STZ-糖尿病大鼠晶状体上皮细胞HSP70的表达及增殖、凋亡的动态研究

目的　通过动态观察 STZ-糖尿病大鼠晶状体上皮细胞中 HSP70表达、增殖、凋亡的情况 ,探讨 HSP70表达及增殖、凋亡在糖尿病性白内障发生发展中的作用。　方法　 SD大鼠 1 2 0只随机分为两组 :正常对照组与白内障组。用链脲佐菌素 (STZ)诱发糖性白内障 ,每周观察晶状体的变化 ;在实验开始后 2周末、4周末、8周末 ,分别取眼球 ,采用 DNA缺口末端标记技术 (TUNEL 法 )检测晶状体上皮细胞(L EC)凋亡、免疫组织化学 SP二步法检测热休克蛋白 - 70(HSP70 )和增殖细胞核抗原 (PCNA)在 L EC中的表达。　结果　 (1 )正常组大鼠晶状体一直保持透明 ;白内障组约在第2周末出现空泡 ,第 4周末出现絮状混浊 ,第 8周末混浊进一步加重。 (2 )白内障组 L EC中 HSP70、PCNA阳性表达率增加 ,而细胞凋亡率下降 ,与正常组差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ;随着白内障病程的发展 ,白内障组的 L EC中 HSP70、PCNA表达逐渐增多 ,而细胞凋亡率逐渐降低 ,各时间段间阳性表达率差异有显著性 (P<0 .0 5 )、(3)在白内障发展过程中 ,HSP70与 PCNA的表达变化呈正相关 (P <0 .0 1 ) ,HSP70与凋亡率的变化呈负相关 (P<0 .0 1 )。　结论　在糖性白内障的发生过程中 ,细胞增殖与凋亡普遍存在 ,共同介导糖性白内障的发生、发展 ;同时 ,HSP70在 L EC     

鼻咽癌放疗残灶中HSP70/HSP27蛋白的表达

目的：分析鼻咽癌原发组织HSP70/HSP27蛋白表达与放疗残灶的相关性,探讨HSP70/HSP27表达对鼻咽癌放疗残灶的预测价值。方法：应用SP免疫组织化学法检测58例鼻咽癌原发组织HSP70/HSP27热休克蛋白表达,其中规范放疗后有残存癌灶的28例鼻咽癌为实验组,随访5年无癌灶复发的30例为对照病例。结果：HSP70和HSP27在实验组阳性表达率分别为92.9％(26/28)和53.6%(15/28),而在对照组的阳性表达率为53.3％(16/30) 和53.3%(16/30),HSP70阳性表达率在两组间比较有统计学差异(P<0.05),而HSP27阳性表达率在两组间比较无统计学差异(P>0.05);HSP70和HSP27在实验组共同阳性表达率为50.0%(14/28),对照组为16.7%(5/30),两者比较有统计学差异(P<0.05);两者共同阴性表达率在实验组和对照组分别为3.6%(1/28) 和10.0%(3/30),两者相比无统计学差异（P>0.05）。结论：HSP70在鼻咽癌抗放射损伤中可能起重要作用,检测鼻咽癌组织HSP70蛋白表达对预测鼻咽癌放射后癌灶残存可能有重要价值。     

热休克蛋白70和热休克蛋白27在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)和热休克蛋白27(HSP27)在宫颈鳞癌中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学方法检测HSP70、HSP27在60例宫颈鳞癌,18例宫颈上皮内瘤变(C IN),7例正常宫颈组织中的表达。结果宫颈鳞癌组织中HSP70,HSP27阳性表达率与正常宫颈组织相比差异有统计学意义(P<0.05);宫颈鳞癌中HSP70的阳性表达与病理分级、临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),HSP27的阳性表达与病理分级密切相关(P<0.05);HSP70与HSP27在宫颈鳞癌中的表达无相关关系(P>0.05)。结论HSP70、HSP27均在宫颈鳞癌发生和发展中起重要作用,HSP70可能作为判断宫颈癌预后的重要指标。     

热休克蛋白（HSP70、HSP27）在食管癌组织中表达的意义

目的：探讨HSP70和HSP27在食管癌组织中的表达情况。方法：采用SP免疫组织化学染色检测59例食管癌组织中HSP70和HSP27。结果：HSP70和HSP27的总阳性率分别为64.41%(38/59)和58.62%(34/58)，HSP70和HSP27的共同阳性率为30.00%(9/30)。结论：在食管癌中HSP70和HSP27普遍表达。     

大肠腺癌中HSP27和MMP9的表达及意义

目的观察大肠腺癌中HSP27和MMP9的表达情况。方法选择手术切除结直肠腺癌标本62例,并取20例癌旁正常大肠黏膜组织标本作对照,采用SP免疫组化方法检测HSP27和MMP9的表达。观察大肠腺癌组和对照组中HSP27、MMP9的表达;大肠腺癌组中年龄、性别、肿瘤直径、组织学类型、淋巴结转移以及Dukes分期与HSP27、MMP9表达的关系。结果大肠腺癌组的HSP27、MMP9表达均显著高于对照组(P<0.01)。在中低分化腺癌和存在淋巴结转移患者的HSP27、MMP9表达显著高于高分化和无淋巴结转者(P<0.05或0.01);HSP27与MMP9在大肠腺癌中的表达无显著性差异(P>0.05)。结论 HSP27和MMP9在大肠腺癌的发生、分化、浸润、转移中起协同作用。     

HSP70在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在妊娠期高血压疾病产妇胎盘组织中的表达及其在发病中的作用.方法70例妊娠期高血压疾病产妇为妊娠期高血压疾病组(其中妊娠期高血压组20例、轻度子疒间前期组20例、重度子疒间前期组30例),另选同期健康产妇30例为对照组,用免疫组织化学法(SP法)检测胎盘组织中HSP70表达水平并进行比较.结果①妊娠期高血压疾病组和对照组胎盘组织中都有HSP70表达,主要位于胎盘合体滋养细胞和血管内皮细胞,表达部位为胞质.②合体滋养细胞HSP70表达:妊娠期高血压组、轻度子疒间前期组、重度子疒间前期组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),重度子疒间前期组与轻度子疒间前期组(P<0.05)、妊娠期高血压组(P<0.01)比较差异有统计学意义.③血管内皮细胞HSP70表达:妊娠期高血压组、轻度子疒间前期组、重度子疒间前期组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),重度子疒间前期组与妊娠期高血压组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 HSP70在妊娠期高血压疾病产妇胎盘组织中表达增强,HSP70可能在妊娠期高血压疾病的病理生理过程中起一定作用.     

HSP27、70、90在胃癌中的表达及意义

目的 探讨热休克蛋白27(HSP27)、70、90及其mRNA在胃癌、癌旁组织、慢性胃炎和正常胃粘膜组织中的表达情况,及与临床、病理资料之间的关系.方法 采用组织芯片技术、免疫组织化学方法检测病理诊断明确的60例胃癌组织标本及对应的距胃癌组织边缘1.5cm处的癌旁组织、距胃癌组织边缘5cm以上的正常组织以及胃炎组织中HSP27、70、90的表达差异,RT-PCR法对10例患者的胃癌组织及对应的癌旁组织、慢性胃炎组织和正常组织的HSP27、70、90mRNA的表达情况进行检测,结合临床病理资料进行统计分析.结果 HSP27、70、90的表达:在60例胃癌组织中的阳性表达率为73.3%、75%、71.7%,明显高于癌旁组织(p<0.01)、胃炎组织(p<0.01)和正常组织(p<0.01);在mRNA水平,胃癌组织的HSP27、70、90表达也明显高于其余3组(P<0.001).HSP27、70、90的表达与病人年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无明显相关性(P>0.05);与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性(P<0.05).结论 胃癌中HSP27、70、90的表达水平明显高于癌旁组织、胃炎组织和正常组织,提示与胃癌发生、发展密切相关; 而且与病人年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无明显相关性;与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性;HSP27、70、90之间具有相关性.     

αA晶体蛋白基因启动子与HSP70融合基因对大鼠半乳糖性白内障的抑制作用

目的通过观察αA晶体蛋白基因启动子（αACP）与HSP70基因的融合基因表达载体（即pαACP-HSP70）对大鼠半乳糖性白内障的抑制作用,了解外源性HSP70在白内障发生发展中的作用。方法颈背部皮下注射D-半乳糖建立半乳糖性白内障大鼠模型;利用多价阳离子脂质体法包裹表达质粒,球后注射质粒到半乳糖性白内障大鼠眼部。裂隙灯观察大鼠晶状体混浊度的变化。通过荧光显微镜直接观察绿色荧光蛋白基因（EGFP）的表达。结果半乳糖＋α-70组、半乳糖＋HSP70组和半乳糖＋EGFP组均可直接观察到大鼠晶状体上皮细胞中有绿色荧光,且半乳糖＋α-70组荧光强度最强,与半乳糖＋HSP70组、半乳糖＋EGFP组有统计学意义（P〈0.05）,NS组与半乳糖＋NS组未见绿色荧光蛋白表达;半乳糖＋α-70组白内障出现的程度与同期的半乳糖＋NS组、半乳糖＋EGFP组及半乳糖＋HSP70组相比明显减轻（P〈0.05）,并且其所出现白内障的时间亦延迟（P〈0.05）。结论 pαACP-HSP70融合基因能在大鼠晶体上皮细胞内表达;外源HSP70可能起到延缓白内障发生和发展的作用。     

HSP70与TNF-α在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理分期关系的研究

目的:探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系?方法:采用RT-PCR以及Western blot技术检测对比40 例甲状腺癌组织?20例甲状腺良性病变组织以及15例正常甲状腺组织中HSP70?TNF-α的表达情况,并分析HSP70表达水平与甲状腺癌临床病理学特征的关系?结果:3组人群组织中HSP70 mRNA水平比较差异有统计学意义(P < 0.001),甲状腺癌组织中HSP70 mRNA水平显著高于正常甲状腺组织以及甲状腺良性病变组织(P均< 0.05);HSP70 mRNA的表达水平与甲状腺癌组织病理分级显著相关(rs = 0.810,P < 0.05);甲状腺癌组织中HSP70 蛋白水平显著高于正常甲状腺组织(P < 0.05);3组人群组织中TNF-α mRNA水平比较差异有统计学意义(P < 0.05),甲状腺癌组织中TNF-α mRNA水平显著高于正常甲状腺组织以及甲状腺良性病变组织(P均< 0.05)?结论:HSP70?TNF-α在甲状腺癌组织中的表达升高,且HSP70与甲状腺癌组织病理分级明显相关,提示HSP70在甲状腺癌发生发展中发挥重要的作用?     

HSP70、HSP90在肾细胞癌中的表达及其临床意义

目的 分析HSPT0、HSP90在肾细胞癌组织中表达的意义.方法 用免疫组化S-P法检测32例肾细胞癌组织标本中HSP70、HSP90的表达情况.结果 肾细胞癌组织中HSP70、HSP90表达阳性率分别为90.6%(29/32)、84.4%(27/32),明显高于正常肾组织,差异有统计学意义(P<0.05);但其表达程度与肾细胞癌临床分期及细胞类型无明显相关性(P>0.05).结论 HSPT0、HSP90高表达在肾细胞癌的发生、发展中具有促进作用.     

HSP27基因的克隆与表达

目的构建热休克蛋白27(Heat shock protein 27,HSP27)真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应(ischemia Preconditioning,IP)的作用及机制研究.方法利用乳腺癌细胞系MCS-7,用RT-PCR方法扩增HSP27全长基因,将HSP27基因克隆到真核表达载体pAAV-MCS中.重组质粒转染NIH3T3细胞,Western blot法鉴定重组质粒HSP27/pAAV-MCS能在哺乳动物细胞中正确表达.结果RT-PCR方法正确地扩增出全长HSP27基因.限制性内切酶酶切和测序结果证实HSP27基因克隆完全正确.重组质粒转染哺乳动物细胞系NIH3T3后,ECLWestern blot法证实了目的基因能在其中正确表达.结论成功地克隆真核表达重组质粒HSP27/pAAV-MCS,为下一步研究HSP27对肾脏缺血预适应的作用及其机制打下了基础.     

热休克蛋白10和热休克蛋白的60表达、纯化及与线粒体DNA转录因子A相互结合

目的:表达、纯化热休克蛋白10(Hsp10)和热休克蛋白60(Hsp60),研究人类线粒体DNA转录因子A(TFAM)在体外与Hsp10,Hsp60间的相互交联作用。方法:使用Escherichia.Coli(E.coli)诱导表达含有6个组氨酸标记的Hsp10和Hsp60,镍离子鳌合树脂分离纯化后,体外分别与纯化TFAM共育,抗-TFAM抗体免疫沉淀,SDS-PAGE分离蛋白,CBB探测分析。结果:Hsp10可在体外与TFAM发生免疫共沉淀,Hsp60不能。结论:Hsp10可能为TFAM-复合体组分。     

热休克蛋白10和热休克蛋白60的表达、纯化及与线粒体DNA转录因子A相互结合

目的:表达、纯化热休克蛋白10(Hsp10)和热休克蛋白60(Hsp60),研究人类线粒体DNA转录因子A(TFAM)在体外与Hsp10,Hsp60间的相互交联作用.方法:使用Escherichia.Coli(E.coli)诱导表达含有6个组氨酸标记的Hsp10和Hsp60,镍离子鳌合树脂分离纯化后,体外分别与纯化TFAM共育,抗-TFAM抗体免疫沉淀,SDSPAGE分离蛋白,CBB探测分析.结果:Hsp10可在体外与TFAM发生免疫共沉淀,Hsp60不能.结论:Hsp10可能为TFAM-复合体组分.     

HSP70在肾脏缺血预适应中的作用

目的 探讨缺血预适应对肾脏HSP70表达的影响.方法 大鼠3个循环的2min缺血加5min再灌注缺血预适应模型,免疫组化观察在体肾脏HSP70的表达.结果 缺血预适应后肾脏HSP70的表达显著升高.结论 缺血预适应可升高缺血再灌注损伤后肾脏HSP70的表达,改善肾功能.     

HSP90表达对乳腺癌细胞侵袭转移能力的影响

目的研究HSP90的表达与乳腺癌细胞侵袭转移能力的相关性.方法采用RT-PCR和Western blot检测HSP90在MDA-MB-435s和MDA-MB-231细胞中mRNA水平和蛋白质水平的表达差异.Transwell小室人工重组基底膜侵袭迁移实验检测经HSP90抑制剂Geldanamycin(GA)处理前后两株细胞侵袭迁移能力的改变.结果MDA-MB-435s细胞中HSP90α的mRNA表达水平明显高于MDA-MB-231细胞(P＜0.01),MDA-MB-435s和MDA-MB-231细胞中HSP90β的mRNA表达水平没有明显差异(P＞0.05),MDA-MB-435s细胞中HSP90的蛋白质表达水平明显高于MDA-MB-231细胞(P＜0.01).两株细胞用药前侵袭迁移能力无明显差异(P＞0.05),HSP90的抑制剂GA对MDA-MB-435s和MDA-MB-231细胞的侵袭迁移能力均呈现明显抑制作用(P＜0.01,P＜0.05),对MDA-MB-435s细胞的抑制作用更明显(P＜0.01).结论HSP90的表达影响乳腺癌细胞侵袭转移能力.     

亚低温对大鼠弥漫性脑损伤后海马CA3区HSP70表达及细胞凋亡的影响

目的观察亚低温对大鼠弥漫性脑损伤(DBI)后海马CA3区HSP70在蛋白质和mRNA水平表达及细胞凋亡的影响,探讨亚低温脑保护的分子生物机制.方法将大鼠随机分成空白对照、假手术、单纯DBI和DBI后亚低温治疗4组,按Marmarou氏方法制作大鼠DBI模型,分别采用免疫组化法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及流式细胞仪(FCM),观察各组动物脑海马CA3区HSP70在蛋白质和mRNA水平的表达及细胞凋亡率.结果与对照组相比,大鼠DBI后海马CA3区HSP70表达水平及细胞凋亡率均升高(P＜0.05).亚低温治疗后,大鼠脑海马CA3区HSP70表达水平较单纯DBI组显著增高(P＜0.01),而细胞凋亡率降低(P＜0.05).结论亚低温对创伤性脑损伤的脑保护机制可能与促进HSP70表达并减少神经细胞凋亡有关.     

抗中性粒细胞胞浆抗体在小儿过敏性紫癜及其早期肾损害的临床意义

目的 :了解抗中性粒细胞胞浆抗体 (ANCA)在小儿过敏性紫癜 (HSP)的阳性率 ,探讨ANCA与HSP早期肾损害的关系。方法 :对 48例HSP患儿在急性期用间接免疫荧光法 (IIF)和酶联免疫吸附试验 (ELISA)进行血清ANCA检测 ,将 48例分为ANCA阳性组及ANCA阴性组 ,同时检测患儿尿微量白蛋白 (Alb)及尿α1 微球蛋白 (α1 Mg) ,比较AN CA阳性组及ANCA阴性组的肾脏损害与ANCA的相关性。结果 :48例HSP患儿ANCA阳性 15例 ( 3 1 2 5 % ) ,其中核周型 (P ANCA) 9例 ,胞浆型 (C ANCA) 6例。ANCA阳性组肾损害明显高于ANCA阴性组 (P <0 0 1)。结论 :ANCA测定对HSP诊断有一定的临床价值 ,其活动性与HSP早期肾损害密切相关。     

胰腺癌组织中HSP90和IGF-1R的表达及临床意义

目的探讨热休克蛋白90（HSP90）和胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）在胰腺癌中表达与胰腺癌生物学特性间的相互关系。方法应用免疫组织化学Envision两步法检测45例胰腺癌组织及20例癌旁正常组织中HSP90和IGF-1R的表达情况。结果胰腺癌组织中HsP90与IGF-1R表达率分别为73．3％（33／45）、62．2％（28／45）。显著高于癌旁正常胰腺组织的表达20％（4／20）、10．0％（2／20）（P〈O．01）,二者均与组织分化程度呈负相关（P〈0．01）。与淋巴结转移及临床分期呈正相关（P〈0．01）,两者表达也呈正相关（r=0．670,P〈0．01）。结论HSP90和IGF-1R在胰腺癌组织中均高表达,与癌旁正常组织有显著差异（P〈0．01）,两者表达也呈正相关（r=0．670,P〈0．01）,两者在胰腺癌的发生发展过程中起重要作用。