blotting等方法，定量观测了PTSD样行为异常大鼠海马细胞内游离Ca^2 含量与钙调素（CaM)相对活性平均通道荧光，及海马组织总CaM、Ca^2 ／CaM依赖性蛋白激酶IIα（CaMKIIα）表达的动态变化规律。结果：电刺激停止后72h内阈下刺激组实验动物海马细胞内游离钙浓度明显增高，游离CaM平均通道荧光则同步降低；而海马组织总CaM表达于电刺激停止后48h内明显增多，CaMKIIα表达则显著降低。结论：海马细胞Ca^2 -CaM-CaMKIIα信号途径调控紊乱可能是实现动物长时程PTSD样行为异常的重要病理生理基础之一。     

大鼠创伤后应激障碍模型的建立及其海马糖皮质激素受体的变化

目的 建立较理想的创伤后应激障碍（PTSD）动物模型，并初步探讨脑组织糖皮质激素受体（GR）变化规律。方法 采用频率25Hz、波宽1ms、串长10s、串隔7min、强度100μA的恒流、单脉冲电流，反复刺激大鼠海马建立PTSD模型，观察实验情感行为改变；并利用Western blot法检测脑组织GR.要通过反复惊厥阈下电刺激海马，成功诱发了实验动物较长时程 明显活动习性改变、警觉水平增高、惊恐行为、环境适应能力下降、射藏逃避反应等多种PTSD样情感行为障碍；电刺激停止后1周内海马GR表达明显增高。结论 海马惊厥下电刺激可基本满足PTSD主要临床表现，而海马结构GR持续高表达可能直接参与了PTSD持续性精神行为障碍和发生发展过程。     

不同运动负荷对大鼠海马组织NGF和nNOS表达的影响及其意义

目的:探讨不同运动负荷对大鼠海马组织神经生长因子(NGF)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响及机制,为运动干预脑健康及预防脑老化研究奠定基础.方法:40只Wistar雄性大鼠随机分为不进行运动干预的对照组和每天进行15、30和60 min的小、中、大游泳运动负荷的实验组,实验8周后取大鼠脑组织,免疫组织化学S-...     

创伤后应激障碍大鼠海马和杏仁核中神经元凋亡及Caspase-9的表达及其意义

目的:探讨创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马和杏仁核神经元凋亡及Caspase-9表达水平的变化,阐明PTSD大鼠海马与杏仁核体积异常的原因。方法:将100只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(20只)和PTSD组(80只),利用改良的单一连续应激(SPS&S)制作PTSD大鼠模型。采用Morris水迷宫实验和僵立行为实验检测大鼠行为学表现;TUNEL方法检测大鼠海马和杏仁核神经元凋亡阳性细胞率;流式细胞术(FCM)检测大鼠海马和杏仁核神经元凋亡率;Western blotting法检测大鼠海马和杏仁核中Caspase-9表达水平。结果:PTSD组大鼠逃避潜伏期(EL)和僵立行为百分比显著高于对照组(P<0.05);PTSD后1、4、7和14d大鼠海马和杏仁核TUNEL阳性细胞和凋亡率高于对照组(P<0.05),28d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);PTSD后1、4、7和14d大鼠海马和杏仁核Caspase-9表达水平高于对照组(P<0.05),28d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PTSD大鼠海马和杏仁核神经元凋亡增加,Caspase-9表达水平上调,提示其凋亡可能是引起海马与杏仁核体积异常的原因之一。     

丝胶对2型糖尿病大鼠海马nNOS表达的作用

目的:探讨丝胶对2型糖尿病大鼠海马神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的作用.方法:小剂量链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,并给予丝胶灌胃.SP免疫组化染色观察海马神经元nNOS的表达.结果:nNOS免疫阳性产物呈棕黄色细腻颗粒状,位于海马神经元的胞浆.与正常对照组大鼠相比,糖尿病模型组大鼠海马神经元nNOS的表达明显升高(P＜0.01),丝胶治疗组大鼠海马神经元nNOS的表达明显低于糖尿病模型组(P＜0.01).结论:丝胶可通过下调糖尿病大鼠海马nNOS的表达,减轻过量一氧化氮导致的神经毒性,发挥对海马的保护作用.     

血管性痴呆小鼠海马NOS活力和nNOS蛋白表达的改变

目的:观察血管性痴呆(VD)小鼠海马内一氧化氮合酶(NOS)的活性和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的表达,探讨VD的发生机制. 方法:复制小鼠VD模型,利用Y-迷宫检测VD模型小鼠学习记忆能力,采用NADPH-d组织化学和nNOS免疫组织化学方法,研究VD小鼠与正常小鼠海马NOS和nNOS阳性神经元数量的变化. 结果:VD小鼠比正常小鼠Y-迷宫学习记忆训练次数明显增多,差异有显著性(P<0.01);海马CA1区NOS和 nNOS阳性神经元的数量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05). 结论:VD的发生可能与海马NOS和 nNOS阳性神经元的数量增多有关.     

电针对帕金森病模型大鼠海马CA1区nNOS表达的影响

目的:观察不同频率电针对帕金森病(PD)模型大鼠海马CA1区神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、PD模型低频电针组和高频电针组。采用右侧纹状体内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)制备PD模型,取合谷和太冲穴,分别给予低频(2 Hz)和高频(100 Hz)电针治疗。免疫组织化学方法观察海马CA1区nNOS表达。结果:与正常对照组相比,PD模型大鼠海马CA1区nNOS表达增加,高频电针可降低其nNOS表达,低频电针对其没有影响。结论:高频电针治疗PD的机制之一可能是通过降低PD模型大鼠海马CA1区nNOS表达。     

慢性综合应激对大鼠海马CA3区nNOS和BDNF表达及行为学表现的影响

目的：观察慢性综合应激引起的大鼠海马CA3区的病理变化及相应的行为学改变，探讨抑郁的发病机制。方法：观察在应激的不同时程内，Wistar大鼠海马CA3区神经元型一氧化氮合成酶(nNOS)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的动态变化，同时观察大鼠行为学改变。结果：经慢性应激11d，海马CA3区nNOS蛋白表达增加，BDNF蛋白表达减少，探究行为减少，修饰行为受到抑制，排便量增加；应激21d，nNOS蛋白表达有逐渐降低的趋势，BDNF蛋白表达几乎消失，大鼠表现为抑郁状态。结论：慢性综合应激可能通过损伤大鼠海马引起大鼠的抑郁状态，提示脑损伤可能在抑郁发病机制中起重要作用，保护脑组织应成为抑郁新的治疗靶。     

糖尿病大鼠神经病理疼痛增强脊髓神经型一氧化氮合酶的表达

目的观察糖尿病大鼠神经病理性疼痛形成时脊髓神经型一氧化氮合酶（nNOS）表达的变化。方法60只SD大鼠,随机
分为糖尿病神经病理性疼痛大鼠组（DM组）和空白对照组（C组）,n=30。DM组大鼠采用腹腔注射链尿佐菌素（STZ,60 mg/kg）
诱导糖尿病神经病理性疼痛,C组则注射等剂量的溶剂。于注射STZ前、注射STZ后2、7、14、21、28 d（T1~6）取尾静脉血测定血
糖;于T1、T3~6时用von Frey丝测定50%缩足反应阈值（PWT）并测量大鼠体质量;分别于T1、T3~6时处死各组6只大鼠,采用免疫印
迹的方法检测大鼠脊髓nNOS的表达。结果与C组相比,DM组大鼠注射STZ后血糖显著增高（P<0.01）,体质量逐渐下降（P<
0.05）;DM组大鼠于T4~6时PWT明显低于C组（P<0.05）;DM组大鼠脊髓的nNOS的表达于T4~6时明显较C组增强（P<0.05）;DM
组大鼠脊髓nNOS的表达与其PWT呈明显的负相关（P<0.01）。结论糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓nNOS表达增强,可能参
与其疼痛的形成。
     

电针对慢性应激大鼠顶皮质和丘脑网状核神经元型一氧化氮合酶表达的影响

目的:观察电针(electroacupuncture,EA)对慢性应激大鼠顶皮质和丘脑网状核(thalamic reticular nucleus,TRN)神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法:连续21d给予大鼠各种应激性刺激,并予21d电针治疗,应用免疫组化方法观察慢性应激对大鼠顶皮质和TRN内nNOS的表达,并观察电针治疗后nNOS表达的变化。结果:模型组大鼠顶皮质内nNOS的表达减弱,而TRN内的表达增强;电针后顶皮质内nNOS的表达增强,而TRN内nNOS的表达减弱。结论:电针可调节nNOS在大鼠顶皮质和TRN内的表达。     

JNK信号通路在异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡的作用

目的 探讨c-Jun氨基末端激酶(the c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路对异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡以及对磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 48只出生后7d(Py7)的新生大鼠按照随机数的方法随机均分为DMSO对照组(D组)、JNK抑制剂SP600125对照组(SP30组)、异氟醚+DMSO组(Iso+D组)和异氟醚+SP600125组(Iso+ SP30组).对照组吸入空气,异氟醚组吸入1.1％异氟醚4h.麻醉前20 min,幼鼠根据分组分别侧脑室注射SP600125 30 μg或者12％ DMS0 5μl.麻醉结束后6h,部分幼鼠灌注取脑,TUNEL荧光染色检测脑海马CA1区神经细胞凋亡(n=6);部分幼鼠取新鲜脑皮质,Western blotting法检测磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的变化(n=6).组间资料的比较采用单因素方差分析.结果 幼鼠海马CA1区的TUNEL阳性细胞数比较,Iso+D组[(135.72±21.26)个/mm2]比D组[(24.07±1.35)个/mm2]增加5倍(P＜0.01);与Iso+D组相比,Iso+ SP30组[(42.49±5.56)个/mm2] CA1区的TUNEL阳性细胞数降低了84％ (P＜0.05).Iso+D组磷酸化JNK P46表达比D组增加44.1％ (P＜0.01),而Iso+ SP30组显著降低了磷酸化JNK P54 (p＜ 0.05)和P46(P＜ 0.01)的表达.Iso+D组Bax表达比D组增加1.5倍(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达比D组下降42.2％ (P＜0.05);而Iso+ SP30组Bax表达下降(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P＜0.01).D组与SP30组TUNEL阳性细胞数,磷酸化JNK,Bcl-2和Bax蛋白表达差异均无统计学意义.结论 JNK信号通路激活促进了异氟醚诱导发育期大鼠海马神经细胞凋亡,SP600125通过维持Bcl-2,降低Bax表达产生抑制凋亡作用.     

高脂饮食对大鼠大脑皮质神经元型一氧化氮合酶表达的影响

目的观察高脂饮食对大脑皮质神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法雄性SD大鼠60只,随机分为实验组和对照组(n=30);分别于高脂饲料喂养7 d,30 d,90 d时处死动物,测定血清总胆固醇浓度,免疫组织化学法检测nNOS表达,光镜下计数免疫阳性神经元数目。结果高脂饮食7 d,实验组血清总胆固醇浓度、大脑皮质nNOS表达和免疫阳性神经元数目与对照组比较无显著差异(P>0.05);高脂饮食30 d、90 d时,实验组血清总胆固醇浓度显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),大脑皮质nNOS表达与免疫阳性神经元数目显著增多(P<0.05,P<0.01)。结论高脂饮食可导致大脑皮质nNOS免疫阳性神经元数目增多,nNOS表达增强,nNOS可能在高脂血症导致脑皮质损伤中发挥作用。     

实验性血管痉挛中内皮一氧化氮合酶的基因表达

目的　研究内皮 eNOS基因表达与兔实验性血管痉挛的关系。方法　将16只兔随机分成内皮剥脱+普通饮食组（n=8）和内皮剥脱+胆固醇饮食组（n=8）。血管造影观察球囊内皮剥脱前后以及普通饮食和高胆固醇饮食喂养8周后麦角新碱诱发血管痉挛情况。原位杂交和Northern　bloting法定位和定量检测各组血管eNOS　mRNA表达情况。结果　血管造影显示,内皮剥脱+胆固醇饮食组可诱导出局限性血管痉挛。原位杂交显示eNOS　mRNA定位在血管内皮细胞胞浆,痉挛血管节段内皮细胞内表达减少,Northern bloting法定量显示痉挛血管节段eNOS　mRNA相对表达量较其他组明显减少。结论　高胆固醇和内皮剥脱使eNOS基因转录和翻译下调,血管内皮eNOS　mRNA表达降低可能与实验性血管痉挛的诱发高度相关。     

补阳还五汤对脑缺血大鼠nNOS免疫阳性神经元的影响

目的探讨补阳还五汤对大鼠持续性局灶性脑缺血后脑组织内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元表达的影响。方法动物分为正常对照组,模型对照缺血1、4、10h组,补阳还五汤预处理缺血1、4、10h组。局灶性脑缺血模型由线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO)制成,免疫组化SABC法测定大鼠脑缺血后,不同脑区在不同时间段的nNOS免疫阳性神经元表达的变化。结果缺血侧各脑区内nNOS免疫阳性神经元表达较正常对照组升高(P<0.05),随时间延长而递增,在大脑皮层纹状区与尾壳核表达增加程度最高。补阳还五汤预处理缺血4、10h组大脑皮层纹状区nNOS免疫阳性神经元表达(170.80±21.71、189.20±18.53)比模型组同时段表达(244.60±12.44、363.00±24.82)显著性降低(P<0.05);补阳还五汤预处理缺血1、4、10h组尾壳核nNOS免疫阳性神经元表达(127.33±19.83、215.20±38.80、191.20±22.39)比模型组同时段表达(138.67±13.99、266.40±29.25、373.20±31.55)显著性降低(P<0.05)。早期即起效,并随缺血时间延长而递增。结论提示补阳还五汤能抑制缺血后脑组织内早期nNOS活性的升高,对缺血后脑组织具有早期保护作用。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠脑神经型一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠脑神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase, nNOS)表达的影响.方法:将SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、牛珀至宝微丸组.模型组静脉注射内毒素脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)1.5 mg/kg、腹腔注射D-氨基半乳糖(D-galactosamine, D-GalN)100 mg/kg造成内毒素休克模型,牛珀至宝微丸组用药7 d后再作以上处理.用免疫组织化学方法检测各组nNOS在不同脑区的表达.结果:nNOS阳性细胞广泛分布于大脑皮质Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ层,海马分子层,齿状回多形层,脑干网状结构,小脑分子层、颗粒层和普尔基涅细胞层.在大脑皮质、海马、脑干及小脑各部位,牛珀至宝微丸组的nNOS阳性细胞数略高于正常对照组,但明显低于模型组(P<0.05).结论:牛珀至宝微丸有部分下调内毒素休克所致广泛脑区nNOS过度表达的作用.