强氧化剂脱黑色素对免疫组化染色影响的评估

正黑色素瘤是临床上较为常见的皮肤黏膜和色素膜恶性肿瘤,也是发病率增长最快的恶性肿瘤之一~([1])。免疫组化染色是黑色素瘤病理学诊断常用的检查方法。富含黑色素的瘤组织行免疫组化染色时,组织中沉积的大量黑色素与免疫组化阳性所显示的DAB棕黄色颗粒互相干扰,影响结果判读~([2])。因此,这一类组织染色前通常需要进行氧化脱黑色素处理。本实验在实践中发现强氧化剂处理切片不仅会造成组织脱片,还易破坏组织内抗原,造成假阴性结果。本文采用3组不同染色法评估富含黑色素的黑色素瘤组织中常规检测的4种抗原受氧化脱黑色素的影响程度,现报道如下。     

DPX封片胶在牙组织免疫组化染色防脱片中的作用

目的:研究DPX封片胶在牙组织免疫组化染色中的防脱片效果。方法:狗上前牙EDTA脱钙、常规石蜡包埋、切片、脱蜡、水洗、干燥后,用DPX封片胶在组织边缘和玻片上涂抹一圈,37℃烤干DPX封片胶,EnVision技术观察IL-1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-9的表达。结果:DPX封片胶处理后的切片,经微波抗原修复后,切片上的组织完整没有边缘脱落破损现象。免疫组化染色后,组织形态基本完整,相应分子表达定位准确,染色结果清晰。结论:DPX封片胶在牙齿等含钙组织免疫组化染色中有良好的防脱片作用。     

石蜡切片后粘胶技术在免疫组化染色中的应用

在临床病理诊断中 ,免疫组化染色是必不可少的技术 ,特别是外院来会诊的石蜡切片和蜡块 ,大多数是需要进行免疫组化染色 ,但这些切片往往经抗原修复技术处理后部分或全部从载玻片上脱落 ,延误诊断。我们在工作中发现石蜡切片后粘胶技术能克服这种现象 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　材料　取外院会诊自带未经处理的石蜡切片白片 5 0张 ,石蜡块 2 0个 (其中 10个蜡块曾在免疫组化染色中脱落过 )按常规石蜡切片 ,切片厚 4 μｍ ,附贴在未经粘合处理的载玻片上 ,6 0℃温箱中烤片 1ｈ ,取出备用。1 2　方法　不同病例的切片按常规脱蜡至水洗 ,…     

三种粘片剂及不同烘烤温度和时间对免疫组化切片的影响

免疫组织化学染色过程中 ,因步骤多、微波高温修复、37℃孵育等因素 ,常出现脱片问题 ,造成染色的失败 ,浪费人工及试剂。为了解决脱片问题 ,同时又不使抗原或抗体受到破坏 ,我们选取了经免疫组化染色确定为强、中、弱三种反应强度的标本 ,分别用硌矾明胶、APES( 3- Amino PropyltriethoxySilane)、多聚赖氨酸 ( Poly- L - L ysine)三种粘片剂处理切片 ,再将切片经 37℃、5 0℃、6 0℃三种烘烤温度分别烤片 1 hr、2 hr、3hr、4hr及 1 2 hr,使用同样方法及程序染色 ,观察切片的肉眼观、粘贴程度及抗原抗体保存情况 ,结果为 :1.三种粘片剂…     

介绍一种简便的组织切片脱汞方法

介绍一种简便的组织切片脱汞方法梁英杰，凌启波在进行某些特殊染色和免疫组化染色时，为了更好地保存组织成分或组织抗原，往往需要选择最佳的固定液。常用的固定液如Ｂ５固定液、Ｚｅｎｋｅｒ固定液，因含有汞盐，在染色前需经脱汞处理。本文介绍的方法是将脱汞的操作过...     

不同脱钙方式对骨组织样本不同病理分析的影响

<正>骨与软组织肿瘤生物学特性复杂，在临床病理工作中有时依据形态学较难做出准确的病理诊断，需行免疫组化、FISH、PCR、Sanger测序及NGS等检测^[1]。骨组织质地坚硬，应使用脱钙液将组织软化后制片。目前，临床使用较多的仍为混合酸性脱钙液，其脱钙速度快，但易对组织抗原及DNA造成不可逆的损伤; EDTA性质温和，对组织抗原及核酸保存较好，但缺点是脱钙时间久且效果差。有研究显示改良EDTA常温处理骨髓样本20～24 h,HE染色佳，免疫组化染色强度适中，定位准确^[2]。     

大鼠与小鼠脑组织脱水方法的实验研究

近年来，我们在协助其他单位或研究生做动物实验后的组织病理学研究中发现，若按日常人体标本的脱水时间和程序制备大鼠与小鼠的脑组织蜡块，则在切片后进行染色前处理及染色时会出现严重的脱片现象，从而造成后续工作无法进行。即使在载玻片上涂蛋白甘油、多聚赖氨酸等防脱片剂效果不佳，未脱片者的HE染色、特殊染色及免疫组化染色     

免疫组织化学阳性标记结果的观察和判断

免疫组织化学标记结果的判断是以观察组织片阳性或阴性染色为前提，就阳性染色而言，应着重观察阳性染色颗粒在细胞中存在的位置和分布形式，因为它直接反映抗原在细胞中定位和分布情况，而抗原的存在与否及其在细胞中的定位正是免疫组化诊断的重要依据。在免疫组化标记中，观察阳性染色颗粒定位有助于区别假阳性反应；决定抗原定位     

乳白胶作为粘片剂的应用

在病理HE制片及免疫组织化学制片工作中,经常遇到组织切片与载玻片粘合不牢而脱片的情况。既影响工作质量和速度,又造成试剂的浪费。尤其是在免疫组化染色中,因抗体试剂昂贵,若经常脱片,不仅影响病理诊断;也会降低经济效益。因此,使用好粘片剂以减少脱片提高制片质量是病理技术     

诊断免疫组织化学阴性对照的标准化:来自国际特设专家委员会的建议

正免疫组织化学(简称免疫组化)是应用于临床病理诊断和鉴别诊断的重要技术手段。免疫组化操作步骤繁多,不同的标本处理方法、不同的抗原修复条件以及不同的检测系统等均可影响染色结果,而设置对照(包括阳性和阴性对照)是检验操作步骤是否正确、染色结果是否可靠的关键。阳性对照主要用于证实目的抗原是否存在以及评估抗原表达水平,阴性对照主要用于评估免疫组化检测结果的特异性(即排除假阳性结果)。对照标准化是免疫组化质量控制及其结     

骨髓活检组织制片中改良脱钙液的应用及常见问题分析

正在临床病理外检工作中,骨髓组织由于含有大量的钙盐而比较坚硬,需经过脱钙处理后才能进行常规制片,脱钙不全或脱钙过度均影响骨髓HE染色及免疫组化染色效果,降低病理诊断的准确率。作者在长期的骨髓制片工作中,摸索出一种适合骨髓组织的改良EDTA脱钙液,提高了骨髓制片质量和染色效果。本文现就骨髓活检标本固定及取材、脱钙、制片和染色等环节进行总结,供广大同仁分析交流,共同提高骨髓活检组织制片和染色质量。     

微波-EDTA快速脱钙技术及其在免疫组化染色中的应用

在临床病理诊断和一些动物实验研究中,常常需要对骨组织进行脱钙处理,硝酸脱钙液的pH值低,对骨组织的抗原性影响大,给免疫组织化学染色造成不良影响,乙烯二胺四乙酸(ethylene diamine tetraceticacid,EDTA)脱钙液的pH值近中性,对组织结构、抗原     

提高免疫组化染色质量的相关处理和操作

恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素[1].在组织细胞准备过程中,不仅要求保持组织细胞形态的完整,更需要保持组织或细胞内的抗原,使之不受损失或弥散,防止组织自溶.很显然,在一张组织或细胞已坏死、抗原已丢失的材料上,再好的技术和抗体也难以成功染色.本文就组织标本及时取材、固定、组织脱水和包埋、切片以及免疫组化规范操作等过程进行分析与讨论,旨在与技术人员一起学习交流,以提高免疫组化染色的质量,为病理诊断提供有力保证.     

脑组织切片免疫组化技术中防止脱片制作方法

在做人脑组织病检及小鼠、大鼠等小动物要取材脑组织的实验中,因为脑组织本身的组织结构,化学组成等因素,按常规取材、固定、脱水方式,做成组织切片再做免疫组织化学染色时,切片经抗原修复和缓冲液的长时间浸泡后,往往会部分或全部从载玻片上脱落,严重影响实验操作的进行与染色结果的判断~([1-3]).经过查阅资料多次摸索,本技术组总结出一套脑组织切片制片方法,可以有效防止脑组织切片免疫组化技术中组织切片脱片的发生.     

EDTA在HE染色中的应用

正苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色是病理技术中最基本的染色方法,染色理想状态是在镜下见细胞核与细胞质蓝红相映,对比明显;核膜及核染色质颗粒清晰可见。实际工作中因组织干涸、固定脱水不足、脱钙等原因会造成切片染色困难,细胞核染色淡或出现局部灰染,给临床病理诊断带来困扰。经过大量实验,本科室对处理不好的组织切片染色前用EDTA抗原修复液进行高压修复,使染色质量得     

免疫组织化学染色中几个问题的探讨

免疫组织化学染色技术在实际运用中,由于切片厚薄的掌握不当、脱片及核对比染色欠佳等问题曾使许多研究者感到为难。我们在进行垂体腺瘤的免疫组化研究中也曾遇到上述问题,现将我们的作法及改进介绍如下。     

抗原热修复退色法在HE切片改做免疫组化染色中的探索

HE染色与免疫组化染色在病理诊断中处于重要的地位,是目前病理科较常用的常规方法。在实际病理诊断工作中,经常遇到HE染色的会诊组织切片和细胞涂片,而无相应的组织蜡块或多余的细胞涂片白片,为进一步明确诊断只能在原HE染片上做免疫组化染色,此时需将HE染片退去     

正交设计试验在免疫组化检测琥珀酸脱氢酶条件优化中的应用

免疫组化染色已成为病理学临床诊断和研究中不可缺少的重要技术之一,其染色是否成功受抗原修复、一抗浓度、孵育时间、温度等因素的影响。在实际工作中,检测一些新抗体时需从众多影响因素的不同水平去摸索最佳的检测条件,费时费力。为了减少实验次数和劳动量,降低实验成本,本文将正交设计试验引入免疫组化检测条件优化实验中,运用免疫组化法检测琥珀酸脱氢酶( succinate dehydrogenase, SDH)在胃肠道间质瘤中的表达,探讨该方法的可行性,以便于寻找一种经济、简易、可行的免疫组化检测条件优化方法。     

盐酸在免疫组化染色中的应用

免疫组化染色已成为临床病理诊断的重要手段之一,由于在常规制片过程中,常因组织标本经甲醛固定后,抗原被封闭,使染色效果不理想。目前,国内外报道多采用微波辐射、高压加热等方法来修复组织抗原,而应用盐酸水解的方法则较少报道,作者应用盐酸水解法来修复组织抗原,获得满意效果,介绍如下。１　材料和方法１－１　材料　本院手术送检的食管、胃、肠、乳腺、卵巢等肿瘤组织。均经４％甲醛固定、石蜡包埋,连续４μｍ厚切片,６０℃恒温箱烤片１～２４ｈ。载玻片先用多聚赖氨酸处理。１－２　试剂　１ｍｏｌ·Ｌ－１盐酸水解液（配制…     

不同修复方法对免疫组化染色结果的影响

目前,免疫组化染色技术已成为病理学诊断中不可少的重要手段,而进行抗原修复使抗原决定簇暴露则是免疫组化染色成功的关键。本研究中,观察了高压加热法、微波加热法、胰酶消化和胃酶消化4种抗原修复方法对免疫组化染色结果的影响。1材料和方法1.1材料收集乳腺癌、淋巴瘤和大肠癌组织标本各12例,均由唐山市协和医院病理科提供。选用鼠抗人单克隆抗体(mAb)ER、PR、c-erbB-2、CK7、EMA、CEA、CK(pan)、MDR-1、P53、Ki67、GCDFP-15、LCA、CD3、CD20、CD45RO、CD79α及PV9000试剂盒,均购自北京中山生物技术有限公司。1.2方法按…