Ziehl-Neelsen抗酸染色的改良体会

正随着病理学技术的不断完善和发展,许多疾病的诊断有了新的方法和途径,但结核病和麻风病的诊断金标准仍为抗酸染色法,特异显示病灶中抗酸染色阳性的抗酸杆菌。目前,实验室常用抗酸染色法为Ziehl-Neelsen法,但在实践工作中,不同医院在抗酸染色法操作及结果上存在较大差异,阳性率也较低,给诊断造成了一定困难。为此,作者在实践中总结经验,对一些操作细节进行了改良,效果显著,现介绍     

胸水游离DNA的结核杆菌检测在结核病诊断中的价值北大核心CSCD

结核病（tuberculosis）是严重的传染病之一,目前临床有多种方法检测结核分枝杆菌,如血清抗体检测法,痰涂片抗酸染色法、细菌培养法,荧光PCR法等。每种方法都有其优缺点,如血清抗体检测灵敏度高但特异度差,细菌培养法耗时长,痰涂片抗酸染色法快捷但灵敏度差等。     

γ-干扰素释放试验在结核病诊断中的应用

目的 探讨γ-干扰素释放试验（IGRAs）在结核病诊断中的应用价值。方法 选取2017年7月~2019年6月在景德镇市第一人民医院就诊的100例疑似结核感染患者和50例健康体检者作为研究对象,分别行γ-干扰素释放试验和涂片抗酸染色镜检。将最终确诊为结核病患者48例设为结核病组,52例非结核病患者作为非结核病组,50例健康体检者设为正常对照组。分析三组TB-IGRAs阳性率,对比肺结核病组涂阴与涂阳TB-IGRAs检测结果,并比较TB-IGRAs与涂片抗酸染色对结核病的诊断效能。结果 结核病组IGRAs阳性率高于非结核病组和正常对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;涂阳肺结核和涂阴肺结核患者的IGRAs阳性率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;IGRAs法敏感度为85.42%,特异性为89.22%,阳性预测值为78.85%,阴性预测值为92.86%;涂片抗酸染色法敏感度为22.92%,特异性为100.00%,阳性预测值为100.00%,阴性预测值为73.38%; IGRAs诊断结核病的敏感度高于涂片抗酸染色,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 IGRAs具有较高的敏感度和阴性预测值,对结核病的诊断具有较高的诊断价值,值得在临床中应用。     

改良抗酸染色法诊断盆腔结核意义分析

目的 建立改良抗酸染色法并分析其在盆腔结核中的诊断价值.方法 对48例盆腔结核患者盆腔积液用离心涂片法、改良抗酸染色法和BACTEC MGIT 960培养法进行检测,并对结果进行分析.结果 离心涂片法、改良抗酸染色法和BACTEC MGIT 960培养法阳性率分别为2.08％ (1/48)、39.58％ (19/48)和37.50％ (18/48),改良抗酸法分别与离心涂片法及BACTEC MGIT 960培养法比较,改良抗酸染色法的阳性检出率最高,其与离心涂片法差异有统计学意义(P＜0.001),但与BACTEC MGIT 960培养法差异无统计学意义(P＞0.05).结论 改良抗酸染色法较离心涂片法阳性率明显提高,虽然和BACTEC MGIT 960培养法阳性率无明显差异,但是改良抗酸染色法可以快速诊断盆腔结核,对于临床工作有重要意义.     

结核杆菌染色法的改良

结核分枝杆菌是一种能在单核巨噬细胞内生长繁殖的细胞内寄生菌[1 ] 。近年来 ,由于结核杆菌多重耐药菌株的出现及ＨＩＶ感染的流行 ,结核病的发病率和死亡率均呈上升趋势。使得各国的医学工作者不得不再次重视这一严重威胁人类健康的疾病。ＷＨＯ于 1993年宣布全球结核病紧急状态 ,呼吁采取全球性紧急措施 ,控制结核病的发生。其中 ,提高结核病患者结核杆菌的阳性检出率便变得尤为重要。然而对结核病做出快速准确的诊断一直是临床工作中的难点。目前使用的齐 尼染色法 (抗酸染色 ) ,因成本低、操作简单且无需专门仪器设备 ,仍为大多数医院…     

介绍一种抗酸染色法

抗酸染色法有多种 ,根据本科近 10年来应用不同抗酸染色法的经验 ,对 8例已确诊为结核病的病理切片及细胞学涂片 ,从染色效果、操作难易程度及染色时间方面 ,用 6种不同抗酸染色法〔1～ 4〕反复染色对比实验结果 ,推荐一种经典的、简易的、快速实用性强的抗酸染色法———萋纳石炭酸染色法。1　材料与方法1.1　溶液配制　 (1)萋纳石炭酸复红溶液 :碱性复红乙醇饱和溶液 10ｍｌ,5 %石炭酸溶液 90ｍｌ。 (2 )脱色剂 :浓盐酸 3ｍｌ,95 %乙醇 97ｍｌ。 (3)复染液 (吕弗勒美蓝液 ) :美蓝乙醇饱和溶液 30ｍｌ,10 %氢氧化钾 0 1ｍｌ,蒸馏水 10 0ｍ…     

优化改良PCR法检测石蜡组织标本中结核分枝杆菌

正临床病理活检中肺外器官结核要多于肺结核~([1]),而病理学诊断是肺外结核病确诊的重要手段。结核病组织标本有其特征性的病理学形态特点,病理诊断医师可以怀疑其结核病变,但确诊需依靠抗酸杆菌染色等结果。但实践中抗酸杆菌染色等阳性率低,漏检率高~([2])。随着分子生物学检测技术在病理学诊断中的应用,部分大型医院已经应用荧光PCR     

改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用

目的建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法。方法对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法（以下简称本改良法）、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较。结果本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异（χ2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404）,但明显高于常规抗酸染色法（U=3.713,P〈0.0010）;本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法。同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法（5minvs24h）。结论成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用。     

三种方法在盆腔结核诊断中的价值分析

目的 评价盆腔积液改良抗酸染色法、离心涂片法和外周血结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在盆腔结核诊断中的价值.方法 回顾性分析确诊的35例盆腔结核患者和35例盆腔恶性肿瘤患者盆腔积液(对照组)的改良抗酸染色法和离心涂片法以及血液T-SPOT.TB检测结果.比较三种方法的灵敏度及特异度.结果 改良抗酸染色法敏感性为31.43％ (11/35),特异性100％;离心涂片法敏感性5.71％ (2/35),特异性100％;T-SPOT.TB敏感性为48.57％(17/35),特异性94.29％,改良抗酸染色法和T-SPOT.TB两种方法联合检测的阳性率为57.14％ (20/35).改良抗酸染色法与离心涂片法及T-SPOT.TB比较,其阳性率较高,差异均有统计学意义(P＜0.05),改良法与T-SPOT.TB联合检测阳性率较改良法高(P＜0.05).结论 改良抗酸染色法和T-SPOT.TB检测阳性率高,联合检测诊断效果更好,两种技术对盆腔结核有重要的辅助诊断价值.     

巴氏染色后的涂片褪色行抗酸染色在结核诊断中的应用

正WHO《2017年全球结核病报告》指出:结核病仍然是全球主要的传染病杀手,中国的发病率仅次于印度和印度尼西亚。结核病菌会严重伤害机体的各个器官和组织,临床症状复杂,尤其肺外结核,病情表现为隐匿性变化或缺乏典型症状,临床易误诊和漏诊。结核诊断方法包括:临床症状、影像学检查及病原体检测、结核血清学检测、抗酸杆菌染色、结核杆菌基因检测等。病理科日常工作中诊断结核的主要方法为齐-尼(Ziehl-Neeslen)抗酸染色和结核杆菌荧光定量聚合酶链反应(qP CR),虽然大部分患者可通过上述两种方法确诊,但本科室统计发现每年约10%的细胞学患者因取材     

qPCR检测结核杆菌在肺和胸膜上皮样肉芽肿性疾病诊断中的意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,q PCR)法在诊断及鉴别诊断肺和胸膜结核病和其他肉芽肿性疾病中的意义。方法收集经病理学检查发现上皮样肉芽肿性病变的肺和胸膜活检的石蜡包埋组织142例,应用q PCR法检测结核分枝杆菌DNA,同时行抗酸染色,并与临床资料对比进行回顾性分析。结果在142例肺胸膜活检标本中,60例临床诊断确诊为结核病。采用q PCR法检测结核分枝杆菌DNA阳性者58例,敏感性为96.67%,特异性为100%;抗酸染色阳性者17例,敏感性为28.33%,特异性为97.56%,差异有统计学意义(χ~2=21.47,P0.001)。结论结核分枝杆菌核酸检测有助于在石蜡包埋的肺和胸膜小活检组织中快速、准确的诊断结核病,可用于疑似结核的肉芽肿性病变的鉴别诊断。     

石蜡包埋组织结核分枝杆菌检测方法的对比分析

结核病是由结核分枝杆菌引起的极具危害性的肉芽肿性病变,以肺结核最为常见.目前,组织病理学检查已成为结核病诊断的重要手段.抗酸染色作为结核病主要辅助检查手段,其灵敏度、特异性均较低[1 -2].《中国结核病病理学诊断专家共识》提出结核病的病理诊断标准:根据结核病的病理变化及结核分枝杆菌基因检测阳性才能作出明确诊断.文献报...     

提高抗酸染色阳性率的几点细节

正在临床病理诊断中遇到肉芽肿性病变伴干酪样坏死或结核样结节常常应用抗酸染色作诊断与鉴别诊断。作为基层医院,在没有荧光显微镜无法进行金胺O染色且无条件开展PCR定量检测技术的实验室,Ziehl-Neelsen苯酚碱性品红法检测抗酸杆菌是最常用也是最传统、经典的染色法,由于其成本低,操作简单、直观准确、费用少且无需专门仪器设备,在病理实验室中广泛应用,但由于该方法特异性高、阳性率较低,为了提高抗酸杆菌的检出率,作者对染液的配制、染     

BCG多克隆抗体在结核性病变组织中的诊断价值

目的 :探讨用卡介苗 (BCG)多克隆抗体检测结核性病变组织中BCG抗原对结核病的诊断价值。方法　收集各种组织不同类型的结核性病变组织标本 175例 ,非结核性病变组织标本 5 4例 ,采用BCG多克隆抗体免疫组化染色标记检测组织中BCG抗原 ,同时与细菌学的抗酸染色作比较。结果　结核组对BCG呈阳性反应者 135例 ,占 77 12 %。阳性染色在朗汉斯巨细胞、上皮样细胞的胞质及干酪样坏死组织呈鲜红色颗粒 ;而抗酸染色阳性仅有 11例。占 6 2 9%。结核病的基本病理类型对BCG反应的阳性率分别是渗出为主型 >坏死为主型 >增殖为主型。结论　采用BCG多克隆抗体的免疫组化标记对结核病诊断的敏感性明显高于抗酸染色 ,有一定的鉴别诊断价值     

金胺O荧光染色和抗酸染色在结核病诊断中的联合应用

目前病理诊断工作中,结核病的诊断主要依靠HE染色的形态特点和抗酸染色找到结核杆菌作为确诊依据[1].然而,实际工作中结核病变形态有时不典型,需要其他疾病鉴别.在常见的几种结核杆菌的检测方法中[2,3],抗酸染色结核杆菌检出率不足30%,结核杆菌培养阳性率为25%～75%,PCR检测结核杆菌DNA阳性率为77%～90%,但后两种方法对实验室要求较高,在基层医院中难以开展.     

智能化抗酸杆菌检测在结核诊断中的应用

目的 探讨智能化抗酸杆菌检测在结核病理诊断中的应用。方法 收集150例肉芽肿性改变的石蜡包埋组织,同时进行手工抗酸染色和自动抗酸染色,分别进行人工阅片病理诊断。使用自主开发的结核杆菌识别人工智能(tuberculosis bacillus finder, TB-Finder)作为初筛,另请病理医师复核150张自动抗酸染色切片并作出病理诊断,分析两种染色模式的效率及准确率。结果 150例智能化平台染色的阳性率为29.3%(44/150),传统模式染色的阳性率为6.6%(10/150)。染色加诊断全流程智能化平台每张切片耗时12 min,传统模式每张切片耗时57 min,智能化平台节约时间成本约78%。结论 智能化抗酸杆菌检测平台的应用可提高病理医师的工作效率和诊断准确率,有助于规范质量控制。     

表面活性剂对结核杆菌染色效果的影响

作者在对传统的Ｚｉｅｈｌ Ｎｅｅｌｓｅｎ抗酸染色法改良的基础上 ,研究不同浓度的ＴｒｉｔｏｎＸ 10 0、Ｔｗｅｅｎ 2 0、Ｔｗｅｅｎ 80 3种表面活性剂对结核杆菌着色的影响 ,以期获得更佳的显示结核杆菌效果的方法。1　材料与方法1.1　标本　 (1)结核杆菌阳性的标本 ,经 10 %福尔马林液固定 ,石蜡切片 4～ 5 μｍ。 (2 )实验分为 3组 ,即ＴｒｉｔｏｎＸ 10 0、Ｔｗｅｅｎ 2 0、Ｔｗｅｅｎ 80组 ,用传统的Ｚｉｅｈｌ Ｎｅｅｌｓｅｎ抗酸染色法做阳性对照 ,非结核病组织做阴性对照。1 .2　染液配制　 (1)分别配制 1%、5 %、10 %和 2 0 % 4…     

荧光定量PCR检测病理组织中结核分枝杆菌的临床价值

目的探讨应用荧光定量PCR（FQ-PCR）技术在病理组织中检测结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）的临床应用价值。方法对196例临床诊断结核的穿刺病理活检标本进行石蜡包埋切片,采用实时荧光定量PCR技术检测TB．DNA,并行抗酸染色及组织病理学检查,对三种检测与临床诊断符合率进行比较。结果在196例临床诊断结核的石蜡包埋组织中,荧光定量PCR检测阳性136例,阳性率为69．39％,抗酸染色检测阳性69例,阳性率为35．20％,组织病理学检查阳性102例,阳性率为52．04％,荧光定量PCR检测阳性率最高。结论荧光定量PCR技术简便、快捷,敏感性强、特异性高,可作为结核病分子病理诊断的重要检测方法,具有较高的临床应用价值。     

抗酸染色中碱性品红用量分析

抗酸染色主要使用对象是抗酸菌中的抗酸杆菌,其属于分枝杆菌。结核分枝杆菌是引起人和动物结核病的病原体,常侵犯全身各组织及器官,尤其是以肺、淋巴结等多见。由于其内含大量脂质,故对一般染液不易着色,从而影响诊断及治疗。常规抗酸杆菌染色多采用传统的Ziehl-Neelsen法[1],但染液放置一段时间后易出现沉淀,滴染时切片上染液残渣易造成污染。本科室在配制染液时通过对碱性品红用量的调整及对比染色,能较好的显示抗酸杆菌,现报道如下。     

3种特殊染色在肺慢性肉芽肿性炎中的应用

正肺部肉芽肿性炎症通常由于肺部感染了特殊的病原微生物或寄生虫形成有相对诊断意义的特征性肉芽肿。常见的病原体有结核杆菌、伤寒杆菌、梅毒螺旋体、真菌等。本文采用过碘酸-Schiff(PAS)染色法、Grocott六胺银染色法、Ziehl-Neelesn抗酸杆菌染色法,并改良其染色技术,以帮助鉴别这些病原体感染导致的肺部疾病。1材料与方法1.1材料收集上海市胸科医院存档的肺慢性肉芽肿性炎