星形细胞瘤热休克蛋白70（HSP70）表达的研究

目的 研究HSP70在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级的关系,探讨HSP70在星形细胞瘤预后判断上的价值。方法 用SP免疫组化方法对96例星形细胞瘤中HSP70的表达进行研究。结果 在星形细胞瘤中,HSP70的阳性表达随星形细胞瘤的病理分级增高而增加。结论 结合脑星形细胞瘤的病理组织分级,HSP70的表达能反映星形细胞瘤的恶性进展,从而对判断的预后有一定价值。     

星形细胞瘤恶性进展过程中 PCNA表达的研究

目的 研究增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级的关系,讨论ＰＣＮＡ在星形细胞瘤预后判断上的价值。方法 ＳＰ免疫组化方法对１０１例星形细胞瘤的ＰＣＮＡ表达进行观察,并着重对同一标本含有多个不同病理分级区的２２例肿瘤的ＰＣＮＡ阳性细胞百分率进行分析。结果 随着病理级别的升高,ＰＣＮＡ阳性细胞百分率升高,同一病例的不同病病分级区的ＰＣＮＡ的表达也呈同样的规律。结论 ＰＣＮＡ较准确     

半乳糖凝集素-3在人脑星形细胞瘤中的表达及其与预后的关系

目的探讨半乳糖凝集素-3﹙Gal-3﹚在星形细胞瘤不同病理分级中的生物学意义及其与预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测46例首次手术切除的星形细胞瘤标本和8例正常脑组织标本中Gal-3的表达,并将它的表达与患者各临床指标之间进行统计学分析。结果正常脑组织中无明显Gal-3的表达,随着星形细胞瘤病理分级的提高,Gal-3的阳性表达逐渐升高（P〈0.05）,且其表达与肿瘤直径有关（P〈0.05）,其阳性表达的患者2年生存率低比阴性表达者低（P〈0.01）。结论Gal-3在星形细胞瘤中的表达上调可能对肿瘤发生、发展和恶性转化具有重要的作用,对于肿瘤恶性程度分级、预后评估有一定的价值。     

星形细胞瘤中肿瘤抑制基因及生物学标记表达的研究

目的:检测30例不同病理级别星形细胞瘤中p53基因的表达状况及肿瘤其它生物学特性.方法:采用常规HE染色及免疫组织化学技术检测30例标本中p53、PCNA、GFAP、VIM、S-100的表达.结果:P53免疫组化染色阳性率随病理级别增高而增高,Ⅳ级阳性率 83.3%,Ⅰ、Ⅱ级15.4%,且不同级别染色程度也有差异;PCNA均呈阳性,Ⅳ级病例染色阳性强度大于Ⅰ级.GFAP、S-100随病理级别升高而阳性率降低,VIM却随级别升高而升高.结论:检测P53基因突变产物,可判断星形细胞瘤恶性程度与预后,P53基因在星形细胞瘤发展、演化中有重要作用.PCNA可反映星形细胞瘤增殖活性及恶性程度,GFAP、VIM、S-100的测定也可了解其分化程度,三者结合,可增加判断的准确性.     

星形细胞瘤恶性进展与P16蛋白表达

目的 研究细胞周期负性调控蛋白在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级的关系,探讨纠正P16蛋白缺乏做为胶质瘤基因治疗策略的可行性。方法 SP免疫组化方法对41例不同级别星形细胞瘤的P16蛋白表达进行观察,评价染色强度和阳性细胞百分数与星形细胞瘤恶性度的关系。结果 随着星形细胞瘤恶性度的增高,P16蛋白表达阴性例数增多,阳性染色细胞呈减少趋势。结论 星形细胞瘤P16蛋白表达水平与其分级呈负相关,P16蛋白表达异常是影响星形细胞瘤发生发展的重要因素。     

星形细胞瘤热休克蛋白70表达与病人的预后

目的研究人脑星形细胞瘤中热休克蛋白70(HSP70)表达与肿瘤病理分级及病人预后的关系。方法用HSP70单克隆抗体对61例随访资料完整的人脑星形细胞瘤进行免疫组化研究。结果①39例(63.93%)HSP70阳性表达,并且,随着肿瘤分化程度的降低,HSP70阳性表达率升高;低恶度星形细胞瘤、间变性星形细胞瘤、胶质母细胞瘤HSP70阳性表达率分别为41.38%(12/29)、77.78%(14/18)、92.86%(13/14),其差别有显著性(P<0.05),表明HSP70阳性表达与星形细胞瘤的发生和发展有关。②HSP70阴性表达的病人的总体生存期长于HSP70阳性表达者,二者差异有显著性(P<0.05)。结论HSP70的阳性表达与星形细胞瘤病人的不良预后相关,作为一种肿瘤相关性标志物,HSP70对星形细胞瘤病人的预后判断有参考价值。     

自噬相关基因Beclin1在星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨自噬相关基因Beclin1在星形细胞瘤中的表达,及与肿瘤病理和临床表现的相关性与意义。方法采用免疫组化和免疫印迹法检测62例不同级别的星形细胞瘤Beclin1的表达情况,并结合临床表现和病理结果进行相关性分析。结果免疫组化显示星形细胞瘤中Beclin1蛋白表达随肿瘤级别升高而降低。免疫印迹法显示高级别（Ⅲ～Ⅳ级）星形细胞瘤Beclin1平均光密度比值低于低级别（Ⅰ～Ⅱ级）肿瘤（P=0.036）。生存期大于36个月者Beclin1平均光密度比值高于生存期小于36个月者（P=0.041）。结论Beclin1在高级别星形细胞瘤中表达下降,Beclin1检测可作为判断生存期和临床预后的辅助指标。     

星形细胞肿瘤PCNA、p53蛋白表达与细胞增殖和肿瘤预后

目的研究星形细胞肿瘤PCNA、p53蛋白表达与细胞增殖和肿瘤预后的关系.方法应用免疫组化技术对57例星形细胞肿瘤PCNA和p53进行标记;病例随访资料采用Kaplan-Meier生存曲线处理,分析PCNA和p53表达与肿瘤分化状况和预后的关系.结果48例(84.2%)星形细胞肿瘤表达PCNA,45例(78.9%)表达p53.PCNA表达与肿瘤恶性程度和预后显著相关;p53蛋白表达多见于分化不良的星形细胞肿瘤,但表达水平与肿瘤预后无明显相关.结论PCNA和p53对评价星形细胞肿瘤生物学行为有参考价值.PCNA对肿瘤增殖潜能和预后判断价值大于p53;p53基因突变可能是肿瘤细胞恶性转化的分子基础.     

GFAP、Vimentin、VEGF和p53的表达与星形细胞瘤预后的相关性研究

目的探讨胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、波形蛋白(Vimentin)、血管内皮生长因子(VEGF)和p53的表达与星形细胞瘤预后的关系。方法采用免疫组化SP法,检测GFAP、Vimentin、VEGF和p53在星形细胞瘤的表达,将其结果与预后随访结果作综合性分析。结果Ⅰ-Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级星形细胞瘤患者之间,2年生存率及5年生存率之间有显著性差异(P<0.01)。随病理级别增高,GFAP阳性细胞数递减,而Vimentin阳性细胞数递增,Vimentin/GFAP比值亦呈上升趋势。在星形细胞瘤中VEGF和p53的阳性表达率分别为64.1%和47.2%,其表达与病理学分级呈正相关。结论GFAP、Vimentin、VEGF和p53是评价星形细胞瘤病人预后的重要指标。     

人脑星形细胞瘤中肿瘤相关抗原RCAS1的表达

目的探讨表达于SiSo细胞系上的受体结合癌抗原(RCAS1)在星形细胞瘤中的表达情况,及其与肿瘤病理分级的关系.方法用免疫组织化学方法检测RCAS1的表达,研究对象为6例正常脑组织、13例毛细胞型星形细胞瘤、25例弥漫型星形细胞瘤、20例间变型星形细胞瘤、13例胶质母细胞瘤.结果 RCAS1在人脑星形细胞瘤中的总表达率为60.1%, RCAS1的表达与肿瘤级别呈正相关(P<0.001),间变型星形细胞瘤与胶质母细胞瘤之间的阳性表达细胞计分差异有显著性(P<0.01).结论 RCAS1是人脑星形细胞瘤的新的肿瘤相关抗原,其表达与胶质母细胞瘤的形成相关.     

Expression of retinoblastoma gene product and p21 (WAF1/Cip 1) protein in gliomas: correlations with proliferation markers, p53 expression and survival

Using immunohistochemistry we evaluated the expression of two negative regulators of the cell cycle, the retinoblastoma gene product (pRb) and the WAF1/Cip1 gene product (p21), in consecutive paraffin sections from 54 gliomas (49 astrocytomas and 5 oligodendrogliomas) and related it to clinicopathological parameters, proliferative fraction, p53 expression and survival. Survival analysis was restricted to the group of diffuse astrocytomas (48 patients). pRb expression did not correlate with histological type, grade or p53 expression, while a moderately strong correlation existed between pRb expression and the percentages of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and MIB-1-positive cells. In 30% of cases we observed diminished pRb expression (i.e., a low pRb/Ki-67 ratio), irrespective of grade or histological type. p21 protein was elevated in 50% of cases, especially within the higher grades. The percentage of p21-positive cells was not related to histological type or grade but correlated loosely with PCNA and pRb expression. A p53-negative/p21-negative phenotype was characteristic of oligodendrogliomas and low-grade astrocytomas, whereas the p53-positive/p21-positive, p53-positive/p21-negative and p53-negative/p21-positive phenotypes were almost equally distributed among high-grade tumors. In survival analysis (either univariate or multivariate) diminished pRb expression was not a statistically significant prognostic indicator. In contrast, p21 expression emerged as an important indicator of shortened disease-free survival, in both univariate and multivariate analyses. Moreover, the double-positive p53/p21 phenotype tended to be associated with a shorter overall survival. Our results suggest that Rb gene deregulation does not significantly affect prognosis but p21 expression may play an important role in disease-free survival of astrocytoma patients. Received: 14 August 1997 / Revised: 6 November 1997 / Accepted: 28 November 1997     

ALDH1 expression is correlated with pathologic grade and poor clinical outcome in patients with astrocytoma

Aldehyde dehydrogenase 1 (ALDH1), a detoxifying enzyme, is a stem-like cell marker, but its expression pattern and clinical significance in astrocytoma remain unclear. In this study, we used immunohistochemical analysis to systematically investigate the expression of ALDH1 in 76 astrocytomas of different pathological grade and seven samples of normal brain tissues. We found that ALDH1 was expressed in some of the astrocytomas but was not detected in normal brain tissues. The proportion of ALDH1-expressing cells was positively correlated with the pathological grade of the astrocytomas, but not with patient age, sex or tumor size. We also collected detailed follow-up data and analyzed the correlation of ALDH1 expression with overall survival (OS) and progression-free survival (PFS) using univariate and multivariate analysis. We found that the proportion of ALDH1-positive cells was an independent prognostic factor for PFS and OS. These results show that ALDH1 is expressed in astrocytoma, and that its expression is correlated with pathological grade and patient survival.     

全反式维甲酸抑制MDM2基因在胶质瘤细胞SHG-44中的表达

目的 探讨全反式维甲酸对胶质瘤细胞SHG-44中MDM2基因表达的影响,为进一步研究脑胶质瘤的进展机制及基因治疗提供依据.方法 分别利用cDNA微阵列与Western blot技术分析在10μmol/L全反式维甲酸(all-transretinoic acid,ATRA)处理前后的胶质瘤SHG-44细胞MDM2基因和蛋白的差异表达应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(Streptavidin-Peroxidase,SP)法检测Ⅱ级与Ⅳ级胶质瘤标本MDM2蛋白的表达.随机选择数个差异基因进行Northern杂交实验,以验证cDNA微阵列的结果.结果 应用cDNA微阵列检测发现,MDM2基因在ATRA处理与未处理的SHG-44细胞之间表达量的比值为0.37,提示ATRA可抑制MDM2基因在SHG-44中的表达.该结果进一步得Northern杂交实验结果的支持.Western blot分析结果显示10μmol/L ATRA处理前后胶质瘤SHG-44细胞之间MDM2蛋白的相对表达量分别为21.40±0.58和14.02±0.35(t=24.728,P=0.000),提示MDM2蛋白在SHG-44中的表达受到ATRA抑制.Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤标本MDM2蛋白的阳性表达率分别为24.00%(6/25)和56.52%(13/23)(X2=5.298,P=0.021),MDM2蛋白的表达随胶质瘤恶性程度的增高而增加.结论 ATRA可抑制SHG-44胶质瘤细胞中MDM2基因的表达,MDM2基因的表达水平与胶质瘤的演进有关.     

Ezrin在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨Ezrin在人脑星形细胞瘤中的表达及意义.方法 免疫组化法检测107例星形细胞瘤和10例正常脑组织中Ezrin的表达,结合临床随访资料分析其表达与预后的相关性.结果 Ezrin的表达在2组之间的差异有统计学意义(P＜0.05).星形细胞瘤中Ezrin阳性表达率为89.7%,其表达与肿瘤恶性程度呈正相关(r=0.551,P＜0.01),临床资料分析发现Ezrin的表达与肿瘤细胞分化、瘤周水肿程度有关(P＜0.05).Ezrin强阳性表达组和弱阳性+阴性表达组的术后无瘤生存时间之间差异具有统计学意义(X~2=29.85,P=0.000).结论 Ezrin的表达与星形细胞瘤的恶性程度相关,过表达对肿瘤发展起重要作用.     

MRI评分在星形细胞起源肿瘤诊断中的应用

目的观察星形细胞起源肿瘤患者的MRI表现,探讨MRI评分与病理学分级之间的相关性。方法选择经手术病理证实的幕上星形细胞起源肿瘤患者44例,其中星形细胞瘤9例、间变性星形细胞瘤14例及多形性胶质母细胞瘤21例,手术后进行MRI评分。评分标准包括肿瘤是否越过中线、有无水肿、不均质性、出血、边界清晰、囊变或坏死、血管流空效应、强化程度和强化的不均质性等9项指标。结果MRI评分随肿瘤病理分级的提高而增加,星形细胞瘤患者的不均质性、水肿、边界清晰、血管流空效应、强化程度和强化的不均质性等6项指标均低于间变性星形细胞瘤和多形性胶质母细胞瘤,其差异具有显著性意义(均P<0.05);而间变性星形细胞瘤与多形性胶质母细胞瘤之间9项指标相比,仅不均质性和强化程度2项差异有显著性意义(P<0.05)。结论MRI评分对选择星形细胞起源肿瘤的治疗方法及判断患者预后具有重要临床参考价值。     

14-3-3蛋白在星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨14-3-3蛋白在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级和预后间的关系。方法采用免疫组化ABC法检测10例正常脑组织和67例确诊并有随访的人脑星形细胞瘤石蜡标本中14-3-3蛋白的表达情况。分析14-3-3蛋白的表达与肿瘤恶性程度及预后间的关系。结果在正常脑组织标本中，14-3-3蛋白主要表达于神经元胞体和突起，而在少数的胶质细胞中仅见其弱表达。绝大部分星形胶质细胞瘤中可见14-3-3蛋白阳性表达，其阳性表达率为：Ⅱ级76．5％（13／17），Ⅲ级76．2％（16／21），Ⅳ级79．3％（23／29）。不同恶性级别的星形细胞肿瘤中，14-3-3蛋白的阳性表达率无显著差别（P〉0．05），但14-3-3蛋白表达的强度和范围有随肿瘤的恶性度增高而增加的趋势（P〈0．05）。52例14-3-3蛋白阳性表达患者的生存期明显短于15例14-3-3蛋白表达阴性的患者（P〈0．01）。结论14-3-3蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达上凋与肿瘤的恶性程度及预后相关。14-3-3蛋白有望成为星形细胞瘤基因治疗的新靶点。     

Characterisation of molecular alterations in microdissected archival gliomas

Classification of gliomas according to their molecular characteristics may be important in future histopathological diagnosis. However, gliomas frequently display heterogeneity at the histological, biological and molecular level. In this study of archival diagnostic gliomas, precision microdissection was used to enrich samples in the most malignant cells or to investigate intratumoural histological heterogeneity. Analysis of tumour samples microdissected from the most aggressive regions, representative of the histopathological diagnosis, revealed PTEN mutations in 4/14 anaplastic astrocytomas, 4/13 glioblastomas and 1 gliosarcoma, but not in 19 low-grade gliomas. Using a novel PCR procedure and direct sequence analysis of the entire coding sequence, TP53 mutations were detected in 1/3 pilocytic astrocytomas, 3/13 astrocytomas, 4/14 anaplastic astrocytomas, 5/13 glioblastomas and 1 gliosarcoma. All but one of the tumours with TP53 mutation showed p53 immunopositivity, but 5 low-grade and 10 high-grade gliomas had p53 protein nuclear accumulation in the absence of detectable mutation. p53 status was unrelated to p21 expression. Neither PTEN nor TP53 mutations influenced the proliferative index or microvessel density of high-grade astrocytomas. Unusual findings include: TP53 mutation in a juvenile pilocytic astrocytoma; TP53 and PTEN mutations in a de novo glioblastoma, a gliosarcoma with identical mutations in gliomatous and sarcomatous components, and an infratentorial anaplastic astrocytoma with an earlier supratentorial grade II astrocytoma bearing the same TP53 mutation but not the PTEN mutation or loss of heterozygosity (LOH) of 10q23. Similarly, the transition to high-grade histology was associated with acquisition of PTEN mutations and 10q23.3 LOH in two de novo high-grade tumours with regions of low-grade histology.